專利名稱：基質金屬蛋白酶抑制劑的制作方法
技術領域：
本發明涉及新的基質金屬蛋白酶抑制劑，它們是基于琥珀酰胺的異羥肟酸或羧酸硫代酰胺類化合物。本發明還涉及它們的制備方法、含有它們的藥物組合物，以及這些化合物在藥物中的用途。特別是，所述化合物是涉及組織降解的基質金屬蛋白酶的抑制劑。此外，本發明的一些化合物是細胞釋放腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的抑制劑。
迄今為止已表征了至少16種不同的但高度同源的MMP類物質。它們共同具有負責連接鋅的HisGluXaaGlyHis基元的催化結構域，這對于催化功能是必需的。MMP族的成員由于存在或不存在附加結構域而在結構上彼此不同，這些附加結構域對活性，例如底物特異性、抑制劑的結合、基質結合以及細胞表面定位作用，產生影響(參見H．Birkedal-hansen；W．G．Moore，M．K．BoddenC．J．Windsor；B．Birkedal-hansen；A．DeCarloCrit．Rev．Oral Biol．Med．(1993)4，197-250和A．E．Chambers；L．M．Matristan國立癌癥研究所雜志(J．Natl．Cancer Inst．)(1997)89(17)，1260-1270)。通過其底物選擇性已鑒定出三類主要的MMP膠原酶降解原纖維膠原，溶基質素選擇蛋白聚糖和糖蛋白作為底物，而明膠酶在非原纖維和變性膠原(明膠)的降解中特別有效。
人們認為對基質金屬蛋白酶作用具有抑制活性的化合物在涉及組織分解和炎癥的病癥的治療或預防中特別有效，如類風濕性關節炎、骨關節炎、骨質稀少(osteopenia)如骨質疏松癥、齒根骨膜炎、齒齦炎、角膜表皮或胃潰瘍以及腫瘤轉移、侵染和生長。MMP抑制劑在神經炎性疾病，包括那些與髓磷脂降解有關的神經炎疾病(例如多發性硬化)的治療中，以及在血管生成依賴性疾病，包括關節炎病癥和實體瘤生長以及牛皮癬、增生性視網膜病、新生血管性青光眼、眼瘤、血管纖維瘤和血管瘤的治療中也具有潛在的價值。然而，人們仍然不完全了解單個MMP在任何上述疾病狀態中的相關作用。
TNF-α是一種細胞因子，其以28-kDa前體生成且以活性的17-kDa形式釋放。這種活性形式可以體內介導大量有害作用，包括炎癥、發熱、心血管效應、出血、凝固和急性期反應，在急性感染和休克狀態中也觀察到的類似癥狀。長時間使用TNF-α可引起惡病質和食欲缺乏；過量TNF-α的蓄積可以致命。
所以，能夠抑制TNF-α的生成或作用的化合物在多種炎癥、感染、免疫性和惡性疾病的治療或預防中特別有效。所述疾病包括但不限于膿毒性休克、血液動力性休克和膿毒病綜合征、局部缺血后再灌注損傷、瘧疾、節段性回腸炎、分支桿菌性感染、腦膜炎、牛皮癬、充血性心力衰竭、纖維變性疾病、惡病質、移植排斥、癌癥、自身免疫性疾病、類風濕性關節炎、多發性硬化、輻射損傷、免疫抑制性單克隆抗體給藥繼發性中毒和氧過多性肺泡損傷。
TNF-α轉化酶是一種參與TNF-α生物合成的金屬蛋白酶。抑制TNF-α轉化酶就可以抑制TNF-α的生成。由于在若干種以MMP介導的組織降解為特征的病癥，包括多發性硬化、關節炎和癌癥中，業已發現了TNF-α的過度生成，所以能夠同時抑制MMP和TNF-α生成的化合物可能在和上述兩種機理有關的疾病或病癥的治療或預防中特別有效。
許多已知MMP抑制劑是基于天然氨基酸的肽衍生物，以及MMP天然底物中切割位點的類似物。其它已知的MMP抑制劑在結構上肽特征很少，可以被視作假肽類物質或擬肽物。這些化合物常常帶有鋅結合基團，最常見的是異羥肟酸、羧酸、巰基、氧化了的亞磷(例如次膦酸、膦酰胺，包括氨基膦酸)基團。
已知有兩類假肽或擬肽MMP抑制劑分別帶有異羥肟酸基團和羧酸基團作為它們各自的鋅結合基團。幾無例外的是，這些已知抑制劑可以用結構式(A)表示 其中X是鋅結合異羥肟酸(-CONHOH)或羧酸(-COOH)基團，并且基團R1至R5按照現有技術中此類化合物的具體定義來變化。
在上述化合物中，在所屬技術領域中一般認為，改變鋅結合基團和取代基R1、R2和R3對MMP類物質的相對抑制作用可產生明顯影響。基團X被認為是通過在活性位點中結合Zn(Ⅱ)離子來和MMP類物質相互作用。通常，在針對多種MMP類物質的抑制活性方面，異羥肟酸優于羧酸。然而，與其它取代基結合在一起的羧酸基團可以選擇性地抑制明膠酶(EP-489，577-A)。據信，R1、R2和R3基團分別占據了天然酶底物的P1、P1I和P2I氨基酸側鏈結合位點。這表明較大的R1取代基可以提高對抗溶基質素的活性，位于R2的(C1-C6)烷基(如異丁基)對于抗膠原酶活性來說是優選的，同時位于R2的苯基烷基(例如苯基丙基)可以產生對明膠酶而不是其它MMP類物質的選擇性。
盡管已知許多MMP抑制劑具有體外活性，但多數不適合進一步被開發成為藥物，這歸因于它們在以藥學上可接受的劑量口服給藥時缺乏有效活性。雖然已知有多種因素影響口服生物利用度，但設計出具有高度口服生物利用度的酶抑制劑遠非那么簡單。尋找出令活性的內在水平、水溶解度、口服吸收和藥代動力學達到良好平衡的取代基R1、R2、R3、R4和R5組合在所屬技術領域中始終是一個難題，因為上述性質隨R1-R5改變的變化方式無法預測。鑒定出具有上述特性的基于異羥肟酸和羧酸的MMP抑制劑始終是該領域的探索目標。
如今，我們發現了新的有效的異羥肟酸和羧酸硫代酰胺衍生物，這些衍生物具有極佳的口服生物利用度，和在口服給藥后具有較長的作用時間和優于結構上接近的有關類似物的藥代動力學分布圖。
因此，本發明涉及一類前所未知的下式(Ⅰ)的化合物，其中X是異羥肟酸或羧酸基團，其主要特征在于Y和Z基團中的一個或兩個為S原子。
本發明提供通式(Ⅰ)的化合物或其鹽、水合物或溶劑化物 其中X是-CO2H或-CONHOH基團；Y和Z獨立地是硫或氧，它們中至少一個是硫；R1是氫、羥基、(C1-C6)烷基、(C2-C6)鏈烯基，或(C3-C8)環烷基；R2是(C1-C24)烷基、苯基(C1-C6)烷基，或苯基(C0-C6烷基)O(C1-C6)烷基，任何這些基團可以被(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、鹵素或氰基(CN)任意取代；R3是其中任何官能團可以被保護的天然α-氨基酸的特征側鏈、可以被任意取代的(C1-C6)烷基，或環烷基(C1-C6)烷基；R4是氫、(C1-C6)烷基、苯基(C1-C6)烷基、任意取代的苯基或雜芳基，或式-(Q-O)n-Q的基團，其中Q是直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，其中n是＞1的整數，且在基團R4中連續線性原子數不超過12；任何上述烷基或鏈烯基為直鏈或支鏈。
除非作出相反定義，本說明書中所用的下列術語含義如下“烷基”是指只由碳和氫組成的直鏈或支鏈烷基基團，不具有不飽和，并且含有多個特定的碳原子，包括如甲基、正丙基、異丁基、叔丁基、己基和十二烷基。
“(C2-C6)鏈烯基”是指含有2-6個碳原子、具有至少一個立體化學合適的為E或Z的雙鍵的直鏈或支鏈烯基。該術語包括，例如，乙烯基、烯丙基、1-和2-丁烯基及2-甲基-2-丙烯基。
“烷氧基”是指式-OR的基團，其中R是定義如上的烷基，例如甲氧基、正丙氧基、叔丁氧基和類似基團。
“環烷基”是指含有3-8個碳原子的飽和脂環基并且包括，例如，環丙基、環戊基、環己基和環辛基。
“天然α-氨基酸的特征側鏈”是指連接在下列氨基酸中的-CH(NH2)(COOH)基團上的特征側鏈丙氨酸、精氨酸、天門冬氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、纈氨酸。該氨基酸側鏈可以被保護。
除非在本文出現時被特殊定義，在此適用于任意基團的術語“取代”是指至多被4個取代基取代，各取代基分別可以是(C1-C6)烷氧基、羥基、硫代、(C1-C6)烷硫基、氨基、鹵素(包括氟、氯、溴和碘)、氰基、三氟甲基、硝基、-COOH、-CONH2、-CONHRA或-CONRARA，其中RA是(C1-C6)烷基或天然α-氨基酸的殘基。
本發明的化合物可以和堿類形成鹽。所述鹽包括衍生自無機堿或有機堿的鹽，例如金屬鹽如鈉或鉀鹽，堿土金屬鹽如鎂或鈣鹽，和有機胺鹽如嗎啉、哌啶、二甲胺或二乙胺鹽。
如果本發明的化合物含有堿性基團，還可以和藥學上可接受的無機酸或有機酸生成鹽，所述無機或有機酸例如是鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、磷酸、硫酸、硝酸、對-甲苯磺酸、甲磺酸、甲酸、乙酸、丙酸、檸檬酸、酒石酸、琥珀酸、苯甲酸、馬來酸，這些是非限定實例。
由于存在不對稱碳原子，本發明的化合物中存在若干手性中心。若干不對稱碳原子的存在致使各手性中心產生了多個具有R或S立體化學的非對映異構體。通式(Ⅰ)和(除非另有定義)本申請中其它所有的結構式均包括了所有的立體異構體和混合物(例如外消旋混合物)。
在本發明的化合物中，優選的立體化學一般如下所述帶有R1和X基團-(S)的C原子，C原子帶有R2-(R)的C原子，帶有R3基團-(S)2的C原子，但也包括其中上述構型占優勢的混合物。在不限定上述概述下
優選的式Ⅰ化合物是那些其中X代表-CONHOH的化合物。
特定R1基團的實例包括氫、羥基、甲基、乙基、正丙基、烯丙基和甲氧基。目前優選其中R1是氫、羥基、烯丙基或丙基的化合物。
特定R2基團的實例包括(C4-C24)烷基、苯基(C1-C6)烷基。目前優選其中R2是異丁基、苯基丙基、(4-氯苯基)丙基、(4-甲基苯氧基)乙基或(C6-C16)烷基的化合物。
特定R3基團的實例包括芐基、4-甲氧基芐基、異丁基、叔丁基、環己基甲基、吲哚甲基、1-氟代甲基乙基、異丙基。目前優選其中R3是芐基、叔丁基、環己基甲基、4-甲氧基芐基、吲哚甲基、異丁基或異丙基的化合物。
特定R4基團的實例包括(C1-C6)烷基、苯基(C1-C6)烷基和帶有至少兩個不相鄰氧原子的聚醚鏈。目前優選其中R4是甲基、苯基丙基、2-(2-甲氧基乙氧基)乙基、2-(2-甲氧基乙氧基甲氧基)乙基或2-(乙氧基乙氧基甲氧基)乙基的化合物。
本發明的實例是N4-羥基-2(R)-苯基乙基-N1-[1(S)-(3-苯基丙基-硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(3-苯基丙基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺N4-羥基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-2(R)-苯基丙基-琥珀酰胺N4-羥基-2(R)-苯基丙基-N1-[1(S)-(3-苯基丙基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺N4-羥基-2(R)-苯基丙基-N1-[1(S)-(3-苯基丙基硫代氨基甲酰基)-2-環己基乙基]-琥珀酰胺N4-羥基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-環己基乙基]-2(R)-苯基丙基-琥珀酰胺
