專利名稱：一種吳茱萸內酯對照品的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種吳茱萸內酯對照品的制備方法，屬于藥材中指標 成分的提取分離技術領域。
背景技術：
吳茱萸為常用中藥，具有散寒止痛，降逆止嘔，助陽止瀉之功效，主要用 于厥陰頭痛，寒疝腹痛，寒濕腳氣，經行腹痛，脘腹脹痛，嘔吐吞酸，五更泄 瀉；外治口瘡，高血壓等癥。吳茱萸所含的化學成分種類較多，包括生物堿、 黃酮、萜類、木脂素等成分。其中生物堿、苦味素、萜類為主要有效成分。目 前，《中國藥典》2005版要求的吳茱萸藥材的指標成分為吳茱萸堿、吳茱萸次堿
及吳茱萸內酯。為了找到吳茱萸內酯的最佳的提取分離方法，為對照品的供應 提供保障，本發明對吳茱萸內酯對照品的提取工藝進行了全面考察，確定了最 佳的提取工藝，成功的對吳茱萸內酯進行了分離提純，本發明工藝簡單，適合 工業化生產。

發明內容
本發明目的在于提供一種吳茱萸內酯對照品的制備方法。 本發明是這樣實現的
(1) 吳茱萸藥材粉碎成粗粉，加5 10倍量20 95%的乙醇或甲醇回流提 取2 5次，每次1 4小時，合并各次提取液，回收溶劑，得到流浸膏；
(2) 將上述流浸膏用水分散，依次用石油醚、氯仿萃取；
(3) 將氯仿層用甲醇或乙醇溶解后，硅膠拌樣，硅膠柱層析分離，柱層析 次數為1 10次，經硅膠薄層檢測，收集含吳茱萸內酯的流份，回收溶劑得淡 黃色粉末；
(4) 將上述淡黃色粉末，用流動相溶解后，s印hadexLH-20的凝膠柱層析，經硅膠薄層檢測，將具有吳茱萸內酯為單一點的柱層析流份合并，回收溶劑后， 即得吳茱萸內酯純品，柱層析的洗脫溶劑為氯仿-甲醇，比例為1: 1;
(5)將上述吳茱萸內酯純品置于干燥器24小時以上，高效液相色譜法檢 測，即得到純度》98%的吳茱萸內酯對照品。
上述制備方法所用的原料為蕓香科植物吳茱萸(Evodia rutaecaxpa(Juss. )Benth ) ， 石 虎
(E. rutaecaxpa(Juss. )Benth. var. officinalis(Dode)Huang)禾口疏毛吳茱萸 (E. rutaecarpa(Juss.)Benth. var. Bodinieri (Dode)Huang)干燥的近成熟果 實。
與現有技術相比本發明具有以下優點 本發明通過對吳茱萸藥材的提取工藝進行全面考察，確定了吳茱萸內酯的 最佳提取工藝，成功地對吳茱萸內酯對照品進行了分離和純化。該方法工藝簡 單、適于工業化生產。
具體實施例方式
下面是本發明的實施例，但本發明不僅限于所述實施例。 實施例1:
(1) 吳茱萸藥材粉碎成粗粉，加5倍量95%的乙醇或甲醇回流提取2次， 每次1小時，合并各次提取液，回收溶劑，得到流浸膏；
(2) 將上述流浸膏用水分散，依次用石油醚、氯仿萃取5次，每次用量為 藥液量的1/3倍；
(3) 將氯仿層用甲醇溶解后，硅膠(200-300目)拌樣，硅膠(100-200目) 柱層析分離，柱層析次數為2次，硅膠薄層法檢測，收集含吳茱萸內酯的流份， 回收溶劑得淡黃色粉末；
(4) 將上述淡黃色粉末，用流動相溶解后，s印hadex LH-20的凝膠柱層析， 經硅膠薄層法檢測，將具有吳茱萸內酯為單一點的柱層析流份合并，回收溶劑后，即得吳茱萸內酯純品，柱層析的洗脫溶劑為氯仿-甲醇，比例為1: 1;
(5)將上述吳茱萸內酯純品置于干燥器24小時以上，高效液相色譜法檢 測，即得到純度>98%的吳茱萸內酯對照品。 實施例2:
(1) 吳茱萸藥材粉碎成粗粉，加10倍量75%的乙醇或甲醇回流提取3次， 每次1小時，合并各次提取液，回收溶劑，得到流浸膏；
(2) 將上述流浸膏用水分散，依次用石油醚、氯仿萃取3次，每次用量為 藥液量的1/3倍；
(3) 將氯仿層用甲醇溶解后，硅膠(200-300目)拌樣，硅膠(100-200目) 柱層析分離，柱層析次數為1次，經硅膠薄層法檢測，收集含吳茱萸內酯的流 份，回收溶劑得淡黃色粉末；
