專利名稱：用于減少膽固醇以及脂質含量的物質的制作方法
技術領域：
本發明涉及減少哺乳動物、特別是人類血清膽固醇及脂質含量的物質。
已知脂質和膽固醇影響人類健康，例如體重超重問題和心血管疾病。已經作了許多嘗試減少食物中所含脂質和膽固醇的不利作用。一種可供選擇的方法是特殊的低脂肪或不含脂肪的膳食。另一種解決辦法是給予特殊藥物或使用特殊的食品添加劑。
美國專利4223023公開了將標準殼聚糖用作食品添加劑以及可口服給藥降低脂質吸收的制劑。
WO98/34625描述了凝膠樣分散劑和/或散劑形式的微晶殼聚糖降低脂質和膽固醇的作用，其中所述微晶殼聚糖的特征為對于降低膽固醇其平均分子量高于1,000道爾頓、優選10,000-300,000道爾頓，對于降低脂質其分子量高于10,000道爾頓、優選50,000-700,000道爾頓，而且其脫乙酰程度高于60％。此公開內容描述了微晶殼聚糖降低膽固醇和脂質含量的一般活性。
所有廣為人知的基于殼聚糖的減肥和降低膽固醇藥物其活性以及作用的有效性是非選擇性的。
本發明的目的是應用微晶殼聚糖有效地、特異地以及選擇性地降低膽固醇及脂質含量。為達到此目的，適合口服給藥形式的所述物質的主要特征為具有兩個部分的平均分子量不同的微晶殼聚糖。這兩部分微晶殼聚糖同時存在于通過混合這兩種成分制備的同一制品中，每個微晶殼聚糖部分具有各自特征性的分子量分布和平均值。較低平均分子量的微晶殼聚糖部分具有降低膽固醇水平、特別是有害LDL膽固醇的作用，而加入同一制劑中的具有較高平均分子量的部分具有降低脂質的作用。這兩種微晶殼聚糖也有可能在其它性質上還有差異。按照一個優選實施方案，所述制品微晶殼聚糖與協同活性物質組合以增強對膽固醇和脂質的降低作用。
至少兩個部分的所述微晶殼聚糖為散劑和/或凝膠樣分散劑形式，并且將其與協同活性物質例如有機酸如抗壞血酸和/或碳酸鹽如碳酸鈉、碳酸鈣和/或碳酸鎂組合以提高該物質在機體中的有效性并增加膽固醇和脂質的降低。
按照本發明的一個優選實施方案，微晶殼聚糖與協同活性物質以1∶0.001-0.001∶1重量比、優選1∶0.01-0.01∶1組合。
按照本發明的一個優選實施方案，所述混合的選定聚合物部分的多分散性低于4.0。用于降低膽固醇含量的第一個部分的平均分子量低于140kD、優選20-140kD。用于降低脂質含量的第二個部分的平均分子量高于140kD，優選160-400kD，最優選200-400kD，因此它具有減肥作用。所述兩個部分的微晶殼聚糖的重量比為1∶99999-99999∶1，優選1∶4999-4999∶1。最實用實施方案的重量比為1∶19-19∶1，優選1∶9-9∶1。
將所述微晶殼聚糖與添加劑組合，該添加劑的特征為與這類能夠與膽固醇和脂質形成復合物的天然聚合物質具有高度協同作用。所述協同添加劑在微晶殼聚糖存在下可改善特別形式的殼聚糖活性、保護所述哺乳動物機體系統以及對去除脂溶性維生素A和維生素E起保護作用，所述添加劑包括有機酸如抗壞血酸和/或適當的碳酸鹽如碳酸鈉、碳酸鈣和/或碳酸鎂組成。微晶殼聚糖具有高度豐富(highlydeveloped)的固有表面、大量正電荷以及較強的生成氫鍵和離子鍵的性能，并能與所述協同活性物質形成復合物。所述碳酸鹽有助于所給予的制劑在胃腸道發揮有益的作用，并通過接觸胃酸性環境時釋放的二氧化碳使微晶殼聚糖充分地分散在胃中。此外，通過適當選擇不同碳酸鹽之間的平衡可調節所述制劑的pH。
按照本發明，微晶殼聚糖降低膽固醇和/或脂質的作用速率的選擇與其成分含量以及低于4.0的多分散度有關。用酶使以粘度平均分子量在140kD以下、優選20-140kD限定的第一部分微晶殼聚糖較快降解產生適量的低聚氨基糖(oligoaminosaccharide)，該低聚氨基糖具有假定結構而且能夠以高結合率與膽固醇、特別是其低密度部分LDL(低密度脂蛋白)結合。用粘度平均分子量140kD以上、優選160-400kD、最優選200-400kD限定的第二部分微晶殼聚糖，使脂質含量降低。所用上述各部分的適當比例的微晶殼聚糖使得一方面具有選擇性、特異性地降低膽固醇的作用，另一方面又具有降低脂質作用。
按照本發明所述包含微晶殼聚糖的物質在患者用其治療四周后，使總膽固醇含量與初始水平相比降低6％以上，LDL膽固醇含量降低15％以上。
含微晶殼聚糖物質的優勢與其從散劑到凝膠樣分散劑的多種可能形式有關。使用本發明所述物質時不必特殊膳食。
所述物質的基本組分可和藥學上可接受的載體一起包含于可口服給藥單位中。因此所述物質可為膠囊劑、片劑或丸劑形式。
