專利名稱：一種治療重癥肌無力的藥物組合物及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種藥物組合物及其制備方法，尤其涉及一種主要以中草藥為原料制備而成的治療重癥肌無力的中成藥及其制備方法，屬于中藥領域。
背景技術：
重癥肌無力(Myasthenia Gravis，MG)是一種累及神經肌肉接頭乙酰膽堿受體的自身免疫性疾病，全身多組肌群均可受累。其主要特征是呈進行性的肌肉收縮無力和易疲勞，休息后可恢復，大部分病人早期表現為眼瞼下垂和復視。重癥肌無力在臨床上的發病率為每一百萬人80-200例，并且發病率與性別和年齡相關，好發于三十歲左右的年青女性和六十左右的老年男性。15％的病人肌無力僅累及眼外或眼瞼肌肉，大約85％的病人發展為全身性的肌無力，有少數病人甚至會發生肌無力危象，如不及時搶救會危及生命[1]。但目前對于重癥肌無力尚無特效的治療方法。臨床常用的膽堿酯酶抑制劑在臨床上已經應用了80多年，是治療重癥肌無力肯定有效的藥物。其原理是抗膽堿酯酶藥抑制了膽堿酯酶對乙酰膽堿的水解作用，結果乙酰膽堿能在突觸間隙維持較長時間不被水解，與受體結合的機會增加，從而使肌無力癥狀能部分逆轉。但該藥只能治標，不能根本改變免疫病理過程，長期用此治療方法會因為乙酰膽堿受體破壞的加重而失效，使患者神經肌肉接頭處的病理改變加重，對該藥的敏感性下降，甚至加速病情惡化。據臨床觀察，膽堿酯酶抑制劑不僅容易產生耐藥性，病情易于反復，長期應用副作用大，而且常會促進乙酰膽堿受體嚴重破壞，誘發膽堿能性危象，甚至在停藥時出現反跳，給患者帶來很大痛苦。在認識到本病本質上是自身免疫性疾病后，醫學界開始探索針對其免疫學發病機制的免疫療法。目前，臨床常采用糖皮質激素和細胞毒劑進行免疫抑制治療，但此類藥物毒副作用大而限制了臨床使用。糖皮質激素治療重癥肌無力的機制與其對免疫過程有抑制作用有關，它能抑制巨噬細胞對抗原的吞噬和處理，抑制γ-干擾素的產生從而抑制巨噬細胞對抗原的處理和提呈及抗原表達，并且能抑制白介素-2、γ-干擾素、集落刺激因子等減少，使得T細胞、B細胞介導的免疫應答減弱，從而使大多數患者的病情得到緩解；另一方面通過抑制AchRaB合成，使神經—肌肉接頭處突觸后膜上的AchR免受或少受自身免疫攻擊所造成的破壞。在臨床過程中會出現空腹血糖增高、心慌、失眠、向心性肥胖等副作用，還會誘發高血壓、糖尿病、柯興氏綜合征、股骨頭無菌性壞死、病理性骨折等疾病。據文獻報道[2～5]，在強的松等腎上腺類固醇激素減量過程中，往往因為減量過快誘發病情反復，甚至誘發肌無力危象的發生。
中醫對重癥肌無力的認識雖無完備系統的論述，但已有與重癥肌無力相似癥狀的“瞼廢”、“視歧”、“脾倦”、“痿證”等證名記載。如《素問·痿證》“陽明者，五臟六腑之海，主潤宗筋，宗筋主束骨而利機關也。沖脈者，經脈之海也，主滲灌溪谷，與陽明合于宗筋，陰陽總宗筋之會，……皆屬于帶脈而統于督脈，故陽明虛則宗筋縱，帶脈不引，故足痿不用也。”眼肌型重癥肌無力以一或兩側眼瞼下垂、復視、眼球活動受限為主要表現，相當于中醫文獻所說的“睢目”、“侵風”(《諸病源候論》)或“瞼廢”(《目經大成》)。《諸病源侯論》“目是臟腑血氣精華，肝之外侯，然則五臟六腑之血氣，皆上榮于目也，若血氣虛則腠理開、衛外不固而受風，風客于瞼膚之間，所以其皮緩縱，垂復于目，則不能開。”中醫認為，眼肌型重癥肌無力的病機主要是脾腎兩虛，病因可歸納為先天稟賦不足、情志刺激、過度疲勞、外邪侵襲或后天失養。《難經·十六難》說“怠惰、嗜臥，四肢不收，有事者脾病也”。中醫眼科的五輪學說中肉輪即眼瞼(胞瞼)，屬脾胃，司開合；若脾胃氣虛可致眼瞼下垂不舉。瞳仁為水輪屬腎，腎主藏精，目為肝之外候，肝開竅于目，肝主藏血，肝腎同源；若肝血腎精不足，精血不能上注于目，則出現復視、眼球轉動不靈活。在治療上，歷代醫家大多遵循《素問·痿論篇》之“治痿獨取陽明”理論，注重健脾補胃，以養五臟，兼顧祛邪。近年來，中醫中藥治療重癥肌無力的報道很多，許多醫家運用中醫治療該病進行了積極的探索，大多是從補益脾腎入手，對提高和鞏固療效起著非常重要的作用。但由于MG反復發作，遷延不愈，需要長期服藥治療，而傳統中藥湯劑較為繁瑣、不便，難以迅速及時地服藥，影響療效的發揮；加之MG的具體分型尚未標準化、規范化，傳統中藥湯劑的臨床觀察往往缺乏可比性和重復性，況且方藥的隨證加減又嚴重地影響了成藥的研制和劑型的改進。所以，為適應臨床治療的需要，從中醫理論出發，開發治療重癥肌無力安全有效的中藥新藥，仍是目前的重要研究方向。

發明內容
