藍萼甲素的葡萄糖衍生物及其制備方法和應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及醫藥發明領域，具體涉及藍萼甲素（glaucocalyxinA，GLA)的葡萄糖 衍生物及其制備方法和應用。
【背景技術】
[0002] 藍萼甲素（glaucocalyxinA，GLA)，化學名稱為：（50，7a，90，IOa)-7, 14-二 羥基貝殼杉-16-烯-3, 15-二酮；又名leukameninF，分子式為C20H2804,分子量：332. 43， CAS登記號：79498-31-0,密度：1. 22g/cm3,熔點：513. 4°C，易溶于甲醇、乙醇，其結構式為 式III所示。
[0003]
【主權項】
1. 一種藍萼甲素的葡萄糖衍生物，該類衍生物具有式I或式II所示結構：
其中，&為氫或甲氧基，R2各自獨立的為氫或乙酰基，n為0或1。
2. 根據權利要求1所述的衍生物，其特征在于，所述衍生物為式Ia-Ic:
3. 根據權利要求1所述的衍生物，其特征在于，所述衍生物為式Ila-IIc所示化合物：
4. 一種制備權利要求1-3任一項所述的衍生物的方法，其特征在于，該方法包括以下 步驟： 步驟1，全乙酰化溴代葡萄糖和全乙酰化疊氮葡萄糖的制備：以葡萄糖為原料，通過乙 酰化、溴代、疊氮化反應得到全乙酰化溴代葡萄糖和全乙酰化疊氮葡萄糖； 步驟2,含末端炔基或羧基的苯甲醛衍生物的制備：以取代羥基苯甲醛為原料，通過與 3_溴丙炔發生親核取代反應，得到含末端炔基的苯甲醛衍生物，或與氯乙酸發生親核取代 反應，得到含羧基的苯甲醛衍生物； 步驟3,取代苯甲醛乙酰葡萄糖苷的制備：以步驟1制備的全乙酰化疊氮葡萄糖和步驟 2制備的含末端炔基的苯甲醛衍生物為原料，通過click反應，得到含三氮唑基團的取代苯 甲醛乙酰葡萄糖苷； 或，以步驟1制備的全乙酰化溴代葡萄糖和步驟2制備的含羧基的苯甲醛衍生物或 取代羥基苯甲醛為原料，通過親核取代反應，得到重要的中間產物，取代苯甲醛乙酰葡萄糖 苷； 步驟4,藍萼甲素葡萄糖衍生物的制備：以步驟3制備的重要中間產物取代苯甲醛乙 酰葡萄糖苷和藍萼甲素為原料，通過縮合反應，得到目標產物藍萼甲素的葡萄糖衍生物 Ia_Ic、IIa-IIc〇
5. 根據權利要求4所述的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟： 步驟1，全乙酰化溴代葡萄糖和全乙酰化疊氮葡萄糖的制備：葡萄糖與乙酸鈉按摩爾 比為1:1. 0-1:2. 0混勾，在乙酸酐中加熱回流2-3h，反應結束后冷卻，加入冰水析出白色固 體，過濾，用5-6倍量的蒸餾水洗滌，干燥，得到全乙酰化葡萄糖；所得全乙酰化葡萄糖溶于 二氯甲燒，滴加溴化氫-乙酸溶液，室溫反應20-30h，之后加入冰水結束反應，二氯甲燒萃 取，有機層依次用蒸餾水、飽和碳酸氫鈉、食鹽水洗滌，干燥、減壓濃縮，得到全乙酰化溴代 葡萄糖；所得全乙酰化溴代葡萄糖溶于有機溶劑，加入疊氮化鈉，60-90°C反應5-12h，冷卻 至室溫，加入冰水析出固體，過濾，干燥，得全乙酰化疊氮葡萄糖； 步驟2,含末端炔基或羧基的苯甲醛衍生物的制備：：取代羥基苯甲醛與3-溴丙炔按 摩爾比為1:1-1:2于有機溶劑中攪拌溶解，加入0. 6-1摩爾當量的無水碳酸鉀，催化量的碘 化鉀，40-60°C反應6-10小時，反應結束后加入反應液等體積的蒸餾水，乙酸乙酯萃取，萃 取液無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析分離純化，石油醚-乙酸乙酯體系洗脫， 得到含末端炔基的苯甲醛衍生物； 取代羥基苯甲醛置于5%氫氧化鈉溶液，調節pH值為8-9,逐滴加入1. 