專利名稱:含有支鏈淀粉的粉末及其制備方法以及用途的制作方法
含有支鏈淀粉的粉末及其制備方法以及用途技術領域:
本發明涉及含有支鏈淀粉的粉末和其制備方法以及用途,具體而言,涉及可不經煩瑣的純化步驟而廉價地制備,并且,示優良的特性的新穎的含有支鏈淀粉的粉末和其制備方法、以及其用途。背景技術:
支鏈淀粉是,如所熟知,由屬于作為真菌類之一種的出芽短梗霉(Aureobasidiumpullulans)的微生物產生的無色、無臭的水溶性多糖,基本上是麥芽三糖通過α -1, 6鍵重復鍵合的直鏈狀的α-葡聚糖。支鏈淀粉,通常是以水飴等的糖質或淀粉作為碳源而制備的安全、且可食性的多糖。另外,由于具備水溶性、且粘接性強,造膜性優良等的特性,作為食品、藥品等的粘結劑或包被材,另外,將可食性膜、染料等的各種成分分散的片、還有,作為封入含有食品或藥品領域中使用的功能性成分的顆粒的膠囊等的各種成形物,在以食品為首的,化妝品、藥品等廣泛的領域中使用。
例如,在特公昭59-4291號公報、特開昭59-111817號公報、及特開平5-285969號公報中公開了支鏈淀粉膜的制備方法;在特開昭57-155975號公報及特表號公報中公開了支鏈淀粉膜的向食品包裝的用途;在專利第3350823號公報中公開了以支鏈淀粉作為主成分的粘結劑;在特公昭52-6346號公報中公開了使用支鏈淀粉膜或支鏈淀粉皮膜的氧化防止方法;在特公昭60-16217號公報中公開了向支鏈淀粉膜中分散甜味料的膜狀膳食甜味料;在特公平7-553號公報及特開2005-21124號公報中公開了向支鏈淀粉膜中分散藥劑等的膜狀制劑。另外,在「中村敏、“油化學”、第34卷、第10號、865-871頁、1985年」中述對于支鏈淀粉膜的制備和其利用的概述,在「中村敏、“日本食品科學”、第25卷、第4號、61-67頁、1986年」、「中村敏、“食品工業”、第30卷、第10號、株式會社光琳發行、33-39頁、1987年」、「田中良直、“包裝技術”、第29卷、第8號、852-859頁、1991年」、「竹內葉、“ ^、 一〒y夕”、第28卷、第9號、17-19頁、2000年」、及「“食的科學”、通卷277號、3月號、株式會社光琳發行、96-99頁、2001」年中介紹了作為可食性膜的支鏈淀粉膜的制法或用途。
本申請人,首先,在特公昭51-36360號公報、特公昭51-42199號公報、及特公昭55-42635號公報中公開,通過在作為碳源含有水飴等的糖質或淀粉部分分解物的培養基中培養屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的微生物,以工業的規模制備支鏈淀粉及含有支鏈淀粉的粉末的方法。支鏈淀粉在上述微生物的培養物中產生,含支鏈淀粉的培養物通過離心分離或過濾等除去微生物的菌體,根據需要脫色、脫鹽之后,加甲醇等的有機溶劑而純化。即,支鏈淀粉在甲醇中不溶,但支鏈淀粉以外的夾雜糖質,通常在水性甲醇中可溶,所以通過向上述培養物加甲醇等的有機溶劑而使支鏈淀粉沉淀,分離沉淀和上清,可除去夾雜糖質。通過重復此有機溶劑的添加和沉淀和上清的分離的操作而支鏈淀粉被純化,可提高其純度。純化的支鏈淀粉經適宜的粉末化步驟而作為含有支鏈淀粉的粉末。在特開昭48-21739號公報、特公昭55-27099號公報、及特公昭58-50665號公報中公開了使用如上所述純化、制備的支鏈淀粉的膜、包被膜、片、膠囊等的成形物的制備方法。
但是,在通過向含有支鏈淀粉的培養物加有機溶劑而使支鏈淀粉沉淀,被稱為將其與上清分離的溶劑沉淀的支鏈淀粉的純化步驟中,大量的有機溶劑是必要的,即便將使用的有機溶劑通過蒸餾等的手段回收,也無法無視用于回收的裝置或有機溶劑中要求的費用,有制品成本升高的不適合。另外,被稱為添加有機溶劑而使支鏈淀粉沉淀而分離的純化操作自體也由于煩瑣而耗工,結果,成為使得到的含有支鏈淀粉的粉末的價格升高的結果。因此,經如上述一樣的純化步驟制備的含有支鏈淀粉的粉末如,例如,「中村敏、“油化學”、第34卷、第10號、865-871頁、1985年」、「中村敏、“日本食品科學”、第25卷、第4號、61-67頁、1986年」、「中村敏、“食品工業”、第30卷、第10號、株式會社光琳發行、33-39頁、1987年」、及特公昭60-49164號公報中所記載,止于“試劑用支鏈淀粉”、或者成分子量測定時的分子量標準的“支鏈 淀粉標準樣品”、在藥品領域中的“血漿增量劑”等的特殊用途中使用。順便而言,作為由支鏈淀粉組成的分子量標志物,在專利第3012917號公報中公開通過使用酰胺鍵型氧化硅填充柱的順相分配模式的高效液相層析分離、純化的支鏈淀粉。
鑒于上述的事情,本申請人,在專利第3232488號公報中公開,通過調節培養條件,不經由溶劑沉淀的純化步驟,將每固體物的支鏈淀粉含量提高至約50質量%以上、優選至約55 90質量%的支鏈淀粉高含有物和其制備方法以及用途。由于此支鏈淀粉高含有物不經由溶劑沉淀的煩瑣的純化步驟制備,有可簡便地制備、且廉價的益處。另外,本申請人,在專利第4203322號公報中公開了通過含有α,α _海藻糖而提高對濕度變化的穩定性的支鏈淀粉高含有物和其用途;在特開2003-96103號公報中公開了通過均質地含以葡萄糖作為構成糖的非還原性糖質而提高對濕度變化的穩定性的含有支鏈淀粉的粉末;在特開號公報中公開了使用支鏈淀粉分解酶分解支鏈淀粉而制備質量平均分子量/數平均分子量的比降低的支鏈淀粉的方法。