采用以下方法確定微晶殼聚糖的性質- 按照“Chitin’，Pergamon Press，Oxford，1977中所述方法測定粘度平均分子量。- 按照“Cellulose Chemistry and Technology”，第11卷，第633頁，1977中所述方法測定脫乙酰程度。- 按照凝膠滲透色譜法測定多分散性及各部分含量。
按照所述標準方法測定總膽固醇、LDL及HDL膽固醇甘油三酯以及維生素A和維生素E含量。
在以下實施例中對本發明作進一步解釋，這些實施例不限制權利要求的范圍。實施例1使用硬明膠膠囊劑降低膽固醇和脂質含量，所述膠囊劑包含400mg微晶殼聚糖粉(其特征為測定粘度平均分子量為137kD、脫乙酰程度為76％以及多分散度為3.84)和70mg協同活性物質(包括3.8mg抗壞血酸、18.8mg碳酸鈉、25.8mg碳酸鈣以及21.6mg碳酸鎂)。51名身體質量指數(body mass index)為28.0-34.99的健康女性接受按照Declaration of Helsinki and Tokyo和當地倫理委員會審核的實驗方案進行的體內測試。還按照Good Clinical Practice規則進行所述試驗。要求患者保持包括飲食習慣在內的每日生活常規。使用作為安慰劑的包含淀粉的相同膠囊作比較。所述方法日劑量為2.4g微晶殼聚糖(每次3粒膠囊，每天2次)。對安慰劑應用同樣體系。所述患者的特征見表1。
表1.治療前患者特征(數據為均數±SD)患者治療組殼聚糖/范圍安慰劑/范圍合計例數 24 27 51年齡(歲) 41.1±7.8/24-5741.3±7.1/19-5541.3±7.3身高(cm) 165.1 165.2 165.1體重(kg) 83.33±9.2/71-105 84.63±7.8/71-101 84±8.4身體質量指數 30.39±2.1/28-35 30.81±2.2/28-35 30.61±2fs-chol.tot.(mmol/l) 5.55±0.9 5.48±0.8 5.51±0.9fs-HDL(mmol/l)1.33±0.3 1.34±0.4 1.37±0.4fs-Trigl.(mmol/l) 1.24±0.6 1.40±0.6 1.33±0.6fs-LDL(mmol/l)3.65±0.9 3.45±0.7 3.55±0.8四周后的治療參數見表2。表2.四周后的治療參數參數 殼聚糖 安慰劑患者例數 24 27fs-chol.tot.(mmol/l) 5.23＋0.85.41＋0.8差別 -0.32-0.07fs-HDL(mmol/l) 1.48＋0.41.54＋0.5差別 +0.15+0.14fs-LDL(mmol/l) 3.18±0.83.27±0.7差別 -0.47-0.18fs-Trigl.(mmol/l)1.26＋0.61.34＋0.8差別 +0.2-0.06四周長時間的檢測結果，用微晶殼聚糖治療的患者血清平均總膽固醇降低0.32mmol/l，而以所述安慰劑治療組只降低0.07mmol/l。微晶殼聚糖治療組低密度膽固醇(LDL)降低0.48mmol/l，而所述安慰劑組只降低0.18mmol/l。
將0.1重量份微晶殼聚糖粉與99.9重量份微晶殼聚糖部分混合，所述微晶殼聚糖粉的特征為測定粘度平均分子量為300kD、脫乙酰程度為84.7％以及多分散度為3.42，所述微晶殼聚糖部分的特征為測定粘度平均分子量為123kD、脫乙酰程度為84.8％以及多分散度為3.67。所述混合的微晶殼聚糖粉的特征為測定粘度平均分子量為122kD、脫乙酰程度為84.8％以及多分散度為3.65。以膠囊劑形式應用400mg上述混合物及另外70mg實施例1中所述活性協同物質降低膽固醇和脂質含量。所用方法同實施例1。患者特征及8周后的治療結果見表3.表3.患者特征及8周后的治療參數參數殼聚糖 安慰劑治療前治療后 治療前治療后患者例數 1111 1414年齡，歲 38±8 -44±5 -身高，cm 165±7-165±6-身體質量指數 32±2 32±233±2 33±2fs-chol.tot.(mmol/l) 5.75±1.0 5.37±0.95.41±0.6 5.19±0.8差別 - -0.38- -0.22fs-HDL(mmol/l) 1.43±0.291.45±0.32 1.27±0.431.36±0.51差別 - +0.02- +0.09fs-LDL(mmol/l) 3.79±0.943.49±0.64 3.31±0.823.23±0.79差別 - -0.30- -0.08fs-Trigl.(mmol/l)1.20±0.451.40±0.39 1.33±0.491.33±0.43差別 - +0.2 - 08周長時間的檢測結果，用微晶殼聚糖治療的患者血清總膽固醇降低0.38mmol/l，而安慰劑組只降低0.22mmol/l。第一組低密度膽固醇LDL降低0.30mmol/l，而第二組只降低0.08mmol/l。同時試驗前及試驗8周后分析脂溶性維生素A和維生素E。該檢測結果見表4。
