專利名稱：新穎的5－羥基－3－羧酸酯吲哚類衍生物及其制備方法
技術領域：
本發明涉及醫藥技術領域，確切地說它是新穎的5-羥基3-羧酸酯吲哚類衍生物及其制備方法。
背景技術：
流行性感冒是由流感病毒引起的急性病毒性吸吸道傳染病，主要影響老年人和免疫系統受損的人。流感病毒屬正黏液病毒科，根據抗原的不同，分為甲、乙、丙三種類型，甲型常以流行的形式出現，能引起世界性的大流行，乙型常引起局部暴發，丙型主要以散發形式出現。在流感的流行中，起主要作用的是甲型病毒，它是目前導致流感流行的主要原因。
由于流感病毒株具有病毒變異性和多重耐藥性，使本來有效的流感疫苗很快失敗；現有的抗流感藥物種類和數量有限，并且通常具有藥物耐受性和毒副作用。為解決這些問題，已進行許多研究，以研制出具有強效抗流感病毒活性以及更低毒性的新型抗流感病毒化學治療藥物。
5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物作為新型抗流感病毒藥物的研究始于二十世紀八十年代初期。Grinev A.H.，et al.Khim-Farm Zh，1987，21(1)，52；Parisheva E.K.et al.Khim Farm Zh，1988，22(5)，565；Mezentseva M.V.et al.Khim Farm Zh，1990，24(10)，52；Otova S.A.，et al Khim Farm Zh，1992，26(1)，52；Zotova S.A.et al. Khim FarmZh，1995，29(1)，51等文獻報道了一些5-羥基3-羧酸酯吲哚類化合物的合成及其藥理活性研究，實驗表明其中一些化合物具有抗流感病毒活性，并且具有誘導干擾素產生，增強人體免疫力的藥理作用。
1993年，由前蘇聯VNIKhFI公司開發的該類結構衍生物-6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽(Arbidol，PCT Int Appl.WO 9008135(RUSS)，1990-6-26)在俄羅斯上市，用于治療和預防甲、乙型流感和急性病毒性呼吸道感染，它還具有干擾素誘導作用和免疫調節作用。
為了研制出新型高效的抗流感病毒藥物，本發明人對5-羥基-3-羧酸酯吲哚類化合物進行了廣泛研究，對多個結構位點進行修飾和改造，合成了一系列新的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物。

發明內容
本發明的目的是提供一種新穎的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物及其制備方法，以及其藥學上可接受的鹽，還涉及以該化合物為活性成分的藥物組合物，作為抗病毒劑，對流感病毒和呼吸道病毒具有顯著的抑制作用，以及它們在用作抗流感病毒劑和在治療和預防急性病毒性呼吸道感染中的應用。本發明還涉及它們的制備方法。它的結構式如式I所示化合物及其藥學上可接受的鹽。 其中，R1為C1～C10烷基，C3-C7環烷基，C2～C10鏈烯基，C2～C10炔基，R2為C1～C4烷基；Z為H，C1～C10烷基，C2～C10鏈烯基，C2～C10炔基，CH2SR5，CH2NR6R7；R5為萘基或被1～3個R8任選取代的苯基；或R5為具有1～4個選自氮、氧、硫的雜原子的4～10個原子的單環或多環飽和環或含5～10個原子的雜芳環，其中所述的飽和的和雜芳環可被1～3個R8任選取代；或R5為C1-C10烷基，C3～C7環烷基，C2-C10烯基，C2-C10炔基，它們可以被1～3個R8任選取代；R6和R7獨立地選自H，氨基胍基，肼基，C1-C10烷基，C3～C7環烷基，C2-C10烯基，C2-C10炔基，它們可以被1～3個R8任選取代；或R6、R7和N一起形成4～10個原子的單環或多環飽和環或5～10個原子的雜芳環，其中所述飽和的和雜芳環任選包括1～4個選自氮、氧和硫的雜原子，除了R6和R7所連接的氮原子外，所述飽和環任選包括1或2個碳碳雙鍵或叁鍵，所述飽和的和雜芳環可被1～3個R8任選取代；R3和R4為如R6和R7所定義；X表示H，鹵素；R8表示C1-C6烷基，C3～C7環烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，羥基，C1-C6烷氧基，C2-C6烯氧基，C2-C6炔氧基，巰基，C1-C6烷硫基，C2-C6烯硫基，苯基，芐基，游離的、成鹽的、酯化的和酰胺化的羧基，鹵素，三氟甲基，烷酰基，硝基，氰基，氨基或被單或二(C1-C6烷基)取代的氨基；條件為當X為溴原子，R1為甲基，R2為乙基，R3和R4均為甲基，Z為CH2SR5時，其中，R5不是對氯苯基，對乙氧基苯基，對乙基苯基，對甲基苯基，鄰硝基苯基，芐基，2-吡啶基，4-羥基-3，5-二叔丁基苯基，環己基，2-噻吩基，苯基，3-噻吩基；當X為溴原子，R1為甲基，R2為乙基，NR3R4為1-嗎啉基，Z為CH2NR6R7時，其中，R6，R7當其中之一為H或甲基時，另一個不是對氯苯基，對甲氧基苯基，對硝基苯基；當X為溴原子，R1為甲基，R2為乙基，R3和R4均為甲基，Z為CH2NR6R7時，其中，R6，R7當其中之一為H或甲基時，另一個不是苯基，對氯苯基，對甲氧基苯基，對硝基苯基，且R6，R7不能同時為芐基；當X為H，R1為甲基，R2為乙基，R3和R4均為甲基，Z為CH2NR6R7時，其中，R6，R7不能同時為H，甲基，乙基；NR6R7不是嗎啉基；當Z為CH2SR5時，其中，R5不是苯基，芐基。
按照本發明，在取代基的定義中優選的R1為甲基，乙基，丙基，異丙基，環丙基，環戊基和環己基；優選的R2為C1-C4烷基；優選的Z為CH2SR5，CH2NR6R7；優選的R5為未取代的苯基或選自羥基，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，鹵素，三氟甲基，硝基，氰基或氨基的基團1～3取代的苯基；優選的R5為被1～3個鹵原子取代的苯基，特別優選的R5為被1～3個氯原子取代的苯基。
優選的R5為吡咯基，呋喃基，噻吩基，吡唑基，咪唑基，噻二唑基，噻唑基，惡唑基，異惡唑基，吡啶基，噠嗪基，嘧啶基，吡嗪基，吲哚基、苯并呋喃基，苯并噻吩基、喹啉基以及嘌呤堿殘基。
優選的R6、R7和N一起為吡咯基，吡唑基，咪唑基，吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，4-甲基哌嗪基，嗎啉基。
優選的R3和R4獨立的選自H，甲基，乙基，丙基，環丙基，丁基，環戊基，環己基，正辛基，氨基胍基。
優選的R3、R4和N一起為吡咯基，吡唑基，咪唑基，2-甲基咪唑基，吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，4-甲基哌嗪基，嗎啉基。
優選的X表示H、溴原子。
按照本發明，特別優選的上式I的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物包括6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-異丙基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(AD-1)6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(AD-2)6-溴-4-(二乙胺基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-異丙基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(AD-5)6-溴-4-(嗎啉-4-基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(ad-11)6-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(2，6-二氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(AD-18)6-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(4-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(ad-19)6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(AD-21)6-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(ad-25)6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(2，6-二氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(ad-32)6-溴-4-(嗎啉-4-基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(吡啶-2-基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(ad-39)6