本發明首先所要解決的技術問題是克服現有技術的不足，提供一種新的療效顯著、臨床用藥安全的治療重癥肌無力的藥物組合物。
本發明首先所要解決的技術問題是通過以下技術途徑來實現的一種治療重癥肌無力的藥物組合物，包括以下重量份的原料藥制成何首烏2-6份、龜板2-6份、人參1.5-6份、紅景天2-8份、郁金2-6份、白術2-5份和遠志1-3份。
本發明藥物配方中，各原料藥的重量份優選為何首烏4份、龜板4份、人參3份、紅景天4份、郁金3份、白術3份和遠志1份。
上述原料中，所述的何首烏優選為制何首烏；人參優選為生曬參，而且，人參可用刺五加或西洋參所替代。白術優選為炒白術或生白術。制首烏、生曬參、炒白術或生白術的炮制方法可參照《中藥大辭典》(上海科學技術出版社)一書所記載的方法。
本發明藥物組合物基于中醫藥治療重癥肌無力的辨病與辨證相結合原則，標本兼治，虛實并治，篩選出健脾補腎、益氣填精、逐瘀通絡的天然植物藥，根據中醫理論組方，按照一定的重量配比制備而成。
本發明藥物配伍依據方中以制首烏和生曬參作為君藥，健脾補腎、益氣填精；配龜板、紅景天、白術為臣藥，輔助君藥發揮益氣健脾、滋陰補腎作用；郁金除濕化痰、行氣活血為佐；再用遠志為使藥，以其開竅通絡的功效，輔助其它藥物達病之所。諸藥配伍，補益中寓通散，標本兼顧，共奏健脾補腎、逐瘀通絡之功，臨床上可用于脾腎兩虛、絡脈瘀阻型重癥肌無力病證。
方中何首烏始載于《開寶本草》，又名烏肝石、赤首石、夜交藤，是蓼科植物何首烏(Polygonummul tiflorum Thunb.)的塊根。制首烏為何首烏經與黑豆汁、黃酒拌勻，隔水燉制品。何首烏味苦、甘、澀，性微溫，歸肝、腎經。具有補肝腎、益精血、烏須發、強筋骨之功效，是滋補肝腎常用中藥之一。臨床中常用于治療肝腎精血虧虛所致的頭昏目眩、須發早白、腰膝酸軟及遺精等。《本草匯言》云何首烏“制熟氣溫，無毒。”《何首烏傳》載“長筋力，益精髓，壯氣，駐顏，黑發，延年。”《滇南本草》謂其“澀精，堅腎氣”。《藥品化義》指出“益肝，斂血，滋陰。治腰膝軟弱，筋骨酸痛。”所以，本發明藥物用它作為君藥，可以補肝腎、益精血、強筋骨，治療上述重癥肌無力病癥的作用。
人參為五加科人參屬植物人參Panaxginseng.C.A.Mey-er.的根。本發明優選用生曬參，其炮制方法如下將人參洗刷干凈后，日曬一天后，再用硫磺熏過曬干而成。人參味甘、微苦，性平，歸肺、脾、心、腎經。功能大補元氣，補脾益肺，生津止渴，安神益智。《本經》中記載，人參“主補五臟，安精神，定魂魄。”《藥性論》說“主五臟氣不足，五勞七傷，虛損痿弱。”《醫學啟源》“治脾肺陽氣不足，及肺氣喘促，短氣少氣，補中緩中。”以上的文獻記載表明人參善大補元氣，對全身具有良好的強壯作用，“能回陽氣于垂絕，去虛于俄頃，”為治虛勞內傷第一要藥，具有很好的補氣健脾功效，對于脾腎虛弱、精氣內虧導致的重癥肌無力可起到很好的治療作用。所以，本發明藥物用它作為君藥，治療上述的重癥肌無力病癥。
龜板為龜科動物烏龜Chinemys reevesii(Gray)的甲殼。味咸、甘，性微寒，歸肝、腎、心經。具有滋陰潛陽，補腎健骨，補心安神。《本經》謂其主治“腎陰不足，筋骨不健，腰膝痿弱。”《別錄》載其主“不可久立，傷寒勞復。”《日用本草》“治腰膝酸軟，不能久立。”《本草衍義》“治勞倦”、“治四肢無力”。朱丹溪以龜甲為主，配黃柏、牛膝、陳皮等，治痿厥、筋骨軟，氣血俱虛甚者(《丹溪心法》補腎丸)。《攝生秘剖》中龜鹿二仙膏以龜甲配鹿茸、人參、枸杞子，治虛損精極者，瘦削少氣，目視不明等證。從以上這些文獻記載來看，龜板有滋陰補腎之功，方中助制首烏共起補腎益精之功，對肝腎虛弱引起的諸多疾病可以起到很好的治療作用，用作臣藥。
紅景天是景天科大花紅景天Rhodiolacrendata.的根。味甘、微酸，性平，歸心、肝經。漢藏醫藥古籍《本草綱目》、《神農本草》、《藏藥本草》、《川度本草》、《四部醫典》等均記載了其藥用價值，稱其為“火焰草”、“八寶草”，有扶正固體，醒腦瞑目、輕身益氣，久服通神不老之功效。99年版《中華人民共和國藥典》和77年《藏藥標準》均以收入被譽為“高原人參”。作為藥用的見記載的有《中華人民共和國藥典》77年版和《四川省中成藥標準》77.年版，記載的為大花紅景天和狹葉紅景天，《中國藥典》77年版的成方制劑“九味石灰華散”中有紅景天，它是作為“清熱”“滋補元氣”而使用。從以上這些文獻資料來看，紅景天有著很好的益氣之功，在本發明藥物中助人參益氣，針對精氣內虧等病癥可起到較好的治療作用，所以，在方中用作臣藥。