其后,本申請人再發展上述專利第3232488號公報中得到的見解,不經由溶劑沉淀的純化步驟而開發了支鏈淀粉含量提高至90質量%以上的含有支鏈淀粉的粉末,作為在食品、藥品、化妝品中廣用的含有支鏈淀粉的粉末,將被稱為“ΡΙ_20”(株式會社林原商事銷售)、及“PF-20”(株式會社林原商事銷售)的2種的含有支鏈淀粉的粉末制品化(參照「中村敏、“油化學”、第34卷、第10號、865-871頁、1985年」、「中村敏、“日本食品科學”、第25卷、第4號、61-67頁、1986年」、及「中村敏、“食品工業”、第30卷、第10號、株式會社光琳發行、33-39頁、1987年」)。這2種含有支鏈淀粉的粉末,其后,統合為與“ΡΙ-20”大致是同等品的“食品添加物支鏈淀粉”(株式會社林原商事銷售),現在此“食品添加物支鏈淀粉”在市售。“食品添加物支鏈淀粉”的粘接力、附著力、被膜性、潤滑性優良,同時安全,并且,比較廉價,因此作為廣用的含有支鏈淀粉的粉末,作為食品用的增粘劑、粘接劑、粘著劑、被膜齊U,加工成膜狀,瞬時溶于水的無地膜,或作為使用可食性墨印刷的印刷膜、將食品、香料等混合的混合膜等,在廣泛的領域中使用。
但是,根據本發明人得到的其后的見解,上述“食品添加物支鏈淀粉”盡管有各種優良的特性,使用其制備的支 鏈淀粉膜,也有由于其厚度,曲折,或灣曲等而產生應力集中位置,則經時從其應力集中位置破裂或斷裂,從而不適宜使用的缺點。另外,上述“食品添加物支鏈淀粉”盡管支鏈淀粉含量達90質量%以上,但支鏈淀粉含量或含的支鏈淀粉的分子量分布在每制備批中不恒定,有難得到在溶解性或粘結力等的方面品質一定的產品的缺點。即,根據本發明人所確認,在“食品添加物支鏈淀粉”中的支鏈淀粉含量盡管在90質量%以上,但通常、在每制備批中在約90 96質量%的范圍內變動。伴隨此變動,所含的支鏈淀粉以外的夾雜糖質的含量也在約4 10質量%左右的范圍內變動,如果夾雜糖質的含量有2倍以上的變動幅,則當然會對含有支鏈淀粉的粉末的溶解性或粘結性等產生影響,就會有難得到在溶解性或粘結力等的方面品質一定的產品的問題。同樣地,如果所含的支鏈淀粉的分子量分布有變動,則會對含有支鏈淀粉的粉末中含的支鏈淀粉自體的溶解性或粘結力產生影響,隨著夾雜糖質含量的變動,含有支鏈淀粉的粉末的溶解性或粘結力會變動。因此,將“食品添加物支鏈淀粉”在以膜為首的成形物中使用之時,得到的成形物的強度、溶解性、崩解性等的性質,在極端的情況中,在“食品添加物支鏈淀粉”的每制備批中會不同。例如,藥品要求施用之后的有效成分的吸收、分布、代謝、排泄等的在活體內的動態恒定,其中使用的藥品添加物不對藥品的藥理作用產生影響而體內動態必需維持穩定,但在將以往的“食品添加物支鏈淀粉”作為藥品添加物,例如作為藥品的錠劑等的粘結劑使用之時,有效成分的溶出的速度在每制品不恒定,給在活體內的藥物動態帶來影響。如此,“食品添加物支鏈淀粉”,無論是作為食品用,還是作為要求強度或溶解性、粘結力等的性質恒定、且藥效成分的體內動態常恒定的藥品用、或者準藥品用或化妝品用等的添加物,都說不上是必然充分。使支鏈淀粉,或含有支鏈淀粉的成形物的用途不停留于食品,而為了擴大到食品以外的藥品、準藥品、化妝品等,要求每制品無偏差的恒定、且一定的品質的制品的提供的領域,另外,即便是食品等的從以往就使用“食品添加物支鏈淀粉”的領域,為了再擴大到相比支鏈淀粉膜等的含有支鏈淀粉的成形物要求更高的強度的用途,解消作為廣用的含有支鏈淀粉的粉末的“食品添加物支鏈淀粉”具有的上述的缺點是不可或缺的。
發明內容
本發明旨在解消以往的含有支鏈淀粉的粉末具有的上述的缺點,不經由溶劑沉淀等的煩瑣的純化步驟而制備,并且,在成形為膜之時示相比以往品更高的斷裂強度,同時有將夾雜糖的含量穩定維持到極其少的水平的一定的組成,優選為,旨在提供所含的支鏈淀粉的分子量分布在一定的范圍內的含有支鏈淀粉的粉末和其制備方法、以及那樣的含有支鏈淀粉的粉末的用途。
本發明人在為了解決上述課題而重復銳意研究,在重復各種試行錯誤之中發現,在從屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的微生物人為地創制的變異株之中,在含葡萄糖及麥芽糖作為碳源的選擇培養基中培養之時,盡管支鏈淀粉的生成量與親本株是同程度,但支鏈淀粉以外的糖質、即夾雜糖質的比例相比親本株更顯著地少的幾種變異株。在這些的變異株之中,選擇夾雜糖質的比例最少的變異株,將其在含有葡萄糖及麥芽糖作為碳源的培養基中培養,從該培養物,不經使用有機溶劑使支鏈淀粉沉淀的由溶劑沉淀的純化步驟,基于常規方法制備含有支鏈淀粉的粉末時,盡管微少含有作為屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的微生物的代謝產物的甘露糖醇,但得到夾雜糖質含量相比上述“食品添加物支鏈淀粉”顯著地更少的含有支鏈淀粉的粉末。使用此含有支鏈淀粉的粉末通過常規方法成形支鏈淀粉膜時,其斷裂強度相比上述使用“食品添加物支鏈淀粉”得的支鏈淀粉膜顯著地更高。再者,此含有支鏈淀粉的粉末,無關于制備批,夾雜糖質含量穩定地維持在極其少的水平,糖質組成大致一定,同時所含的支鏈淀粉的分子量分布穩定地在一定的范圍內,所以不僅上述斷裂強度,在對水的溶解性或將其他物質相互結合的粘結力等的方面也常可期待一定的品質,例如,在成形為膜、片、錠劑、顆粒等的藥品、準藥品、化妝品等中使用的成形物時,可在強度、溶解性、崩解性等的性質面維持一定的品質。從而,可得到有藥品、準藥品、化妝品等中要求的一定、且恒定的性質的成形物,特別是即便在藥品中使用,也無由于溶解性或崩解性的偏差等給有效成分的體內動態帶來影響的擔憂,所以此含有支鏈淀粉的粉末也可作為藥品添加物使用。本發明基于這些見解完成。