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(ad-40)6-溴-4-(嗎啉-4-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(ad-41)6-溴-4-(吡咯烷-1-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(ad-42)6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(4-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(AD-45)6-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(4-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(ad-46)6-溴-4-(嗎啉-4-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(4-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(AD-47)6-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(3，4-二氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(AD-51)6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(3-甲氧基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(AD-61)6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-異丙基-2-[(4-異丙基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(SY-8)6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(3-甲氧基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(AD-69)6-溴-4-(嗎啉-4-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(2，6-二氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(AD-74)6-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(2-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(AD-91)6-溴-4-(吡咯烷-1-基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(3-甲基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(AD-92)6-溴-4-(吡咯烷-1-基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(3-氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(AD-97)6-溴-4-(氨基胍基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(AD-100)和藥學上可接受的鹽。
而且，按照本發明所屬領域的一些通常方法，本發明的上式I的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物可以與酸生成它的藥學上可接受的鹽。酸可以包括無機酸或有機酸，例如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、磷酸、甲酸、乙酸、丙酸、三氟乙酸、馬來酸、灑石酸、甲磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸等。
本發明的另一個目的在于提供一種用于制備通式II的化合物或其藥物可接受的鹽的制備方法。其特征在于使通式III的化合物與HNR3R4反應得到。
其中，X、Z、R1、R2和R8分別與權利要求1所定義相同，R3和R4其中之一可以為H，另一個取代基為氨基胍基，或者R3、R4和N一起為含5～10個原子的雜芳環，其中所述雜芳環任選包括1～4個選自氮、氧和硫的雜原子，可被1～3個R8任選取代；R和R′獨立地選自H，C1-C10烷基，C3～C7環烷基。
由于按照本發明的上式I的5-羥基3-羧酸酯吲哚類化合物具有潛在的抗流感病毒和抗呼吸道病毒作用，因此，它在臨床上可用作抗流感病毒劑和用于治療和預防急性病毒性呼吸道感染，特別是由下述病毒如甲型、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、鼻病毒和腺病毒等引起的。
根據本發明的化合物可作為活性成分用于治療或預防流感和急性病毒性呼吸道感染，本發明也提供治療或預防上述疾病的方法，包括給予患有或易患有此病的病人治療有效量的根據本發明的化合物。
本發明包括藥物組合物，該組合物含有上式I的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類化合物或其藥學上可接受的鹽作為活性成分。本發明的化合物可以它們本身或作為包含本發明的化合物與藥學上可接受的稀釋劑、輔助劑和/或載體混合的藥用組合物給藥，特別優選不含有可引起不利作用例如過敏反應的物質的組合物。
當本發明的藥物組合物應用于臨床時，可將其配制成若干種劑型，其中含有藥學領域中常用的一些賦形劑；例如，口服制劑(如片劑，膠囊劑，錠劑，溶液或混懸液)；可注射的制劑(如可注射的溶液或混懸液，或者是可注射的干燥粉末，在注射前加入注射用水可立即使用)；局部制劑(例如軟膏或溶液)。
用于本發明藥物組合物的載體是藥學領域中可得到的常見類型，包括口服制劑用的粘合劑、潤滑劑、崩解劑、助溶劑、稀釋劑、穩定劑、懸浮劑、無色素、矯味劑等；可注射制劑用的防腐劑、加溶劑、穩定劑等；局部制劑用的基質、稀釋劑、潤滑劑、防腐劑等。藥物制劑可以經口服或胃腸外方式(例如靜脈內、皮下、腹膜內或局部)給藥，如果某些藥物在胃部條件下是不穩定的，可將其配制成腸衣片劑。
而且，上式I的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類化合物用于患者的臨床劑量可以根據活性成分在體內的治療功效和生物利用度、它們的代謝和排泄速率和患者的年齡、性別、疾病期來進行適當調整，不過成人的每日劑量一般應當為10～500mg，優選為50～300mg。因此，當本發明的藥物組合物被制成單位劑型時，考慮到上述有效劑量，每單位制劑應當含有10～500mg上式I 5-羥基-3-羧酸酯吲哚類化合物，優選為50～300mg。按照醫生或藥師的指導，這些制劑可以以一定間隔分若干次給藥(優選為一至六次)。
下面合成路線A～D描述了本發明的式I化合物的制備，所有的原料都是通過這些示意圖中描述的方法、通過有機化學領域普通技術人員熟知的方法制備的或者可商購。本發明的全部最終化合物都是通過這些示意圖中描述的方法或通過與其類似的方法制備的，這些方法是有機化學領域普通技術人員熟知的。這些示意圖中應用的全部可變因數如下文的定義或如權利要求中的定義。
按照本發明的式I化合物，在路線A中，Z為CH2SR5或CH2NR6R7，取代基R1、R2、R5、R6和R7如上所定義，其中，R3、R4獨立地選自H，肼基，C1-C10烷基，C3～C7環烷基，C2-C10烯基，C2-C10炔基，它們可以被1～3個R8任選取代；或者R3、R4和N一起形成4～10個原子的單環或多環飽和環，其中飽和環任選包括1～4個選自氮、氧和硫的雜原子，除了R3和R4所連接的氮原子外，所述飽和環任選包括1或2個碳碳雙鍵或叁鍵，可被1～3個R8任選取代；將R1取代的胺加入至乙酰乙酸酯中，加熱反應生成化合物3-胺基-2-丁烯酸酯(A-1)，化合物A-1與對苯醌在1，2-二氯乙烷中回流加成得到化合物1-取代-2-甲基-5-羥基吲哚-3-羧酸酯(A-2)，經乙酸酐或乙酰氯酰化，得到1-取代-2-甲基-5-乙酰氧基吲哚-3-羧酸酯(A-3)，在過氧化苯甲酰催化下，A-3與液溴在四氯化碳中，加熱回流，得到6-溴-5-乙酰氧基-1-取代-2-溴甲基-1H-吲哚-3-羧酸酯(A-4)，在堿性條件下，與合適的HSR5或HNR6R7發生取代反應，得到化合物A-5，再與甲醛及R3R4NH發生Mannich反應，生成式I的化合物A-6。
路線A按照本發明的式I化合物，在路線B中，取代基X為氫、氟、氯原子，其它取代基同路線A中化合物取代基所定義。
路線B氯代乙酸乙酯可以作為商品購得，將其與HSR5或HNR6R7(取代的硫酚或胺)在堿性條件下，室溫反應即得到化合物B-1，然后再與取代的胺在1，2-二氯乙烷回流反應12～24h，得到化合物B-2，再與對苯醌在1，2-二氯乙烷中回流反應6～12h，冷卻析出化合物B-3，再經Mannich反應得到式I化合物B-4。