白術為菊科植物白術Atractylodes macrocephala Koidz的干燥根莖。本品首載于《本經》，列為上品。味苦、甘，性溫，歸脾、胃經。功能健脾益氣，燥濕利水。《本經》“主風寒濕痹，死肌。”《別錄》“主大風在身面，風眩頭痛，目淚出。”《日華子》“治一切風疾，五勞七傷，冷氣腹脹。補腰膝，消痰……及筋骨弱軟。”《醫學啟源》“除濕益燥，和中益氣。其用有九溫中，一也；去脾胃中濕，二也；除胃熱，三也；強脾胃，進飲食，四也；和胃，生津液，五也；主肌熱，六也；治四肢困倦，目不欲開，怠惰嗜臥，不思飲食，七也。”《衛生家寶》中“溫脾湯”即以白術配合人參主治脾胃久虛證。所以，本品在本發明藥物中也用作臣藥，起到輔助治療重癥肌無力等病癥的作用。
郁金是姜科植物溫郁金Curcumawenyujin Y.H.chenetC.Ling、姜黃CurcumaLougaL、廣西莪術Curcumakwangsiensis S.G.LeeetC.F.Liang、蓬莪術Curcumaphaeocaulis Val.的干燥塊根。味辛、苦，性寒，歸心、肝、膽經。具有活血化瘀、行氣解郁、清心涼血、疏肝利膽之功。《新修本草》載其“下氣，生肌，止血，破惡血。”《本草備要》“行氣，解郁，泄血，破瘀。”郁金在本發明藥物中可以活血化瘀、行氣解郁，起到輔助治療重癥肌無力等病癥的作用，方中是為佐藥。
遠志為遠志科植物細葉遠志Polygala tenuifolia Willd.的根。味苦辛，性溫，歸心、腎經。功能祛痰解郁，安神益智。《本經》“補不足，除邪氣，利九竅，益智慧，耳目聰明，不忘，強志倍力。”《日華子本草》“主膈氣驚魘，長肌肉，助筋骨。”《本草再新》“行氣散郁，并善豁痰。”方中是為使藥，以開竅通絡，助藥達病之所。
本發明人經過大量的試驗發現，上述配方與下述重量份的原料藥組合則具有更好的療效山茱萸2-5重量份、黃柏1-3重量份和陳皮1-3重量份。優選與以下重量份的原料組合山茱萸3重量份、黃柏1重量份和陳皮2重量份。
山茱萸為山茱萸科植物山茱萸Cornus officinalis Sieb.et Zucc.的干燥成熟果肉。味酸，性微溫，歸肝、腎經。具有補益肝腎，收斂固脫作用。《本經》載其“溫中，逐寒濕痹”。《雷過炮炙論》謂“壯元氣，秘精”。《別錄》云其“強陰益精，安五臟，通九竅，止小便利，明目，強力長年”。《藥性論》“補腎氣，添精髓”。《本草再新》“益氣養陰，補腎平肝，溫中發汗。”所以，本品在本發明藥物中起到輔助治療重癥肌無力等病癥的作用。
黃柏為蕓香科植物黃檗Phellodendron amurense Rupr.或黃皮樹Phellodendron chinense Schneid.的干燥樹皮。味苦、性寒，歸腎、膀胱、大腸經。能清熱燥濕，瀉火解毒，消腫祛腐。《本經》謂“主五臟腸胃中結熱”。《別錄》“療驚氣在皮間”。《日華子》“安心除勞，治骨蒸，洗肝，明目，多淚，口干”。《醫學啟源》云其為“癱瘓必用之藥也。……補腎氣不足，壯骨髓”。《脾胃論》“除濕熱為痿，救足膝無力，亦除陰汗、陰痿。”所以，黃柏在本方中可以輔助君藥和臣藥燥濕健脾作用。
陳皮又名橘皮，作為藥用始載于《神農本草經》，列為上品。為蕓香科植物橘Citrus reticulate Blanco.及其栽培變種的成熟果皮。味辛、苦，性溫，歸脾、胃、肺經。功能理氣健脾、燥濕化痰。《本經》認為其“主胸中瘕熱，逆氣，利水谷，久服去臭下氣。”《別錄》“下氣……利小便，主脾不能消谷，氣沖胸中。”《藥性論》“治胸膈間氣，開胃，主氣痢，消痰涎。”《本草拾遺》“去氣，調中。”《珍珠囊》“利肺氣。”《醫林纂要·藥性》更明確指出“上則瀉肺邪，降逆氣；中則燥脾濕，和中氣；下則舒肝木，潤腎命。主于順氣，消痰，去邪。”陳皮在本發明藥物中可以理氣健脾、燥濕化痰，起到輔助治療重癥肌無力等病癥的作用。
在上述藥物基礎上與再與以下重量份的原料藥配伍組合可達到最佳的治療效果蛤蟆油1-4份，紫河車、羊胎素或鹿胎1-4份；優選為蛤蟆油1份，紫河車、羊胎素或鹿胎1份。因為，蛤蟆油(來源及炮制方法將蛙科動物中國林蛙雌蛙的輸卵管干燥而得)，性味甘、咸、平，具有補腎益精、養陰潤肺之功效；紫河車、羊胎素或鹿胎均具有補氣、養血、益精、抗疲勞等功效，上述藥物可起到輔助治療重癥肌無力等病癥的作用。
本發明所用到的原料藥的來源及規格本發明所用到的原料藥均可從普通醫藥商店購買得到，其規格如下龜板本品為龜科動物Chinemys reevesii(Gray)的腹甲。(樣品為飲片炮制品)經鑒定符合《中國人民共和國藥典》2000年版一部第143頁龜甲項下的有關規定。
何首烏何首烏為蓼科植物何首烏Polygonum multiflomm Thunb的干燥塊根。(樣品為飲片炮制品)。經鑒定符合《中國人民共和國藥典》2000年版一部第140頁制何首烏項下的有關規定。