N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-硫羰-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺3(S)，N4-二羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-環已基乙基]-琥珀酰胺3(S)，N4-二羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(3-苯基丙基硫代氨基甲酰基)-2-環己基乙基]-琥珀酰胺N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(3-甲基硫代氨基甲酰基)-2-環己基乙基]-琥珀酰胺N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(3-甲基硫代氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-琥珀酰胺N4-羥基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-苯基乙基}-2(R)-苯基丙基-琥珀酰胺3(S)，N4-二羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2，2-二甲基-丙基]-琥珀酰胺3(S)-烯丙基-N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基}-琥珀酰胺3(S)-烯丙基-N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-(4-甲氧基苯基)乙基}-琥珀酰胺N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-甲基-丙基]-3(S)-丙基-琥珀酰胺N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-(1(S)-{2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基硫代氨基甲酰基}-3-甲基-丁基)-3(S)-丙基-琥珀酰胺2(R)-十二烷基-N4-羥基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-3-甲基-丁基]-琥珀酰胺2(R)-十二烷基-N4-羥基-N1-[1(S)-(苯基乙基硫代氨基甲酰基)-2-甲基-丁基]-琥珀酰胺2(R)-十六烷基-N4-羥基-N1-[1(S)-(苯基硫代氨基甲酰基)-乙基]-琥珀酰胺2(R)-十六烷基-N4-羥基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2，2-二甲基-丙基]-琥珀酰胺3(S)，N4-二羥基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-(4-甲氧基苯基)-乙基}-2(R)-苯基丙基-琥珀酰胺3(S)，N4-二羥基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-甲基-丙基}-2(R)-苯基丙基-琥珀酰胺N4-羥基-2(R)-(4-氯苯基)丙基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-(4-甲氧基苯基)乙基}-琥珀酰胺N4-羥基-2(R)-(4-氯苯基)丙基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基硫代氨基甲酰基}-3-甲基-丁基)-琥珀酰胺N4-羥基-2(R)-(4-氯苯基)丙基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-甲基-丙基}-琥珀酰胺N4-羥基-2(R)-(4-氯苯基)丙基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-琥珀酰胺N4-羥基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-甲基-丙基}-2(R)-(4-甲基苯氧基)乙基-琥珀酰胺N4-羥基-N1-(1(S)-{2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基硫代氨基甲酰基}-(4-甲氧基苯基)乙基)-2(R)-(4-甲基苯氧基)乙基-琥珀酰胺N4-羥基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2(R)-(4-甲基苯氧基)乙基-琥珀酰胺現有專利公開文獻的例子給出如下EP-A-0214639(Searle)EP-A-0489577(Celltech)WO 96／16931(British Biotech)WO 96／33991(Sankyo)現有專利公開文本的通式(A)與本發明通式(Ⅰ)的硫肽類化合物相比描述的是簡單的肽類化合物。如今驚奇地發現，本發明的化合物不但對酶促降解作用具有比其氧化的對應物更高的穩定性，而且是比現已公開的化合物更有效的抑制劑。
采用下列方法對所述化合物進行體外試驗基質金屬蛋白酶得自于用MCF-7人乳腺癌細胞調制的培養基，并且通過在和明膠(1mg／ml，Sigma，MO，美國)共聚合的SDS-丙烯酰胺凝膠(7．0％)上電泳分離。隨后將含有MMP類物質的凝膠與試驗化合物一起在10ml緩沖液(50mMtris-HCl，pH7．5，200mM NaCl，5mM CaCl2，1μM ZnCl2，0．002％NaN3)中于37℃下培養過夜。用存在于10％乙酸中的0．5％考馬斯亮藍R-250將該凝膠染色60分鐘，用10％乙酸脫色，用5％的甘油培養且用凝膠干燥儀干燥。此后測定抑制50％最大酶促活性時所需的摩爾濃度。本發明的某些化合物和選自上述現有技術公開文本(EP-A-0214639)的對比化合物的試驗結果如表1所示。表1．本發明下列實施例的化合物和參比物對MMP2／3和MMP9的體外抑制作用對基質金屬蛋白酶的體外抑制作用(nM)化合物 MMP-2／3MMP-9實施例3 1×10-91×10-9實施例4 1×10-91×10-9實施例5 1×10-91×10-9參比物1 1×10-81×10-8參比物1N1-羥基-3R-異丁基-N4-[1S-(甲基氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺(EP-A 0214639)本發明的化合物可以通過多種有機合成領域普通技術人員所公知的途徑制備。本發明的化合物可以采用下列方法，結合合成有機化學領域的已知方法或為該領域普通技術人員所了解的改進方法來制備。優選的方法包括但不限于下述方法。
新的式(Ⅰ)化合物可以通過這部分中所描述的反應和技術來制備。所述反應是在適合于反應物和所用原料并適于影響該轉化作用的溶劑中進行。此外應懂得，在下述合成方法中，所有建議的反應條件，包括選擇的溶劑、反應壓力、反應溫度、試驗時間和處理方法，均被選擇作為這些反應的標準條件，它們易于為所屬領域技術人員理解。有機合成領域的技術人員了解，離析物分子不同部分上存在的官能度必須適合于所建議的反應物和反應。不是所有屬于指定類型的式(Ⅰ)化合物都適合所述一些方法中要求的某些反應條件。這些對與反應條件相適應的取代基的限制對于所屬領域技術人員來說所顯然的，而且可以采用備擇方法。
其中X是異羥肟酸基團-CONHOH的本發明化合物可以由其中X是羧酸基團-COOH的本發明化合物來制備。所述制備方法構成本發明另一方面，該方法包括將通式(Ⅱ)的酸 與羥胺、O-保護羥胺、N，O-雙保護羥胺反應。酸(Ⅱ)本身可以被保護不發生所述反應，隨后由所得的異羥肟酸基團和從R1、R2、R3和R4中的任何保護取代基上脫去保護基。
可以采用任何有機合成領域技術人員已知的多種酰胺鍵形成方法進行該縮合反應。這些方法包括但不限于使用標準偶聯法，例如混合碳酸酐(氯甲酸異丁酯)法，碳二亞胺(N，N-二甲基氨基丙基-N1-乙基碳二亞胺(EDC)，二環己基碳二亞胺，二異丙基碳二亞胺)法，活潑酯(全氟苯基酯，對-硝基苯基酯，N-羥基琥珀酰亞氨酸酯)法，羰基二咪唑法，疊氮化物法，亞磷反應物如BOP-Cl、疊氮化物法，酸(Ⅱ)轉化為酰氯。一些上述方法(尤其是碳二亞胺)可以通過加入1-羥基苯并三唑(HOBt)加以改進。
如上所述的保護基是本身公知的保護基，例如肽化學技術中的保護基。氨基經常可以用叔-丁氧基羰基、芐氧基羰基或乙酰基保護，或形成苯二甲酰亞氨基。羥基常常被保護成為易裂解的醚類化合物，例如叔丁基或芐基醚，或成為易裂解的酯類化合物，例如乙酸酯。羧酸基團常常被保護成為易裂解的酯類化合物，例如叔丁基或芐基酯。
在化合物(Ⅰ)中的R1是羥基的特定情況中，也可以在化合物(Ⅱ)的偶聯過程中進行保護。特別適用于這種情況的技術可以是同時保護羥基R1和相鄰羧基，生成式(Ⅱa)的二噁酮 其中基團R5和R6衍生自二噁酮生成試劑，和可以是，例如氫、烷基、苯基或取代苯基。該二噁酮環在與羥胺反應時開環，生成預期的式(Ⅰ)異羥肟酸衍生物。
其中X是羧酸基團-COOH、Y是氧及Z是硫的本發明化合物可以通過以下方法制備，該方法包括除了偶聯反應中特別活潑的R1、R2、R3和R4中的任何取代基自身可以被保護以便不發生該偶聯反應，并且隨后脫去該保護基之外，將式(Ⅲ)的酸或其活化衍生物與式(Ⅳ)的胺偶聯，如合成路線1所示，其中R是酯保護基，R1、R2、R3和R4如通式(Ⅰ)中的定義。該縮合反應可以采用任何適于形成酰胺鍵的多種方法，如上所述。合成路線1
在化合物(Ⅲ)中的R1是羥基的特定情況中，也可以在化合物(Ⅱ)與(Ⅳ)的偶聯過程中進行保護。特別適合于這種情況的技術可以是同時保護羥基和羧基，以生成式(Ⅶ)的二噁酮，如同上述通式(Ⅱa)的化合物 式(Ⅳ)的胺是由相應的α-氨基酸、通過文獻所述的方法(M．A．Shalaby，C．W．Grote，H．Rapoport；《有機化學雜志》(1996)61 9045-48)和如下所示的合成路線2來制備，其中R是氨基甲酸酯形式的胺保護基，例如叔丁基或芐基。
上述起始原料(Ⅲ)和α-氨基酸起始原料是已知化合物，或通過常規已知合成方法(例如上述專利公開中所述的方法)制備。
合成路線2 其中X是羧酸基團-COOH、Y是氧、Z是氧或硫的本發明化合物可以通過以下方法制備，該方法包括將起始原料(Ⅲ)轉化為活化形式(ⅩⅣ)，隨后該化合物與胺(ⅩⅤ)反應，如下列合成路線3所示。
本發明的化合物適合于用于有效治療上述疾病的藥物組合物。
合成路線3 顯然，式Ⅰ化合物(此后稱作活性組分)產生治療作用所需的用量將根據具體化合物、給藥途徑和被治療的哺乳動物而改變。式Ⅰ化合物用于系統性治療的適當劑量為0．1-200mg／kg體重，首選0．2-50mg／kg哺乳動物的體重，每天給藥一次或數次。
作為活性組分，例如本發明的化合物可以作為原料化學藥品單獨給藥，但優選將本發明的化合物作為藥物制劑給藥。一般地，活性組分占該制劑重量的0．1％-100％。對于口服給藥，所述制劑的劑量單位含有0．07mg至1g的活性組分，優選約0．5mg至約500mg的活性組分，更優選約50mg。對于局部給藥，活性組分適宜是該制劑重量的1％-20％，但活性組分也可以高達50％w／w。適合經鼻或頰給藥的制劑可以含有0．1％-20％w／w，例如約2％w／w的活性組分。
術語“劑量單位”是指一個單元，即能夠向患者給藥并且易于操作和包裝的單劑量，它保留了作為物理上和化學上穩定的單位劑量，該單位劑量含有活性原料或其與固體或液體藥用稀釋劑或載體形成的混合物。
不論是用于獸醫還是用于人體醫療，本發明的制劑含有與藥學上可接受的載體和其它任意治療性組分相組合的所述活性組分。所述載體必須是“可接受”的，也就是與制劑的其它組分相容和對接受者無害。
所述制劑包括那些適合口服給藥、經眼給藥、直腸給藥、非腸胃道(包括皮下、肌肉內和靜脈內)給藥、經皮給藥、關節內給藥、局部給藥、經鼻給藥或經頰給藥的劑型。
