專利名稱：：玉米須提取物及其制備方法和在制備治療痛風藥物中的應用的制作方法
技術領域：
：本發明提供一種玉米須提取物，同時還提供了其制備方法和在制備治療痛風藥物中的應用，屬于中醫藥物制備
技術領域：
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背景技術：
：痛風病是體內嘌呤代謝紊亂引起的一類疾病，隨著我國人民生活水平的提高、壽命的延長、飲食結構的改變(富含核蛋白的食物增多)、肥胖者的增加，以及對本病的重視程度加強等，痛風已不再是國人的罕見病，其患病率較15年前增長約1530倍。痛風是一種由于血尿酸過高沉積在關節或其鄰近組織所引起的特殊疾病，好發于中老年男性中，但是目前中老年女性和青年男性的發病率也有所上升。發病年齡多在50歲以上(63%);在老年患者中，女性發病率高于男性，且發病率由60歲前的7%提高至60歲后的29%。
發明內容本發明提供一種玉米須提取物，具有醫藥活性。本發明其制備方法，簡單易行、成本較低廉，適用于工業化生產。本發明進一步公開了上述提取物在制備治療痛風藥物中的用途，具有顯著療效，無毒副作用等特點。本發明提供的玉米須提取物，可以通過以下方法得到的取玉米須210g，除去雜質，剪成段約3-4cm，1050倍量50-95%乙醇70-8(TC回流提取34次，每次提取12小時，過濾，合并濾液，減壓回收溶劑，濃縮成稠膏，4(TC-8(TC，0.05Mpa條件下減壓干燥，粉碎成細分；取干粉加水溶解，經大孔樹脂柱分離，以水、10%、30%、50%、70%、90%的乙醇依次(梯度？)洗脫，得到分離物；回收個部分洗脫液，濃縮，40°C-8CTC，0.05Mpa條件下減壓干燥，粉碎成細粉，即得。本發明提取方法得到玉米須總黃酮，經過工藝驗證試驗表明提取率可達到3.0%，提取物中總黃酮含量以蘆丁計不少于60。/。。以下實驗表明本發明藥物對小鼠耳腫脹、鎮痛等作用的影響實驗材料1.動物昆明種小鼠，體質量(20土2)g;雄性大鼠，體重150200g2.儀器HF—300電子分析天平、TGL—16A臺式高速冷凍離心機、SK-1快速混勻器、721紫外分光光度儀3.藥物玉米須總黃酮(YMXZHT)長春中醫藥大學中醫藥與生物工程研究中心；消炎痛，山西三晉藥業有限公司；別嘌呤醇廣東彼迪藥業有限公司生產；苯溴馬隆，氫氯噻嗪江蘇昆山龍燈瑞迪制藥有限公司。4.試劑二甲苯，北京化工；酵母膏，北京奧博星生物技術有限責任公司；尿酸試劑盒,黃嘌呤氧化酶測試盒，尿素氮試劑盒，均為南京建成生物工程研究所產品。實驗方法1、玉米須總黃酮對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響取雄性昆明種小鼠50只，稱質量后隨機分為空白組、陽性對照組(消炎痛)、YMXZHT高、中、低劑量組共5組。分別于每日早8時、晚8時灌胃給藥，給藥容量均為0.2ml/10g體量，連續給藥3d。末次給藥45min后，在右耳的前后兩面均勻涂布二甲苯O.02ml/只，以左耳作對照，45min后將其脫頸處死，剪下左、右耳，然后用直徑為7mm的打孔器分別在同一部位取下耳圓片，立即天平稱質量，計算耳殼的腫脹度，公式腫脹度(g)-右耳的質量(g)—左耳的質量(g)。2、玉米須總黃酮對小鼠的鎮痛作用(扭體法)觀察取健康昆明種小鼠60只，雌雄各半，隨機分為空白組、陽性對照組(消炎痛)和YMXZHT高、中、低劑量組共5組，每組12只。每日早晚8時各灌胃1次,連續給藥3天，末次給藥后lh每只小鼠腹腔注射O.6%醋酸溶液0.2ml。觀察并記錄注射醋酸后小鼠扭體潛伏期及20min內扭體(腹部內凹，軀干與后肢伸張、臀部高起)次數。3、玉米須總黃酮對酵母膏致小鼠高尿酸血癥模型血清尿酸(UA)、黃嘌呤氧化酶(XOD)、尿素氮(BUN)的影響取昆明種雄性小鼠70只，稱重后隨機分為空白組、模型組、陽性對照A組(別嘌呤醇)、陽性對照B組(苯溴馬隆)、YMXZHT高、中、低劑量組共7組。除空白組外，其余各組以酵母30g'kg-l'd灌胃，連續1周，第6天、第7天陽性對照A組和B組分別給予別嘌醇(40mg/kg)和苯溴馬隆(20呢/kg)灌胃，中藥各劑量組從第5天開始予以中藥灌胃，連續3天，第8天眼眶后靜脈叢取血，測定小鼠血清UA、XOD和BUN值。4、玉米須總黃酮對大鼠利尿作用150200g雄性大鼠預先使之適應代謝籠的生活環境12日后，用25ml'kg-l的38t:溫水灌胃，2小時內收集的尿量達到所灌入量的40%以上的動物可用于利尿實驗。