即,本發明通過提供含有支鏈淀粉的粉末解決上述的課題,所述含有支鏈淀粉的粉末特征在于,是不經從將屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的微生物的變異株在含葡萄糖及麥芽糖作為碳源的培養基中培養而得到的培養物除去夾雜糖質的步驟而制備的含有支鏈淀粉的粉末,含在75容積%水性甲醇中不溶的支鏈淀粉級分和可溶的夾雜糖質級分,基于蒽酮-硫酸法求出的,相對于粉末全體中含的全糖質含量的夾雜糖質級分中含的夾雜糖質含量的比例是3質量%以下,同時含有甘露糖醇。本發明的含有支鏈淀粉的粉末,如上所述,以相對于粉末全體中含的全糖質含量的夾雜糖質級分中含的夾雜糖質含量的比例是3質量%以下而極其少作為大的特征,上述全糖質含量及上述夾雜糖質含量均基于蒽酮-硫酸法求出。蒽酮-硫酸法,如眾所周知,是利用由蒽酮的呈色反應的糖質的定量方法,由該呈色反應的吸光度作為與糖質的量成比例的值得到,所以可基于該值測定糖的量。再有,在定量以葡萄糖作為構成糖的糖質時,可通過將D-葡萄糖作為標準物質使用而作為D-葡萄糖換算量求出。蒽酮-硫酸法,在“食品添加物公定書”(第8版)、日本食品添加物協會發行、2007年、572-573頁(“支鏈淀粉”的項)中,也作為在支鏈淀粉的純度試驗中的“單糖類及少糖類”的測定方法被采用。上述“食品添加物公定書”記載的方法是作為在斯界中的支鏈淀粉純度的測定方法廣泛被認知的標準的方法,所以在本發明中,如后述的實驗2 3所示,以上述“食品添加物公定書”記載的“單糖類及少糖類”的測定方法作為基準,求出相對于粉末全體中含的全糖質含量的夾雜糖質含量的比例。但是,在糖質之中,例如,如后述的甘露糖醇一祥,存在在蒽酮-硫酸法中不呈色,無法檢測的糖質 ,基于蒽酮-硫酸法求出的全糖質含量及夾雜糖質含量雖然不必然對應于嚴格意義上的全糖質含量及夾雜糖質含量,但在本說明書中,只要未特別說明,將基于蒽酮-硫酸法求出的全糖質含量簡稱為“全糖質含量”、將基于蒽酮-硫酸法求出的夾雜糖質級分中的夾雜糖質含量簡稱為“夾雜糖質含量”。順便而言,在含有支鏈淀粉的粉末中的支鏈淀粉含量是將在支鏈淀粉級分中的支鏈淀粉含量,以夾雜糖質含量為基準,基于蒽酮-硫酸法求出也可,但本發明的含有支鏈淀粉的粉末是由支鏈淀粉級分和夾雜糖質級分組成的粉末,所以可通過從上述全糖質含量減算上述夾雜糖質含量來更簡便地求出。從而,在本發明的含有支鏈淀粉的粉末中,如果相對于全糖質含量的夾雜糖質含量的比例在3質量%以下,在支鏈淀粉級分中的支鏈淀粉含量成為全糖質含量的97質量%以上。再有,在此支鏈淀粉含量中,當然,不含在如甘露糖醇ー樣的蒽酮-硫酸法中檢測不到的糖質的量。如此,在本發明的含有支鏈淀粉的粉末中盡管含夾雜糖質,但其量最大也就是全糖質含量的3質量%,是極其少量,所以假設,即便夾雜糖質含量在從超過0質量%到3質量%的范圍變動,相對于其余的97質量%以上的支鏈淀粉的變動比例小,作為全體,在本發明的含有支鏈淀粉的粉末中的全糖質組成是大致一定的。另外,本發明的含有支鏈淀粉的粉末,如上所述,以含有甘露糖醇作為另一大的特征。甘露糖醇雖然依賴于培養中使用的碳源的種類,但通常是作為屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的微生物的代謝產物在培養物中含的物質。但是,甘露糖醇可溶于水性甲醇,所以在培養物由使用有機溶劑的溶劑沉淀被純化之時被除去。從而,甘露糖醇不被除去而在粉末中含有示,本發明的含有支鏈淀粉的粉末是不經通過使用有機溶劑的溶劑沉淀等除去夾雜糖質的步驟而制備的含有支鏈淀粉的粉末。在所述含有支鏈淀粉的粉末中通常存在以無水物換算計2質量%左右的不由蒽酮-硫酸法呈色而無法檢測的糖質成分,其主成分是甘露糖醇。順便而言,甘露糖醇的量可,例如,通過后述的實驗4所示的高效液相層析(HPLC)分析求出。由上述HPLC分析的甘露糖醇的檢測限界通常被認為是0.01質量%左右,所以本發明的含有支鏈淀粉的粉末含有甘露糖醇是指在粉末中含有以無水物換算計0.01質量%以上的甘露糖醇。另外,雖然也依賴于培養中使用的碳源的種類,但本發明的含有支鏈淀粉的粉末中含的甘露糖醇的含量,通常不超過以無水物換算計2質量%。再有,甘露糖醇是在75容積%水性甲醇中可溶,所以通常含在夾雜糖質級分中,如前所述,由于用蒽酮-硫酸法檢測不到,所以在上述夾雜糖質含量中不含。如上所述,本發明的含有支鏈淀粉的粉末含有甘露糖醇,即便是不經通過使用有機溶劑的溶劑沉淀等除去夾雜糖質的步驟制備的含有支鏈淀粉的粉末,夾雜糖質含量是全糖質含量的3質量%以下,是極其少量。如此又含甘露糖醇,并且,夾雜糖質含量是極其少量的含有支鏈淀粉的粉末,據本申請人所知,在本申請申請前不存在,是新穎的含有支鏈淀粉的粉末。本發明的含有支鏈淀粉的粉末,成形含有支鏈淀粉的粉末而得到的厚度IOOiim的膜、更具體而言,將含有支鏈淀粉的粉末的20質量/容積%水溶液在平板上流延之后,于25°C干燥,再在相対濕度22%的氣氛調濕而得`到的厚度100 u m的膜,在使用截面積Imm2的突刺試驗用適配體進行的突刺強度試驗中,顯示20MPa以上的突刺斷裂強度。此突刺斷裂強度,如通過后述的實驗示,相比使用上述“食品添加物支鏈淀粉”得到的支鏈淀粉膜更顯著地高,本發明的含有支鏈淀粉的粉末即便是不經由溶劑沉淀等的支鏈淀粉的純化步驟制備的,說起來是“廣用品”,示成形為膜時,有突刺斷裂強度大的優良的特性。另外,本發明通過提供含有支鏈淀粉的粉末的制備方法解決上述的課題,所述方法的特征在于包括將屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的微生物的變異株在含葡萄糖及麥芽糖作為碳源的培養基中培養的步驟、將得到的培養物除去菌體、脫色、脫鹽、濃縮、及粉末化的步驟,不包括夾雜糖質的除去步驟。