所述制劑一般是以單位劑型存在，并且可以通過任何藥學領域的已知方法制備。所有方法都包括將活性組分與由一種或多種輔助組分構成的載體相結合的步驟。通常，所述制劑是通過將活性組分均勻和緊密地混合在液態載體或微細固態載體中或這兩種載體中，如果需要，隨后使產品成型為預定制劑。
本發明適宜口服給藥的制劑可以是離散單位的形式，例如膠囊、小藥囊、片劑或錠劑，各自含有預定量的活性組分；粉末或顆粒的形式；存在于含水液體或非水液體中的溶液或懸浮液形式；或水包油乳液或油包水乳液的形式。活性組分還可以以干大丸藥、干藥糖劑或糊劑的形式給藥。
用于直腸給藥的制劑可以是將活性組分和載體(如可可脂)混合在一起的栓劑形式，或灌腸劑的形式。
適于非腸道給藥的制劑一般包括活性組分的滅菌油性或含水制劑，優選該制劑與接受者的血液等滲。
適于關節內給藥的制劑可以是微晶形式的活性組分之無菌含水制劑形式，例如微晶水懸浮液的形式。活性組分還也可以利用脂質體制劑或生物可降解聚合物體系進行關節內和經眼給藥。
適合局部給藥(包括眼部治療)的制劑包括液體或半液體制劑，例如搽劑、洗劑、凝膠、涂敷劑、水包油或油包水乳化體如膏霜、軟膏或糊劑；或溶液或懸浮液，如滴劑。
適于鼻腔或頰腔給藥的制劑包括粉末、半拋射和噴霧制劑，例如氣溶膠和霧化劑。
除了上述組分以外，本發明的制劑可以含有一種或多種附加組分。
所述組合物可以進一步含有其他治療中常用的治療活性化合物。
本發明通過下列通用方法、制備例和實施例來作進一步舉例說明。通用方法、制備例和實施例表6中列出例舉的化合物，表5中給出通式(Ⅱ)的化合物，表2給出通式(Ⅹ)的中間體，表3中給出通式(Ⅳ)的中間體，和表4中列出通式(Ⅱa)的中間體。通式(Ⅱ)的化合物出現在制備例中，但未出現在實施例中。
所有熔點均未經修正。除非另外特別指出，1H核磁共振(NMR)光譜(300MHz)和13C NMR(75．6 MHz)化學位移值(δ)(ppm)采用的是氘代氯仿溶液，相對于內標四甲基硅烷(δ=0．00)或氯仿(δ=7．25)或氘代氯仿(13CNMRδ=76．81)計。定義的(二重峰(d)，三重峰(t)，四重峰(q))或未定義的(m)多重峰給出其大致的中點值，除非給出的是范圍。質譜記錄在QUATTROⅡ(微質譜)上。所用有機溶劑為無水溶劑。層析在硅膠上進行。
下列縮寫表示BOC叔-丁氧基羰基DMFN，N-二甲基甲酰胺EDCN-乙基-N1-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽HOBt 1-羥基苯并三唑iBu異丁基Me 甲基MS 質譜NMMN-甲基嗎啉NMR核磁共振RT 室溫TFA三氟乙酸THF四氫呋喃表2某些通式(Ⅹ)的化合物 化合物編號制備例序號R R3201 1 叔丁基苯基甲基202 2 叔丁基環己基甲基203 3 叔丁基叔丁基表3某些通式(Ⅳ)的化合物 化合物編號制備例序號R3R4205 5 苯基甲基甲基206 6 苯基甲基3-苯基丙基207 7 環己基甲基 甲基208 8 環己基甲基 3-苯基丙基表4某些通式(Ⅱa)的化合物 化合物 制備例R2R3R4R5=R6Y Z序號序號217 17 異丁基 環己基甲基甲基甲基O S218 18 異丁基 苯基甲基 甲基甲基O S223 23 異丁基 叔丁基甲基甲基O S232 32 苯基丙基 (4-MeO)-苯基甲基 甲基O S23333 苯基丙基 異丙基 甲基O S表5某些通式(Ⅱ)的化合物 化合物 制備例 R1R2R3R4Y Z序號序號209 9 H2-苯基乙基苯基甲基3-苯基丙基O S210 10 H異丁基苯基甲基3-苯基丙基O S211 11 H異丁基苯基甲基甲基 O S212 12 H3-苯基丙基苯基甲基甲基 O S213 13 H3-苯基丙基苯基甲基3-苯基丙基O S214 14 H3-苯基丙基環己基甲基 3-苯基丙基O S215 15 H3-苯基丙基環己基甲基 甲基 O S216 16 H異丁基苯基甲基甲基 S O219 19 H異丁基環己基甲基 3-苯基丙基O S220 20 H異丁基環己基甲基 甲基 O S221 21 H異丁基 吲哚甲基甲基O S222 22 H3-苯基丙基 苯基甲基 224 24 烯丙基異丁基 叔丁基 225 25 烯丙基異丁基 4-甲氧基-苯基甲基 226 26 丙基異丁基 異丙基 甲基O S227 27 丙基異丁基 異丁基 228 28 H十二烷基 異丁基 甲基O S229 29 H十二烷基 2-丁基 苯基乙基O S230 30 H十六烷基 甲基苯基O S231 31 H十六烷基 叔丁基 甲基O S234 34 H3-(4-Cl-苯基)丙基 4-甲氧基-苯基甲基 235 35 H3-(4-Cl-苯基)丙基 異丁基 236 36 H3-(4-Cl-苯基)丙基 異丁基 237 37 H3-(4-Cl-苯基)丙基 吲哚甲基 甲基O S238 38 H2(4-Me-苯氧基)乙基 異丙基 239 39 H2-(4-Me-苯氧基)乙基4-甲氧基-苯基甲基 240 40 H2-(4-Me-苯氧基)乙基吲哚甲基 甲基O S表6 舉例說明的化合物 化合物實施R1R2R3R4Y Z序號例序號101 1 H2-苯基乙基苯基甲基3-苯基丙基O S102 2 H異丁基苯基甲基3-苯基丙基O S103 3 H異丁基苯基甲基甲基 O S104 4 H3-苯基丙基苯基甲基甲基 O S105 5 H3-苯基丙基苯基甲基3-苯基丙基O S106 6 H3-苯基丙基環己基甲基 3-苯基丙基O S107 7 H3-苯基丙基環己基甲基 甲基 O S108 8 H異丁基苯基甲基甲基 S O109 9 OH 異丁基環己基甲基 甲基 O S110 10OH 異丁基苯基甲基甲基 O S111 11H異丁基環己基甲基 3-苯基丙基O S112 12H異丁基環己基甲基 甲基 O S113 13H異丁基吲哚甲基甲基 O S114 14H3-苯基丙基苯基甲基 115 15OH 異丁基叔丁基 甲基 O S116 16 烯丙基異丁基 叔丁基 117 17 烯丙基異丁基 4-甲氧基- 118 18 丙基異丁基 異丙基 甲基O S119 19 丙基異丁基 異丁基 120 20 H十二烷基 異丁基 甲基O S121 21 H十二烷基 2-丁基 苯基乙基O S122 22 H十六烷基 甲基 苯基O S123 23 H十六烷基 叔丁基 甲基O S124 24 OH 3-苯基丙基 4-甲氧基- 125 25 OH 3-苯基丙基 異丙基 126 26 H3-(4-Cl-苯基)4-甲氧基 127 27 H3-(4-Cl-苯基)異丁基 128 28 H3-(4-Cl-苯基)異丙基 129 29 H3-(4-Cl-苯基)丙基吲哚甲基 甲基O S130 30 H2-(4-Me-苯氧基)乙基 異丙基 131 31 H2-4-Me-苯氧基)乙基 4-甲氧基-苯基 甲基 132 32 H2-(4-Me-苯氧基)乙基 吲哚甲基 甲基O S通用方法1通式(Ⅹ)的硫代酰化反應物的生成(參見合成路線2)(M．A．Shalaby，C．W．Grote，H．Rapoport；《有機化學雜志》(1996)619045-48)。將NMM(2．2ml；20mmol)在-20℃下加入Na-BOC氨基酸在THF中的溶液內，隨后滴加氯甲酸異丁酯(1．3ml，10mmol)。將該混合物攪拌30分鐘，加入4-硝基-1，2-苯二胺(1．53g，10mmol)，并且將所得漿液在-15℃下攪拌2小時并且在RT下過夜。該混合物通過硅藻土(Celite)過濾且將濾液濃縮。將殘余物溶解在EtOAc中，用1M NaHPO4、鹽水、5％NaHCO3和鹽水連續洗滌該溶液，隨后干燥(MgSO4)和濃縮。殘余物通過結晶法(EtOAc／石油醚)或層析法(EtOAc／石油醚)純化得到N-酰苯胺(Ⅷ)。
在氬氣流下，將P4S10(1．1g，2．5mmol)與存在于THF(100ml)中的Na2CO3(0．27g，2．5mmol)混合。在RT下將該混合物攪拌1小時，冷卻至0℃。向該溶液內加入N-酰苯胺(Ⅷ)(5mmol)，將該反應混合物在0℃下攪拌30分鐘并且在RT下攪拌2．5小時。該混合物經硅藻土過濾，蒸發濾液。將殘余物溶解在EtOAc中，用5％NaHCO3洗滌兩次，用EtOAc反萃取該水層。合并的有機層用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)和濃縮，殘余物通過層析法(EtOAc／石油醚)純化得到硫代苯胺(Ⅸ)。在5分鐘內和攪拌下，向硫代苯胺(Ⅸ)(2mmol)在冰醋酸(用水稀釋至5％，15ml)中的溶液內分次加入NaNO3(0．21g，3mmol)。30分鐘后，加入冰水(～100ml)，并且過濾沉淀出的產物，用水洗滌。將固體在真空下干燥過夜且在50℃下放置4小時，得到硫代酰化反應物(Ⅹ)。通用方法2通式(Ⅳ)的胺的生成(參見合成路線2)在15分鐘內，向冷卻(0℃)的存在于30ml THF中的硫代酰化反應物(Ⅹ)(2mmol)溶液中滴加溶于10ml THF中的胺R4NH2(2mmol)的溶液。1小時后蒸發溶劑且通過層析法(EtOAc／石油醚)純化殘余物得到保護胺(Ⅺ)。
攪拌下向溶于CH2Cl2(4ml)中的保護胺(Ⅺ)的溶液內滴加4ml用HCl飽和的Et2O。1小時20分鐘后過濾該沉淀產物，用Et2O洗滌，生成通式(Ⅳ)的胺的鹽酸鹽。
或者，將保護胺(Ⅺ)(2mmol)溶解在TFA(20ml)中。RT下50分鐘后濃縮該溶液，用甲苯濃縮兩次并且用甲醇濃縮一次，生成通式(Ⅳ)的胺的三氟乙酸鹽。通用方法3通式(Ⅲ)的酸和通式(Ⅳ)的胺的偶聯反應和隨后的酯水解反應(參見合成路線1)攪拌下，向存在于DMF(20ml)中的通式(Ⅲ)的酸(3．4mmol)、通式(Ⅳ)的胺(3．4mmol，其鹽酸鹽或三氟乙酸鹽)、HOBt(3．4mmol)和NMM(10．2mmol)的溶液內加入EDC(4．4mmol)。令混合物在室溫下過夜，用EtOAC／H2O提取。用EtOAC反向提取水層。合并的有機層用2NNaOH、H2O、1N HCl、H2O、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)和濃縮。殘余物通過層析法(EtOAc／石油醚)純化得到通式(Ⅴ)的酯。隨后將通式(Ⅴ)的酯(2．9mmol)溶解在甲酸(50ml)中，在RT下放置1小時20分鐘，濃縮，用甲苯濃縮兩次并且用甲醇濃縮一次，得到通式(Ⅵ)的酸。通用方法4通式(Ⅶ)的酸和通式(Ⅳ)的胺的偶聯反應將通式(Ⅶ)(2．4mmol)的酸溶解在CH2Cl2(10ml)中并冷卻至0℃，隨后加入全氟苯酚(670mg，3．6mmol)和EDC(560mg，2．9mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌2小時，隨后用1N Na2CO3和鹽水洗滌該溶液。將有機層干燥(MgSO4)，濃縮。殘余物通過層析法(CH3Cl2)純化得到全氟苯基酯。
將該全氟苯基酯(2．0mmol)溶解在DMS(2ml)中并冷卻至0℃，隨后加入通式(Ⅳ)的胺(1．95mmol)。在0℃下將該溶液攪拌10分鐘，隨后在室溫下過夜。蒸發溶劑且將殘余物溶解在Et2O中，用H2O、1N Na2CO3、H2O、鹽水連續洗滌，干燥(MgSO4)和濃縮。殘余物通過結晶法或層析法純化，得到通式(Ⅱa)的化合物。通用方法5通式(ⅩⅣ)的硫代酰化反應物的生成(參見合成路線3)通式(ⅩⅣ)的硫代酰化反應物按照與硫代酰化反應物(Ⅹ)類似的方法、參見通用方法1、由通式(Ⅲ)的羧酸開始制備。通用方法6通式(ⅩⅦ)的羧酸的生成(參見合成路線3)在15分鐘內，向冷卻(0℃)的溶于30ml THF中的硫代酰化反應物(ⅩⅣ)溶液內滴加存在于10ml THF中的胺(ⅩⅤ)(2mmol)的溶液。1小時后蒸發溶劑，殘余物通過層析法(EtOAc／石油醚)純化得到通式(ⅩⅥ)的酯。