將篩選出的50只大鼠依體重隨機分為5組，每組IO只。分組以及給藥方法見表4。各組按1.0mg/kg灌服相應的藥物，連續5天，每天一次，實驗前8小時動物禁食不禁水。實驗當天用38。C溫水灌胃25mlkg-1，每小時一次共兩次。第二次給完水后30分鐘給末次藥物。與給藥后收集0.5、1.0、2.0、4.0、8.0小時的尿量o5、統計學方法實驗結果以±表示，應用SPSSll.5統計分析軟件對實驗數據進行處理，各組間比較采用單因素方差分析。實驗結果1、玉米須總黃酮抑制二甲苯致小鼠耳腫脹的結果見表l。玉米須總黃酮高劑量組明顯抑制二甲苯致小鼠耳腫脹，與空白組比較，有極顯著性差異<0.01)，而中、低劑量組作用不明顯。低、中、高劑量組藥腫脹抑制率分別為12.01%、20.09%、40.17%，有隨劑量增加而增強的趨勢。表lYMXZHT對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響(n-lO)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注與空白組比較承P〈0.05**P〈0.012.玉米須總黃酮鎮痛(扭體法)作用研究結果見表2。玉米須總黃酮高、中劑量組能明顯減少醋酸致小鼠的扭體次數，與空白組比較，有顯著性差異(P〈0.05),而低劑量組作用不顯著。低、中、高劑量組均有延長扭體潛伏期的作用趨勢，且有隨劑量增加而作用增強的趨勢。表2玉米須總黃酮對醋酸致痛小鼠潛伏期及扭體次數的影響(n=12)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>YMXZHT中劑量組1956.99±4.2815.17±11.92*YMXZHT低劑量組97.55.39±0.6923.08±5.02注與空白組比較承P〈0.05**P<0.013.玉米須總黃酮對酵母膏致小鼠高尿酸血癥模型血清UA、XOD、BUN的影響結果見表3。模型組與空白組比較，UA、XOD、BUN明顯升高，有顯著性差異(P〈0.01)，說明造模成功。陽性對照A組、陽性對照B組及玉米須總黃酮各劑量組血清UA值較模型組均降低，有顯著差異(P〈0.05或P〈0.01);但陽性對照A組(別嘌呤醇)和玉米須總黃酮高劑量組降低UA更明顯，有極顯著差異(P〈0.01)。與模型組相比，陽性對照A組及玉米須總黃酮各劑量組均能降低XOD值，有顯著差異(P〈0.01);而陽性對照B組作用不明顯。與模型組相比，陽性對照B組及玉米須總黃酮各劑量組均能明顯降低BUN值，有顯著差(P〈0.01)。表3玉米須總黃酮對酵母膏致高尿酸血癥<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注與空白組比較AAP〈0.01;與模型組比較，*P〈0.05**P〈0.01。4、玉米須總黃酮對大鼠利尿作用結果發現玉米須總黃酮大、中、小劑量組在給藥14小時有明顯的利尿作用。見表4。<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>空白組生理鹽水0.90±0.920.96±0.311.02±0.510.86±0.421.48±0.68氫氯噻嗪101.47±0.752.65±1.23***1.81±0.35***2.66±0.73***1.83士0.77YMXZHT高劑2701.40±0.681.84±0.79林2.26±1.15林2.00±0.86林1.30±0.95量組YMXZHT中劑1351.44±0.711.83±1.20*1.71±0.81*1.29±0.41*1.60±1.33*量組YMXZHT低劑67.51.01±0.821.03±0.771.67±0.791.21±0.561.08±0.67量組與空白組比較氺P〈0.05**P〈0.01***P<0.0015、小結本實驗證實玉米須總黃酮能明顯抑制二甲苯致小鼠耳腫脹，有顯著的抗炎作用，高劑量組效果好于對照組消炎痛組；能減少醋酸致小鼠扭體次數、延長潛伏期，有良好的鎮痛效果；能夠通過抑制黃嘌呤氧化酶而減少尿酸生成，且玉米須總黃酮高、中、低各劑量組效果均好于對照組苯溴馬隆；能夠降低尿素氮，改善腎功能，且玉米須總黃酮高、中、低各劑量組效果均好于對照組別嘌呤醇，且玉米須總黃酮高、中劑量組均有明顯的利尿作用，且在試驗過程中未見動物死亡。