按照本發明的式I化合物，在路線C中，取代基Z為H或C1～C10烷基，C2～C10烯基，C2～C10炔基，X為H或鹵素，其它取代基同路線A中化合物取代基所定義。
路線C甲酰乙酸酯或烴酰乙酸酯與取代的胺反應，再與對苯醌或鄰位鹵素取代的對苯醌發生縮合反應，得到化合物C-2，經Mannich反應，得到式I化合物C-3。
按照本發明的式I化合物，在路線D中，Z如式I化合物所定義，X為H或鹵素，R3和R4其中之一可以為H，另一個取代基為氨基胍基，或者R3、R4和N一起為含5～10個原子的雜芳環，可被1～3個R8任選取代。R和R′獨立地選自H，C1-C10烷基，C3～C7環烷基。
路線D化合物D-1的制備如上述路線A～C，將化合物D-1與式HNR3R4的化合物反應，其中NR3R4如上所定義，反應使用的有機溶劑為C1～C4直鏈或支鏈醇和乙腈等極性有機溶劑，反應溫度為加熱回流，反應時間為4-6h，得到式I化合物D-2。
本發明的優點是提供了一種新型高效的抗流感病毒藥物，適用范圍廣，療效好，并能增加人體免疫力。


圖1為本發明對MDCK細胞和HELA細胞的毒性測定結果。
圖2為本發明在MDCK和HELA細胞培養內對A3和RSV病毒的抑制試驗結果。
具體實施例方式聯系如下實施例，將更好地理解本發明的化合物和它們的制備，這些實施例旨在闡述而不是限制本發明的范圍。
實施例16-溴-4-(二乙基胺基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽步驟A3-甲基胺基-3-丁烯酸乙酯(1)的制備在攪拌微熱下，將甲胺溶液274ml(1.4mol)滴加到50％氫氧化鈉溶液300ml中，將發生的甲胺氣體導入乙酰乙酸乙酯169ml(1.3mol)中，反應放熱，攪拌，水浴冷卻反應液，反應溫度維持在35～40℃，至反應液變渾，得淺綠色渾濁液，停止通氣，室溫攪拌過夜。次日，攪拌抽氣2h，加入乙醚300ml分層，有機層水洗至pH為8，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮有機層，得透明液體180.6g，收率97.1％，所得濃縮液直接用于下步反應。
步驟B1，2-二甲基-5-羥基吲哚-3-羧酸乙酯(2)的制備將對苯醌117.5g(1.05mol)溶于1，2-二氯乙烷1200ml中，在攪拌下，滴加化合物(1)，控制反應溫度40～45℃，反應1h，自然冷卻至室溫，放置過夜，析出固體，抽濾，冷丙酮洗，干燥，丙酮重結晶得化合物(2)165.0g，收率57.8％，mp207～208℃。
步驟C6-溴-2-(溴甲基)-5-羥基-1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(3)的制備將化合物(2)65.0g(0.28mol)加入到四氯化碳400ml中，加入3粒過氧化苯甲酰，滴加溴40.0ml(0.70mol)，滴畢回流4h，反應畢，靜置，冷卻，抽濾，乙酸乙酯重結晶，得化合物(3)94.9g，收率為86.7％，步驟D6-溴-5-羥基-1-甲基-2-[(苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯(4)的制備在甲醇400ml中，加入氫氧化鈉11.5g(0.29mol)和硫酚30.4g(0.24mol)，室溫攪拌2h后，分次加入化合物(3)94.0g(0.24mol)，室溫攪拌6h，稀醋酸中和反應液至中性，析出大量固體，抽濾，水洗，干燥，乙酸乙酯重結晶，得化合物(4)92.7g，收率92.0％，mp195～197℃。
步驟E6-溴-4-(二乙基胺基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-(苯硫甲基)-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽的制備將二乙胺2.6ml(0.029mol)、37％甲醛溶液3.8ml(0.024mol)和化合物(4)10g(0.024mol)依次加入乙醇400ml中，再加入適量冰醋酸調pH至4～5，于40～45℃反應6h，減壓蒸除部分乙醇，將濃縮液倒入水200ml中，加入50％氫氧化鈉溶液調pH至10～12，乙醚提取，有機層用無水硫酸鎂干燥，蒸干，將所得油狀物溶于丙酮30ml中，回流下滴加鹽酸乙醚溶液，至反應液pH為2～3，繼續回流0.5h，自然冷卻，靜置析晶，丙酮-乙醇重結晶得淡黃色固體9.9g，收率為76.1％，mp168～170℃。
1H-NMR(CDCl3)1.35(t，3H)，1.45(t，6H)，3.15(s，4H)，3.60(s，3H)，4.19(q，2H)，4.56(s，2H)，5.28(d，2H)，7.28(s，5H)，7.65(s，1H)，10.08(s，1H)實施例2～37的化合物制備方法同實施例1。
實施例26-溴-4-(二甲基胺基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-異丙基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯磷酸鹽1H-NMR(DMSO)1.25～1.38(m，12H)，2.49(s，6H)，2.95(m，1H)，4.18～4.34(s，m，6H)，4.69(s，2H)，7.26(d，2H)，7.36(d，2H)，7.38(s，1H)，7.89(s，1H)實施例36-溴-4-(二甲基胺基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯磷酸鹽1H-NMR(DMSO)1.23(t，3H)，1.29(t，3H)，2.38(s，6H)，4.11(q，2H)，4.20～4.24(m，4H)，4.60(s，2H)，7.16(m，2H)，7.35(m，2H)，8.01(s，1H)實施例46-溴-4-(二乙基胺基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-異丙基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯1H-NMR(DMSO)1.15(t，6H)，1.22(d，6H)，1.28～1.38(m，6H)，2.67(m，4H)，2.89(m，1H)，4.04(m，4H)，4.20(m，2H)，4.28(s，2H)，4.46(s，2H)7.13(d，2H)，7.27(d，2H)，7.42(s，1H)實施例56-溴-4-(嗎啉-4-基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.23～1.43(m，6H)，3.21(m，4H)，3.89(m，2H)，4.11(m，2H)，4.20(m，2H)，4.33(m，2H)，4.51(s，2H)，5.26(s，2H)，6.94(m，2H)，7.25(m，2H)，7.67(s，1H)，8.40(s，1H)，11.11(s，1H)實施例66-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(2，6-二氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.29(t，3H)，2.77(s，3H)，3.30～3.59(m，8H)，3.83(s，3H)，4.07(m，2H)，4.71(s，2H)，4.89(s，2H)，7.39(m，1H)，7.50(m，2H)，8.04(s，1H)實施例76-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(4-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯二鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.26(t，3H)，2.78(s，3H)，3.43～3.94(m，12H)，4.19(m，2H)，4.70(s，2H)，8.04(s，1H)，12.25(s，2H)
