專利名稱：一種s-(+)-鄰氯苯甘氨酸的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種s- ( + )-鄰氯苯甘氨酸的制備方法。
背景技術：
氯吡格雷(Clopidogrel,化學名稱為(2S)-2-(2-氯苯基)-2-(4，5,6，7-四氫噻吩 [3，2-c]并吡啶-5-基)乙酸甲酯)是一種安全、有效的血小板聚集抑制劑，其結構 式如下
現有技術中，關于氯吡格雷的制備方法的報道很多，大致分為兩類 一是 首先化學合成(±) 2-(2-氯苯基)-2-(4，5，6，7-四氫噻吩[3，2-c]并吡啶-5-基)乙酸甲 酯，然后通過外消旋拆分所述的(±) 2醫(2-氯苯基)-2-(4，5,6，7-四氫噻吩[3，2-c]并 吡啶-5-基)乙酸甲酯獲得(28)-2-(2-氯苯基)-2-(4，5，6，7-四氫噻吩[3，2-(:并吡啶-5-基)乙酸甲酯)即氯吡格雷；另一種方法是先獲得手性的中間體，然后再合成氯 吡格雷。在第二類方法中，R-(-)-鄰氯扁桃酸和S-(+)-鄰氯苯甘氨酸是主要的兩 種中間體，但是由于R-(-)-鄰氯扁桃酸制備的氯吡格雷中異構體雜質含量較高， 現有的氯吡格雷的制備工藝大多是通過拆分得到S-(+)-鄰氯苯甘氨酸，然后再由 S-(+)-鄰氯苯甘氨酸合成氯吡格雷。現有的工藝存在以下缺點
1、 進行拆分時，需要使用到髙純度手性酸，如樟腦磺酸、酒石酸、扁桃酸、 乳酸、馬來酸、氨基酸以及這些酸的衍生物等，原料成本髙。
2、 通過拆分手性中間體合成氯吡格雷，工藝路線長，能耗大。
3、 所得拆分產物理論收率僅在50%左右，實際收率更低。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是為了克服現有技術的不足，提供一種S-(+)-鄰氯苯甘氨酸的制備方法，該方法工藝簡單，且收率髙、成本低。 為解決以上技術問題，本發明采取如下技術方案 一種S- ( + )-鄰氯苯甘氨酸的制備方法，包括如下步驟 (1)、以鄰氯苯甲醛、氰化鉀以及碳酸銨為原料，反應合成(±)鄰氯苯乙
3內酰脲；
(2)、將步驟(1)所得(±)鄰氯苯乙內酰脲用水溶解，并調節水溶液pH 在8 10之間，然后加入質量為所述的(±)鄰氯苯乙內酰脲質量10% 20%的 土壤桿菌，在氮氣保護、溫度35C 45X:以及振蕩條件下，反應1 3天生成所 述的S- ( + )-鄰氯苯甘氨酸。
作為本發明的進一步實施方案步驟(1)的具體過程為將鄰氯苯甲醛、 氰化鉀以及碳酸銨加入到乙醇和水的混合溶劑中得到反應液，然后將反應液升 溫至55C 65'C,并于該溫度下保溫攪拌反應18 30小時，結束反應，用鹽酸 調節反應液pH至2 3,過濾，保留濾餅，水洗，干燥，提純得白色晶體即為 (±)鄰氯苯乙內酰脲。所述的鄰氯苯甲醛、氰化鉀以及碳酸銨的投料摩爾比優 選為1:0.95 1.0:1.5 2。
步驟(2)中，在反應結束后，離心并保留濾液，加入活性炭對濾液進行脫
色，然后向濾液中加入二氯甲烷，并在溫度0ic 5x:和攪拌下，加入鹽酸調節
pH至4 5,分出二氯甲烷層，干燥、減壓濃縮至干得白色固體即為所述的S-(+ )-鄰氯苯甘氨酸。
本發明中步驟(2)中，土壤桿菌在pH 8 10的水溶液環境中可產生D-乙 酰脲水解酶和N-氨基甲酰水解酶，在這兩種酶的作用下，(±)鄰氯苯乙內酰脲 中的S- ( + )-鄰氯苯乙內酰脲發生水解生成S- ( + )-鄰氯苯甘氨酸，并且在此 水解環境下，(±)鄰氯苯乙內酰脲中的R-(-)-鄰氯苯乙內酰脲不斷產生自發 消旋，從而(±)鄰氯苯乙內酰脲理論上可被等量地轉化為S- ( + )-鄰氯苯甘氨 酸。
本發明與傳統拆分方法相比，直接通過酶催化得到目標產物，不需要使用 任何手性物質，原料成本低且工藝簡單。另外，如上所述，(±)鄰氯苯乙內酰 脲理論上可被等量地轉化為S- ( + )-鄰氯苯甘氨酸，如此，目標產物的實際收 率可達85%以上；而且，由于使用酶催化技術，整個生產工藝中，有機溶劑 使用少，產生廢料少，有利于環境保護。
具體實施例方式
下面對本發明的具體實施方式
進行說明，但不限于這些實施例。
實施例1
一種(±)-鄰氯苯乙內酰脲制備方法，合成路線如下(NH4)2C03
KCN
、Cl v 、Cl
該制備方法的具體過程為將鄰氯苯甲醛5.6g、氰化鉀2.6g和碳酸銨9.1g 在攪拌下加入到50ml50。/。的乙醇水溶液中，升溫到55 65'C，于該溫度下， 保溫攪拌反應24小時，冷卻至室溫，用鹽酸調節pH 2 3,過濾，水洗，干 燥得(士)-鄰氯苯乙內酰脲粗品，該粗品用水重結晶得白色晶體6.8g，收率80%, m.pl75 177"C ，純度(HPLC) 99.80%。