山茱萸本品為山茱萸科植物山茱萸Cornus officinalis Sieb.Et Zucc.的干燥成熟果肉。經鑒定符合《中國人民共和國藥典》2000年版一部第22頁山茱萸項下的有關規定。
人參本品為五加科植物人參Panax ginseng C.A.Mey.的干燥根。經鑒定符合《中國人民共和國藥典》2000年版一部第6頁人參項下的有關規定。
白術本品為菊科植物白術Atractylodes macrocephala Koidz.的干燥根莖。(樣品為飲片炮制品)經鑒定符合《中國人民共和國藥典》2000年版一部第77頁白術項下的有關規定。
紅景天本品為景天科植物大花紅景天Rhodiola crenulata(Hook.F.etThoms)H.Ohba的干燥根及根莖。
郁金本品為姜科植物溫郁金Curcuma wenyujin Y.H.Chen et C.Ling的干燥塊根。經鑒定符合《中國人民共和國藥典》2000年版一部第166頁郁金項下的有關規定。
遠志本品為遠志科植物遠志Polygala tenuifolia Willd.的干燥根。經鑒定符合《中國人民共和國藥典》2000年版一部第123頁遠志項下的有關規定。
黃柏本品為蕓香科植物黃皮樹Phellodendron chinense Schneid.的干燥樹皮(樣品為絲狀飲片)。經鑒定符合《中國人民共和國藥典》2000年版一部第251頁黃柏項下的有關規定。
陳皮本品為蕓香科植物橘Citrus reticulate Blanco或其栽培變種的干燥成熟果皮(樣品為絲狀飲片)。經鑒定符合《中國人民共和國藥典》2000年版一部第148頁陳皮項下的有關規定。
本發明藥物組合物可以采用中藥制劑的常規方法制備成任何常規內服制劑。
一種制備本發明藥物組合物的方法，包括以下步驟1)按以下重量份稱取各原料藥何首烏2-6份、龜板2-6份、人參1.5-6份、紅景天2-8份、郁金2-6份、白術2-5份和遠志1-3份；2)將人參、何首烏和紅景天用60％乙醇加熱回流提取三次，濾取醇提液，減壓回收得浸膏1備用；3)白術和郁金加水5倍，水蒸氣蒸餾法提取揮發油，收取揮發油，用β-環糊精包合，得干包結物備用；藥渣與遠志合煎二次，濾過，減壓濃縮加乙醇沉淀，放置過夜，濾取上清液，減壓回收得浸膏2備用；4)龜板提取三次，將提取液減壓濃縮，離心，上清液減壓濃縮得浸膏3備用；5)將以上3種浸膏和干包結物合并，干燥，粉碎，即得本發明藥物。
優選的，一種本發明藥物活性組分的制備方法，包括以下步驟1)按以下重量份稱取各原料藥何首烏2-6份、龜板2-6份、人參1.5-6份、紅景天2-8份、郁金2-6份、白術2-5份和遠志1-3份；
2)將人參、何首烏和紅景天用60％乙醇加熱回流提取三次，每次加6倍重量乙醇，提取1.5小時；濾取醇提液，減壓回收乙醇至相對密度1.28～1.33(50℃～60℃)，得浸膏1備用；3)白術和郁金加水5倍，水蒸氣蒸餾法提取揮發油6小時，收取揮發油，用β-環糊精(β-CD)包合；包合條件揮發油∶β-CD＝1∶8，包合溫度40℃，攪拌時間2.5小時，放置室溫，冷藏過夜，濾取沉淀物，50℃干燥，得干包結物備用；藥渣與遠志合煎二次，第一次加水12倍，提取1.0小時，第二次加水10倍，提取0.5小時，濾過，減壓濃縮至相對密度1.075～1.112(50～60℃)的濃縮液，將濃縮液加2倍乙醇沉淀，放置過夜，濾取上清液，減壓回收乙醇至相對密度為1.28～1.33(50℃～60℃)的浸膏，得浸膏2備用；4)龜板提取三次，每次加水10倍，提取2.5小時，藥液減壓濃縮至相對密度1.06(50℃)，離心，上清液減壓濃縮至相對密度1.28～1.33(50℃～60℃)，得浸膏3備用；5)將以上3種浸膏和干包結物合并，干燥，粉碎，即得本發明藥物的活性組分。
本發明藥物如果還與山茱萸、黃柏和陳皮組合，其制備方法如下1)按以下重量份稱取各原料藥何首烏2-6份、龜板2-6份、人參1.5-6份、紅景天2-8份、郁金2-6份、白術2-5份、遠志1-3份、山茱萸2-5重量份、黃柏1-3重量份和陳皮1-3重量份；2)將人參、何首烏、紅景天、山茱萸和黃柏用60％乙醇加熱回流提取三次，每次加6倍重量乙醇，提取1.5小時；濾取醇提液，減壓回收乙醇至相對密度1.28～1.33(50℃～60℃)，得浸膏1備用；3)白術、郁金和陳皮加水5倍，水蒸氣蒸餾法提取揮發油6小時，收取揮發油，用β-環糊精(β-CD)包合；包合條件揮發油∶β-CD＝1∶8，包合溫度40℃，攪拌時間2.5小時，放置室溫，冷藏過夜，濾取沉淀物，50℃干燥，得干包結物備用；藥渣與遠志合煎二次，第一次加水12倍，提取1.0小時，第二次加水10倍，提取0.5小時，濾過，減壓濃縮至相對密度1.075～1.112(50～60℃)，加2倍乙醇沉淀，放置過夜，濾取上清液，減壓回收乙醇至相對密度為1.28～1.33(50℃～60℃)浸膏，得浸膏2備用；4)龜板提取三次，每次加水10倍，提取2.5小時，藥液減壓濃縮至相對密度1.06(50℃)，離心，上清液減壓濃縮至相對密度1.28～1.33(50℃～60℃)，得浸膏3備用；5)將以上3種浸膏和干包結物合并，干燥，粉碎，即得本發明藥物的活性組分。