實施例86-溴-4-(二甲基胺基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.34(t，3H)，1.42(t，3H)，2.81(s，6H)，4.13(m，2H)，4.18(m，2H)，4.54(s，2H)，5.16(s，2H)，7.21(d，2H)，7.27(d，2H)，7.64(s，1H)實施例96-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯二鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.22(t，3H)，1.28(t，3H)，2.78(s，3H)，3.29～3.60(m，8H)，4.20(m，2H)，4.29(m，2H)，4.74(s，2H)，4.74(s，2H)，7.42(m，4H)，8.06(s，1H)，12.05(s，2H)實施例106-溴-4-(二甲基胺基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(2，6-二氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.35(t，3H)，2.19(s，6H)，3.74(s，3H)，4.16(m，2H)，4.56(s，2H)，5.08(s，2H)，7.28(m，3H)，7.63(s，1H)，6.77(s，1H)實施例116-溴-4-(嗎啉-4-基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(吡啶-2-基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.30(s，3H)，3.29(m，4H)，3.71(m，2H)，3.84(s，3H)，3.96(m，2H)，4.31(m，2H)，4.94(s，2H)，5.01(s，2H)，7.20(m，1H)，7.36(d，1H)，7.68(m，1H)，8.05(s，1H)，8.52(d，1H)，9.46(s，1H)實施例126-溴-4-(二甲基胺基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.07(m，2H)，1.16(m，2H)，1.32(t，3H)，2.37(s，6H)，2.95(m，1H)，4.13(s，2H)，4.20(m，2H)，4.67(s，2H)，7.24～7.33(m，5H)，7.69(s，1H)實施例136-溴-4-(嗎啉-4-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯1H-NMR(DMSO)1.05(m，2H)，1.15(m，2H)，1.32(t，3H)，2.64(s，4H)，2.95(m，1H)，3.77(s，4H)，4.17～4.25(m，4H)，4.66(s，2H)，7.23～7.26(m，3H)，7.32(m，2H)，7.69(s，1H)實施例146-溴-4-(吡咯烷-1-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.08(m，2H)，1.23(m，2H)，1.35(t，3H)，2.01～2.17(m，4H)，2.91(m，1H)，3.13(m，2H)，3.53(m，2H)，4.20(m，2H)，4.72(s，2H)，5.20(s，2H)，7.25(m，4H)，7.89(s，1H)，10.78(s，1H)實施例156-溴-4-(二甲基胺基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(4-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.07(m，2H)，1.24(m，2H)，1.34(t，3H)，2.79(s，6H)，2.91(m，1H)，4.20(m，2H)，4.67(s，2H)，5.15(s，2H)，6.92(m，2H)，7.23(m，2H)，7.89(s，1H)，10.81(s，1H)實施例166-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(4-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.04(s，2H)，1.23～1.28(m，5H)，2.77(m，3H)，3.09(s，2H)，3.10～3.41(m，9H)，4.18(m，2H)，4.70(s，2H)，7.18(m，2H)，7.39(m，2H)，7.86(s，1H)實施例176-溴-4-(嗎啉-4-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(4-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.08(m，2H)，1.26(m，2H)，1.37(t，3H)，2.93(m，1H)，3.20(m，2H)，3.88(d，2H)，4.19～4.35(m，4H)，4.68(s，2H)，5.25(s，2H)，6.94(m，2H)，7.25(m，2H)，7.93(s，1H)，11.22(s，1H)實施例186-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(3，4-二氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.06(m，2H)，1.26～1.28(m，5H)，2.79(m，3H)，3.17(s，2H)，3.56～3.93(m，9H)，4.22(m，2H)，4.79(s，2H)，7.22(m，1H)，7.41(m，1H)，7.51(m，1H)，7.95(s，1H)，9.87(s，1H)，11.95(s，1H)實施例196-溴-4-(二甲基胺基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(3-甲氧基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(CDCl3)1.25(t，3H)，1.40(t，3H)，2.83(s，6H)，3.73(s，3H)，4.11(m，2H)，4.21(m，2H)，4.56(s，2H)，5.20(s，2H)，6.80～6.89(m，3H)，7.19(m，1H)，7.64(s，1H)，10.67(s，1H)實施例206-溴-4-(二甲基胺基)甲基-5-羥基-1-異丙基-2-[(4-異丙基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯草酸鹽1H-NMR(CDCl3)1.20(d，6H)，1.27(t，3H)，1.64(d，6H)，2.83(m，1H)，2.85(s，6H)，4.15(m，2H)，4.54(s，2H)，4.76(m，1H)，5.04(s，2H)，7.12(d，2H)，7.25(s，2H)，7.85(s，1H)，9.92(s，2H)實施例216-溴-4-(二甲基胺基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(3-甲氧基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽
1H-NMR(DMSO)1.10(m，2H)，1.24(m，2H)，1.35(t，3H)，2.82(s，6H)，2.96(s，1H)，3.69(s，3H)，4.23(m，2H)，4.74(s，2H)，5.19(s，2H)，6.81(m，2H)，6.88(m，1H)，7.17(s，1H)，7.91(s，1H)，10.79(s，1H)實施例226-溴-4-(嗎啉-4-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(2，6-二氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.09(m，2H)，1.30(m，2H)，1.37(t，3H)，3.16(m，5H)，3.86(m，2H)，4.16(m，2H)，4.30(m，2H)，4.73(s，2H)，5.15(s，2H)，7.21～7.31(m，3H)，7.94(s，1H)，8.35(s，1H)，11.25(s，1H)實施例236-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(2-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯二鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.07(m，2H)，1.23～1.28(m，5H)，2.77(m，3H)，3.14(s，2H)，3.56～3.74(m，9H)，4.21(m，2H)，4.76(s，2H)，7.19(m，1H)，7.28(m，1H)，7.42(m，2H)，7.93(s，1H)，9.90(s，1H)，11.97(s，1H)實施例246-溴-4-(吡咯烷-1-基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(3-甲基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(CDCl3)1.33(t，3H)，1.40(t，3H)，2.09(m，2H)，2.16(m，2H)，2.28(s，3H)，3.15(m，2H)，3.53(m，2H)，4.11(m，2H)，4.21(m，2H)，4.54(s，2H)，5.25(s 