專利名稱：木香烴內酯的制備方法
技術領域：
本發明屬于藥物有效成分提取分離制備領域，具體涉及一種從廣玉蘭葉中提 提取分離木香烴內酯的方法。
技術背景木香烴內酯(costunolide)為一類倍半萜烯內酯化合物，分子中含有一ct-亞甲 基卞內酯基團，具有抗菌抗病毒樣作用。文獻(Song XK, Tu PF， et al. A new sesquiterpene lactone from Tsoongiodendron odorum Chun. J" i'朋Ato Pracf 2001:3(4):285-291)報道，木香烴內酯顯示對白血病癌細胞系(HL-60)具有細胞 毒性作用，能抑制白血病癌細胞的生長。文獻(Koo TH， Lee JH， et al. A sesquiterpene lactone, costunolide, from Magnolia grandiflora inhibits NP-kappa B by targeting I kappa B phosphorylation. Met/, 2001 Mar,67(2):103-107)記載，木香烴內酯具有抑制核轉錄因子NF-kB作用，實驗證明，其能抑制NF-kB與DNA結合，并呈劑 量依賴關系，作用強于小白菊內酯，還可抑制由脂多糖(LPS)誘導的iN0S的mRNA 的表達，在濃度為lug/ml時3即可達到完全抑制作用。發明內容本發明的目的在于提供一種從廣玉蘭葉中提取分離木香烴內酯的方法，本發 明方法適合工業化生產，得率高，產物純度可達90%以上。本發明以廣玉蘭葉為原料，以水浸泡提取除去其中的水溶性成分后，再用濃 度較高的能與水混溶的有機溶劑系統提取，經柱層析分離精制后可得到木香烴內酯。實現本發明的具體工藝如下a) 水提取棄雜廣玉蘭葉粗粉，以去離子水浸泡提取兩次，每次12小時，過濾，棄水提取液，殘渣備用；b) :木香烴內酯粗提物的制備經水提取后的廣玉蘭葉，用能與水混溶的有機溶劑提取，減壓濃縮提取液，濃縮液中再加入蒸餾水分散，用石油醚或己烷萃 取至萃取液顏色變淡，再改用氯仿或乙酸乙酯萃取，合并氯仿或乙酸乙酯萃 取液，減壓濃縮得木香烴內酯粗提物； C)木香烴內酯的精制將上述得到的木香烴內酯粗提物，采用硅膠柱進行進一 步的分離，以石油醚-乙酸乙酯20:1-4:1或石油醚-丙酮20:1-4:1為流動相梯度 洗脫，收集含木香烴內酯的流份段，濃縮。d)將第一次收集得到的木香烴內酯再次采用硅膠柱層析分離，以石油醚-乙酸乙 酯5:1等度洗脫，收集木香烴內酯流份，濃縮、干燥即得。其中所用的能與水混溶的有機溶劑系統可以是甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、 丙酮以及這些溶劑的任意組舍，優選乙醇，更優選75%~95%的乙醇。本發明中的提取方法可以是浸泡提取、滲漉提取或回流提取，優選回流提取。本發明在第一次收集木香烴內酯時，當所得木香烴內酯大于或等于90%時， 可以不需第二步硅膠柱層析精制，對木香烴內酯純度小于90%的流份，采用第二 步硅膠柱層析進一步精制。本發明在采用硅膠柱層析分離時，所用的流動相除為石油醚-乙酸乙酯或石油 醚-丙酮外，還可用己垸-丙酮、己烷-乙酸乙酯、氯仿-乙酸乙酯、氯仿-丙酮、氯仿 -甲醇系統，只要在分離過程中，能將木香烴內酯與其它成分分開即可，可認為與 本發明技術方案等同。本發明所得到的木香烴內酯，加入藥學上可接受的輔料，可制成各種所需的 劑型，優選為口服劑型，如片劑、膠囊劑、滴丸等。具體實施例木香烴粗內酯的制備實施例1廣玉蘭葉500g，粉碎成粗粉，8倍量水浸泡提取兩次，每次12小時，過濾， 棄水提液，殘渣用8倍量75%的乙醇回流提取兩次，每次1.5小時，過濾，合并濾 液，減壓濃縮至浸膏狀，再加入小于20%的乙醇分散浸膏，石油醚萃取分散液， 至萃取液顏色變淡，減壓除去殘留石油醚，改用乙酸乙酯萃取至乙酸乙酯萃取液 顏色變淡，合并乙酸乙酯萃取液，減壓濃縮、干燥即得。實施例2廣玉蘭葉500g，粉碎成粗粉，8倍量水浸泡提取兩次，每次12小時，過濾， 棄水提液，殘渣用8倍量95%的乙醇回流提取兩次，每次1.5小時，過濾，合并濾 液，減壓濃縮至浸膏狀，再加入小于20%的乙醇分散浸膏，己烷萃取分散液，至 萃取液顏色變淡，減壓除去殘留己垸，改用氯仿萃取至氯仿萃取液顏色變淡，合 并氯仿萃取液，減壓濃縮、干燥即得。