本發明藥物活性組分可以加入制備不同劑型時所需的各種輔料，如例如崩解劑、潤滑劑、黏合劑等以常規的中藥制劑方法制備成任何一種常用的口服制劑，例如可以是丸劑、膠囊劑、片劑(含泡騰片)、散劑、顆粒劑或口服液等。優選為顆粒劑。
用法與用量本發明藥物的用藥量取決于具體劑型，病人的年齡、體重、健康狀況等因素。作為指導顆粒劑，成人每次服5g，每日3次；兩個月為一個療程，一般治療1-6個療程。


圖1為本發明藥物組合物制備工藝流程圖。
具體實施例方式
以下通過實施例來進一步描述本發明，應該理解的是，這些實施例僅用于例證的目的，決不限制本發明的范圍。
顆粒劑的制備按下述重量稱取各原料(單位g)何首烏400、龜板400、人參300、紅景天400、郁金300、白術300、遠志100；原料前處理將何首烏炮制為制首烏；人參炮制為生曬參；白術炮制為生白術。上述原料的炮制方法參照《中藥大辭典》(上海科學技術出版社)一書所記載的方法；
將生曬參、制首烏和紅景天用60％乙醇加熱回流提取三次，每次加6倍重量乙醇，提取1.5小時；濾取醇提液，減壓回收乙醇至相對密度1.28～1.33(50℃～60℃)，得浸膏1備用；白術和郁金加水5倍，水蒸氣蒸餾法提取揮發油6小時，收取揮發油，用β-環糊精(β-CD)包合；包合條件揮發油∶β-CD＝1∶8，包合溫度40℃，攪拌時間2.5小時，放置室溫，冷藏過夜，濾取沉淀物，50℃干燥，得干包結物備用；藥渣與遠志合煎二次，第一次加水12倍，提取1.0小時，第二次加水10倍，提取0.5小時，濾過，減壓濃縮至相對密度1.075～1.112(50～60℃)，加2倍乙醇沉淀，放置過夜，濾取上清液，減壓回收乙醇至相對密度為1.28～1.33(50℃～60℃)浸膏，得浸膏2備用；龜板提取三次，每次加水10倍，提取2.5小時，藥液減壓濃縮至相對密度1.06(50℃)，離心，上清液減壓濃縮至相對密度1.28～1.33(50℃～60℃)，得浸膏3備用；以上3種浸膏和干包結物合并，干燥，粉碎，加入1∶1的乳糖和糊精適量，制粒，分裝即得。
顆粒劑的制備按下述重量稱取各原料(單位g)何首烏200、龜板200、人參150、紅景天200、郁金200、白術200、遠志100；原料前處理將何首烏炮制為制首烏；人參炮制為生曬參；白術炮制為炒白術。上述原料的炮制方法參照《中藥大辭典》(上海科學技術出版社)一書所記載的方法；將生曬參、制首烏和紅景天用60％乙醇加熱回流提取三次，每次加6倍重量乙醇，提取1.5小時；濾取醇提液，減壓回收乙醇至相對密度1.28～1.33(50℃～60℃)，得浸膏1備用；白術和郁金加水5倍，水蒸氣蒸餾法提取揮發油6小時，收取揮發油，用β-環糊精(β-CD)包合；包合條件揮發油∶β-CD＝1∶8，包合溫度40℃，攪拌時間2.5小時，放置室溫，冷藏過夜，濾取沉淀物，50℃干燥，得干包結物備用；藥渣與遠志合煎二次，第一次加水12倍，提取1.0小時，第二次加水10倍，提取0.5小時，濾過，減壓濃縮至相對密度1.075～1.112(50～60℃)，加2倍乙醇沉淀，放置過夜，濾取上清液，減壓回收乙醇至相對密度為1.28～1.33(50℃～60℃)浸膏，得浸膏2備用；龜板提取三次，每次加水10倍，提取2.5小時，藥液減壓濃縮至相對密度1.06(50℃)，離心，上清液減壓濃縮至相對密度1.28～1.33(50℃～60℃)，得浸膏3備用；以上3種浸膏和干包結物合并，干燥，粉碎，加入1∶1的乳糖和糊精適量，制粒，分裝即得。