2H)，7.05～7.17(m，4H)，7.63(s，1H)，10.77(s，1H)實施例256-溴-4-(吡咯烷-1-基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(3-氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(CDCl3)1.34(t，3H)，1.44(t，3H)，2.08～2.18(m，4H)，3.15(m，2H)，3.54(m，2H)，4.14～4.25(m，4H)，4.59(s，2H)，5.23(s，2H)，7.10～7.25(m，3H)，733(s，1H)，10.79(s，1H)實施例266-溴-4-(甲基正丁基胺基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(3-甲基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(CDCl3)0.98(t，3H)，1.35(t，3H)，1.42(m，2H)，2.47(m，2H)，2.27(s，3H)，2.64(s，3H)，3.14(m，2H)，3.59(s，3H)，4.20(m，2H)，4.45～4.62(m，2H)，5.01(m，1H)，5.48(m，1H)，7.05～7.16(m，4H)，7.63(s，1H)，10.48(s，1H)實施例276-溴-4-(甲基正辛基胺基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(3-甲基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(CDCl3)0.88(t，3H)，1.27～1.42(m，15H)，1.69(m，2H)，1.96(m，2H)，2.26(s，3H)，2.63(s，3H)，3.13(m，2H)，3.58(s，3H)，4.19(m，2H)，4.46～4.61(m，2H)，4.98(m，1H)，5.49(m，1H)，7.05～7.16(m，4H)，7.63(s，1H)，8.29(s，1H)，10.49(s，1H)實施例286-溴-4-(二甲基胺基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(3-甲氧基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(CDCl3)1.37(t，3H)，2.84(s，6H)，3.62(s，3H)，3.71(s，3H)，4.24(q，2H)，4.58(s，2H)，5.23(d，2H)，6.81～6.91(m，3H)，7.64(s，1H)，10.72(s，1H)實施例296-溴-4-(二乙基胺基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(4-異丙基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(CDCl3)1.15(t，6H)，1.22(d，6H)，1.32(t，3H)2.67(q，4H)，2.86(m，1H)，3.51(s，3H)，4.19(q，2H)，4.30(s，2H)，4.46(s，2H)，7.12(dd，2H)，7.256(dd，2H)，7.40(s，1H)實施例306-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(CDCl3)1.25(t，3H)，2.87(s，3H)，3.44～3.98(m，11H)，4.30(q，2H)，4.59(s，2H)，5.36(s，2H)，7.27～7.30(m，5H)，7.60(s，1H)實施例316-溴-4-(二甲基胺基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-甲基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.20～1.30(m，6H)，2.27(s，3H)，2.36(s，6H)，4.09～4.22(m，6H)，4.59(s，2H)，7.13(d，2H)，7.23(d，2H)，7.78(s，1H)實施例326-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-異丙基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯二鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.16～1.26(m，12H)，2.76(s，3H)，3.32(s，8H)，4.13～4.25(m，4H)，4.67(s，2H)，4.91(s，2H)，7.21(d，2H)，7.30(d，2H)，8.04(s，1H)，9.72(s，2H)，10.06(s，1H)實施例336-溴-4-(嗎啉-1-基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(3-甲基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(CDCl3)1.21～1.43(m，6H)，2.29(s，3H)，3.23(m，4H)，3.88(m，2H)，4.08～4.36(m，6H)，4.55(s，2H)，5.29(d，2H)，7.09(m，4H)，7.67(s，1H)，11.15(s，1H)實施例346-溴-4-(嗎啉-1-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(4-甲基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(CDCl3)1.07(m，2H)，1.22(m，2H)，1.34(t，3H)，2.33(s，3H)，2.87(m，1H)，3.20(m，4H)，3.87(d，2H)，4.20～4.35(m，4H)，4.68(s，2H)，5.26(d，2H)，7.05(d，2H)，7.17(d，2H)，7.92(s，1H)，8.31(s，1H)，11.21(s，1H)實施例356-溴-4-(嗎啉-1-基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-(吡啶-2-)甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(CDCl3)1.33(t，3H)，1.44(t，3H)，3.28(s，4H)，3.91(d，2H)，4.36(m，6H)，5.34(d，2H)，5.45(d，2H)，7.55(m，1H)，7.68(m，2H)，8.09(m，1H)，8.73(s，1H)實施例366-溴-4-(二甲基胺基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-(哌啶-1-基)甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.05(m，2H)，1.41(m，5H)，1.66～1.91(m，6H)，2.72(s，6H)，3.20(s，2H)，3.47(m，2H)，3.73(m，1H)，4.41(m，2H)，7.87(s，2H)，4.99(s，2H)，1.07(s，8.07)，9.21(s，1H)，9.61(s，1H)，9.93(s，1H)實施例376-溴-4-(二甲基胺基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-(嗎啉-1-基)甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.05(m，2H)，1.39～1.43(m，5H)，2.75(s，6H)，3.42(m，4H)，3.77(s，1H)，3.95(s，4H)，4.41(m，2H)，4.98(m，4H)，8.08(s，1H)，9.16(s，1H)，9.62(s，1H，-oh)，10.85(s，1H)實施例384-(二甲基胺基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-(苯基硫基)甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽步驟A苯硫基乙酰乙酸乙酯的制備將氫氧化鈉4.7g(0.12mol)溶于無水乙醇80ml中，滴加苯硫酚12g(0.11mol)，室溫攪拌1h，滴加氯代乙酰乙酸乙酯16.4g(0.1mol)，室溫反應6h，反應畢，濃縮反應液，乙醚提取，10％碳酸鈉溶液洗，干燥，蒸干，得苯硫基乙酰乙酸乙酯20g，收率67％。
步驟B4-苯硫基-2-甲胺基-2-丁烯酸乙酯的制備將甲胺氣體(約0.14mol)通入苯硫基乙酰乙酸乙酯16.7g(0.07mol)的1，2-二氯乙烷150ml溶液中，50～60℃下反應18h，反應畢，水洗，干燥，蒸干，得到4-苯硫基-2-甲胺基-2-丁烯酸乙酯15g，收率86％。
步驟C5-羥基-1-甲基-2-(苯硫甲基)-1H-吲哚-3-羧酸乙酯的制備將4-苯硫基-2-甲胺基-2-丁烯酸乙酯25g(0.1mol)的100ml 1，2-二氯乙烷溶液滴入對苯醌11.9g(0.11mol)的60ml 1，2-二氯乙烷溶液中，滴加過程中保持溶液微沸，滴畢，回流反應8h，反應畢，冷卻析晶，抽濾，干燥，得到5-羥基-1-甲基-2-(苯基硫基)甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯20.1g，收率59％。