將通式(ⅩⅥ)(1．6mmol)的酯溶解在TFA中并在RT下放置15分鐘。隨后濃縮該溶液，用甲苯濃縮兩次，用甲醇濃縮一次，通過層析法純化(1-5％甲醇的CH2Cl2溶液)得到通式(ⅩⅦ)的羧酸。通用方法7由通式(Ⅱ)或(ⅩⅦ)的相應羧酸制備通式(Ⅰ)的異羥肟酸在氬氣下，將存在于THF(45ml)中的通式(Ⅱ)的羧酸(2．9mmol)溶液冷卻至-10℃。隨后在攪拌下加入NMM(0．3ml，3．0mmol)和氯甲酸異丁酯(0．4ml，3．0mmol)。30分鐘后在-10℃下，加入O-三甲硅基羥胺(0．4ml，3．2mmol)，并且令該混合物在-10℃反應2小時。隨后用1N乙酸酸化該混合物，用EtOAC／H2O提取。用EtOAc反萃取水相，將合并的有機層用H2O、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)和蒸發。殘余物通過層析法(氯仿∶甲醇∶NH3(25％)95∶5∶1)或結晶法純化得到通式(Ⅰ)的異羥肟酸。通用方法8由通式(Ⅱa)的相應化合物制備通式(Ⅰ)的異羥肟酸向溶于二氯甲烷(2ml)中的通式(Ⅱa)化合物(0．1mmol)的溶液內加入O-三甲硅基羥基胺(0．037ml，0．3mmol)。將該溶液放置過夜，濃縮。殘余物通過層析法(氯仿∶甲醇∶N3(25％)95∶5∶1)或結晶法純化得到通式(Ⅰ)的異羥肟酸。通用方法9由通式(Ⅱ)或(ⅩⅦ)的相應羧酸制備通式(Ⅰ)的異羥肟酸向溶于干燥DMF(4．5ml)的通式(Ⅱ)羧酸(0．29mmol)的溶液內加入HOBt(0．38mmol)、NMM(0．38mmol)和EDC(0．38mmol)。將反應混合器冷卻至0℃，加入鹽酸羥胺(0．58mmol)和NMM(0．58mmol)。將反應混合物升至室溫并攪拌過夜。加入乙酸乙酯和水后，分離水相，用乙酸乙酯洗滌3次。合并的有機層用水和鹽水洗滌，干燥和減壓下濃縮。閃式層析(氯仿∶甲醇∶N3(25％)95∶5∶1)得到通式(Ⅰ)的異羥肟酸。
制備例11-(Nα-BOC-L-硫羰苯基丙氨酸)-6-硝基苯并三唑(化合物201)通用方法1。
起始原料Nα-BOC-L-苯基丙氨酸13C NMR(CDCl3)δ209．0，155．0，149．5，149．0，135．3，131．7，129．4，128．5，127．3，122．2，121．5，112．7，80．5，62．0，42．8，28．3。
制備例21-(Nα-BOC-L-硫羰環己基丙氨酸)-6-硝基苯并三唑(化合物202)通用方法1。
起始原料Nα-BOC-L-環己基丙氨酸13C NMR(CDCl3)δ211．9，155．5，149．6，149．0，132．0，122．1，121．4，112．9，80．5，59．7，44．6，35．0，34．1，32．0，28．4，26．4，26．2，25．9。
制備例31-(Nα-BOC-L-硫羰-叔-亮氨酸)-6-硝基苯并三唑(化合物203)通用方法1。
起始原料Nα-BOC-L-叔-亮氨酸13C NMR(CDCl3)δ210．4，155．5，149．6，149．4，131．4，122．2，121．6，112．9，80．4，66．3，37．1，28．4，26．6。
制備例41-[2(R)-異丁基-1-硫羰琥珀酸4-叔-丁酯]-6-硝基苯并三唑(化合物204)通用方法5。
起始原料2-(R)-異丁基-琥珀酸4-叔-丁酯13C NMR(CDCl3)δ215．6，170．7，149．4，149．4，131．9，121．9，121．3，113．3，81．1，47．6，46．6，41．3，28．0，26．1，23．0，22．4。
制備例5L-硫羰苯基丙氨酸N-甲基酰胺鹽酸鹽(化合物205)通用方法2。
起始原料化合物201和甲胺1H NMR(DMSO-d6)δ10．68(bs，1H)，8．46(bs，3H)，7．36-7．18(m，5H)，4．32(m，1H)，3．10(m，2H)，2．84(s，3H)。
制備例6L-硫羰苯基丙氨酸N-(3-苯基丙基)酰胺三氟乙酸鹽(化合物206)通用方法2。
起始原料化合物201和3-苯基丙基胺。
13C NMR(DMSO-d6)δ196．8，141．2，134．7，129．4，128．4，128．3，128．2，127．2，125．9，58．7，44．6，32．2，28．2。
制備例7L-硫羰環己基丙氨酸N-甲酰胺鹽酸鹽(化合物207)通用方法2。
起始原料化合物202和3-苯基丙基胺13C NMR(DMSO-d6)δ198．9，55．2，41．3，32．7，32．6，32．2，31．9，25．7，25．4，25．3。
制備例8L-硫羰環己基丙氨酸N-(3-苯基丙基)酰胺鹽酸鹽(化合物208)通用方法2。
起始原料化合物202。
13C NMR(DMSO-d6)δ198．3，141．2，128．2，125．8，55．3，44．7，41．3，32．9，32．8，32．4，32．0，28．6，25．7，25．4，25．4。
制備例92(R)-苯基乙基-N-[1(S)-(3-苯基丙基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺酸(化合物209)通用方法3。
起始原料2(R)-苯基乙基-琥珀酸4-叔-丁酯和化合物20613C NMR(CDCl3)δ201．7，175．9，174．2，140．8，140．8，136．4，129．3，128．6，128．5，128．5，128．4，128．3，127．1，126．2，126．1，60．7，45．3，41．9，41．8，36．4，33．8，33．0，33．0，28．9。
制備例102(R)-異丁基-N-[1(S)-(3-苯基丙基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺酸(化合210)通用方法3。
起始原料2(R)-異丁基-琥珀酸4-叔-丁酯和化合物20613C NMR(CDCl3)δ201．7，175．6，174．8，140．9，136．6，129．3，128．6，128．5，128．3，127．1，126．1，60．7，45．3，41．8，41．2，40．7，36．7，33．0，28．9，25．6，22．6，22．3。
制備例112(R)-異丁基-N-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺酸(化合物211)通用方法3。
起始原料2(R)-異丁基-琥珀酸4-叔-丁酯和化合物20513C NMR(CDCl3)δ202．7，176．2，174．8，136．5，129．2，128．5，127．0，60．4，41．9，41．3，40．7，36．7，32．4，25．6，22．6，22．3。
制備例12N-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-2(R)-苯基丙基-琥珀酰胺酸(化合物212)通用方法3。
起始原料2(R)-苯基乙基-琥珀酸4-叔-丁酯和化合物205。
1H NMR(CDCl3)δ7．75(bq，1H)，7．34-7．07(m，10H)，6．87(d，1H)，4．83(m，1H)，3．13(dd，1H)，3．01(dd，1H)，2．89(d，3H)，2．77-2．31(m，5H)，1．74-1．36(m，4H)。
制備例132(R)-苯基丙基-N-[1(S)-(3-苯基丙基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺酸(化合物213)通用方法3。
起始原料2(R)-苯基丙基-琥珀酸4-叔-丁酯和化合物2061H NMR(CDCl3)δ7．38(bt，1H)，7．32-7．01(m，15H)，6．88(d，1H)，4．73(m，1H)，3．43(m，2H)，3．15(dd，1H)，2．98(dd，1H)，2．72-2．50(m，5H)，2．43(t，2H)，1．75-1．40(m，6H)。
制備例142(R)-苯基乙基-N-[1(S)-(3-苯基丙基硫代氨基甲酰基)-2-環己基乙基]-琥珀酰胺酸(化合物214)通用方法3。
起始原料2(R)-苯基丙基-琥珀酸4-叔-丁酯和化合物2081H NMR(CDCl3)δ8．42(t，1H)，7．36-7．06(m，10H)，6．46(d，1H)，4．66(m，1H)，3．73-3．44(m，2H)，2．79-2．49(m，6H)，2．42(dd，1H)，1．91(m，2H)，1．77-0．73(m，17H)。
制備例15N-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-環己基乙基]-2(R)-苯基丙基-琥珀酰胺酸(化合物215)通用方法3。
起始原料2(R)-苯基丙基-琥珀酸4-叔-丁酯和化合物2071H NMR(CDCl3)δ8．84(q，1H)，7．32-7．09(m，5H)，6．48(d，1H)，4．77(m，1H)，2．99(d，3H)，2．73(dd，1H)，2．60(m，3H)，2．43(dd，1H)，1．77-0．75(m，17H)。
制備例16(R)-異-丁基-N-硫羰-N-[1(S)-(甲基氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺酸(化合物216)通用方法6。
起始原料化合物204和L-苯基丙氨酸N-甲酰胺
13C NMR(CDCl3)δ208．6，177．1，171．0，136．5，129．2，128．7，127．1，60．5，49．2，44．1，40．5，37．2，26．2，25．5，23．0，22．1。
制備例172(R)-(2，2-二甲基-5-氧代-[1，3]二氧雜戊環-4(S)-基)-4-甲基戊酸[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-環己基乙基]-酰胺(化合物217)通用方法4。
起始原料2(R)-(2，2-二甲基-5-氧代-[1，3]二氧雜戊環-4(S)-基)-4-甲基戊酸和化合物20713C NMR(CDCl3)δ205．1，172．0，171．1，171．0，74．7，56．6，47．2，42．9，36．8，34．1，33．7，32．6，32．5，26．9，26．4，26．4，26．1，25．8，25．7，23．4，21．7。
制備例182(R)-(2，2-二甲基-5-氧代-[1，3]二氧雜戊環-4(S)-基)-4-甲基戊酸[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-酰胺(化合物218)通用方法4。
起始原料2(R)-(2，2-二甲基-5-氧代-[1，3]二氧雜戊環-4(S)-基)-4-甲基戊酸和化合物20513C NMR(CDCl3)δ202．6，172．2，170．5，136．6，129．1，128．7，127．1，111．2，74．8，60．7，46．8，41．5，36．2，32．5，26．8，25．8，25．6，23．3，21．7。
制備例192(R)-異丁基-N1-[1(S)-(3-苯基丙基硫代氨基甲酰基)-2-環己基乙基]-琥珀酰胺酸(化合物219)通用方法3。