顆粒劑的制備按下述重量稱取各原料(單位g)何首烏600、龜板600、人參600、紅景天800、郁金600、白術500、遠志300；原料前處理將何首烏炮制為制首烏；人參炮制為生曬參；白術炮制為生白術或炒白術。上述原料的炮制方法參照《中藥大辭典》(上海科學技術出版社)一書所記載的方法；將生曬參、制首烏和紅景天用60％乙醇加熱回流提取三次，每次加6倍重量乙醇，提取1.5小時；濾取醇提液，減壓回收乙醇至相對密度1.28～1.33(50℃～60℃)，得浸膏1備用；白術和郁金加水5倍，水蒸氣蒸餾法提取揮發油6小時，收取揮發油，用β-環糊精(β-CD)包合；包合條件揮發油∶β-CD＝1∶8，包合溫度40℃，攪拌時間2.5小時，放置室溫，冷藏過夜，濾取沉淀物，50℃干燥，得干包結物備用；藥渣與遠志合煎二次，第一次加水12倍，提取1.0小時，第二次加水10倍，提取0.5小時，濾過，減壓濃縮至相對密度1.075～1.112(50～60℃)，加2倍乙醇沉淀，放置過夜，濾取上清液，減壓回收乙醇至相對密度為1.28～1.33(50℃～60℃)浸膏，得浸膏2備用；龜板提取三次，每次加水10倍，提取2.5小時，藥液減壓濃縮至相對密度1.06(50℃)，離心，上清液減壓濃縮至相對密度1.28～1.33(50℃～60℃)，得浸膏3備用；以上3種浸膏和干包結物合并，干燥，粉碎，加入1∶1的乳糖和糊精適量，制粒，分裝即得。
口服液的制備按下述重量稱取各原料(單位g)
何首烏400、龜板400、刺五加300、紅景天400、郁金300、白術300、遠志100、山茱萸300、黃柏100、陳皮200；原料前處理將何首烏炮制為制首烏；白術炮制為生白術。上述原料的炮制方法參照《中藥大辭典》(上海科學技術出版社)一書所記載的方法。
將刺五加、何首烏、紅景天、山茱萸和黃柏用60％乙醇加熱回流提取三次，每次加6倍重量乙醇，提取1.5小時；濾取醇提液，減壓回收乙醇至相對密度1.28～1.33(50℃～60℃)，得浸膏1備用；白術、郁金和陳皮加水5倍，水蒸氣蒸餾法提取揮發油6小時，收取揮發油備用；藥渣與遠志合煎二次，第一次加水12倍，提取1.0小時，第二次加水10倍，提取0.5小時，濾過，減壓濃縮至相對密度1.075～1.112(50～60℃)，加2倍乙醇沉淀，放置過夜，濾取上清液，減壓回收乙醇至相對密度為1.28～1.33(50℃～60℃)浸膏，得浸膏2備用；龜板提取三次，每次加水10倍，提取2.5小時，藥液減壓濃縮至相對密度1.06(50℃)，離心，上清液減壓濃縮至相對密度1.28～1.33(50℃～60℃)，得浸膏3備用；將以上3種浸膏合并后溶于3000ml純水中，充分攪拌均勻于-5～5℃溫度下放置24小時，取上清液，板框過濾器過濾2次，得過濾液備用；將0.3ml的吐溫-80加入到所提取的揮發油中，充分攪拌均勻后與過濾液、8ml的山梨酸混合均勻，加純化水至4000ml，攪拌均勻，分裝(每支20ml)，滅菌，燈檢，包裝，即得。
丸劑的制備按下述重量稱取各原料(單位g)何首烏400、龜板400、西洋參300、紅景天400、郁金300、白術300、遠志100、蛤蟆油100、紫河車100；原料前處理將何首烏炮制為制首烏；白術炮制為生白術。上述原料的炮制方法參照《中藥大辭典》(上海科學技術出版社)一書所記載的方法。
將西洋參、制首烏、紅景天、山茱萸和黃柏用60％乙醇加熱回流提取三次，每次加6倍重量乙醇，提取1.5小時；濾取醇提液，減壓回收乙醇至相對密度1.28～1.33(50℃～60℃)，得浸膏1備用；白術、郁金和陳皮加水5倍，水蒸氣蒸餾法提取揮發油6小時，收取揮發油，用β-環糊精(β-CD)包合；包合條件揮發油∶β-CD＝1∶8，包合溫度40℃，攪拌時間2.5小時，放置室溫，冷藏過夜，濾取沉淀物，50℃干燥，得干包結物備用；藥渣與遠志合煎二次，第一次加水12倍，提取1.0小時，第二次加水10倍，提取0.5小時，濾過，減壓濃縮至相對密度1.075～1.112(50～60℃)，加2倍乙醇沉淀，放置過夜，濾取上清液，減壓回收乙醇至相對密度為1.28～1.33(50℃～60℃)浸膏，得浸膏2備用；龜板提取三次，每次加水10倍，提取2.5小時，藥液減壓濃縮至相對密度1.06(50℃)，離心，上清液減壓濃縮至相對密度1.28～1.33(50℃～60℃)，得浸膏3備用；將以上3種浸膏和干包結物合并，干燥，粉碎，過100目篩，加入乳糖、糊精各300g，再加入煉蜜80-100g，合坨，制成濃縮水蜜丸，干燥，打光，分裝成每袋6g，即得。
本發明藥物藥效學試驗將本發明實施例1所制備的顆粒以下述劑量給藥10.0g、5.0g及2.5g生藥/kg體重灌胃小鼠，8.0g、4.0g及2.0g生藥/kg體重灌胃大鼠，4.0g、2.0g及1.0g生藥/kg體重灌胃家兔，通過試驗表明本發明藥物具有以下作用1.對重癥肌無力(EAMG)模型大鼠的影響本發明藥物大、中劑量藥物可明顯改善乙酰膽堿受體α亞單位多肽片斷所致EAMG模型大鼠(購自北京維通利華生物工程有限公司)的肌無力癥狀、延長游泳時間；降低血清Ach R-Ab滴度及TNF-α、IFN-γ含量，且對低頻刺激引起的造模大鼠肌電衰減和肌肉收縮力的衰減具有顯著的改善作用。但小劑量本發明藥物改善肌無力癥狀及延長游泳時間的作用不明顯。
