專利名稱：苦參綠茶組合物及其在治療濕疣中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種治療因人乳頭病毒(HPV)引起的尖銳濕疣的組合藥物。
尖銳濕疣是在人體皮膚或男女生殖器粘膜上可檢測到的一種疣，是由人乳頭病毒(HPV)引起的。這種疣表現為與眾不同的乳頭狀或雞冠樣腫瘤，而且有積累和多發的傾向。尖銳濕疣的發病率高，患者人數在不斷增加。目前治療因人乳頭瘤病毒引起的尖銳濕疣的主要方法有手術切除、電烙、冷凍、激光治療等。藥物治療有普達菲倫脂、五-氟尿嘧啶、鬼臼毒素等。然而，上述方法目前都存在一定局限性及毒付作用，因此，治療效果還不令人滿意。
本發明之目的是尋找一種新的藥物，與目前臨床用藥相比，不僅療效更好，而且毒副作用很低，長期使用，不會給患者造成不良影響。
本發明的內容與要點是基于中藥苦參具有清熱解毒、祛風殺蟲之功效，多用于瘡、疥、癬疾，是婦科病的常用藥，綠茶是人們常用的飲料，也具有清熱解毒，收斂除濕等功效，并經研究證明，綠茶具有抗病毒、抗菌、抗氧化、抗增生作用，故對上述兩種提取物的組合物治療尖銳濕疣的功效進行了深入研究。
具體步驟如下1、苦參粗提物的制備將中藥材苦參粉碎成粗粉，稱重，加0.2％HCl濕潤30分鐘，裝入滲漉桶，壓緊，緩緩傾入上述液體至沒過藥粉界面，浸漬1小時，開始滲漉，流速為800-1000ml/cm2/小時，當滲漉液無明顯桔紅色沉淀時(少許滲漉液加碘化鉍鉀試劑一滴)，滲漉結束。滲漉液靜止24小時，虹吸上清液，通過強酸型陽離子樹脂柱，流速為500-800ml/cm2/小時，當交換液出現桔紅色沉淀時即停止交換。傾出樹脂，用水漂洗干凈，離心甩干，40℃以下烘干樹脂，加適量濃氨水堿化，裝入索氏提取器中，加氯仿回流提取，至氯仿液無色。傾出氯仿液，過濾，減壓回收溶劑，濃縮液加少量乙醇溶解，減壓回收至無醇味，得苦參粗提物。
強酸型陽離子樹脂的預處理及再生步驟如下將樹脂用溫水浸泡2小時，裝柱，用5-7％HCl浸漬10小時，再用3-5倍量的上述鹽酸轉型，流速為500-800ml/cm2/小時，然后用蒸餾水洗至PH6-7即可。(見圖1)2、綠茶粗提物的制備取綠茶末稱重，加10倍量80℃的水浸泡2小時，壓濾，殘渣再加5倍量80℃的水浸泡1小時，壓濾，棄去殘渣，合并濾液。濾液中加入一倍量氯仿萃取30分鐘，靜置，棄去氯仿層，分出水液，水液中加入一倍量乙酸乙酯萃取30分鐘，靜置，收集乙酸乙酯液，水液同上再萃取一次，棄去水液，合并乙酸乙酯液，減壓回收溶劑，濃縮物加少許水溶解，50℃以下真空干燥，得綠茶粗提物。(見圖2)3、苦參粗提物和綠茶粗提物組合物制備取苦參粗提物14克，加8N鹽酸5-8ml，充分攪拌，使中和完全，以避免與綠茶粗提物的化學作用(這種作用可導致組合物形成新的化合物而失去治療作用)。取黃凡士林40克，無水羊毛脂20克，液體石臘5克，70℃水浴熔化，加入10克綠茶粗提物(過100目篩)，攪拌均勻，緩緩加入上述苦參粗提物，邊加邊攪拌，待完全均勻后，停止加熱，繼續攪拌至室溫，分裝(見圖3)。
本發明所說的苦參、綠茶組合物，亦可制成栓劑或其它劑型，以滿足臨床不同需要。
4、組合物的檢測與鑒別取組合物軟膏1克，加無水乙醇5ml，加濃氨3滴，水浴加熱至熔化，放至室溫，過濾，吸取濾液20μl點于用2％NaOH溶液制備的硅膠G薄層板上；另取苦參堿對照品，配成每1ml含0.1mg的無水乙醇溶液，吸取10μl點于同一硅膠G薄層板上。
展開劑甲苯∶丙酮∶乙醇∶濃氨水(20∶20∶3∶1)顯色劑改良碘化鉍鉀試劑液結論在供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯示相同的橙紅色斑點(附圖5)取組合物軟膏1克，加無水乙醇5ml，水浴加熱至熔化，放至室溫，過濾，吸取濾液20-40μl，點于硅膠G薄層板上；另取綠茶對照品2克，加10ml無水乙醇浸泡2小時，過濾，吸取濾液20-40μl，點于同一硅膠G薄層板上。
展開劑氯仿∶甲醇∶甲酸(8∶20∶0.1)顯色劑置紫外燈下觀察或室溫放置待顯出斑點。
結論在供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同的紫紅色斑點(圖4)。
5、組合物的動物刺激性試驗及臨床療效判定鑒于本發明所涉及的組合物是由常用的中藥材苦參和飲料綠茶的兩種提取物構成，故除刺激性試驗采用動物模型外，可直接通過臨床試驗，觀察其治療尖銳濕疣的功效。