因此，本試驗研究為玉米須總黃酮治療痛風的有效性及安全性提供了有力的實驗依據，但對于其抗炎、鎮痛、降尿酸的機制，仍待進一步作深層次探討。具體實例下列實施例旨在進一步舉例描述本發明，而不是以任何方式限制本發明，再不背離本發明的精神和原則的前提下，對本發明所做的本領域普通技術人員容易實現的任何改動或改變都將落入本發明的權利要求范圍之內。實施例l取玉米須3Kg，除去雜質，剪成段約3cm，1050倍量5(m乙醇7(TC回流提取3次，每次提取l小時，過濾，合并濾液，減壓回收溶劑，濃縮成稠膏，55°C，0.05Mpa條件下減壓干燥，粉碎成細分；去干粉加水溶解，經大孔樹脂柱分離，以水、10%、30%、50%、70%、90%的乙醇依次洗脫，得到分離物。回收個部分洗脫液，濃縮，7(TC，0.05Mpa條件下減壓干燥，粉碎成細分，即得本發明產品。實施例2取玉米須6Kg，除去雜質，剪成段約4cm，50倍量95%乙醇80°(:回流提取4次，每次提取2小時，過濾，合并濾液，減壓回收溶劑，濃縮成稠膏，8(TC，0.05Mpa條件下減壓干燥，粉碎成細分；去干粉加水溶解，經大孔樹脂柱分離，以水、10%、30%、50%、70%、90%的乙醇依次洗脫，得到分離物。回收個部分洗脫液，濃縮，60°C，0.05Mpa條件下減壓干燥，粉碎成細分，即得本發明產品。實施例3滴丸的制備取玉米須抗痛風活性提取物100g與3倍量聚乙二醇6000經混勻、溶化、滴制、冷卻、吸干而制成滴丸。其他項目應符合中華人們共和國藥典2005版滴丸項目的有關要求。實施例4片劑的制備取玉米須抗痛風活性提取物1000g，要用淀粉500g，混合均勻，用適量乙醇制粒，經整粒機整粒，壓片，每片0.25g，口服每次l-2片，每日兩次。其他項目應符合中華人們共和國藥典2005版片劑項目的有關要求。實施例5膠囊劑的制備取玉米須抗痛風活性提取物500g，要用淀粉500g，混合均勻，裝入O弁膠囊，每粒0.30g，口服每次1-2粒，每日兩次。其他項目應符合中華人們共和國藥典2005版膠囊項目的有關要求。實施例6顆粒劑的制備取玉米須抗痛風活性提取物100g，要用淀粉1000g，糖粉400g,混合均勻，用適量乙醇制粒、干燥、整粒、分裝即得。口服，一次5g，每日兩次。其他項目應符合中華人們共和國藥典2005版顆粒劑項目的有關要求。權利要求1.一種玉米須提取物取玉米須，除去雜質，剪成段約3-4cm，10～50倍量50-95％乙醇70-80℃回流提取3～4次，每次提取1～2小時，過濾，合并濾液，減壓回收溶劑，濃縮成稠膏，40℃-80℃，0.05Mpa條件下減壓干燥，粉碎成細分；取干粉加水溶解，經大孔樹脂柱分離，以水、10％、30％、50％、70％、90％的乙醇依次洗脫，得到分離物；回收個部分洗脫液，濃縮，40℃-80℃，0.05Mpa條件下減壓干燥，粉碎成細粉，即得。2.權利要求1所述玉米須提取物的制備方法，包括如下步驟取玉米須，除去雜質，剪成段約3-4cm，1050倍量50-95%乙醇70-80"回流提取34次，每次提取12小時，過濾，合并濾液，減壓回收溶劑，濃縮成稠膏，40°C-80°C，0.05Mpa條件下減壓干燥，粉碎成細分；去干粉加水溶解，經大孔樹脂柱分離，以水、10%、30°/。、50%、70%、90%的乙醇依次洗脫，得到分離物；回收個部分洗脫液，濃縮，40°C-80°C，0.05Mpa條件下減壓干燥，粉碎成細粉，即得。3.權利要求1所述玉米須提取物在制備治療痛風藥物中的應用。全文摘要本發明一種玉米須提取物，取玉米須，除去雜質，剪成段約3-4cm，10～50倍量50-95％乙醇70-80℃回流提取3～4次，每次提取1～2小時，過濾，合并濾液，減壓回收溶劑，濃縮成稠膏，40℃-80℃，0.05MPa條件下減壓干燥，粉碎成細分；去干粉加水溶解，經大孔樹脂柱分離，以水、10％、30％、50％、70％、90％的乙醇依次洗脫，得到分離物。回收個部分洗脫液，濃縮，40℃-80℃，0.05MPa條件下減壓干燥，粉碎成細分，即得。本發明還公開了玉米須子提取物在制備治療痛風藥物中的應用。文檔編號A61K36/899GK101444599SQ20081005148公開日2009年6月3日申請日期2008年11月28日優先權日2008年11月28日發明者曲曉波,胡東華,董金香,邱智東,陳雪松,隋殿軍申請人:長春中醫藥大學