專利名稱：一種具抗癌作用的類胡蘿卜素及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種從富含類胡蘿卜素的紅心鴨蛋中提取的具抗癌作用的類胡蘿卜素及其制備方法。
在湖區放養或飼養的蛋鴨中，當蛋鴨食用一定量的菹草或含菹草的飼料，其產下蛋的蛋黃呈紅色，稱為紅心鴨蛋。實驗證明，在紅心鴨蛋中形成蛋黃中紅色物質的主要成份為類胡蘿卜素，其含量最高可達5.8mg/100g。且與其紅色度成正相關。
應該說經常食用富含類胡蘿卜素的紅心鴨蛋和其它此類食品對人體會有一定的保健和抗癌作用，但常規的食用由于劑量偏低和不確定，人體消化和吸收的差異等因素影響，不足以取得顯著的抗癌治癌藥理效果。
本發明為解決上述提出的問題所采用的技術方案為從富含類胡蘿卜素的紅心鴨蛋的蛋黃中，用石油醚與丙酮混合溶劑提取、分離出含類胡蘿卜素的提取液，經真空濃縮后，將濃縮液經純化處理分離出類胡蘿卜素，再經低溫干燥制得純類胡蘿卜素劑料。
本發明制備類胡蘿卜素方法的技術方案為以富含類胡蘿卜素的紅心鴨蛋為原料，經常規清洗處理，將蛋黃與蛋清分離，通過冷凍干燥得凍干蛋黃粉備用，取一定量的凍于蛋黃粉用石油醚與丙酮混合溶劑提取，分離出提取液，在提取液中加入少量蒸餾水，靜置，使石油醚與丙酮分層，分離丙酮水層，用蒸餾水洗石油醚層2～3次，放出蒸餾水層，在石油醚層中加入少量無水硫酸鈉，分離出石油醚層，得主含類胡蘿卜素的提取液，在40℃下真空濃縮，將濃縮提取物上硅膠柱，先用石油醚與丙酮混合液洗脫非類胡蘿卜素成份，再用石油醚、丙酮、甲醇混合液洗脫出類胡蘿卜素成份，經低溫干燥處理即制得純類胡蘿卜素劑料。
上述制備方法中，提取類胡蘿卜素時，石油醚、丙酮混合溶劑中，石油醚與丙酮的混合比例按容量(V/V)計為1～5∶1；石油醚、丙酮混合溶劑與凍干蛋黃粉的液料比按V/W(容量/重量)計為3～4∶1；純化類胡蘿卜素時，石油醚、丙酮混合液的混合比例按容量(V/V)計為4～24∶1；石油醚、丙酮、甲醇混合液的混合比例按容量(V/V)計為8.7∶1∶0.3。
本發明的紅心鴨蛋由食用一定量的菹草或食用含菹草的飼料的蛋鴨所生產，紅心鴨蛋蛋黃的羅氏色度達12度以上，蛋黃中類胡蘿卜素的含量25～30mg/kg以上。
通過對本發明類胡蘿卜素所作的指紋鑒定圖譜(見附圖
)實驗表明紅心鴨蛋中紅色類胡蘿卜素成分與菹草中紅色類胡蘿卜素成分具有一致性，即菹草中紅色類胡蘿卜素成分被蛋鴨吸收并沉積于蛋黃中。
本發明的提取和純化過程應在40℃以下的條件下進行，為避免氧化，最好在惰性氣體環境下進行。
本發明的有益效果和功能活性作用在于1、通過本發明的類胡蘿卜素對S180腫瘤的抑制作用的探討和實驗，結果表明，該類胡蘿卜素對肝勻漿MDA的產生有顯著的抑制作用。對昆明小白鼠S180腫瘤具有顯著的抑制作用，且具明顯的量效關系，低、中、高劑量組的類胡蘿卜素對腫瘤的抑制率分別為23.2％、35.7％和42.9％，對腫瘤小鼠的內臟指數有明顯改善作用，并可顯著降低腫瘤小鼠血清MDA含量；2、本發明的類胡蘿卜素對人肝癌細胞QGY-7703凋亡實驗結果見表1，該實驗表明，該類胡蘿卜素具有抗人體肝癌細胞的作用，藥用及功能食品開發前景良好；3、本發明還具有設備簡便，產品提取率高，溶劑可回收的優點。
表1 類胡蘿卜素MTT實驗結果時間 濃度(μmol/L) n存活率(％)0.25 4 98.210.50 4 92.71.0 4 86.90.25 4 93.720.50 4 89.41.0 4 85.80.25 4 91.630.50 4 85.61.0 4 82.8