將提取溶劑乙醇改成甲醇、丙醇、異丙醇、丙酮或這些溶劑的任意組合，即 為其它溶劑提取的實施例。 廣木香內酯的分離實施例3將上述所得到的廣木香內酯粗提物拌入60-90目的硅膠中，采用硅膠柱層析分 離精制，層析用硅膠粒度200-300目，浸膏用量與硅膠用量的重量比為1: 50，以 石油醚-乙酸乙酯20:1-4:1梯度洗脫，分段收集廣木香內酯流份，將廣木香內酯純 度大于90%的流份合并；廣木香內酯含量小于90%的流份另外合并，濃縮，繼續 采用硅膠層析柱分離，以石油醚-乙酸乙酯4:1的等度洗脫，分段收集廣木香內酯 流份，將廣木香內酯大于90%的流份并入到第一次收集到的大于90%的流份中， 濃縮，真空干燥，即得廣木香內酯L2g，純度為95.27%。實施例4將實施例1或2中所得到的廣木香內酯粗提物拌入60-90目的硅膠中，采用硅 膠柱層析分離精制，層析用硅膠粒度200-300目，浸膏用量與硅膠用量的重量比為 1: 50，以石油醚-丙酮20:1-4:1梯度洗脫，分段收集廣木香內酯流份，將廣木香內 酯純度大于90%的流份合并；廣木香內酯含量小于90%的流份另外合并，濃縮， 繼續采用硅膠層析柱分離，以石油醚-丙酮5:1的等度洗脫，分段收集廣木香內酯 流份，將廣木香內酯大于90%的流份并入到第一次收集到的大于90%的流份中， 濃縮，真空干燥，即得廣木香內酯1.0g，純度為97.27%。實施例5工藝中試穩定性考察依據實施例1和實施例3的提取分離程序，做三批產品，每批藥材用量為10kg， 其結果見表1表l木香烴內酯提取工藝三批藥材中試穩定性考察第一批 第二批 第三批得率(g) 25.724.2 26.1 純度(％)_96.35_98.27_94.36從上表結果可知，此工藝穩定，重現性好，適合工業化生產。 實施例6廣木香內酯10g，淀粉20g，混勻，裝入硬膠囊中，共狀100粒，沒單位膠囊 中含廣木香內酯100mg。實施例7廣木香內酯10g，微晶纖維素42g，羧甲基淀粉鈉3.2g，交聯羧甲基纖維素鈉
權利要求
1、從廣玉蘭葉中提取分離木香烴內酯的方法，其特征在于包括如下步驟a)水提取棄雜廣玉蘭葉粗粉，以去離子水浸泡提取兩次，每次12小時，過濾，棄水提取液，殘渣備用；b)木香烴內酯粗提物的制備經水提取后的廣玉蘭葉，用能與水混溶的有機溶劑提取，減壓濃縮提取液，濃縮液中再加入蒸餾水分散，用石油醚或己烷萃取至萃取液顏色變淡，再改用氯仿或乙酸乙酯萃取，合并氯仿或乙酸乙酯萃取液，減壓濃縮得木香烴內酯粗提物；c)木香烴內酯的精制將上述得到的木香烴內酯粗提物，采用硅膠柱進行進一步的分離，以石油醚-乙酸乙酯20∶1-4∶1或石油醚-丙酮20∶1-4∶1為流動相梯度洗脫，收集含木香烴內酯的流份段，濃縮。d)將第一次收集得到的木香烴內酯再次采用硅膠柱層析分離，以石油醚-乙酸乙酯4∶1等度洗脫，收集木香烴內酯流份，濃縮、干燥即得。
2、 如權利要求1所述的方法,其特征在于所述的能與水混溶的有機溶劑系指 甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丙酮以及這些溶劑的任意混合。
3、 如權利要求2所述的方法，其特征在于所述的能與水混溶的有機溶劑優選 乙醇。
4、 如權利要求3所述的方法，其特征在于所述的乙醇優選為75%-95%的乙 醇。
5、 如權利要求1所述的方法，其特征在于所得到的木香烴內酯的純度為大于 等于90%而小于100%。
全文摘要
本發明涉及一種木香烴烴內酯的提取分離方法，以廣玉蘭葉為原料，粉碎成粗粉，經水提除去水溶性雜質，殘留物用85％的乙醇回流提取，石油醚萃取除去一些色素雜質后，以氯仿或乙酸乙酯富集廣木香內酯粗提物，經硅膠柱層析分離后可得廣木香內酯。本發明提取工藝簡便易操作，得率高，適合工業化生產。
文檔編號C07D307/93GK101157676SQ200710119450
公開日2008年4月9日 申請日期2007年7月25日 優先權日2007年7月25日
發明者熊國裕 申請人:北京星昊醫藥股份有限公司