表4.脂溶性維生素A和維生素E維生素類型殼聚糖治療安慰劑治療維生素A(μM/l)治療前2.44±0.4 2.31±0.3治療后2.41±0.3 2.29±0.3維生素E(μM/l)治療前24.80±5.424.00±3.8治療后24.60±5.424.91±4.1
脂溶性維生素檢測結果證實，對于其含量而言，所用微晶殼聚糖是完全安全的。
按照S.Demarger Andre和A.Domard在Carbohydrate Polymers22(1993)117-126中描述的改進方法使用幾種微晶殼聚糖(MCCh)粉樣品(干重0.15g并具有相似的脫乙酰程度DD＝80-85％，以測定粘度平均分子量Mw＝20-180kD為特征)、與實施例1中所述組合物配制的MCCh制劑(測定粘度平均分子量為130kD，MCCh干重為0.15g)以及含標準殼聚糖(DD＝74％及Mw＝125kD)的市售“脂肪阻斷劑”檢測脂肪結合效率。
脂肪結合效率以結合脂肪總量相對于初始脂肪酸的百分率計算，見下表5。
表5.不同殼聚糖形式的脂肪結合效率殼聚糖類型Mw脂肪酸結合效率kD ％MCCh 20 44.4MCCh 16554.2MCCh 14557.0MCCh 18052.6MCCh制劑 13031.8含標準殼聚糖的市售12517.6“脂肪阻斷劑”所示檢測結果表明，總脂肪結合效率揭示所述MCCh作用與其平均分子量相關。與所述含標準殼聚糖的市售“脂肪阻斷劑”相比，MCCh與實施例1組合物配制的制劑的總脂肪結合效率提高81％以上。
提高所述平均分子量使更多的脂質(75-87％)被吸收，且最佳Mw范圍為200kD-400kD。
權利要求
1.用于降低膽固醇及脂質含量的物質，該物質基于固體劑或凝膠樣分散劑形式的微晶殼聚糖，其特征在于以散劑和/或凝膠樣分散劑形式使用的所述微晶殼聚糖包含至少兩個平均分子量不同的部分的混合物。
2.權利要求1要求保護的物質，其特征在于所述混合的選定聚合物部分的多分散度低于4.0。
3.權利要求1或2要求保護的物質，其特征在于第一部分的平均分子量低于140kD、優選20-140kD以使膽固醇含量降低，而所述第二部分的平均分子量高于140kD、優選160-400kD、最優選200-400kD以降低與減肥作用有關的脂質含量。
4.權利要求1-3任一項要求保護的物質，其特征在于散劑和/或凝膠樣分散劑形式的所述微晶殼聚糖與協同活性物質組合以增強所述膽固醇和脂質的降低，所述協同活性物質為例如有機酸如抗壞血酸和/或碳酸鹽如碳酸鈉、碳酸鈣和/或碳酸鎂。
5.權利要求4要求保護的物質，其特征在于所述微晶殼聚糖與碳酸鈉、碳酸鈣以及碳酸鎂組合。
6.權利要求1-5任一項要求保護的物質，其特征在于所述兩個部分的微晶殼聚糖的重量比為1∶99999-99999∶1。
7.權利要求6要求保護的物質，其特征在于所述兩個部分的微晶殼聚糖的重量比為1∶4999-4999∶1。
8.權利要求7要求保護的物質，其特征在于所述兩個部分的微晶殼聚糖的重量比為1∶19-19∶1，優選1∶9-9∶1。
9.前述任意一項權利要求要求保護的物質，其特征在于所述微晶殼聚糖與協同活性物質以重量比1∶0.001-0.001∶1、優選1∶0.01-0.01∶1組合。
10.前述任意一項權利要求要求保護的物質，其特征在于所述物質為可口服給藥的膠囊劑、片劑或丸劑形式。
全文摘要
本發明涉及降低膽固醇及脂質含量的物質,該物質基于固體劑或凝膠樣分散劑形式的微晶殼聚糖。所述微晶殼聚糖為散劑和/或凝膠樣分散劑形式,它包含分子量不同的兩個部分的混合物,一個部分降低所述膽固醇(LDL)含量,另一個部分降低所述脂質含量。將微晶殼聚糖進一步與協同活性物質組合以增強所述膽固醇和脂質的降低,所述協同活性物質為例如有機酸如抗壞血酸和/或碳酸鹽如碳酸鈉、碳酸鈣和/或碳酸鎂。
文檔編號A61K31/715GK1331703SQ99814701
公開日2002年1月16日 申請日期1999年10月25日 優先權日1998年10月23日
發明者H·斯特魯斯茨克, H·波梅爾, M·烏爾夫, E·塞伊奈特約基, P·伊利塔洛, E·沃里約基, H·海克利 申請人:諾瓦索有限公司