本發明的制備方法中使用的屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的微生物的變異株只要可不經夾雜糖質的除去步驟,制備本發明的含有支鏈淀粉的粉末,則是何變異株均可,不特別限定,例如,作為其適宜的一例,可舉出后述的出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)S-2株(專利生物保藏中心保藏號FERM BP-11261)的變異株。這樣的變異株,基于本說明書的公開,以S-2株作為親本株,可通過向其適用慣用的變異方法和后述的實驗中所述的篩選方法得到。即,如后述的實驗I所示,將S-2株用慣用的變異方法隨機地變異,對得到的變異株在含葡萄糖及麥芽糖作為碳源的培養基中培養之時,以培養物中含的支鏈淀粉以外的夾雜糖質的含量作為指標進行篩選,選擇其含量相比作為親本株的S-2株更顯著地少的即可。
在如上述一祥得到的變異株之中,作為可適宜地使用的變異株之一例,可舉出例如,變異株MA446株(專利生物保藏中心保藏號FERMBP-11250)。本發明的含有支鏈淀粉的粉末是不經溶劑沉淀等的煩瑣的純化步驟制備的廉價的含有支鏈淀粉的粉末,且成形為膜的時,有得到突刺斷裂強度大,所以例如,作為支鏈淀粉膜,可在更寬的用途中使用的益處。另外,根據本發明的含有支鏈淀粉的粉末的制備方法,得到可不要求溶劑沉淀等的煩瑣的純化步驟,簡便并且廉價地,制備具備如上述一祥的優良的益處的含有支鏈淀粉的粉末的益處。另外,本發明通過提供將本發明的含有支鏈淀粉的粉末在至少原料的一部分中使用而制備的含有支鏈淀粉的成形物來解決上述的課題。即,本發明的含有支鏈淀粉的粉末,如上所述,即便是不經由溶劑沉淀等的支鏈淀粉的純化步驟制備的,說起來是“廣用品”,在成形為膜之時,有突刺斷裂強度大的優良的特性。而且,本發明的含有支鏈淀粉的粉末的夾雜糖質含量是3質量%以下,極其低,有高的支鏈淀粉純度,即便制備批不同,糖質組成也維持在大致一定,同時優選為,所含的支鏈淀粉的分子量分布在于一定的范圍內,所以斷裂強度自不用說,溶解性或粘結カ等的性質也變動或偏差少,可作為藥品添加物,在要求有效成分的體內動態常常一定的藥品、準藥品、化妝品等中使用。作為藥品等中使用的形態,不僅膜,可作為用于例如,作為片、錠劑、顆粒、纖維等的成形物,或者,作為包被劑、糖衣劑、賦形齊U、粘著劑等,還有,作為液劑使用的即時溶解型的固體制劑,可得到有藥品、準藥品、化妝品等要求的一定、且恒定的性質的成形物。尤其是,在藥品中使用之時,本發明的含有支鏈淀粉的粉末在溶解速度或崩解速度、斷裂強度等的性質面,每制品無偏差,無由溶解性或崩解性的偏差等給有效成分的體內動態帶來影響的擔憂,所以可作為藥品添加物使用。再有,本發明的含有支鏈淀粉的粉末也可通過由在藥品制備中一般使用的公知的方法作為無熱原的,而作為用于在注射劑等中使用的即時溶解型的固體制劑的原料使用。
圖1是使本發明的含有支鏈淀粉的粉末的水溶液經歷凝膠滲透層析而得到的溶出圖。圖2是使“食品添加物支鏈淀粉”的水溶液經歷凝膠滲透層析而得到的溶出圖。圖3是使本發明的含有支鏈淀粉的粉末的75容積%水性甲醇可溶的夾雜糖質級分的水溶液經歷凝膠滲透層析而得到的溶出圖。圖4是使“食品添加物支鏈淀粉”的75容積%水性甲醇可溶的夾雜糖質級分的水溶液經歷凝膠滲透層析而得到的溶出圖。圖5成形在本發明的含有支鏈淀粉的粉末而得到的膜的由放射光的X射線小角散射分析中,散射角2 0的范圍是0.001 0.1°的回折圖。圖6成形在本發明的含有支鏈淀粉的粉末而得到的膜的由放射光的X射線小角散射分析中,散射角20的范圍是0.01 2°的回折圖。實施方式本發明的含有支鏈淀粉的粉末,如前所述,是具有如下特征的含有支鏈淀粉的粉末,其為不經從將屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的微生物的變異株在含葡萄糖及麥芽糖作為碳源的培養基中培養而得到的培養物除去夾雜糖質的步驟而制備的含有支鏈淀粉的粉末,含在75容積%水性甲醇中不溶的支鏈淀粉級分和可溶的夾雜糖質級分,相對于粉末全體中含的全糖質含量的夾雜糖質含量的比例是3質量%以下,同時含有甘露糖醇。再有,75容積%水性甲醇是指將水和甲醇以容積比1:3混合的混液。屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的微生物的變異株只要可不經從其培養物,除去夾雜糖質的步驟而制備本發明的含有支鏈淀粉的粉末,是何變異株都可。作為所使用的親本株,可使用例如,作為「上田誠之助、“エ業化學雜志”、第67卷、757-760頁、1964年」中記載的支鏈淀粉產生菌的芽霉屬(Pullulariasp.)S-2株。再有,芽霉(Pullularia)屬現在被分類為短梗霉(Aureobasidium)屬,在短梗霉(Aureobasidium)屬中,僅知出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans) I種。S-2株產生支鏈淀粉,另外,如后所述,與出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)有極好的一致的培養性狀,所以被鑒定為是屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的微生物,在茨城縣筑波市東I 丁目I番地I中央第6所在的獨立行政法人產業技術綜合研究所、專利生物保藏中心中,于2010年6月28日,以保藏號FERMBP-11261保藏。