起始原料2(R)-異丁基-琥珀酸4-叔-丁酯和化合物20813C NMR(CDCl3)δ204．1，176．1，175．1，141．0，128．5，128．4，126．2，57．0，45．4，42．8，41．4，40．6，36．6，34．1，33．4，33．3，32．9，29．3，26．4，26．2，26．0，25．6，22．7，22．3，15．2。
制備例202(R)-異丁基-N1-[1(S)-(3-甲基硫代氨基甲酰基)-2-環己基乙基]-琥珀酰胺酸(化合物220)通用方法3。
起始原料2(R)-異丁基-琥珀酸4-叔-丁酯和化合物2071H NMR(CDCl3)δ8．70(d，1H)，6．60(d，1H)，4．78(q，1H，3．08(d，3H)，3．10(m，1H)，2．7(m，2H)，2．5(m，1H)，1．7(m，6H)，1．2(m，10H)，0．93(d，3H)，0．88(d，3H)。
制備例212(R)-異丁基-N1-[1(S)-(3-甲基硫代氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-琥珀酰胺酸(化合物221)通用方法3。
起始原料2(R)-異丁基-琥珀酸4-叔-丁酯和L-硫羰色氨酸N-甲酰胺鹽酸鹽(按照化合物205所述方法制備)。
13C NMR(CDCl3)δ203．2，177．9，176．4，136．0，127．4，123．5，122．1，119．5，118．6，111．5，110．3，60．0，41．7，32．6，31．5，25．5，22．5。
制備例22N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-苯基乙基}-2(R)-苯基丙基-琥珀酰胺酸(化合物222)通用方法3。
起始原料2(R)-苯基丙基-琥珀酸4-叔-丁酯和L-硫羰丙氨酸N-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基]酰胺(按照化合物205所述方法制備)。
13C NMR(CDCl3)δ202．0，141．7，136．6，129．3，128．5，128．4，128．3，126．9，125．9．95．5，71．8，66．8，65．5，60．5，58．9，45．8，42．5，42．1，35．6，31．7，29．7，28．8．制備例232(R)-(2，2-二甲基-5-氧代-[1，3]二氧雜戊環-4(S)-基)-4-甲基戊酸[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2，2-二甲基-丙基]-酰胺(化合物223)通用方法4。
起始原料2(R)-(2，2-二甲基-5-氧代-[1，3]二氧雜戊環-4(S)-基)-4-甲基戊酸和L-硫羰叔丁基甘氨酸N-甲酰胺鹽酸鹽(按照化合物205所述方法制備)。
13C NMR(CDCl3)δ202．0，171．9，170．5，110．9，74．8，65．2，47．7，37．0，35．7，32．5，26．9，26．8，25．8，25．7，23．2，21．9。
制備例243(S)-烯丙基-2(R)-異丁基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基}-琥珀酰胺酸(化合物224)通用方法3。
起始原料3(R，S)-烯丙基-2(R)-異丁基-琥珀酸4-叔-丁酯和L-硫羰叔丁基甘氨酸N-甲酰胺鹽酸鹽(按照化合物205所述方法制備)。
13C NMR(CDCl3)δ200．8，175．6，174．9，135．1，117．7，71．9，70．3，68．1，65．2，59．0，47．6，46．0，45．5，39．2，36．0，34．6，27．0，25．9，23．7，21．7。
制備例253(S)-烯丙基-2(R)-異丁基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-(4-甲氧基苯基)乙基}-琥珀酰胺酸(化合物225)通用方法3。
起始原料3(R，S)-烯丙基-2(R)-異丁基-琥珀酸4-叔-丁酯和L-硫羰-4-甲氧基-苯基丙氨酸N-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基]酰胺(按照化合物205所述方法制備)。
13C NMR(CDCl3)δ201．7，175．5，174．4，158．8，135．1，130．3，128．3，117．7，114．0，71．8，70．1，68．1，60．4，58．9，55．2，47．2，45．6，41．4，38．5，34．4，25．9，23．7，21．5．制備例262(R)-異丁基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-甲基丙基]-3(S)-丙基-琥珀酰胺酸(化合物226)通用方法3。
起始原料2(R)-異丁基-3(S)-丙基-琥珀酸4-叔-丁酯和L-硫羰纈氨酸N-甲酰胺鹽酸鹽(按照化合物205所述方法制備)。
1H NMR(CDCl3)δ9．07(q，1H)，7．12(d，1H)，4．53(t，1H)，3．14(d，3H)，2．60(d，2H)，2．19(m，1H)，1．65(m，2H)，1．41(m，4H)，1．05-0．80(m，17H)。
制備例272(R)-異丁基-N1-(1(S)-{2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基硫代氨基甲酰基}-3-甲基-丁基)-3(S)-丙基-琥珀酰胺酸(化合物227)通用方法3。
起始原料2(R)-異丁基-3(S)-丙基-琥珀酸4-叔-丁酯和L-硫羰亮氨酸N-{2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基}酰胺(按照化合物205所述方法制備)。
13C NMR(CDCl3)δ204．3，177．7，174．2，71．9，70．6，70．4，70．3，68．0，59．0，57．1，48．3，47．4，45．6，45．2，40．0，32．9，25．9，24．9，23．7，22．9，22．2，21．6，20．7，13．9。
制備例282(R)-十二烷基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-3-甲基丁基]-琥珀酰胺酸(化合物228)通用方法3。
起始原料2(R)-十二烷基-琥珀酸4-叔-丁酯和L-硫羰亮氨酸N-甲酰胺鹽酸鹽(按照化合物205所述方法制備)。
13C NMR(CDC13)δ205．0，177．2，175．4，57．5，44．4，42．9，36．9，32．7，32．5，31．9，29．7，29．6，29．5，29．4，27．2，24．8，22．8，22．7，22．1，14．1。
制備例292(R)-十二烷基-N1-[1(S)-(苯基乙基硫代氨基甲酰基)-2-甲基-丁基]-琥珀酰胺酸(化合物229)通用方法3。
起始原料2(R)-十二烷基-琥珀酸4-叔-丁酯和L-硫羰異亮氨酸N-苯基乙酰胺鹽酸鹽(按照化合物205所述方法制備)。
13C NMR(CDCl3)δ203．5，176．8，175．3，138．2，128．6，126．6，63．6，46．7，43．0，39．2，37．1，33．6，32．7，31．9，29．7，29．6，29．4，27．3，24．8，22．7，15．3，14．1，10．9。制備例302(R)-十六烷基-N1-[1(S)-(苯基硫代氨基甲酰基)-乙基]-琥珀酰胺酸(化合物230)通用方法3。
起始原料2(R)-十六烷基-琥珀酸4-叔-丁酯和L-硫羰丙氨酸N-苯基酰胺鹽酸鹽(按照化合物205所述方法制備)。
1H NMR(CDCl3)δ10．67(s，1H)，7．76(d，2H)，7．36(t，2H)，7．22(t，1H)，6．96(d，1H)，5．16(m，1H)，2．68(m，2H)，2．45(m，1H)，1．62(m，1H)，1．49(d，3H)，1．25(m，30H)，0．87(t，3H)。
制備例312(R)-十六烷基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2，2-二甲基-丙基]-琥珀酰胺酸(化合物231)通用方法3。
起始原料2(R)-十六烷基-琥珀酸4-叔-丁酯和L-硫羰叔丁基甘氨酸N-甲酰胺鹽酸鹽(按照化合物205所述方法制備)。
1H NMR(DMSO-d6)δ12．7(s，1H)，10．08(q，1H)，7．37(d，1H)，4．62(d，1H)，2．94(d，3H)，2．74(m，1H)，2．4(dd，1H)，2．25(dd，1H)，1．40(m，1H)，1．35-1．05(m，29H)，0．92(s，9H)，0．85(t，3H)。
制備例322(R)-(2，2-二甲基-5-氧代-[1，3]二氧雜戊環-4(S)-基)-(3-苯基)丙酸{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-(4-甲氧基苯基)-乙基}-酰胺(化合物232)通用方法4。
起始原料2(R)-(2，2-二甲基-5-氧代-[1，3]二氧雜戊環-4(S)-基)-5-苯基戊酸和L-硫羰-4-甲氧基-苯基丙氨酸N-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基]酰胺(按照化合物205所述方法制備)。
13C NMR(CDCl3)δ201．9，172．0，169．8，158．7，141．8，130．3，128．6，128．4，128．4，125．9，114．0，111．0，74．4，71．8，70．2，68．0，61．2，59．0，55．2，49．0，45．4，41．2，35．6，28．8，27．4，26．9，25．9。
制備例332(R)-(2，2-二甲基-5-氧代-[1，3]二氧雜戊環-4(S)-基)-(3-苯基)丙酸{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-甲基-丙基}-酰胺(化合物233)通用方法4。
起始原料2(R)-(2，2-二甲基-5-氧代-[1，3]二氧雜戊環-4(S)-基)-5-苯基戊酸和L-硫羰-纈氨酸N-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基]酰胺(按照化合物205所述方法制備)。
13C NMR(CDCl3)δ203．6，172．1，170．2，141．8，128．4，128．3，125．8，110．8，95．9，74．4，71．9，67．0，66．2，64．3，59．1，49．5，46．0，35．6，33．9，28．7，27．5，27．0，26．0，19．5，18．3。
制備例342(R)-(4-氯苯基)丙基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-(4-甲氧基苯基)乙基}-琥珀酰胺酸(化合物234)通用方法3。
起始原料2(R)-(4-氯苯基)丙基-琥珀酸4-叔-丁酯和L-硫羰-4-甲氧基-苯基丙氨酸N-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基]酰胺(按照化合物205所述方法制備)。
13C NMR(CDCl3)δ202．0，174．7，174．1，158．7，140．1，131．6，130．3，129．8，128．6，128．5，114．0，71．8，70．1，68．1，61．0，58．9，55．2，45．6，42．6，41．1，36．4，34．9，31．6，28．6。