1)動物粘膜刺激性試驗；藥品濕疣靈；對照品空白基質。
動物家兔4只，體重為1800-2000g，購于中國藥品生物制品檢定所動物中心。
給藥方法及劑量
用消毒棉簽涂適量藥膏于家兔眼瞼內。第1、2、3、4只家兔的右眼均涂濕疣靈，其左眼均涂空白基質作對照。
給藥前觀察每只家兔雙眼均正常，眼球結膜無充血，角膜光反射正常，眼瞼開閉正常，飲食及活動均正常。
給藥后觀察(第一次給藥)1個小時后觀察第1、2、3、4只家兔右眼多閉；左眼均正常。無全身反應。
3個小時后觀察第1、2、3、4只家兔右眼仍多閉，第2、4只家兔右眼球結膜稍發紅；左眼正常，無全身反應。
6個小時后觀察4只家兔右眼較前有好轉。左眼正常，無全身反應。
20個小時后觀察4只家兔的右眼均恢復正常，全身活動正常(表1)表1第一次給藥后觀察
指眼球結膜給藥后觀察(7天后第二次給藥)1小時后觀察第1、2只家兔右眼球結膜稍發紅，眼多閉；第3、4只家兔右眼較正常。左眼均正常，無全身反應。
3小時后觀察第1只家兔右眼球結膜稍發紅，眼多閉，第2只家兔右眼有好轉仍多閉，第3、4只家兔右眼正常。左眼均正常，無全身反應。
6小時后觀察第1只家兔右眼有好轉，第2只家兔右眼基本正常，第3、4只家兔右眼正常。左眼均正常，無全身反應。
20小時后觀察第1、2、3、4只家兔右眼均恢復正常，左眼均正常，全身活動正常(表2)。
表2第二次給藥后觀察(第一次給藥7天后)
指眼球結膜結論濕疣靈無刺激性。2)臨床療效觀察；治療對象為確診的尖銳濕疣患者49例；給藥途徑為外用，涂敷于病患部位；用藥劑量，根據患處面積及程度調整掌握。治療標準分為治愈(濕疣全部消失)；顯效(濕疣消失率＞50％)；無效(濕疣消失率＜50％)，療程平均為一個月左右。
經臨床試用結果，總有效率達90％(表3)
根據資料報道，單獨使用綠茶提取物(茶多酚)治療尖銳濕疣，其治愈率為54％，顯效率為32％，總有效率為86％，表明，苦參和綠茶提取物經特殊處理配制的組合物，治療效果明顯優于單獨使用綠茶提取物茶多酚。
本發明的優點和效果在于，與目前臨床使用治療尖銳濕疣的藥物相比，本組合物(濕疣靈)療效好，無刺激，無過敏，無毒副作用，可長期使用，且操作簡便，患者可自行將藥物涂于患處，故不失為一種安全可靠的有效藥物。


圖1苦參粗提物制備流程圖。
圖2綠茶粗提物制備流程圖。
圖3苦參、綠茶粗提物組合物制備流程圖。
圖4綠茶提取物的薄層鑒別圖譜其中1——濕疣靈2——綠茶提取物對照品圖5苦參提取物的薄層鑒別圖譜其中1——苦參粗提物2、3——濕疣靈4——苦參堿對照品
權利要求
1.一種濕疣靈及其制造方法，其特征是該組合物系由苦參粗提物和綠茶粗提物經特殊處理配制而成并具有較好的治療尖銳濕疣的功效。
2.按照權利要求1所述的濕疣靈及其制造方法，其特征是基本工藝步驟為A)將苦參粗提物先用8N鹽酸攪勻至完全中和，放置備用；B)將黃凡士林、無水羊毛脂及液體石臘(70℃水浴熔化)加入綠茶粗提物；C)將預處理好的苦參粗提物在適當溫度下與B混合攪勻，得棕褐色軟膏。
3.按照權利要求1或2所述的濕疣靈及其制造方法，其特征是所得組合物的檢測鑒別標準是苦參粗提物和苦參堿對照品在同一硅膠G薄層板上，經特定展開劑和顯色劑處理后，其色譜相應位置應顯示相同的橙紅色斑點；綠茶粗提物和綠茶對照品在同一硅膠G薄層板上，經特定展開劑和顯色劑處理后，其色譜相應位置應顯示相同的紫紅色斑點。
4.按照權利要求1所述的濕疣靈及其制造方法，其特征是臨床治療尖銳濕疣，經皮膚外用給藥途徑，根據病變面積與程度掌握劑量，平均療程為30天±，按照治愈、顯效、無效和副作用標準判定療效及安全性。
全文摘要
本發明涉及一種治療因人乳頭病毒引起的尖銳濕疣的組合物，它是先將苦參粗提物用適當濃度鹽酸預處理至完全中和，再與調配好的綠茶粗提物混合攪勻，得棕褐色軟膏，經特定的展開劑和顯色劑在硅膠G薄層板上分別檢測兩種粗提物的色斑反應確證后，通過皮膚給藥途徑，經30天左右療程觀察，組合物的治愈率達76%，顯效率14%，總有效率90%。且無不良反應，為臨床增添了一種新的治療尖銳濕疣有效藥物。
文檔編號A61P17/12GK1239669SQ99103108
公開日1999年12月29日 申請日期1999年3月24日 優先權日1999年3月24日
發明者程書鈞, 穆秀珍, 王德昌 申請人:中國醫學科學院腫瘤醫院、腫瘤研究所