實施例1取原料紅心鴨蛋，紅心鴨蛋蛋黃的羅氏色度達19度，經常規清洗消毒處理，將蛋黃與蛋清分離，通過冷凍干燥得凍干蛋黃粉備用，取凍干蛋黃粉100克用石油醚∶丙酮(2∶1V/V)混合溶劑提取3次，每次用混合溶劑400毫升提取60分鐘，分離出提取液，加入20毫升蒸餾水，靜置，使石油醚與丙酮分層，放出丙酮層，蒸餾水洗2～3次，每次15毫升，放出水層，在石油醚層中加入3克無水硫酸鈉，回收石油醚層，得主含類胡蘿卜素的提取液，提取液在40℃下真空濃縮，將濃縮提取物上硅膠柱，先用石油醚∶丙酮混合液(24∶1V/V)洗脫非類胡蘿卜素，再用石油醚∶丙酮∶甲醇混合液(8.7∶1∶0.3V/V)洗脫出類胡蘿卜素成份，最后經低溫干燥處理即制得純類胡蘿卜素劑料。
實施例2取原料紅心鴨蛋，紅心鴨蛋蛋黃的羅氏色度達15度，經常規清洗消毒處理，將蛋黃與蛋清分離，通過冷凍干燥得凍干蛋黃粉備用，取凍干蛋黃粉100克用石油醚∶丙酮(1∶1V/V)混合溶劑提取3次，每次用提取液300毫升，提取50分鐘，分離出提取液，加入15毫升蒸餾水，靜置，使石油醚與丙酮分層，放出丙酮層，蒸餾水洗2～3次，每次20毫升，放出水層，在石油醚層中加入4克無水硫酸鈉，回收石油醚層，得主含類胡蘿卜素的提取液，提取液在40℃下真空濃縮，將濃縮提取物上硅膠柱，先用石油醚∶丙酮混合液(24∶1V/V)洗脫非類胡蘿卜素，再用石油醚∶丙酮∶甲醇混合液(8.7∶1∶0.3V/V)洗脫出類胡蘿卜素成份，最后經低溫干燥處理即制得純類胡蘿卜素劑料。
權利要求
1.一種具抗癌作用的類胡蘿卜素，其特征在于從富含類胡蘿卜素的紅心鴨蛋的蛋黃中，用石油醚與丙酮混合溶劑提取、分離出含類胡蘿卜素的提取液，經真空濃縮后，將濃縮液經純化處理分離出類胡蘿卜素，再經低溫干燥制得純類胡蘿卜素劑料。
2.按權利要求1所述的類胡蘿卜素，其特征在于所述紅心鴨蛋由食用一定量的菹草或食用含菹草的飼料的蛋鴨所生產，紅心鴨蛋蛋黃的羅氏色度達12度以上，蛋黃中類胡蘿卜素的含量25～30mg/kg以上。
3.一種具搞癌作用的類胡蘿卜素的制備方法，其特征在于以富含類胡蘿卜素的紅心鴨蛋為原料，經常規清洗處理，將蛋黃與蛋清分離，通過冷凍干燥得凍干蛋黃粉備用，取一定量的凍干蛋黃粉用石油醚與丙酮混合溶劑提取，分離出提取液，在提取液中加入少量蒸餾水，靜置，使石油醚與丙酮分層，分離丙酮水層，用蒸餾水洗石油醚層2～3次，放出蒸餾水層，在石油醚層中加入少量無水硫酸鈉，分離出石油醚層，得主含類胡蘿卜素的提取液，在40℃下真空濃縮，將濃縮提取物上硅膠柱，先用石油醚與丙酮混合液洗脫非類胡蘿卜素成份，再用石油醚、丙酮、甲醇混合液洗脫出類胡蘿卜素成份，經低溫干燥處理即制得純類胡蘿卜素劑料。
4.按權利要求3所述的制備方法，其特征在于提取類胡蘿卜素時，石油醚、丙酮混合溶劑中，石油醚與丙酮的混合比例按容量(V/V)計為1～5∶1；石油醚、丙酮混合溶劑與凍干蛋黃粉的液料比按V/W(容量/重量)計為3～4∶1。
5.按權利要求3或4所述的制備方法，其特征在于純化類胡蘿卜素時，石油醚、丙酮混合液的混合比例按容量(V/V)計為4～24∶1；石油醚、丙酮、甲醇混合液的混合比例按容量(V/V)計為8.7∶1∶0.3。
6.按權利要求3或4所述的制備方法，其特征在于紅心鴨蛋由食用一定量的菹草或食用含菹草的飼料的蛋鴨所生產，紅心鴨蛋蛋黃的羅氏色度達1 2度以上，蛋黃中類胡蘿卜素的含量25～30mg/kg以上。
7.按權利要求3或4所述的制備方法，其特征在于提取和純化過程在40℃以下的條件下進行。
8.按權利要求7所述的制備方法，其特征在于提取和純化過程在惰性氣體環境下進行。
全文摘要
本發明涉及一種從富含類胡蘿卜素的紅心鴨蛋中提取的具抗癌作用的類胡蘿卜素及其制備方法。本發明從富含類胡蘿卜素的紅心鴨蛋的蛋黃中，用石油醚與丙酮混合溶劑提取、分離出含類胡蘿卜素的提取液，經真空濃縮后，將濃縮液經純化處理分離出類胡蘿卜素，再經低溫干燥制得純類胡蘿卜素劑料。該類胡蘿卜素對肝勻漿MDA的產生有顯著的抑制作用，對昆明小白鼠S
文檔編號A61P35/00GK1431196SQ0311842
公開日2003年7月23日 申請日期2003年1月8日 優先權日2003年1月8日
發明者張聲華, 余佑生, 張民, 劉良忠, 王海斌, 石嘉懌, 任丹丹, 周宏成, 許振華 申請人:張聲華, 余佑生