步驟D4-(二甲基胺基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-(苯基硫基)甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯的制備按照實施例1步驟E操作，化合物5-羥基-1-甲基-2-(苯基硫基)甲基-1H-吲哚3-羧酸乙酯與二甲胺、甲醛反應得到4-(二甲基胺基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-(苯硫基)甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯。
1H-NMR(DMSO)1.25(t，3H)，2.76(d，6H)，3.69(s，3H)，4.20(m，2H)，4.73(s，2H)，4.75(s，2H)，7.04(d，1H)，7.29～7.41(m，5H)，7.56(d，1H)，8.69(s，1H)實施例39～45的化合物制備方法同實施例38。
實施例394-(嗎啉-1-基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-(苯基硫基)甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.24(t，3H)，3.25～3.29(m，4H)，3.71(s，3H)，3.75(s，2H)，3.94(s，1H)，3.98(s，1H)，4.20(d，2H)，4.77(s，2H)，4.83(s，2H)，7.04(d，1H)，7.30～7.42(m，5H)，7.57(d，1H)，9.05(s，1H)實施例404-(吡咯烷-1-基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-(苯基硫基)甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.24(t，3H)，1.89(m，2H)，2.03(s，2H)，3.25(m，2H)，3.39(m，4H)，3.69(s，3H)，4.20(m，2H)，4.76(s，2H)，4.83(d，2H)7.04(d，1H)，7.30～7.42(m，5H)，7.54(d，1H)，9.07(s，1H)實施例414-(甲基環丙基胺基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-(苯基硫基)甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯草酸鹽1H-NMR(DMSO)0.72(m，2H)，0.85(m，2H)，1.09(m，2H)，1.24(m，2H)，1.30(t，3H)，2.60(s，3H)，2.74(m，1H)，3.13(m，1H)，4.24(m，2H)，4.83(s，2H)，4.85(s，2H)，6.99(d，1H)，7.32～7.43(m，5H)，7.63(d，1H)實施例424-(甲基異丁基胺基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-(苯基硫基)甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯草酸鹽1H-NMR(DMSO)0.97(s，3H)，0.99(s，3H)，1.04(m，2H)，1.22～1.27(m，5H)，2.13(m，1H)，2.63(s，3H)，3.10(m，3H)，4.20(m，2H)，4.61(m，2H)，4.81(s，2H)，7.02(d，1H)，7.31～7.41(m，5H)，7.67(d，1H)，10.08(s，1H)實施例434-(甲基正丁基胺基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-(苯基硫基)甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯草酸鹽1H-NMR(DMSO)0.89(t，3H)，1.03(m，2H)，1.19(m，2H)，1.25(t，3H)，1.33(m，2H)，1.63(m，2H)，2.50(s，3H)，2.91(m，2H)，3.06(m，1H)，4.20(m，2H)，4.56(s，2H)，4.82(s，2H)，7.00(d，1H)，7.29～7.42(m，5H)，7.60(d，1H)，8.35(s，2H)實施例446-氟-4-(嗎啉-1-基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(3-甲基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.26～1.43(m，6H)，2.32(s，3H)，3.26(m，4H)，3.89(m，2H)，4.10～4.37(m，6H)，4.67(s，2H)，5.29(d，2H)，7.05(m，4H)，8.25(d，1H)實施例456-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-異丙基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.12～1.25(m，12H)，2.74(s，3H)，3.26(s，8H)，4.15～4.24(m，4H)，4.67(s，2H)，4.94(s，2H)，7.30(d，2H)，7.34(d，2H)，8.10(s，1H)實施例466-溴-4-(咪唑-1-基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(4-氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽依照實施例1方法制備得到6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(4-氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯，將該化合物10.2g(0.02mol)加至乙醇80mL中，攪拌使溶解，加入咪唑3.4g(0.05mol)，加熱回流4h，減壓濃縮，得油狀物，與鹽酸乙醚反應后，得固體，重結晶得目標化合物9.7g，收率91％。
1H-NMR(DMSO)1.14(t，3H)，3.72(s，3H)，4.08(q，2)，4.65(s，2H)，5.73(s，2H)，7.28～7.39(m，5H)，7.89(s，1H)，9.05(s，1H)實施例47～55的化合物制備方法同實施例46。
實施例476-溴-4-(氨基胍基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯1H-NMR(CDCl3)1.16(t，3H)，2.72(s，2H)，3.33(s，3H)，4.03(m，2H)，4.34(s，2H)，4.62(s，2H)，6.34(s，2H)，7.12～7.35(m，7H)實施例486-溴-4-(氨基胍基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(3，4-二氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.22(t，3H)，3.54(s，3H)，4.15(q，2)，4.52(s，2H)，4.66(s，2H)，6.89(m，4H)，7.18(s，1H)，7.40(m，1H)，7.51(m，2H)實施例496-溴-4-(2-甲基-咪唑-1-基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(3，4-二氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.06(t，3H)，2.30(s，3H)，3.77(s，3H)，3.98(q，2)，4.66(s，2H)，5.48(s，2H)，6.24(s，1H)，6.51(s，1H)，7.11(s，1H)，7.36(m，2H)，7.89(s，1H)實施例506-溴-4-(氨基胍基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(4-異丙基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.19(t，6H)，1.24(t，3H)，2.85(m，1H)，3.47(s，3H)，4.18(q，2H)，4.61(m，4H)，7.21(d，2H)，7.29(d，2H)，7.49(s，1H)，7.95(s，1H)實施例516-溴-4-(氨基胍基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(4-氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.23(t，3H)，3.54(s，3H)，4.18(q，2H)，4.55(d，2H)，4.67(s，2H)，6.58(s，2H)，6.93(s，1H)，7.39(s，4H)，7.49(s，1H)實施例526-溴-4-(2-甲基咪唑-1-基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.07(t，3H)，2.33(s，3H)，3.70(s，3H)，3.99(q，2H)，4.65(s，2H)，5.52(s，2H)，6.27(s，1H)，6.52(s，1H)，7.29(s，5H)，7.88(s，1H)實施例534-(2-甲基咪唑-1-基)甲基-5-羥基-1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.26(t，3H)，2.59(s，3H)，3.66(s，3H)，4.25(m，2H)，5.73(s，2H)，6.74(s，1H)，6.89(d，2H)，7.37(d，1H)，7.42(s，1H)，9.44(s，1H)實施例544-(2-甲基-5-硝基咪唑-1-基)甲基-5-羥基-1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)1.36(t，3H)，2.76(s，3H)，3.72(s，3H)，4.32(m，2H)，4.75(s，2H)，6.97(d，1H)，7.53(d，1H)，8.2 