制備例352(R)-(4-氯苯基)丙基-N1-(1(S)-{2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基硫代氨基甲酰基}-3-甲基-丁基)-琥珀酰胺酸(化合物235)通用方法3。
起始原料2(R)-(4-氯苯基)丙基-琥珀酸4-叔-丁酯和L-硫羰亮氨酸N-{2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基}酰胺(按照化合物205所述方法制備)。
13C NMR(CDCl3)δ204．5，175．1，174．5，140．2，131．6，129．8，128．4，71．9，70．5，70．3，70．2，68．1，58．9，57．5，45．6，44．9，42．5，36．5，34．9，31．8，28．7，4．8，22．9，22．1。
制備例362(R)-(4-氯苯基)丙基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-甲基-丙基}-琥珀酰胺酸(化合物236)通用方法3。
起始原料2(R)-(4-甲基苯氧基)乙基-琥珀酸4-叔-丁酯和L-硫羰纈氨酸N-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基]酰胺(按照化合物205所述方法制備)。
13C NMR(CDCl3)δ203．7，176．1，174．7，140．3，131．5，129．8，128．4，95．8，71．9，67．1，65．7，64．4，59．0，45．8，42．9，37．3，34．9，33．7，32．0．28．6，19．4，18．6。
制備例372(R)-(4-氯苯基)丙基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-琥珀酰胺酸(化合物237)通用方法3。
起始原料2(R)-(4-氯苯基)丙基-琥珀酸4-叔-丁酯和L-硫羰色氨酸N-甲酰胺鹽酸鹽(按照化合物205所述方法制備)。
13C NMR(DMSO-d6)δ203．6，173．9，173．8，141．0，135．9，130．0，127．9，127．2，123．5，120．7，118．3，118．0，111．2，110．3，59．8，42．1，37．8，34．2，32．1，31．6，30．4，28．1。
制備例38N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-甲基-丙基}-2(R)-(4-甲基苯氧基)乙基-琥珀酰胺酸(化合物238)通用方法3。
起始原料2(R)-(4-氯苯基)丙基-琥珀酸4-叔-丁酯和L-硫羰纈氨酸N-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基]酰胺(按照化合物205所述方法制備)。
13C NMR(CDCl3)δ203．5，175．4，174．2，156．4，130．2，129．9，114．6，95．8，71．9，67．0，65．9，65．3，64．6，59．0，45．9，39．5，36．4，33．8，31．9，20．5，19．4，18．5。
制備例39N1-(1(S)-{2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基硫代氨基甲酰基}-(4-甲氧基苯基)乙基)-2(R)-(4-甲基苯氧基)乙基-琥珀酰胺酸(化合物239)通用方法3。
起始原料2(R)-(4-甲基苯氧基)乙基-琥珀酸4-叔-丁酯和L-硫羰-4-甲氧基-苯基丙氨酸N-{2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基}酰胺(按照化合物205所述方法制備)。
1H NMR(CDCl3)δ8．39(t，1H)，7．11(d，2H)，7．04(d，2H)，6．92(d，1H)，6．79(d，2H)，6．73(d，2H)，4．80(q，1H)，3．88(t，2H)，3．75(s，3H)，3．8-3．4(m，12H)，3．36(s，3H)，3．13(d，2H)，2．92(m，1H)，2．71(dd，1H)，2．59(dd，1H)，2．27(s，3H)，2．00(m，2H)。
制備例40N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2(R)-(4-甲基苯氧基)乙基-琥珀酰胺酸(化合物240)通用方法3。
起始原料2(R)-(4-甲基苯氧基)乙基-琥珀酸4-叔-丁酯和L-硫羰色氨酸N-甲基酰胺鹽酸鹽(按照化合物205所述方法制備)。
13C NMR(CDCl3)δ203．2，177．6，175．7，156．2，136．1，130．4，130．0，127．4，123．6，122．1，119．5，118．8，114．5，111．5，110．2，65．6，60．3，40．3，38．6，32．6，31．9，31．3，20．4。
實施例1N4-羥基-2(R)-苯基乙基-N1-[1(S)-(3-苯基丙基-硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺(化合物101)通用方法7。
起始原料化合物209。
13C NMR(DMSO-d6)δ202．7，173．2，167．4，141．9，141．4，137．6，129．1，128．2，128．1，128．1，127．9，126．2，125．6，125．5，60．0，44．4，41．4，34．6，33．5，32．4，32．3，28．6。
實施例2N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(3-苯基丙基-硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺(化合物102)通用方法7。
起始原料化合物210。
13C NMR(DMSO-d6)δ202．5，173．5，167．4，141．4，137．7，129．0，128．1，127．9，126．1，125．7，59．9，44．4，40．5，40．2，35．6，32．2，28．6，25．0，23．2，21．8。
實施例3N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺(化合物103)通用方法7。
起始原料化合物211。
13C NMR(CDCl3)δ 202．7，174．9，168．9，136．5，129．2，128．6，127．0，60．3，42．0，41．4，36．2，32．7，25．7，22．9，22．1。
實施例4N4-羥基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-2(R)-苯基丙基-琥珀酰胺(化合物104)通用方法7。
起始原料化合物212。
13C NMR(DMSO-d6)δ203．1，173．4，167．6，142．0，137．9，128．9，128．1，128．0，127．9，126．2，125．5，60．1，41．8，40．1，35．0，34．7，32．0，31．3，28．3。
實施例5N4-羥基-2(R)-苯基丙基-N1-[1(S)-(3-苯基丙基-硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺(化合物105)通用方法7。
起始原料化合物213。
13C NMR(CDCl3)δ201．5，174．6，169．0，141．7，141．0，136．3，129．3，128．6，128．4，128．3，128．3，127．1，126．0，125．9，60．7，45．3，43．1，41．5，35．5，35．3，32．9，32．1，28．8，28．6。
實施例6N4-羥基-2(R)-苯基丙基-N1-[1(S)-(3-苯基丙基-硫代氨基甲酰基)-2-環己基乙基]-琥珀酰胺(化合物106)通用方法7。
起始原料化合物214。
13C NMR(CDCl3)δ203．8，174．9，169．0，141．6，141．2，128．5，128．4，126．1，125．9，57．2，45．5，43．0，42．6，35．5，34．0，33．3，33．2，33．0，32 4，29．2，28．7，26．4，26．1，25．9。
實施例7N4-羥基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-環己基乙基]-2(R)-苯基丙基-琥珀酰胺(化合物107)通用方法7。
起始原料化合物215。
13C NMR(DMSO-d6)δ204．8，173．5，167．6，142．0，128．1，128．0，125．5，56．5，42．0，41．8，35．1，34．8，33．5，33．1，32．0，31．6，31．6，28．4，26．0，25．7，25．4。
實施例8N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-硫羰-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺(化合物108)通用方法7。
起始原料化合物216。
MS[M-H]-364，[M-OH]-348，[M-NH2OH]-331實施例93(S)，N4-二羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-環己基乙基]-琥珀酰胺(化合物109)通用方法8。
起始原料化合物217。
13C NMR(CDCl3)δ204．2，174．5，169．8，71．2，57．3，47．2，42．9，38．9，34．4，33．7，33．0，32．3，26．3，26．2，26．0，25．8，23．0，22．1。
實施例103(S)，R4-二羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺(化合物110)通用方法8。
起始原料化合物218。
MS[MH]+382，[MNa]+404，[MH-NH2OH]+349實施例11N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(3-苯基丙基-硫代氨基甲酰基)-2-環己基乙基]-琥珀酰胺(化合物111)通用方法7。
起始原料化合物219。
13C NMR(CD3OD)δ205．9，176．7，170．6，142．9，129．5，129．4，127．0，58．3，46．1，43．9，42．6，42．4，37．1，35．5，34．7，34．3，33．9，30．6，27．7，27．4，27．2，26．9，23．8，22．4。
實施例12N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(3-甲基硫代氨基甲酰基)-2-環己基乙基]-琥珀酰胺(化合物112)通用方法7。
起始原料化合物220。
13C NMR(CD3OD)δ206．6，176．8，58．2，43．9，42．7，37．1，35．5，34．9，33．6，32．7，27．7，27．4，27．2，26．9，23．8，22．4，15．5。
實施例13N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(3-甲基硫代氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-琥珀酰胺(化合物113)通用方法7。
起始原料化合物221。