為了得到 本發明中所使用的屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的微生物的變異株,在上述S-2株中實施,例如,「杉山純多等編、“新版微生物化學實驗法”、株式會社講談公司Scientific、1999年3月20日發行、126-133頁」中記載的,由紫外線照射或變異劑的藥劑處理等的本領域中通常進行的突變處理而得到變異株、對于得到的變異株,以在含葡萄糖及麥芽糖作為碳源的培養基中培養之時培養物中含的支鏈淀粉以外的夾雜糖質的含量作為指標進行篩選,選擇其含量相比作為親本株的S-2株更顯著地少的即可。在后述的實驗I中,詳述篩選的方法之一例。作為本發明中使用的變異株,在含葡萄糖及麥芽糖作為碳源的選擇培養基中培養之時,培養物中含的支鏈淀粉以外的夾雜糖質的含量優選相比將作為親本株的S-2株在同培養基中培養之時更低,更優選是成將作為親本株的S-2株在同培養基中培養之時的50%以下。如上所述,本發明的含有支鏈淀粉的粉末絕對不限于由特定的變異株的培養物制備的,作為可制備本發明的含有支鏈淀粉的粉末的適宜的變異株的具體例,可舉出對上述出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans) S-2株實施突變而得到的變異株出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans) MA446株。變異株MA446株與作為親本株的S-2株同樣產生支鏈淀粉,另外,如后所述,與出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)有極良好一致的培養性狀,所以被鑒定為是屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的微生物,在茨城縣筑波市東I 丁目I番地I中央第6所在的獨立行政法人產業技術綜合研究所、專利生物保藏中心中,于2010年4月30日以保藏號FERM BP-11250進行保藏。順便而言,作為親本株的S-2株及變異株MA446株的培養性狀如下。〈S-2株及變異株MA446株的培養性狀>在馬鈴薯右旋糖瓊脂培養基(馬鈴薯浸出液末4.0g、葡萄糖20.0g、瓊脂15.0g、純化水1,000ml、pH5.6)上于27°C好氧地培育,產生暗黒色的染料。不確認到變形而移動的樣子或子實體的形成。觀察不到有性生殖,在菌絲中確認隔壁。在培育約4天往后,形成單性房狀出芽型的分生子,從直鏈狀的菌絲尖端或中間發生出芽型分生子。成熟的分生子作為單胞存在,無色、滑面。作為變異株的培養中使用的培養基,只要是基本上,培養后,培養基中含的夾雜糖質的含量少,可不經從培養物夾雜糖質的除去步驟,制備本發明的含有支鏈淀粉的粉末,就不特別限制,與為了支鏈淀粉產生而培養屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的微生物中使用的培養基同樣地,可使用適宜含有碳源、氮源、有機營養源、無機物質等的培養基。作為碳源,使用含有葡萄糖及麥芽糖的糖質混合物,優選為,含有葡萄糖及麥芽糖的右旋糖ー當量(以下,表示為“DE”)50 90的糖質、更優選為,使用各自以無水物換算計10質量%以上含有葡萄糖及麥芽糖的糖質。在作為碳源缺少葡萄糖或麥芽糖之任何或雙方時,培養物的夾雜糖質的含量不變那么低,制備本發明的含有支鏈淀粉的粉末變得困難。另夕卜,在作為碳源所使用的糖質的DE不足50或超90之時,支鏈淀粉的生成不變少,在得到的含有支鏈淀粉的粉末中的支鏈淀粉的含量降低,相對夾雜糖質的含量増加,所以不喜好。再有,培養基中的碳源的濃度作為5 20質量/容積%是優選的。
作為氮源,使用選自銨鹽、硝酸鹽等的無機氮源或谷氨酸鹽、胨、酵母提取物、玉米漿等的有機氮源等的I種或2種以上。此外,作為無機物質,適宜使用磷酸鹽、鎂鹽、鐵鹽等。培養在通氣下攪拌或振蕩而好氧地進行是優選的。作為培養溫度,適宜于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的培育的27°C是適宜的。作為培養時間,碳源被消費,支鏈淀粉的產生量變得大致最大,夾雜糖質的含量降低而至成大致一定是優選的。另外,根據需要,為了增大支鏈淀粉的產生量或作為所望的分子量,通過向培養基添加適宜的PH調節齊U,或間歇或連續地移出培養液而適宜供給ー補足新鮮的營養培養基來調節培養液的稀釋速度下進行連續培養也可。從如上述一樣得到的培養物,通過離心分離或過濾等的慣用的適宜的方法除去菌體,可得到含支鏈淀粉的培養上清。將得到的培養上清通過由常規方法,脫色、脫鹽、濃縮、干燥、粉末化,可得到本發明的含有支鏈淀粉的粉末。作為脫色處理,通常進行使用粉末活性炭的過濾。另外,在脫鹽處理中,通常、使用陽離子交換樹脂及陰離子交換樹脂。作為陽離子交換樹脂,可適宜使用例如,“ DIAIONPK218”(三菱化學株式會社制備)或,“DIAION SK-1B”(三菱化學株式會社制備)等,作為陰離子交換樹脂,可適宜使用“DIAION WA30”(三菱化學株式會社制備)或,“AmberliteIRA411”(有機株式會社銷售)等的市售的離子交換樹脂。干燥及粉末化基于常規方法進行即可,例如,干燥后,將得到的塊粉碎而粉末化也可,由噴霧干燥法同時進行干燥和粉末化也可。如上述一樣得到的本發明的含有支鏈淀粉的粉末,其相對于粉末全體中含的全糖質含量的夾雜糖質含量是3質量%以下,換言之,支鏈淀粉含量穩定為97質量%以上,更優選為,相對于粉末全體中含的全糖質含量的夾雜糖質含量是I質量%以下,換言之,支鏈淀粉含量極其穩定為99質量%以上,并且,含有甘露糖醇。順便而言,在本發明的含有支鏈淀粉的粉末中,在夾雜糖質級分中的夾雜糖質中,含葡萄糖聚合度3 90的糖質。葡萄糖聚合度3 90的糖質是指,具體而言,如后述的實驗4中記載,使在含有支鏈淀粉的粉末的75容量%水性甲醇中可溶的夾雜糖質級分經歷凝膠滲透層析(以下,簡稱為“GPC”)之時,相當于葡萄糖聚合度3 90的分子量、S卩,考慮到在由GPC求出的平均分子量中含一定的誤差,是在分子量500 15,000道爾頓的范圍檢測的成分。