1(s，1H)，8.64(s，1H)，9.93(s，1H)，13.0(s，1H)實施例554-(咪唑-1-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽1H-NMR(DMSO)0.94(m，2H)，1.23～1.27(m，5H)，2.67(s，3H)，3.23(m，1H)，4.26(t，2H)，5.74(s，2H)，6.93(d，1H)，7.09(d，1H)，7.66(d，1H)，8.20(s，1H)，9.63(s，1H)本發明產物的藥理研究細胞培養法是最常見的體外篩選藥物抗病毒活性的方法之一。病毒在宿主細胞內復制，包括繁殖循環全過程(吸附、侵入、脫殼和病毒粒子的釋放)，因此，阻礙病毒復制的任何環節的抗病毒藥物均可最終表現為能抑制子代病毒粒子的產生，細胞病變法(cytopathic effect，CPE)是一種常用的篩選抗病毒藥物方法，凡是可引細胞病變的病毒均可用此法，以CPE為指標，方法簡便，能夠對多數試驗藥物抑制病毒試驗的效果進行測定，漏篩機會較小，篩選同時可觀察藥物對宿主細胞的毒性。篩選過程大致分為二步第一步，選作化合物對細胞的毒性試驗，第二步再作化合物的抗病毒試驗。
下面，對按照本發明的上式I的5-羥基吲哚-3-羧酸酯類衍生物的抗病毒活性進行了體外評價。在狗腎細胞(MDCK)和人宮頸癌細胞(Hela)細胞培養內，采用細胞病變法，檢測化合物對甲3型流感病毒和RSV病毒的抑制作用，病毒株采用甲3型和呼吸道合胞病毒。
實驗方法1.化合物對MDCK細胞的毒性測定MDCK細胞以40萬/ml濃度接種96孔培養板，37℃、5％CO2培養24h，分別加入供試化合物、Arbidol、金剛烷胺和利巴韋林，分別稀釋4000μg/ml～31.3μg/ml，每濃度接種3孔，每孔100μl。同時設正常細胞對照。置37℃、5％CO2培養5～7天。每24h在倒置顯微鏡下觀察細胞形態變化，記錄細胞形態變化(CPE)以25％以下變化為+，26％～50％變化為++，51％～75％為+++，76％～100％變化為++++。用Reed-Muench法，計算藥物半數中毒濃度(TD50)和最大無毒濃度(TD0)。
2.化合物對Hela細胞的毒性測定Hela細胞以40萬/ml濃度接種96孔培養板，37℃、5％CO2培養24h，分別加入供試化合物、Arbidol、金剛烷胺和利巴韋林，分別稀釋為4000μg/ml～31.3μg/ml，每濃度接種3孔，每孔100μl。同時設正常細胞對照。置37℃、5％CO2培養5～7天。每24小時在倒置顯微鏡下觀察細胞形態變化，記錄細胞形態變化，用Reed-Muench法，計算藥物半數中毒濃度(TD50)和最大無毒濃度(TD0)，試驗重復二次。
3.在MDCK細胞培養內對A3病毒毒力的測定MDCK細胞以每毫升40萬濃度接種96孔培養板，37℃5％CO2培養24h，加入A3病毒，病毒1∶10～1∶40，稀釋4個濃度，每濃度3孔，每孔100μl。設正常細胞對照，33℃5％CO2培養5～7天。每24h在倒置顯微鏡下觀察細胞形態變化，記錄細胞形態變化，用Reed-Muench法，計算病毒半數感染濃度TCID50。
4.在Hela細胞培養內對RSV病毒毒力的測定Hela細胞以每毫升40萬濃度接種96孔培養板，37℃培養24h，加入RSV病毒，10倍稀釋10-1～10-7個濃度，每濃度3孔，每孔100μl。設正常細胞對照。37℃培養5～7天。觀察細胞形態CPE，用Reed-Muench法，計算病毒半數感染濃度TCID50。
5.化合物在MDCK和Hela細胞培養內對A3和RSV病毒的抑制試驗MDCK和Hela細胞以40萬/ml濃度接種96孔培養板，37℃培養24…48h后，棄掉培養液，分別加入1∶30A3病毒液，每孔100μl，33℃吸附1.5h，和100TCID50RSV的病毒液，每孔100μl，37℃吸附1h，棄掉病毒液。分別加入對細胞的最大無毒濃度(TD0)的供試化合物和Arbidol溶液，二倍稀釋8～10個濃度，每濃度3孔，每孔100μl。陽性對照采用金剛烷胺和利巴韋林，濃度為500μg/ml～0.97μg/ml，二倍稀釋，每濃度3孔，每孔100μl。同時設病毒對照和正常細胞對照，分別于33℃和37℃，5％CO2培養5～7天，每24h倒置顯微鏡下觀察病毒CPE，至病毒對照細胞病變(CPE)出現“+++…++++”時結束試驗。試驗重復2次，計算化合物半數有效濃度IC50和最小有效濃度MIC及治療指數TI(TI＝TD0/MIC)。
權利要求
1.新穎的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物及其制備方法，其特征在于式I的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物或其藥學上可接受的鹽。 其中，R1為C1～C10烷基，C3-C7環烷基，C2～C10鏈烯基，C2～C10炔基，R2為C1～C4烷基；Z為H，C1～C10烷基，C2～C10鏈烯基，C2～C10炔基，CH2SR5，CH2NR6R7；R5為萘基或被1～3個R8任選取代的苯基；或R5為具有1～4個選自氮、氧、硫的雜原子的4～10個原子的單環或多環飽和環或5～10個原子的雜芳環，其中所述的飽和的和雜芳環可被1～3個R8任選取代；或R5為C1-C10烷基，C3～C7環烷基，C2-C10烯基，C2-C10炔基，它們可以被1～3個R8任選取代；R6和R7獨立地選自H，氨基胍基，肼基，C1-C10烷基，C3～C7環烷基，C2-C10烯基，C2-C10炔基，它們可以被1～3個R8任選取代；或R6、R7和N一起形成4～10個原子的單環或多環飽和環或含5～10個原子的雜芳環，其中所述飽和的和雜芳環任選包括1～4個選自氮、氧和硫的雜原子，除了R6和R7所連接的氮原子外，所述飽和環任選包括1或2個碳碳雙鍵或叁鍵，所述飽和的和雜芳環可被1～3個R8任選取代；R3和R4為如R6和R7所定義；X表示H，鹵素；R8表示C1-C6烷基，C3～C7環烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，羥基，C1-C6烷氧基，C2-C6烯氧基，C2-C6炔氧基，巰基，C1-C6烷硫基，C2-C6烯硫基，苯基，芐基，游離的、成鹽的、酯化的和酰胺化的羧基，鹵素，三氟甲基，烷酰基，硝基，氰基，氨基或被單或二(C1-C6烷基)取代的氨基；條件為當X為溴原子，R1為甲基，R2為乙基，R3和R4均為甲基，Z為CH2SR5時，其中，R5不是對氯苯基，對乙氧基苯基，對乙基苯基，對甲基苯基，鄰硝基苯基，芐基，2-吡啶基，4-羥基-3，5-二叔丁基苯基，環己基，2-噻吩基，苯基，3-噻吩基；當X為溴原子，R1為甲基，R2為乙基，NR3R4為1-嗎啉基，Z為CH2NR6R7時，其中，R6，R7當其中之一為H或甲基時，另一個不是對氯苯基，對甲氧基苯基，對硝基苯基；當X為溴原子，R1為甲基，R2為乙基，R3和R4均為甲基，Z為CH2NR6R7時，其中，R6，R7當其中之一為H或甲基時，另一個不是苯基，對氯苯基，對甲氧基苯基，對硝基苯基，且R6，R7不能同時為芐基；當X為H，R1為甲基，R2為乙基，R3和R4均為甲基，Z為CH2NR6R7時，其中，R6，R7不能同時為H，甲基，乙基；NR6R7不是嗎啉基；當Z為CH2SR5時，其中，R5不是苯基，芐基。
2.根據權利要求1所述的新穎的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物，其特征在于所述化合物中R1為甲基，乙基，丙基，異丙基，環丙基，環戊基和環己基，R2為C1-C4烷基。
3.根據權利要求1所述的新穎的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物，其特征在于所述化合物中Z為CH2SR5或CH2NR6R7。