2.對神經肌肉接點的影響膽堿受體阻滯劑三碘季銨酚可使骨骼肌松弛，兔(購自北京維通利華生物工程有限公司)頭下垂，大、中、小劑量本發明藥物均可顯著降低致使兔頭下垂的三碘季銨酚注射量，降低從垂頭到恢復抬頭所需時間(但小劑量組恢復時間與空白對照組差異無顯著性)。
3.對小鼠小腸運動的影響大劑量本發明藥物可以顯著減低小腸炭末推進距離及推進率。
4.抗疲勞作用大、中劑量本發明藥物可顯著延長正常小鼠負重游泳時間，降低高尿素模型小鼠血清尿素氮含量，但小劑量作用不明顯。
本發明藥物非臨床安全性試驗研究1.小鼠急性毒性試驗由于本發明藥物顆粒毒性較低，無法測出LD50，故對其最大耐受量進行測定。以小鼠(購自北京維通利華生物工程有限公司，雌雄各半，體重20±2g)能耐受的最大濃度6.5g生藥/ml、最大體積0.2ml/10g的藥量一日內連續2次灌胃小鼠(間隔8小時)20只，雌雄各半，連續觀察7天，未發生小鼠死亡，小鼠的大小便、飲食、體重、外觀、行為活動、呼吸等均未出現異常。總給藥量為260.0g生藥/kg體重，相當于臨床用量的433.3倍。在觀察期間，未發現動物有明顯中毒癥狀。
2.大鼠長期毒性試驗實驗選用SD大鼠(購自北京維通利華生物工程有限公司，雌雄各半，體重24±2g)，分別灌胃給予本發明實施例1所制備的顆粒30.0、15.0、7.5g生藥/kg體重/天(相當于人臨床用藥劑量的50.0、25.0、12.5倍)，對照組給予等體積蒸餾水，每組40只，雌雄各半。根據臨床試驗療程，長期毒性時間定為連續26周，給藥期間觀察記錄動物的行為表現，糞便性狀及其他癥狀體征。每周測一次體重和進食量，并根據體重情況調整給藥量，于實驗第13周、26周末和停藥后4周時分別對25％、50％和25％大鼠進行血象、尿常規、心電圖、血液生化及病理學檢查。結果顯示(1)本發明藥物顆粒三個劑量組大鼠的一般活動、精神狀態、毛發、糞便等與空白對照組相比均無明顯差異；(2)本發明藥物顆粒對大鼠體重增長、進食量無明顯影響；(3)各組外周血象，包括紅細胞、白細胞、血紅蛋白、紅細胞壓積、白細胞分類等均在正常范圍內波動；(4)各組尿常規及心電圖檢查未見異常；(5)各組生化指標包括ALT、AST、BUN、Crea、ALP、TP、ALB、T-CHO、GLU、T-BIL，與對照組相比無顯著性差異；(5)各主要臟器肉眼檢查未見明顯腫大、充血、粘連、壞死等病理變化。心、肝、脾、肺、腎、腦、垂體、視神經、甲狀腺、胰腺、胸腺、胃、十二指腸、子宮、卵巢、睪丸、附睪、前列腺等臟器系數與對照組相比，無顯著性差異。病理組織學檢查以上各組織及腹主動脈均未發現有由于藥物引起的病理形態學方面的改變，即無明顯的毒性反應。
本發明藥物治療重癥肌無力的臨床療效觀察一、一般資料1999年-2001年北京回民醫院中醫科住院病人27例，門診病人7例，共34例。34例中男性16例，女性18例；年齡在14歲以下8例，15-25歲3例，25-35歲9例，35-45歲3例，45-55歲3例，55-65歲8例；病程最長30年，最短者1個月。療程以2-4個月居多。詳見表1、表2。
表1 患者性別年齡分布情況

表2 患者病程(年)分布情況

二、診斷標準參照《中藥新藥治療重癥肌無力的臨床研究指導原則》診斷標準。
(1)有典型的橫紋肌無力及易疲勞表現，休息后減輕或朝輕暮重。
(2)新斯的明試驗陽性肌電圖檢查重復神經電刺激動作電位呈衰減效應。
(3)血清抗乙酰膽堿抗體陽性。
三、臨床分型參照《中藥新藥治療重癥肌無力的臨床研究指導原則》診斷標準。
(1)眼肌型僅表現眼臉下垂，眼外肌運動麻痹、復視或眼球固定等癥。
(2)延髓肌型主要表現構音困難，進食嗆咳，多講話后聲音降低，咀嚼乏力，僅能進食軟食，喝水從鼻孔流出，面部表情尷尬，吹氣漏風，閉嘴不緊。嚴重者完全無力咀嚼和吞咽，吐痰不出，甚則呼吸道阻塞而危及生命。
(3)脊髓肌型僅表現為兩上肢或下肢肌無力，多數在四肢帶肌受累后逐漸發展成全身肌無力。
(4)全身肌無力可以是急性起病，數月內同時出現眼肌、面肌、延髓肌、頸肌及四肢肌肉無力，也可由眼肌型、延髓肌型等逐步發展而來。
臨床分型結果本組34型，眼肌型17例(50％)，延髓型3例(8.82％)髓型3例(8.82％)，全身型11例(32.35％)。
四、辨證分型(1)脾氣虛型眼臉下垂，氣短乏力；四肢沉重，納少，大便溏薄；舌質淡，舌體胖嫩，舌苔薄白或白膩；脈細弱或細滑。
(2)脾腎陽虛四肢倦怠乏力，不耐疲勞；重則吞咽困難，飲水發嗆；腰膝酸軟；畏寒肢冷；舌質淡暗，舌體胖，苔薄白，脈沉細弦。