實施例2
一種S-(+)-鄰氯苯甘氨酸甲酸的制備方法，其所涉及的反應如下式所示
pH 8—10
(士)-鄰氯苯乙內酰脲
Agrabactarium radiobacter CPU4211
Cl
R-(-)-鄰氯苯乙內酰脲
G00H
:0
Agrabactarium radiobacter CPU4211
NH2
Gl
s-(+)-鄰氯苯乙內酰脲 s-(+)-鄰氯苯甘氨酸
該制備方法的具體過程如下將6.8g實施例l所得的(士)-鄰氯苯乙內酰脲 的結晶和100ml水攪拌混合均勻，加入氫氧化鈉水溶液，調節pH至8.5，加 入土壤桿菌Agrabactarium radiobacter CPU4211菌體(sigma-aldrich公司提 供)lg，氮氣保護和40"下，振搖反應42小時，離心，棄去沉淀物，濾液用 活性炭脫色后，加入200ml 二氯甲垸，在攪拌和溫度0 5'C下，用鹽酸調節 pH4 5,分出二氯甲烷層，水層用100ml二氯甲垸萃取兩次。合并二氯甲烷層，用無水硫酸鎂干燥后，減壓濃縮至干，得白色固體5.1g即為S-(+)-鄰氯苯 甘氨酸，ee。/。為99.5%,收率85%。
實施例3
一種S-(+)-鄰氯苯甘氨酸甲酯的制備方法，其具體過程如下將70g實施 例1所得的(±)-鄰氯苯乙內酰脲的結晶和1000ml水攪拌混合均勻，加入氫氧 化鈉水溶液，調節pH至9，加入土壤桿菌Agrabactarium radiobacter CPU4211 菌體(sigma-aldrich公司提供)12g，在氮氣保護和溫度40'C下，振搖反應 48小時，離心，棄去沉淀物，濾液用活性炭脫色后，加入200ml 二氯甲烷， 在攪拌和溫度0 5T下用鹽酸調節pH 4 5，分出二氯甲烷層，水層用1000ml 二氯甲烷萃取兩次。合并二氯甲烷層，用無水硫酸鎂干燥后，減壓濃縮至干， 得白色固體54g即為S-(+)-鄰氯苯甘氨酸，ee。/。為99.4%，收率88%。
權利要求
1、一種S-(+)-鄰氯苯甘氨酸的制備方法，其特征在于包括如下步驟(1)、以鄰氯苯甲醛、氰化鉀以及碳酸銨為原料，反應合成(±)鄰氯苯乙內酰脲；(2)、將步驟(1)所得(±)鄰氯苯乙內酰脲用水溶解，并調節水溶液pH在8～10之間，然后加入質量為所述的(±)鄰氯苯乙內酰脲質量10％～20％的土壤桿菌，在氮氣保護、溫度35℃～45℃以及振蕩條件下，反應1～3天生成所述的S-(+)-鄰氯苯甘氨酸。
2、 根據權利要求1所述的S- ( + )-鄰氯苯甘氨酸的制備方法，其特征在于 步驟(1)的具體過程為將鄰氯苯甲醛、氰化鉀以及碳酸銨加入到乙醇和水的 混合溶劑中錚到反應液，然后將反應液升溫至55'C 65C并于該溫度下保溫 攪拌反應18 30小時，結束反應，用鹽酸調節反應液pH至2 3，過濾，保留 濾餅，水洗，干燥，提純得白色晶體即為(±)鄰氯苯乙內酰脲。
3、 根據權利要求l或2所述的S- ( + )-鄰氯苯甘氨酸的制備方法，其特征 在于所述的鄰氯苯甲醛、氰化鉀以及碳酸銨的投料摩爾比為1:0.95 1.0:1.5 2c
4、 根據權利要求1所述的S- ( + )-鄰氯苯甘氨酸的制備方法，其特征在于 步驟(2)中，反應結束后，離心并保留濾液，加入活性炭對濾液進行脫色，然 后向濾液中加入二氯甲烷，并在溫度0'C 5'C和攪拌下，加入鹽酸調節pH至4 5,分出二氯甲垸層，干燥、減壓濃縮至干得白色固體即為所述的S- ( + )-鄰氯 苯甘氨酸。
全文摘要
本發明涉及一種S-(+)-鄰氯苯甘氨酸的制備方法，首先以鄰氯苯甲醛、氰化鉀以及碳酸銨為原料合成(±)鄰氯苯乙內酰脲；然后以土壤桿菌為酶選擇性地將S-(+)-鄰氯苯乙內酰脲水解成S-(+)-鄰氯苯甘氨酸，R-(-)-鄰氯苯乙內酰脲在pH 8-10條件下自消旋水解成S-(+)-鄰氯苯甘氨酸。對比傳統拆分方法，本發明中的生產工藝不使用任何手性化合物，直接通過酶催化得到手性產物，不用拆分，因此，該生產工藝收率高，成本低，工藝簡化。而且，由于使用酶催化技術，整個生產工藝過程有機溶劑使用少，產生廢料少，有利于環境保護。
文檔編號C07C227/24GK101560533SQ200910115428
公開日2009年10月21日 申請日期2009年5月21日 優先權日2009年5月21日
發明者包志堅, 張愛青, 林昌軍, 亮 舒 申請人:蘇州立新制藥有限公司