在本發明的含有支鏈淀粉的粉末中,上述的葡萄糖聚合度3 90的糖質的含量在粉末全體中含的全糖質含量的2質量%以下是優選的。葡萄糖聚合度3 90的糖質的含量超2質量%,則在成形為膜之時,有得不到所期的突刺斷裂強度的情況而不喜好。順便而言,上述葡萄糖聚合度3 90的糖質,當向其作用支鏈淀粉酶之吋,作為主成分生成麥芽三糖和少量的麥芽四糖,所以被認為是有基本上麥芽三糖以a-1,6結合聚合的支鏈淀粉樣的結構的糖質。但是,盡管此糖質有支鏈淀粉樣的結構,但是在75容積%水性甲醇中可溶的低分子量的糖質。如前所述,盡管依賴于培養基中使用的碳源的種類,在屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的微生物的培養物中,通常含作為所述微生物的代謝產物的甘露糖醇。甘露糖醇在75容積%水性甲醇中可溶,只要不由溶劑沉淀等進行夾雜糖質的除去,含在從上述培養物制備的含有支鏈淀粉的粉末中。從而,含有支鏈淀粉的粉末中含甘露糖醇示,所述含有支鏈淀粉的粉末不經由溶劑沉淀等的夾雜糖質的除去步驟而制備。如前所述,甘露糖醇在蒽酮-硫酸法中檢測不到,但含有支鏈淀粉的粉末中的甘露糖醇的量可例如由后述的實驗4中所使用的高效液相層析(HPLC)分析求出。在本發明的含有支鏈淀粉的粉末中的甘露糖醇的量是以無水物換算計,通常、含有支鏈淀粉的粉末的0.04質量%以上,不超2質量%。作為本發明的含有支鏈淀粉的粉末的主成分的支鏈淀粉的分子量只要在成形為膜之時得到期望的突刺斷裂強度,就不特別限制,但作為基于GPC分析的質量平均分子量(以下,表示為Mw)在約50,000 1,000,000道爾頓是優選的,在約50,000 500,000道爾頓是更優選的。Mw低于50,000道爾頓,則成形為膜變得困難而不喜好,另外,高于1,000, 000道爾頓,則其水溶液的粘度變得過高而有發生難處理的問題之吋。另外,從屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的微生物的培養物,經脫色、脫鹽、濃縮、干燥、及粉末化步驟,在不經溶劑沉淀等的夾雜糖質的除去步驟制備的含有支鏈淀粉的粉末中,對成為 分子量分布的指標的支鏈淀粉的數平均分子量(以下,表示為Mn)的Mw的值(即Mw/Mn)通常成約10 70。在本發明的含有支鏈淀粉的粉末中,Mw/Mn的值只要在成形為膜之時得到期望的突刺斷裂強度,就不特別限制,但100以下是適宜的,更適宜在約10 70的范圍是優選的。Mw/Mn的值超100,即分子量分布更寬時,則造膜性不穩定而成形為膜之時難穩定地得到突刺斷裂強度高的膜。本發明的含有支鏈淀粉的粉末是白色、且粉末而流動性優良,與以往的含有支鏈淀粉的粉末同樣示對水良好的溶解性。本發明的含有支鏈淀粉的粉末可根據用途,其他材料、例如,選自支鏈淀粉以外的多糖類、增量劑、賦形劑、填充劑、增粘劑、表面活性劑、發泡劑、消泡劑、PH調節劑、穩定劑、難燃劑、離形劑、抗菌劑、著色劑、著香劑、營養物、嗜好物、呈味物、藥效物質及生理活性物質的I種或2種以上的,在食品、藥品、準藥品及化妝品領域一般使用的成分混合使用。另外,本發明的含有支鏈淀粉的粉末在作為成形物的具體例成形為膜之時突刺斷裂強度優良,與以往的含有支鏈淀粉的粉末有同樣的良好的溶解性,且作為膜的使用耐性優良,所以可作為食品、藥品、及化妝品等的領域中使用的膜、片或包被的原材料有利地利用。再有,將本發明的含有支鏈淀粉的粉末成形為膜等之時,作為剝離劑可使用含蔗糖脂肪酸酯等的糖脂肪酸酷的表面活性剤。另外,本發明的含有支鏈淀粉的粉末,如上所述,共具對水的良好的溶解性和成形為膜等之時高的強度,而且,全糖質中的夾雜糖質含量是3質量%以下,且支鏈淀粉含量是97質量%以上,即支鏈淀粉純度高,糖質組成大致一定,而且,所含的支鏈淀粉自體的分子量分布穩定而在一定的范圍內,所以在將其在成形物中使用之時,可期待給所述成形物帶來常常一定的強度或溶解速度、崩解速度。從而,本發明的含有支鏈淀粉的粉末可在不僅食品,作為藥品添加物,要求有效成分的體內動態常常一定的藥品、準藥品、化妝品等中使用,膜自不必說,可作為作為片、紗布或手術絲等中使用的纖維等的成形物,或者,作為制備錠劑或顆粒劑之時的賦形劑、粘結劑或包被劑等,還有,用于作為液劑使用的即時溶解型的固體制劑。在如此得到的化妝品、藥品、及準藥品中,有每制品無偏差的穩定、且恒定的之一定的品質,特別在藥品中,無由溶解性或崩解性的偏差等而給有效成分的體內動態帶來影響的擔憂。 在將本發明的含有支鏈淀粉的粉末在至少原料的一部分中使用而制備的成形物中,本發明的含有支鏈淀粉的粉末以外,可適宜配合在各自的領域中廣用的各種成分。