13C NMR(DMSO-d6)δ204．4，174．4，168．4，136．8，128．1，124．4，121．6，119．2，118．9，112．0，111．0，60．5，41．4，36．3，33．0，31．4，25．8，23．9，22．8。
實施例14N4-羥基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基}-2(R)-苯基丙基-琥珀酰胺(化合物114)通用方法7。
起始原料化合物222。
13C NMR(CDCl3)δ202．2，174．1，141．7，136．6，129．3，128．5，128．4，128．3，126．9，125．9，95．6，71．8，66．9，65．4，60．7，58．9，45．8，43．3，41．8，35．5，32．0，29．7，28．7。
實施例153(S)，N4-二羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2，2-二甲基-丙基]-琥珀酰胺(化合物115)通用方法8。
起始原料化合物223。
13C NMR(DMSO-d6)δ201．7，171．6，168．8，71．6，64．3，48．3，35．2，31．8，26．9，26．8，25．2，23．6，21．7。
實施例163(S)-烯丙基-N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基}-琥珀酰胺(化合物116)
通用方法9。
起始原料化合物224。
13C NMR(DMSO-d6)δ201．6，173．0，169．2，135．9，116．2，71．2，69．4，67．1，64．6，58．1，46．3，45．9，44．7，34．9，34．5，26．9，25．1，24．2，21．7。
實施例173(S)-烯丙基-N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-(4-甲氧基苯基)乙基}-琥珀酰胺(化合物117)通用方法9。
起始原料化合物225。
13C NMR(DMSO-d6)δ204．4，172．8，169．2，157．7，135．8，130．3，129．5，115．5，113．2，71．1，69．4，67．1，60．0，58．0，54．6，45．9，45．6，44．9，34．2，24．9，24．2，21．5。
實施例18N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-甲基-丙基]-3(S)-丙基-琥珀酰胺(化合物118)通用方法9。
起始原料化合物226。
13C NMR(DMSO-d6)δ204．1，173．2，170．0，64．4，46．1，45．7，32．7，31．7，31．5，25．0，24．1，21．6，19．9，19．2，18．9，13．8。
實施例19N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-(1(S)-{2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)乙氧基]-乙基硫代氨基甲酰基}-3-甲基-丁基)-3(S)-丙基-琥珀酰胺(化合物119)通用方法9。
起始原料化合物227。
13C NMR(DMSO-d6)δ206．0，173．8，170．4，71．7，70．1，70．0，67．5，58．5，57．3，46．6，46．3，45．3，44．0，33．3，25．5，24．7，23．6，22．0，20．5，14．4。
實施例202(R)-十二烷基-N4-羥基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-3-甲基-丁基]-琥珀酰胺(化合物120)通用方法7。
起始原料化合物228。
13C NMR(CDCl3)δ204．7，175．0，169．3，57．6，43．8，43．5，33．1，32．7，31．9，29．7，29．4，27．2，24．9，22．9，22．7，22．2，14．1。
實施例212(R)-十二烷基-N4-羥基-N1-[1(S)-(苯基乙基硫代氨基甲酰基)-2-甲基-丁基]-琥珀酰胺(化合物121)通用方法7。
起始原料化合物229。
13C NMR(DMSO-d6)δ203．5，173．5，167．5，138．8，128．4，128．2，126．1，62．7，46．0，41．4，37．8，34．9，32．8，31．8，31．2，29．1，29．0，28．9，28．9，28．9，28．6，26．4，24．2，22．0，15．1，13．8，10．7。
實施例222(R)-十六烷基-N4-羥基-N1-[1(S)-(苯基硫代氨基甲酰基)-乙基]-琥珀酰胺(化合物122)通用方法7。
起始原料化合物230。
13C NMR(DMSO-d6)δ204．9，173．7，167．7，139．4，128．4，125．9，122．8，55．6，41．5，34．8，32．0，31．3，29．1，28．7，26．5，22．1，21．0，14．0。
實施例232(R)-十六烷基-N4-羥基-N1-[1(S)-(甲基硫代氧基甲酰基)-2，2-二甲基-丙基]-琥珀酰胺(化合物123)通用方法7。
起始原料化合物231。
13C NMR(DMSO-d6)δ201．7，173．3，167．4，64．3，41．6，35．0，34．7，31．7，31．6，31．2，29．0，28．8，28．6，26．7，26．4，22．0，13．8。
實施例243(S)，N4-二羥基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-(4-甲氧基苯基)-乙基}-2(R)-苯基丙基-琥珀酰胺(化合物124)通用方法8。
起始原料化合物232。
13C NMR(CDCl3)δ201．9，173．4，169．6，158．6，141．7，130．3，128．4，128．4，125．9，113．9，72．2，71．7，69．9，68．2，61．3，58．9，55．2，48．4，45．5，40．3，35．5，29．4，28．7。
實施例253(S)，N4-羥基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-甲基-丙基}-2(R)-苯基丙基-琥珀酰胺(化合物125)通用方法8。
起始原料化合物233。
13C NMR(DMSO-d6)δ203．1，174．1，169．6，141．7，128．4，128．4，125．9，95．7，72．3，71．9，67．0，65．6，64．8，59．0，47．8，45．8，35．5，33．3，29．5，28．8，19．4，18．4。
實施例26N4-羥基-2(R)-(4-氯苯基)丙基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-(4-甲氧基苯基)乙基}-琥珀酰胺(化合物126)通用方法7。
起始原料化合物234。
13C NMR(DMSO-d6)δ203．6，173．3， 67．5，157．7，141．0，130．1，130．0，129．5，127．9，113．3，71．1，69．3，66．9，60．1，58．0，54．8，44．7，41．5，34．7，34．2，31．0，28．1。
實施例27N4-羥基-2(R)-(4-氯苯基)丙基-N1-(1(S)-{2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基硫代氨基甲酰基}-3-甲基-丁基)-琥珀酰胺(化合物127)通用方法7。
起始原料化合物235。
13C NMR(DMSO-d6)δ205．0，173．4，167．5，141．0，130．0，127．9，71．2，69．6，69．5，66．9，58．0，57．1，44．7，43．6，41．4，34．8，34．2，31．3，28．2，24．1，22．8，21．6。
實施例28N4-羥基-2(R)-(4-氯苯基)丙基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-甲基-丙基}-琥珀酰胺(化合物128)通用方法7。
起始原料化合物236。
13C NMR(DMSO-d6)δ203．9，173．4，167．5，141．0，130．0，127．9，94．6，71．1，66．2，64．0，57．9，44．7，41．1，34．9，34．2，32．2，31．3，28．1，19．1，18．5。
實施例29N4-羥基-2(R)-(4-氯苯基)丙基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3基)乙基]-琥珀酰胺(化合物129)通用方法7。
起始原料化合物237。
13C NMR(DMSO-d6)δ203．7，173．4，167．6，141．0，135．9，130．0，127．9，127．2，123．6，120．7，118．3，118．1，111．2，110．1，59．7，41．8，34．7，34．2，32．1，31．2，30．5，28．1。
實施例30N4-羥基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-甲基-丙基}-2(R)-(4-甲基苯氧基)乙基-琥珀酰胺(化合物130)通用方法7。
起始原料化合物238。
13C NMR(CDCl3)δ203．5，174．0，168．4，156．4，130．2，129．9，114．6，95．8，71．9，67．1，65．8，65．5，65．0，59．0，45．8，40．5，35．4，33．5，32．2，20．5，19．4，18．6。
實施例31N4-羥基-N1-(1(S)-[2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基硫代氨基甲酰基]-(4-甲氧基苯基)乙基)-2(R)-(4-甲基苯氧基)乙基-琥珀酰胺(化合物131)通用方法7。
起始原料化合物239。
13C NMR(CDCl3)δ202．5，173．8，168．7，158．5，156．4，130．3，130．1，129．9，128．8，114．5，113．9，71．9，70．4，70．3，70．1，68．2，65．4，61．7，58．9，55．2，45．4，40．4，40．3，35．3，31．8，20．5。
實施例32N4-羥基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2(R)-(4-甲基苯氧基)乙基-琥珀酰胺(化合物132)通用方法7。
起始原料化合物240。
13C NMR(DMSO-d6)203．7，172．9，167．3，156．2，135．9，129．6，128．9，127．2，123．7，120．7，118．4，118．1，114．1，111．2，110．0，65．3，59．8，34．8，32．1，31．0，30．5，20．0。
實施例33含有化合物103的膠囊將化合物103溶解在分餾椰子油中以使終濃度為10mg／ml。將10重量份的明膠、5重量份的甘油、0．08重量份的山梨酸鈉和14重量份的蒸餾水在加熱下混合在一起，形成軟明膠膠囊。隨后向每個這樣的膠囊內填充500μl化合物103的油溶液。