(3)肝腎精虧四肢酸軟無力；雙目凝視；重則吞咽困難，飲水發嗆；心煩少，目澀口干，面部烘熱；舌質紅，苔少，脈細弦數。
辨證分型結果本組34型，脾氣虛弱21例(61.76％)，脾腎陽虛7例(26.47％)，肝腎精虧4例(11.76％)，五、治療方法使用本發明實施例1所制備的顆粒劑進行治療。成人每次服5g，每日3次；兩個月為一個療程，根據病情輕重程度不同，治療1-6個療程不等。
六、療效評定標準參照《中藥新藥治療重癥肌無力的臨床研究指導原則》(1)臨床痊愈臨床癥狀和體征全部消失，恢復正常學習和工作，三個月無復發。
(2)顯效臨床癥狀和體征大部分消失，恢復部分工作或輕工作。
(3)有效臨床癥狀和體片有改善，一般生活可自理，但不能恢復工作。
(4)無效臨床癥狀和體征無改善。
七、觀察結果
(1)總療效本組34例，臨床治愈8例(23.53％)，顯效例8例(23.53％)，有效11例(32.35％)，無效7例(20.59％)。總有效率為79.41％。
表3 療效分析表

(2)辨證分型與療效脾氣虛弱型總有效率較高為85.71％，脾腎兩虛型次之為77.78％，肝腎精虧較差為50％。詳見下表。
表4 辨證分型療效分析表

(3)臨床分型與療效眼肌型17例，治愈8例，顯效4例，有效5例，無效0例，治愈率47.05％，顯效率75.29％，總有效率為100％；延髓型及全身型肌無力有效率為60％以上；脊髓型有效率為33％。詳見表5。
表5 臨床分型療效表

觀察結論通過臨床觀察，本發明藥物治療該病的總顯效率為47.06％，總有效率79.41％。特別是對于眼肌型重癥肌無力，有效率為100％，在臨床應用過程中沒有發現不良反應，僅有個別患者出現大便溏泄的現象，加用健脾類中藥癥狀即可改善。說明本發明藥物治療重癥肌無力有較為肯定的療效，而且臨床用藥安全。
權利要求
1.一種治療重癥肌無力的藥物組合物，包括以下重量份的原料藥制成何首烏2-6份、龜板2-6份、人參1.5-6份、紅景天2-8份、郁金2-6份、白術2-5份和遠志1-3份。
2.按照權利要求1的藥物組合物，其特征是各原料藥的重量份是何首烏4份、龜板4份、人參3份、紅景天4份、郁金3份、白術3份和遠志1份。
3.按照權利要求1的藥物組合物，其特征是還含有以下重量份的原料藥山茱萸2-5份、黃柏1-3份和陳皮1-3份。
4.按照權利要求3的藥物組合物，其特征是各原料藥的重量份是何首烏4份、龜板4份、人參3份、紅景天4份、郁金3份、白術3份、遠志1份、山茱萸3份、黃柏1份和陳皮2份。
5.按照權利要求1的藥物組合物，其特征是還含有以下重量份的原料藥蛤蟆油1-4份，紫河車、羊胎素或鹿胎1-4份。
6.按照權利要求1的藥物組合物，其特征是所述的何首烏是制何首烏；所述的白術是生白術或炒白術；所述的人參是生曬參。
7.按照權利要求1的藥物組合物，其特征是所述的人參用刺五加或西洋參代替。
8.按照權利要求1的藥物組合物，其特征是按照中藥制劑常規方法制備成顆粒劑、丸劑、膠囊劑、片劑、散劑、栓劑或口服液。
9.一種制備權利要求1的藥物組合物的方法，步驟如下1)按以下重量份稱取各原料藥何首烏2-6份、龜板2-6份、人參1.5-6份、紅景天2-8份、郁金2-6份、白術2-5份和遠志1-3份；2)將人參、何首烏和紅景天用60％乙醇加熱回流提取三次，濾取醇提液，減壓回收得浸膏1備用；3)白術和郁金加水5倍，水蒸氣蒸餾法提取揮發油，收取揮發油，用β-環糊精包合，得干包結物備用；藥渣與遠志合煎二次，濾過，減壓濃縮加乙醇沉淀，放置過夜，濾取上清液，減壓回收得浸膏2備用；4)龜板提取三次，將提取液減壓濃縮，離心，上清液減壓濃縮得浸膏3備用；5)將以上3種浸膏和干包結物合并，干燥，粉碎，即得本發明藥物。
10.權利要求1-8的任一項藥物組合物在制備治療重癥肌無力藥物中的用途。
全文摘要
本發明公開了一種新的治療重癥肌無力的藥物組合物，該藥物組合物包括以下重量份的原料藥制成何首烏2－6份、龜板2－6份、人參1.5－6份、紅景天2－8份、郁金2－6份、白術2－5份和遠志1－3份。本發明藥物活性組分可以加入制備不同劑型時所需的各種輔料，例如崩解劑、潤滑劑、黏合劑等，以常規的中藥制劑方法制備成任何一種常用的口服制劑，例如可以是丸劑、膠囊劑、片劑(含泡騰片)、散劑、顆粒劑或口服液等，優選為顆粒劑。臨床療效觀察證實，本發明藥物對重癥肌無力療效確切，而且臨床用藥安全。
文檔編號A61K35/56GK1903349SQ200510088649
公開日2007年1月31日 申請日期2005年7月29日 優先權日2005年7月29日
發明者卜綠萍, 蘭金初 申請人:卜綠萍, 蘭金初