4.根據權利要求3所述的新穎的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物，其特征在于其中R5為未取代的或選自羥基，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，鹵素，三氟甲基，硝基，氰基或氨基的基團1～3個取代的苯基；
5.根據權利要求4所述的新穎的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物，其特征在于；其中R5為被1～3個鹵原子取代的苯基；
6.根據權利要求5所述的新穎的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物，其特征在于其中R5為被1～3個氯原子取代的苯基。
7.根據權利要求3所述的新穎的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物，其特征在于其中R5為吡咯基，呋喃基，噻吩基，吡唑基，咪唑基，噻二唑基，噻唑基，惡唑基，異惡唑基，吡啶基，噠嗪基，嘧啶基，吡嗪基，吲哚基、苯并呋喃基，苯并噻吩基、喹啉基以及嘌呤堿殘基。
8.根據權利要求3所述的新穎的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物，其特征在于其中R6、R7和N一起為吡咯基，吡唑基，咪唑基，吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，4-甲基哌嗪基，嗎啉基。
9.根據權利要求1所述的新穎的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物，其特征在于其中R3和R4獨立地選自H，甲基，乙基，丙基，環丙基，丁基，環戊基，環己基，正辛基，氨基胍基。
10.根據權利要求1所述的新穎的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物，其特征在于其中R3、R4和N一起為吡咯基，吡唑基，咪唑基，2-甲基咪唑基，吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，4-甲基哌嗪基，嗎啉基。
11.根據權利要求1所述的新穎的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物，其特征在于其中X為H，溴原子。
12.根據權利要求1所述的新穎的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物，其特征在于下列式I衍生物或其藥學上可接受的鹽上式I的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物包括6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-異丙基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(二乙胺基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-異丙基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(嗎啉-4-基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(2，6-二氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(4-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(4-氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(2，6-二氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(嗎啉-4-基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(吡啶-2-基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(嗎啉-4-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(吡咯烷-1-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(4-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(4-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(嗎啉-4-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(4-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(3，4-二氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(3-甲氧基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-異丙基-2-[(4-異丙基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(二甲胺基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(3-甲氧基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(嗎啉-4-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(2，6-二氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基-5-羥基-1-環丙基-2-[(2-氟苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(吡咯烷-1-基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(3-甲基苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(吡咯烷-1-基)甲基-5-羥基-1-乙基-2-[(3-氯苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯6-溴-4-(氨基胍基)甲基-5-羥基-1-甲基-2-[(苯基)硫基]甲基-1H-吲哚-3-羧酸乙酯和藥學上可接受的鹽。
13.根據權利要求1所述的新穎的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物，其特征在于一種藥用組合物，包含權利要求1～12中任何一項的化合物以及其藥學上可接受的鹽作為活性成分。
14.根據權利要求1所述的新穎的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物，其特征在于抗病毒劑，包含權利要求1～12中任何一項的化合物以及其藥學上可接受的鹽作為活性成分。
15.根據權利要求14所述的新穎的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物，其特征在于抗病毒劑中所述的病毒代表流感病毒和呼吸道病毒。
16.根據權利要求15所述的新穎的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物，其特征在于其中所述的病毒代表甲型、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、鼻病毒和腺病毒等。
17.根據權利要求1所述的新穎的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物，其特征在于1～12中任何一項的化合物，作為活性成分，在用于治療或預防流感和急性病毒性呼吸道感染的藥物中的應用。
18.一種如權利要求1所述的新穎的5-羥基-3-羧酸酯吲哚類衍生物的制備方法，其特征在于使通式III的化合物與HNR3R4反應得到通式II， 其中，X，Z，R1和R2分別與權利要求1所定義相同，R3和R4其中之一可以為H，另一個取代基為氨基胍基，或者R3、R4和N一起為含5～10個原子的雜芳環，可被1～3個R8任選取代。R和R′獨立地選自H，C1-C10烷基，C3～C7環烷基。
全文摘要
本發明是一種新穎的5－羥基－3－羧酸酯吲哚類衍生物及其制備方法。它提供了一種新型高效的抗流感病毒藥物。它的結構式如式I所示。它還涉及它的藥學上可接受的鹽和以該化合物為活性成分的藥物組合物，作為抗病毒劑，對流感病毒和呼吸道病毒具有顯著的抑制作用，以及它在制備抗流感病毒劑和預防急性病毒性呼吸道感染中的藥物上的應用。
文檔編號C07D209/42GK1482118SQ0311080
公開日2004年3月17日 申請日期2003年1月4日 優先權日2003年1月4日
發明者宮平, 平 宮 申請人:沈陽藥科大學