實施例34含有化合物103的片劑化合物103 50mg(活性物質)乳糖 125mg淀粉 12mg甲基纖維素2mg羧甲基纖維素鈉10mg硬脂酸鎂 1mg在適當的攪拌器中將活性物質、乳糖和淀粉混合至均勻狀態并且用5％的甲基纖維素15厘泊的水溶液濕潤。持續混合直至形成顆粒。如果需要，令濕顆粒通過適當的篩子且在適當的干燥器(例如流化床或干燥烘箱)中干燥至水分含量小于1％。令干燥顆粒經過1mm篩子且和羧甲基纖維素鈉混合成均勻狀態。加入硬脂酸鎂，并且繼續短時間混合。
利用適當的壓片機由顆粒制備重量為200mg的片劑。
實施例35含有化合物103的注射制劑化合物1031％(活性物質)氯化鈉 適量乙醇 10％注射用水 100％將活性物質溶解在乙醇(10％)中，隨后用已經氯化鈉等滲的注射用水調至100％。將混合物填充到安瓿內且滅菌。
權利要求
1．通式(Ⅰ)的化合物，或其鹽、水合物或溶劑化物 其中X是-CO2H或-CONHOH基團；Y和Z獨立地是硫或氧，它們中至少一個是硫；R1是氫、羥基、(C1-C6)烷基、(C2-C6)鏈烯基或(C3-C8)環烷基；R2是(C1-C24)烷基、苯基(C1-C6)烷基或苯基(C0-C6烷基)O(C1-C6)烷基，其中任何基團可以被(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、鹵素或氰基(CN)任意取代；R3是其中任何官能團可以被保護的天然α-氨基酸的特征側鏈、可以被任意取代的(C1-C6)烷基或環烷基(C1-C6)烷基；R4是氫、(C1-C6)烷基、苯基(C1-C6)烷基、任意取代的苯基或雜芳基，或式-(Q-O)n-Q的基團，其中Q是(C1-C6)烷基且其中n是＞1的整數，且在基團R4中無連續線性原子數目大于12；任何上述的烷基或鏈烯基為直鏈或支鏈。
2．根據權利要求1所述化合物的純凈形式的非對映異構體，或根據權利要求1所述化合物的立體異構體的混合物。
3．根據上述權利要求任一項所述的化合物，其中R1是氫、羥基、烯丙基或丙基。
4．根據上述權利要求任一項所述的化合物，其中R2是異丁基、苯基丙基、(4-氯苯基)丙基、(4-甲基苯氧基)乙基或(C6-C16)烷基。
5．根據上述權利要求任一項所述的化合物，其中R3是芐基、叔丁基、環己基甲基、4-甲氧基芐基、吲哚甲基、異丁基和異丙基。
6．根據上述權利要求任一項所述的化合物，其中R4是甲基、苯基丙基、2-(2-甲氧基乙氧基)乙基、2-(2-甲氧基乙氧基-甲氧基)乙基或2-(乙氧基乙氧基甲氧基)乙基。
7．根據權利要求1所述的化合物，其中R1是氫、羥基、烯丙基或丙基；R2是異丁基、苯基丙基、(4-氯苯基)丙基、(4-甲基苯氧基)乙基，或(C6-C16)烷基；R3是芐基、叔丁基、環己基甲基、4-甲氧基芐基、吲哚甲基、異丁基或異丙基；R4是甲基、苯基丙基、2-(2-甲氧基乙氧基)乙基、2-(2-甲氧基乙氧基-甲氧基)乙基或2-(乙氧基乙氧基甲氧基)乙基。
8．根據上述權利要求所述的化合物，其選自a)N4-羥基-2(R)-苯基乙基-N1-[1(S)-(3-苯基丙基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺；b)N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(3-苯基丙基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺；c)N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺；d)N4-羥基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-2(R)-苯基丙基]-琥珀酰胺；e)N4-羥基-2(R)-苯基丙基-N1-[1(S)-(3-苯基丙基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺；f)N4-羥基-2(R)-苯基丙基-N1-[1(S)-(3-苯基丙基硫代氨基甲酰基)-2-環己基乙基]-琥珀酰胺；g)N4-羥基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-環己基乙基]-2(R)-苯基丙基-琥珀酰胺；h)N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-硫羰-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺；i)3(S)，N4-二羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-環己基乙基]-琥珀酰胺；j)3(S)，N4-二羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-琥珀酰胺；k)N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(3-苯基丙基硫代氨基甲酰基)-2-環己基乙基]-琥珀酰胺；l)N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(3-甲基硫代氨基甲酰基)-2-環己基乙基]-琥珀酰胺；m)N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(3-甲基硫代氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-琥珀酰胺；n)N4-羥基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-苯基乙基}-2(R)-苯基丙基-琥珀酰胺；o)3(S)，N4-二羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2，2-二甲基-丙基]-琥珀酰胺；p)3(S)-烯丙基-N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基}-琥珀酰胺；q)3(S)-烯丙基-N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-(4-甲氧基苯基)乙基}-琥珀酰胺；r)N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-甲基-丙基]-3(S)-丙基-琥珀酰胺；s)N4-羥基-2(R)-異丁基-N1-(1(S)-{2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基硫代氨基甲酰基}-3-甲基-丁基)-3(S)-丙基-琥珀酰胺；t)2(R)-十二烷基-N4-羥基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-3-甲基-丁基]-琥珀酰胺；u)2(R)-十二烷基-N4-羥基-N1-[1(S)-(苯基乙基硫代氨基甲酰基)-2-甲基-丁基]-琥珀酰胺；v)2(R)-十六烷基-N4-羥基-N1-[1(S)-(苯基硫代氨基甲酰基)-乙基]-琥珀酰胺；w)2(R)-十六烷基-N4-羥基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2，2-二甲基-丙基]-琥珀酰胺；x)3(S)，N4-二羥基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-(4-甲氧基苯基)-乙基}-2(R)-苯基丙基-琥珀酰胺；y)3(S)，N4-二羥基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-甲基-丙基}-2(R)-苯基丙基-琥珀酰胺；z)N4-羥基-2(R)-(4-氯苯基)丙基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-(4-甲氧基苯基)乙基}-琥珀酰胺；aa)N4-羥基-2(R)-(4-氯苯基)丙基-N1-(1(S)-{2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基硫代氨基甲酰基}-3-甲基-丁基)-琥珀酰胺；bb)N4-羥基-2(R)-(4-氯苯基)丙基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-甲基-丙基]-琥珀酰胺；cc)N4-羥基-2(R)-(4-氯苯基)丙基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-)乙基]-琥珀酰胺；dd)N4-羥基-N1-{1(S)-[2-(2-甲氧基-乙氧基甲氧基)-乙基硫代氨基甲酰基]-2-甲基-丙基}-2(R)-(4-甲基苯氧基)乙基-琥珀酰胺；ee)N4-羥基-N1-(1(S)-{2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基硫代氨基甲酰基}-(4-甲氧基苯基)乙基)-2(R)-(4-甲基苯氧基)乙基-琥珀酰胺；ff)N4-羥基-N1-[1(S)-(甲基硫代氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-)乙基]-2(R)-(4-甲基苯氧基)乙基-琥珀酰胺；純凈形式的所述化合物的任一非對映異構體；任一所述化合物的立體異構體的混合物；和任一所述化合物的藥學上可接受的鹽、水合物或溶劑合物。
9．一種用于制備如權利要求1所述的式Ⅰ化合物的方法，該方法通過將通式(Ⅱ)的酸 與羥胺、O-保護羥胺或N，O-雙保護羥胺反應，可以保護式(Ⅱ)的酸不發生該反應，此后由所得異羥肟酸基團和R1、R2、R3和R4中的任意被保護取代基上脫去保護基。
10．一種含有有效量的一種或多種如權利要求1-8的化合物作為活性組分，及藥學上可接受的載體和／或輔劑的藥物組合物。
11．根據權利要求10所述的藥物組合物，該藥物組合物用于系統性治療的劑量單位含有0．07mg-1g的一種或多種如權利要求1-8的化合物作為活性組分。
12．根據權利要求10所述的藥物組合物，該藥物組合物的劑量單位含有0．5mg-約500g的一種或多種如權利要求1-8的化合物作為活性組分。
13．一種用于治療或預防涉及組織降解和炎癥的病癥和用于治療神經炎性疾病以及用于控制血管生成依賴性疾病的方法，所述涉及組織降解和炎癥的病癥例如類風濕性關節炎、骨關節炎、骨質稀少如骨質疏松癥、齒根骨膜炎、齒齦炎、角膜表皮或胃潰瘍以及腫瘤轉移、侵染和生長，所述神經炎性疾病包括涉及髓磷脂降解的那些疾病，例如多發性硬化，所述血管生成依賴性疾病包括關節炎病癥和實體瘤生長以及牛皮癬、增生性視網膜病、新生血管性青光眼、眼瘤、血管纖維瘤和血管瘤，該方法包括給需要的患者施用如權利要求10、11或12所述的藥物組合物。
14．如權利要求1-8任一項所述的化合物在制備用于治療或預防涉及組織降解和炎癥的病癥以及用于治療神經炎性疾病以及用于控制血管生成依賴性疾病的藥物中的用途，所述涉及組織降解和炎癥的病癥例如類風濕性關節炎、骨關節炎、骨質稀少如骨質疏松癥、齒根骨膜炎、齒齦炎、角膜表皮或胃潰瘍以及腫瘤轉移、侵染和生長，所述神經炎性疾病包括涉及髓磷脂降解的那些疾病，例如多發性硬化，所述血管生成依賴性疾病包括關節炎病癥和實體瘤生長以及牛皮癬、增生性視網膜病、新生血管性青光眼、眼瘤、血管纖維瘤和血管瘤。
全文摘要
本發明涉及通式(Ⅰ)的化合物或其鹽、水合物或溶劑化物,其中:X是－CO
文檔編號A61P1/04GK1289323SQ9980259
公開日2001年3月28日 申請日期1999年2月23日 優先權日1998年3月3日
發明者M·K·克里斯坦森 申請人:里奧藥物制品有限公司