一種鎮痛止血藥物及其制備方法和應用
【技術領域】
[0001] 本發明屬于中藥深加工領域，具體涉及一種以民族藥飛龍掌血深加工所得到的一 種鎮痛止血藥物及其制備方法和應用。
【背景技術】
[0002] 止血是一個復雜的生理過程，主要受血液凝固、血小板聚集和血管收縮等重要因 素影響。當血管損傷發生出血，組織自身的凝血機制充分表現出來，凝血酶原激活物活性增 強，形成增多，繼而凝血酶原轉變為凝血酶，凝血酶再催化纖維蛋白原轉變為纖維蛋白，同 時也使機體產生對抗纖維蛋白溶解過程的因素。凡是能夠促使出血停止的藥物均稱為止血 藥，止血藥主要是通過增強體內凝血因素或抑制凝因素，促使凝血，從而達到止血的目的。 臨床上使用的天然止血藥物主要通過縮短凝血時間、促進局部血管收縮、增強毛細血管抵 抗力并降低通透性、抑制纖溶過程、增加血小板數目、縮短凝血酶生成時間、增強血小板第 三因子活性等作用達到止血的功效。目前常用的多數止血藥物功效單一，不能完全滿足臨 床需要，一些天然止血藥物既有止血作用，又能夠促進血液溶解、抑制血小板聚集，在臨床 上表現出止血活血、行血祛瘀的奇特功效。
[0003] 飛龍掌血為蕓香科飛龍掌血屬植物飛龍掌血Tbi/Wia asiaiica ( L. ) Lam.的 干燥根或根皮，是一種重要的民族藥物，在我國南方眾多少數民族地區有廣泛應用，被《中 華本草.苗藥卷》、《中華本草.傣藥卷》等民族醫藥典籍收載，苗族民間用其水煎劑及藥酒 治療跌打損傷、風濕性關節炎、毒蛇咬傷和外傷出血等多種病癥 [1]。
[0004] 雖然飛龍掌血具有良好的鎮痛止血效果[2]，但要發揮鎮痛止血作用日服量用要達 到20-30g左右，由于飛龍掌血中含有較多生物堿毒性成分，如所含白屈菜紅堿為神經肌肉 毒素，對心臟有強烈抑制作用，攝入過量可導致麻痹和死亡 [3]，因此，用飛龍掌血鎮痛止血 一方面要服用較高劑量才能達到很好的治療效果，另一方面，服藥量大又會攝入較多毒素， 為解決這一矛盾，很有必要通過對飛龍掌血進行提取、分離和純化，將飛龍掌血中具有止血 活性的香豆素類有效成分提取出來，將其中毒性生物堿成分分離出去，開發一種用藥量少， 鎮痛止血有效成分含量高，毒性作用低的藥物。
[0005] [1]國家中醫藥管理局中華本草編委會.中華本草，苗藥卷.貴陽，貴州科技 出版社，2005.
[2] 郝小燕，彭琳，葉蘭，等.飛龍掌血生物總堿抗炎鎮痛作用的研究.中西醫結 合學報，2004，2(6): 450-452.
[3] 賈敏如，李星煒.中國民族藥志要.北京，中國醫藥科技出版社，2005。

【發明內容】

[0006] 本發明的目的，在于針對飛龍掌血鎮痛止血有效成分含量低，毒性成分含量較高， 大量內服易引起中毒的問題，開發一種鎮痛止血有效成分含量高，用藥量少，毒副作用低的 藥物，通過對飛龍掌血的提取、分離和純化等方法，將飛龍掌血中具有鎮痛止血作用的有效 成分提取、富集，將毒性成分分離出去，并將制得的藥物應用于制備鎮痛止血的藥劑或藥 物。
[0007] 本發明一種鎮痛止血藥物，是以飛龍掌血（TbWaJia asiaiica ( L. ) Lam.)的根 或根皮為原料，分別經水和乙醇溶液提取，再經提純和分離而制得的一種黃棕色固體顆粒， 其主要成分香豆素類化學物質含量不低于25%，生物堿類物質低于5%，其余主要為淀粉、糖 類、鞣制、萜類和留醇類等物質，該藥物具有良好的鎮痛止血效果，鎮痛效果堪比阿司匹林， 止血效果與云南白藥相近。
[0008] 上述所指的香豆素類化合物是指茴芹香豆素、異茴芹香豆素、8-羥基-6-甲氧基 香豆素和珊瑚菜內酯等。
[0009] 上述所指的生物堿指白屈菜紅堿。
[0010] 本發明所述的一種鎮痛止血藥物的制備方法，是按下列步驟制備： (1) 將飛龍掌血（71〇〇^3^7<3<36^<3以1?(3(1^)]^1111.)的根或根皮洗凈、瞭干、粉碎過80 目篩； (2) 分別加入水、乙醇溶液：10% (v/v)、20% (v/v)、30% (v/v)、40% (v/v)、50% (v/v)、 60% (v/v)、70% (v/v)、80% (v/v)和95% (v/v)回流提取3次，每次I小時，料液比第一次 為1 :12,第二和三次為1 :10 ; (3) 將全部提取液合并，過濾，取濾液減壓蒸餾蒸去溶劑，得提取浸膏，向浸膏中加入 1-2倍重的40-60°C熱水，攪拌懸浮，得懸浮液； (4) 依次用0. 