在上述成形物是化妝品或其中間制品之時,可作為包裝、罩、浴用劑、口中清涼膜等的形態,可將例如,對氧基安息香酸酷、氯化苯扎銨、戊烷ニ醇等的防腐剤、熊果苷、鞣花酸、四氫類姜黃素、維生素P等的美白劑、甘草酸、甘草提取物等的抗炎癥劑、乳鐵蛋白、硫酸軟骨素、透明質酸、感光素101號、感光素301號等的細胞賦活劑、弾性蛋白、角蛋白、尿素、神經酰胺等的保濕劑、角鯊烷、凡士林、三-2-こ基己酸鯨蠟酯等的油劑、角叉菜膠、羧甲基纖維素、豆角膠、羧基こ烯基聚合物等的水溶性高分子、1,3-丁ニ醇、聚こニ醇、丙ニ醇、山梨糖醇、麥芽糖醇等的醇類等,各自I種或2種以上、単獨或適宜組合而配合。另外,在上述成形物是藥品或準藥品或其中間制品之時,可作為顆粒、錠劑、糖衣錠等的形態,可將例如,硫唑嘌呤、環孢菌素、環磷酰胺、甲氨喋呤、他克莫司水和物、白消安等的免疫抑制劑、卡培他濱、利妥昔單抗、曲妥珠單抗、貝伐珠單抗、多西他賽、伊馬替尼甲磺酸鹽、5-氟尿嘧啶、阿那曲唑、泰素、他莫昔芬、多西他賽、羥基脲等的抗癌劑、阿巴卡韋硫酸鹽、扎西他濱、去羥肌苷、泛昔洛韋、利巴韋林等的抗病毒劑、阿莫西林、酞氨西林、頭孢克月虧、磺胺甲ニ唑、左氧氟沙星水和物、頭孢卡品匹伏鹽酸鹽水和物、頭孢托侖匹伏、克拉霉素等的抗生物質、醋氨酚、阿司匹林、こ水楊胺、水楊酸甲酯等的解熱鎮痛劑、潑尼松龍、地塞米松、倍他米松等的類固醇劑、干擾素-a、、胰島素、縮宮素、生長激素、等的蛋白或肽、BCG疫苗、日本腦炎疫苗、麻疹疫苗、脊髄灰質炎疫苗、痘苗、破傷風類病毒、毒蛇抗毒素、人免疫球蛋白等的生物學制劑、視黃醇、硫胺素、核黃素、吡哆素、氰基鈷胺、L-抗壞血酸、類胡蘿卜素、麥角留醇、生育酚、生物素、降鈣素、輔酶Q、a-硫辛酸、煙酸、甲基萘醌、泛醌、吡咯并醌喹啉等的維生素劑或它們的衍生物、高麗人參提取物、蘆薈提取物、蜂膠提取物、甘草提取物、桂皮提取物、獐牙菜提取物等的生藥提取物等,各自I種或2種以上、單獨或適宜組合而配合。可將上述的化妝品、藥品、及準藥品等,在各種成形物或其中間制品中,在不脫離本發明的效果的范圍內,作為再改善柔軟性或強度的目的,根據需要,化妝品、藥品、及準藥品等的領域中通常使用的其他高分子物質、適宜的塑化劑、或者賦形劑等的其他成分與本發明的含有支鏈淀粉的粉末聯用,在以其他賦形劑作為主體的成形物中,將本發明的含有支鏈淀粉的粉末作為粘結劑使用也可。作為高分子物質,可舉出含角叉菜膠、黃原膠、羧甲基纖維素、纖維素、半纖維素、阿拉伯膠、瓜爾膠、角叉菜膠、果膠、殼多糖、瓊脂糖、糊精、直鏈淀粉及化工淀粉的淀粉等的多糖類或它們的衍生物、明膠或酪蛋白等的蛋白質等。作為塑化劑,可使用山梨糖醇、麥芽糖醇、海藻糖、甘油、聚こ烯基醇、聚こニ醇或丙ニ醇等的多元醇。作為賦形劑,可使用麥芽糖醇、甘露糖醇、麥芽糖醇、蔗糖、麥芽糖、乳糖、a,a-海藻糖、a,P -海藻糖、阿拉伯膠、玉米淀粉、結晶纖維素等的糖質、氫氧化鋁、氫氧化鈣、氫氧化鎂、氫氧化鋇、硫酸鈣、亞硫酸鈣、碳酸鈣、氧化硅、硅酸鈣、堿基性碳酸鎂、高嶺土、滑石等的無機物。尤其是,a,a-海藻糖有抑制由有效成分的氧化分解等的變性,穩定保持活性的作用,所以可作為穩定化劑有利地利用。以下,通過實驗詳細地說明本發明。<實驗1:支鏈淀粉產生菌的變異株的取得>向出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans) S-2株的分生子實施由紫外線照射的突變處理,播種到馬鈴薯右旋糖瓊脂平板,于27°C培養而將培育的集落作為變異株分離。將分離的變異株及作為親本株的S-2株,各自,在含有以酸糖化水飴(DE48、以無水物換算計含有葡萄糖約27%、麥芽糖約17%、株式會社林原商事銷售)作為固體分10.0質量/容積%、磷酸氫ニ鉀0.2質量/容積%、胨0.2質量/容積%、氯化鈉0.2質量/容積%、硫酸鎂7水和物0.04質量/容積%、及硫酸亞鐵7水和物0.001質量/容積%的液體選擇培養基(pH7.0)中植菌,于27°C振蕩培養3天。將從各自的培養物通過離心分離除去菌體而得到的培養上清用水稀釋10倍。取各自的一部分,向它們加3倍量的甲醇(試劑特級、和光純藥エ業株式會社制)而作為75容積%水性甲醇,通過充分混和而將支鏈淀粉沉淀之后,將離心分離得到的上清再用水稀釋10倍 的作為夾雜糖質測定用的試驗液。再有,該試驗液是培養上清被稀釋400倍的。另行,將濃度0.01質量/容積%的葡萄糖水溶液作為標準液利用,水作為空白對照,對各試驗液,根據“食品添加物公定書”(第8版)、日本食品添加物協會發行、2007年、572-573頁(“支鏈淀粉”的項)中記載的方法,引起基于蒽酮-硫酸法的呈色反應,使用分光光度計測定在波長620nm的吸光度,由下述的式I,求出在培養上清中的夾雜糖質濃度(%)。另外,將上述的培養上清的10倍稀釋液再用水稀釋100倍的作為全糖質測定用的試驗液,與上述同樣地引起基于蒽酮-硫酸法的呈色反應,測定在波長620nm的吸光度,由下述的式2,求出在培養上清中的全糖質濃度(%)。通過由下述的式3,從全糖質濃度減夾雜糖質濃度來求出支鏈淀粉濃度(%)。式1:夾雜糖質濃度(%)= [ {(Ak-Ao) X 400} / {(As-Ao) X 100} ] X 100其中,Ak:夾雜糖質測定用的試驗液的吸光度、As:標準液的吸光度、Ao:水(對照)的吸光度。式2:全糖質濃度(%)= [{ (Az-Ao) X 1000}/{(As-Ao) X 100}] XlOO其中,Az:全糖質測定用的試驗液的吸光度、As、Ao與式I中的相同。式3:支鏈淀粉濃度(%)=全糖質濃度(%)-夾雜糖質濃度(%)另行,將菌體接種前的培養基的全糖質濃度由蒽酮-硫酸法測定而求出碳源濃度(%),相對于培養基的碳源濃度(%)的夾雜糖質濃度(%)及支鏈淀粉濃度(%),各自,基于下述的式4、5,作為夾雜糖質率(%)及支鏈淀粉對糖收率(%)求出。