4-1. 6倍量的氯 乙酸的飽和碳酸鉀溶液，再加入催化量的碘化鉀，加熱回流至溶液呈橘黃色后繼續反應2-4 小時，停止反應，體系冷卻至室溫，濃鹽酸調節溶液pH值為1-2,沉淀析出，抽濾，5-6倍量的 蒸餾水洗滌多次，所得固體乙醇-水重結晶，真空干燥后，得到含羧基的苯甲醛衍生物； 步驟3,取代苯甲醛乙酰葡萄糖苷的制備：步驟1中所得全乙酰化疊氮葡萄糖與步驟2 中所得含末端炔基的苯甲醛衍生物以摩爾比為1:1. 0-1:1. 5溶于有機溶劑，冰浴條件下加 入催化量的硫酸銅、L-抗壞血酸鈉，室溫條件下反應0-5h，加入1. 5-2倍反應液體積的蒸餾 水，乙酸乙酯萃取，依次用蒸餾水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮，柱層 析分離純化，石油醚-乙酸乙酯體系洗脫，得含三氮唑基團的取代苯甲醛乙酰葡萄糖苷； 步驟4,藍萼甲素葡萄糖衍生物的制備：步驟3中所得苯甲醛乙酰葡萄糖苷與藍萼甲素 以摩爾比為1:0. 5 - 1:1. 5溶于有機溶劑，酸性條件下反應1 - 5h，加入二氯甲烷萃取，依次 用飽和碳酸氫鈉、飽和食鹽水進行洗滌，無水MgS04干燥，過濾，濃縮，柱層析分離純化，石油 醚/乙酸乙酯體系洗脫，得到終產物la-Ic、Ila-lie。
6. 根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述步驟1中：所述的有機溶劑為四氫呋 喃、N，N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜、乙腈、1，4-二氧六環、二氯甲烷或氯仿； 所述步驟2中：所述的有機溶劑為四氫呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜、乙腈或 1，4-二氧六環。
7. 根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述步驟3中，所述的有機溶劑為四氫呋 喃、N，N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜、乙腈、1，4-二氧六環、正丁醇、正丁醇-水、二氯甲烷、氯 仿或乙腈。
8. 根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述步驟4中，所述酸性條件為無機酸、有 機酸或非質子酸。
9. 含權利要求1-3任一項所述的衍生物的制劑，其特征在于，所述制劑由該衍生物與 藥學上可接受的載體組成。
10. 權利要求1-3任一項所述的衍生物或權利要求9所述的制劑在制備治療腫瘤的藥 物中的應用，所述腫瘤優選為肝癌、宮頸癌、白血病、絨毛膜癌和肺癌。
【專利摘要】本發明涉及一種藍萼甲素的葡萄糖衍生物，該類衍生物具有式I或式II所示結構。其中，R1為氫或甲氧基，R2為氫或乙酰基，n為0或1。本發明還涉及所述葡萄糖衍生物的制備方法和應用，經細胞毒活性評價實驗，結果發現藍萼甲素的葡萄糖衍生物具有較強的人腫瘤細胞增殖抑制活性，活性優于母體化合物藍萼甲素。
【IPC分類】A61K31-7048, C07H1-00, A61P35-02, A61P35-00, A61K31-7056, C07H19-056, C07H13-04, C07H15-26
【公開號】CN104558077
【申請號】CN201510027426
【發明人】白素平, 李婷, 尹志奎, 黃鋒, 劉兆敏, 海廣范, 陳亮輝, 任茜茜, 周慧超, 張荒荒
【申請人】新鄉醫學院
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2015年1月20日