5-2倍體積的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取1-3次； (5) 分別減壓蒸餾蒸去溶劑，得石油醚萃取浸膏、氯仿萃取浸膏、乙酸乙酯萃取浸膏和 正丁醇萃取浸膏； (6) 合并氯仿和乙酸乙酯層浸膏，轉移至AB-8型大孔吸附樹脂柱上； (7) 分別以水、10% (v/v)、20% (v/v)、30% (v/v)、40% (v/v)、50% (v/v)、60% (v/v)、 70% (v/v)、80% (v/v)和95% (v/v)乙醇梯度洗脫，每個梯度洗脫5-8個柱體積，取50%-70% 乙醇洗脫液； (8) 將50%-70%乙醇洗脫液合并，采用噴霧干燥技術干燥后得到產品。
[0011] 上述步驟（2)所述的提取方式除了回流提取外還包括煎煮提取、索式提取、滲轆提 取或超臨界流體萃取等。
[0012] 上述步驟（8 )所述干燥方法還包括常溫減壓干燥、冷凍干燥和真空微波干燥等。
[0013] 本發明一種鎮痛止血藥物的應用，是用于制備鎮痛止血的藥物或制劑。
[0014] 上述所指的藥劑包括外用散劑、巴布劑、口服顆粒劑、膠囊劑和片劑等。
[0015] 本發明鎮痛止血藥物可與三七提取物或者市售三七總皂苷等具有活血化淤作用 的植物藥提取物制成復方鎮痛止血藥物。
[0016] 本發明鎮痛止血藥物采用HPLC法進行分析檢測，建立了其HPLC指紋圖譜，同時測 定了藥物中茴芹香豆素、異茴芹香豆素、珊瑚菜內酯、毛兩面針素、8-羥基-6-甲氧基-香豆 素等香豆素類活性成分的含量，結果表明藥物中香豆素類成分不低于25%，白屈菜紅堿等生 物堿物質低于5%，其中白屈菜紅堿含量低于0. 5%，大幅降低了毒性物質攝入量。
[0017] 本發明鎮痛止血藥物采用斷尾法測定小鼠出血時間，以小鼠給藥前后出血時間的 縮短為指標，來判斷藥物止血的效果。按體重分別口服灌胃給藥，每日灌胃一次，連續7天， 于第7天給藥30分鐘后采用毛細玻管法測定小鼠凝血時間CT，次日采用剪尾法測定出血時 間BT，以小鼠給藥前后凝血時間的縮短為指標，來判斷止血藥的效果，結果表明本發明產品 能顯著縮短小鼠的出血時間和凝血時間，顯示了良好的止血活性，表明其可能對內源性凝 血途徑有促進作用。由給藥劑量折算日均人用劑量約為5g生藥，大大降低了服用生藥量。
[0018] 本發明鎮痛止血藥物中加入淀粉、糊精、羧甲基淀粉鈉、羧甲基纖維素鈉、交聯聚 維酮、微晶纖維素、乳糖、滑石粉、硬脂酸鎂等常規輔料，按照常規工藝，制成臨床可接受的 劑型，如外用散劑、巴布劑，口服顆粒劑、膠囊劑、丸劑和片劑等。 本發明鎮痛止血藥物還可以與三七提取物或市售三七總皂苷等具有活血化淤作用的 植物藥提取物按1-100%的比例混合，照常規制劑方法將混合而成的原料藥制成外用散劑、 巴布劑、口服顆粒劑、膠囊劑、丸劑和片劑等。
【附圖說明】
[0019] 圖1是本發明鎮痛止血藥物的HPLC色譜圖， 其中3號峰為綠原酸，7號峰為兩面針堿，11號峰為毛兩面針素，12號峰為8-羥 基-6-甲氧基香豆素，13號峰為白屈菜紅堿，14號峰為茵芋堿，15號峰為異茴芹香豆素，16 號峰為茴芹香豆素，20號峰為珊瑚菜內酯，香豆素類成分約占提取物的35. 2%，白屈菜紅堿 等生物堿類物質降低到2. 0%以下。
【具體實施方式】
[0020] 實施例一(鎮痛止血藥物的制備）： (1) 取飛龍掌血（Toddalia asiatica ( L.) Lam.)的根或根皮6.0公斤，洗凈、瞭干、 粉碎過80目篩； (2) 分別加入水、乙醇溶液：10% (v/v)、20% (v/v)、30% (v/v)、40% (v/v)、50% (v/v)、 60% (v/v)、70% (v/v)、80% (v/v)和95% (v/v)回流提取3次，每次I小時，料液比第一次 為1 :12,第二和三次為1 :10 ; (3) 將全部提取液合并，過濾，取濾液減壓蒸餾蒸去溶劑，得乙醇浸膏1. 2公斤，向浸膏 中加入2. 5公斤60°C熱水，攪拌懸浮，得懸浮液； (4) 依次用2倍體積的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取3次； (5) 分別減