式4:夾雜糖質率(%) ={夾雜糖質濃度(%) /培養基的碳源濃度(%) } X 100式5:支鏈淀粉對糖收率(%) = {支鏈淀粉濃度(%) /培養基的碳源濃度(%) } X 100
將如上述一樣求出的夾雜糖質率作為指標,選擇判斷為夾雜糖質率相比親本株更少的變異株組(分離株的大概W。選擇的變異株之中,特別是夾雜糖質率低,成為親本株之一半以下的5株示于表I。如表I所示,在這些的變異株中,盡管支鏈淀粉對糖收率與作為親本株的S-2株大致同程度,但夾雜糖質率均在3.0%以下,相比作為親本株的S-2株(夾雜糖質率6.6%)之一半更低,相對于支鏈淀粉對糖收率(%)的夾雜糖質率(%)的比率均在
0.05以下,此值也成在作為親本株的S-2株中的比率(0.101)的不足一半。表I所示的這些變異株的支鏈淀粉對糖收率與親本株是同程度,夾雜糖質率低,即便不經從它們的培養物由溶劑的沉淀分別等的純化步驟制備含有支鏈淀粉的粉末,也相比以往的夾雜糖質少,非常可期待得到穩定的一定組成的含有支鏈淀粉的粉末。在其中也是,MA446株在得到的變異株之中夾雜糖質率最低,支鏈淀粉對糖收率與夾雜糖質率的比率也最低,所以選擇此株,進行以下的實驗。再有,基于上述的突變、培養、篩選的方法,將至少S-2株作為親本株,可不要求過度的試行錯誤地適宜、得到可制備本發明的含有支鏈淀粉的粉末的變異株。表I
權利要求
1.含有支鏈淀粉的粉末,其特征在于, 是不經從將屬于出芽短梗霉(Aureobasisium pullulans)的微生物的變異株在含葡萄糖及麥芽糖作為碳源的培養基中培養而得到的培養物除去夾雜糖質的步驟而制備的含有支鏈淀粉的粉末, 含在75容積%水性甲醇中不溶的支鏈淀粉級分和可溶的夾雜糖質級分, 基于蒽酮-硫酸法求出的,相對于粉末全體中含的全糖質含量的夾雜糖質級分中含的夾雜糖質含量的比例是3質量%以下,同時 含有甘露糖醇。
2.權利要求1所述的含有支鏈淀粉的粉末,其特征在于,甘露糖醇的含量以無水物換算計不超2質量%。
3.權利要求1或2所述的含有支鏈淀粉的粉末,其還具有下述(I) (3)的特征: (1)支鏈淀粉的質量平均分子量是約50,000 1,000,000道爾頓。
(2)支鏈淀粉的質量平均分子量/數平均分子量的值是約10 70。
(3)在支鏈淀粉分子中,相對于麥芽三糖結構,以摩爾比含I 3%麥芽四糖結構。
4.權利要求1 3之任一項所述的含有支鏈淀粉的粉末,其還具有下述(4)的特征: (4)成形含有支鏈淀粉的粉末而得到的厚度500μ m的膜,在使用放射光的X射線小角散射分析中,不顯示長周期結構或密度搖擺所致的回折峰。
5.權利要求1 4之任一項所述的含有支鏈淀粉的粉末,其還具有下述(5)的特征: (5)成形含有支鏈淀粉的粉末而得到的厚度100μ m的膜,在使用截面積Imm2的突刺試驗用適配體進行的突刺強度試驗中,顯示20MPa以上的突刺斷裂強度。
6.權利要求1 5之任一項所述的含有支鏈淀粉的粉末,其中屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的微生物的變異株是出芽短梗霉(Aureobasidiumpullulans) S-2株的變異株。
7.權利要求1 6之任一項所述的含有支鏈淀粉的粉末的制備方法,其特征在于, 包括 將屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的微生物的變異株在含葡萄糖及麥芽糖作為碳源的培養基中培養的步驟、 將得到的培養物除去菌體、脫色、脫鹽、濃縮、及粉末化的步驟, 不包括夾雜糖質的除去步 驟。
8.權利要求7所述的含有支鏈淀粉的粉末的制備方法,其中屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的微生物的變異株是出芽短梗霉(Aureobasidiumpullulans) S-2株的變異株。
9.權利要求7或8所述的含有支鏈淀粉的粉末的制備方法,其中屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pulIulans)的微生物的變異株是變異株MA446株(專利生物保藏中心保藏號 FERM BP-11250)。
10.含有支鏈淀粉的成形物,其為將權利要求1 6之任一項所述的含有支鏈淀粉的粉末在至少原料的一部分中使用而制備的。
11.權利要求10所述的含有支鏈淀粉的成形物,其中含有支鏈淀粉的成形物是食品、化妝品、藥品、準藥品、或者它們任何之中間制品。
全文摘要
本發明旨在提供不經由溶劑沉淀等的煩瑣的純化步驟而制備,并且,在成形為膜之時示相比以往品更高的斷裂強度的含有支鏈淀粉的粉末和其制備方法以及用途。通過提供含有支鏈淀粉的粉末,其特征在于,是不經從將屬于出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)的微生物的變異株在含葡萄糖及麥芽糖作為碳源的培養基中培養而得到的培養物除去夾雜糖質的步驟而制備的含有支鏈淀粉的粉末,含在75容積%水性甲醇中不溶的支鏈淀粉級分和可溶的夾雜糖質級分,基于蒽酮-硫酸法求出的,相對于粉末全體中含的全糖質含量的夾雜糖質級分中含的夾雜糖質含量的比例是3質量%以下,同時含有甘露糖醇、及其制備方法以及用途來解決上述課題。
文檔編號C08B37/00GK103140503SQ20118003481
公開日2013年6月5日 申請日期2011年6月17日 優先權日2010年6月17日
發明者澀谷孝, 伊澤精祐, 三宅俊雄 申請人:株式會社林原