(4) 將上述淡黃色粉末，用流動相溶解后，s印hadexLH-20的凝膠柱層析，
經硅膠薄層法檢測，將具有吳茱萸內酯為單一點的柱層析流份合并，回收溶劑 后，即得吳茱萸內酯純品，柱層析的洗脫溶劑為氯仿-甲醇，比例為1: 1;
(5) 將上述吳茱萸內酯純品置于干燥器24小時以上，高效液相色譜法檢 測，即得到純度》98%的吳茱萸內酯對照品。
實施例3:
(1) 吳茱萸藥材粉碎成粗粉，加8倍量50%的乙醇或甲醇回流提取4次， 每次1.5小時，合并各次提取液，回收溶劑，得到流浸膏；
(2) 將上述流浸膏用水分散，依次用石油醚、氯仿萃取6次，每次用量為 藥液量的1/4倍;
(3) 將氯仿層用甲醇溶解后，硅膠(200-300目)拌樣，硅膠(200-300目) 柱層析分離，柱層析次數為l次，經硅膠薄層檢測，收集含吳茱萸內酯的流份， 回收溶劑得淡黃色粉末；
(4) 將上述淡黃色粉末，用流動相溶解后，s印hadexLH-20的凝膠柱層析，經硅膠薄層檢測，將具有吳茱萸內酯為單一點的柱層析流份合并，回收溶劑后， 即得吳茱萸內酯純品，柱層析的洗脫溶劑為氯仿-甲醇，比例為1: 1;
(5)將上述吳茱萸內酯純品置于干燥器24小時以上，高效液相色譜法檢 測，即得到純度》98%的吳茱萸內酯對照品。
權利要求
1、一種吳茱萸內酯對照品的制備方法，其特征在于(1)吳茱萸藥材粉碎成粗粉，加5～10倍量20～95％的乙醇或甲醇回流提取2～5次，每次1～4小時，合并各次提取液，回收溶劑，得到流浸膏；(2)將上述流浸膏用水分散，依次用石油醚、氯仿萃取；(3)將氯仿層用甲醇或乙醇溶解后，硅膠拌樣，硅膠柱層析分離，柱層析次數為1～10次，硅膠薄層層析檢測，收集含吳茱萸內酯的流份，回收溶劑得淡黃色粉末；(4)將上述淡黃色粉末，用流動相溶解后，sephadex LH-20的凝膠柱層析，經硅膠薄層檢測，將具有吳茱萸內酯為單一點的柱層析流份合并，回收溶劑后，即得吳茱萸內酯純品，柱層析的洗脫溶劑為氯仿-甲醇，比例為1∶1；(5)將上述吳茱萸內酯純品置于干燥器24小時以上，高效液相色譜法檢測，即得到純度≥98％的吳茱萸內酯對照品。
2、 按照權利要求1所述吳茱萸內酯對照品的制備方法，其特征在于所 用的吳茱萸藥材為蕓香科植物吳茱萸(Evodia rutaecarpa(Juss.)Benth)，石 虎(E. rutgLecarpa(Juss. )Benth. vax. officinalis (Dode)Hu肌g)禾口疏毛吳茱萸(E. rutaecarpa(Juss. )Benth. var. Bodinieri (Dode)Huang )干燥的近成熟果 實。
3、 按照權利要求1所述吳茱萸內酯對照品的制備方法，其特征在于石油醚、氯仿萃取的次數為1 10次，每次用量相當于藥液量的0 3倍。
4、 如權利要求1所述吳茱萸內酯對照品的制備方法，其特征在于所用的柱層析硅膠為100 400目。
5、 如權利要求1所述吳茱萸內酯對照品的制備方法，其特征在于所用的薄層層析硅膠為硅膠H，所用的展開劑為石油醚丙酮=5: 1，顯色劑為 10%硫酸乙醇溶液。
全文摘要
本發明涉及一種吳茱萸內酯對照品的制備方法，步驟為取吳茱萸藥材粉碎成粗粉，用乙醇回流提取，回收溶劑，得流浸膏，依次用石油醚、氯仿萃取，取氯仿層過硅膠柱，收集含吳茱萸內酯的流份，回收溶劑得淡黃色粉末，凝膠柱層析分離，即得吳茱萸內酯對照品。與現有技術相比，本發明確定了吳茱萸內酯的最佳提取工藝。該制備方法操作簡便、得率高、適于工業化生產。
文檔編號C07D493/00GK101550141SQ200910115318
公開日2009年10月7日 申請日期2009年5月8日 優先權日2009年5月8日
發明者何明珍, 何秀菊, 馮育林, 楊世林, 王躍生, 范玫玫 申請人:江西本草天工科技有限責任公司