專利名稱：新穎的維生素d類似物的制作方法
技術領域：
本發明涉及迄今未知的一類化合物，它們顯示強烈的誘導某些細胞、包括皮膚細胞與癌細胞的分化和抑制其不可取的增殖的活性，以及免疫調節與抗炎作用，還涉及含有這些化合物的藥物制劑、其制劑的劑量單位和它們在以異常細胞分化和/或細胞增殖為特征的疾病治療和/或預防中的用途。
背景技術：
大量維生素D類似物已被描述為顯示一定程度的體外有利于細胞分化誘導的選擇性/細胞增殖抑制活性，與之形成對照的是體內對鈣代謝的作用(測量到血清鈣濃度增加和/或尿鈣排泄增加)，后者不利地限制了可能對患者安全給藥的劑量。在這種選擇性的基礎上已經開發出第一種這類藥物鈣泊三醇(INN)或鈣泊三烯(USAN)，現在是世界公認的用于局部治療牛皮癬的有效和安全的藥物。
在這種基礎上選擇另一種維生素D類似物seocalcitol所進行的研究支持了這樣一種概念，系統給藥的維生素D類似物在亞毒性劑量下可以體內抑制乳腺癌細胞增殖(Colston，K.W.等Biochem.Pharmacol.44，2273-2280(1992))。
另一種維生素D類似物CB1093(20-表-22-乙氧基-23-炔-24a，26a，27a-三高-1α，25(OH)2D3維生素D3)(Calverley M.J.等Vitamin D，Proceedings of the Ninth Workshop on Vitamin D，Orlando，Florida，Walter de Gruyter，Berlin，1994，pp85-86；并且公開在WO 93/19044中)已經顯示在體外測定中具有有力的抑制人癌細胞侵襲性的活性(Hansen C.M.等Vitamin D，Proceedings of the NinthWorkshop on Vitamin D，Orlando，Florida，Walter de Gruyter，Berlin，1994，pp 508-509)。
還已證明CB1093對不同類型癌細胞的增殖具有有力的抑制活性，對它們的分化和細胞凋亡具有有力的刺激活性，例如體外對腦神經膠質腫瘤細胞(Baudet，C.等Cancer Lett.1996，100，3)；體外和體內對MCF-7乳腺癌細胞(Colston，K.W.等Vitamin D，Proceedings of theTenth Workshop on Vitamin D，Strasbourg，France，1997，Universityof California，Riverside，1997，pp 443-450；Danielsson，C.等VitaminD，Proceedings of the Tenth Workshop on Vitamin D，Strasbourg，France，1997，University of California，Riverside，1997，pp 485-486；Danielsson，C.等J.Cellular Biochem.1997，66，552)；體外對NB4急性前髓細胞性白血病細胞(Elstner，E.等J.Clin.Invest.1997，99，349)；體外對HL-60和重新的人急性骨髓樣白血病細胞(Pakkala，I.等Blood1995，86(10，增刊)，775a；Pakkala，I.等Leucomia Research 1997，21，321)；體外對MG-63人骨肉瘤細胞(Ryhnen，S.等J.Cellular Biochem.1998，70，414)。
CB1093還顯著減少伴有繼發性甲狀旁腺機能亢進的慢性尿毒癥大鼠血漿PTH與磷酸鹽水平(Hruby，M.等Nephrol.dial.Transplant1996，11，1781)。
在大鼠尿鈣排泄中已經測定CB1093的經典鈣血維生素D活性是1α，25(OH)2D3的27％，在相同測定法中已經測定seocalcitol的鈣血活性是50％(Danielsson，C.等J.Cellular Biochem.1997，66，552)。在用CB1093治療乳腺腫瘤大鼠(1μg/kg體重，28天)的體內實驗中，最初的腫瘤體積縮小了49％，但是血清鈣濃度仍然有輕微增加(出處同上)。這說明治療窗可能仍然是相當窄的，仍然不能排除關于可能誘導血清鈣水平增加的擔憂。
在過度增殖性疾病、例如癌癥的非局部治療中使用維生素D類似物的另一個問題是體內代謝穩定性。對實際療法所用的化合物來說，這種穩定性不得不超過某一最低水平。如表1所示，在采用大鼠肝勻漿“S-9”的代謝穩定性體外模型(Kissmeyer，A.-M.等Biochem.Pharmacol.1997，53，1087)中，CB1093的穩定性比起seocalcitol(T1/2 1.3hr)和1α，25(OH)2D3(T1/2 2.5hr)來是相當低的。
因此持續需要新穎的維生素D類似物，與1α，25(OH)2D3相比，具有較高的抗細胞增殖和/或細胞分化誘導活性，合理地結合長期治療活性與最低毒性作用。本發明的目的是提供這類新穎的化合物，本文中新穎的通式I化合物達到了該目的。
發明概述本發明的化合物構成一類新穎的由通式I代表的維生素D類似物 其中式R代表氫、或非必須地被一個或多個(C1-C3)烷基、F或苯基取代的(C1-C6)烷基、苯基或(C7-C9)芳烷基；n是整數0、1或2；X代表羥基或鹵素。
發明的詳細說明發明的優選實施方式。
優選的式I化合物是其中R代表甲基、乙基、丙基、異丙基、芐基、和鄰甲基芐基、間甲基芐基與對甲基芐基的化合物。更優選地R代表甲基或乙基。n優選為0或1；1是更優選的。優選地X代表OH、F或Cl。最優選地X代表F，或者X最優選地代表OH或Cl。
本發明的化合物可以包含一個以上非對映異構形式；也就是式I中標為22、25和26的碳原子上的R與S構型。本發明涵蓋所有這些非對映異構體的純凈形式和它們的混合物。優選的異構體是具有構型22(S)，25(S)，26(S)和22(S)，25(S)，26(R)的化合物。另外，其中一個或多個羥基被可以體內轉化為羥基的基團所屏蔽的式I化合物前藥也可以涵蓋其中。
可以這樣得到式I化合物的結晶形式，直接從有機溶劑中濃縮，或者從有機溶劑或所述溶劑與一種助溶劑的混合物中結晶或重結晶，該助溶劑可以是有機或無機的，例如水。晶體可以被分離為基本上不含溶劑的形式或溶劑化物，例如水合物。本發明涵蓋所有結晶變體與晶型和它們的混合物。
本發明的示范性化合物是1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5-乙基-1(S)，5(S)，6(S)-三羥基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物101)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5(S)，6(S)-二羥基-5-乙基-1(S)-甲氧基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物102)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5(S)，6(S)-二羥基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物103)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5(S)，6(S)-二羥基-5-乙基-1(S)-(1-丙氧基)-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物104)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(1(S)-芐氧基-5(S)，6(S)-二羥基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物105)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5(R)，6(S)-二羥基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物106)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5(R)，6(R)-二羥基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物107)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5(S)，6(R)-二羥基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物108)，(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4-乙基-1(S)，4(S)，5(S)-三羥基-2-己炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物109)，(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4(S)，5(S)-二羥基-1(S)-乙氧基-4-乙基-2-己炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物111)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4-乙基-1(S)，4(R)，5(S)-三羥基-2-己炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物114)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4(R)，5(S)-二羥基-1(S)-乙氧基-4-乙基-2-己炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物116)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(1(S)-乙氧基-5-乙基-6(S)-氟-5(S)-羥基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物149)，和1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(1(S)-乙氧基-5-乙基-6(R)-氟-5(S)-羥基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物150)。1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(1(S)，5(R/S)-二羥基-5-乙基-6(S)-氟-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物157)1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(1(S)-乙氧基-5-乙基-6(S)-氟-2-庚炔-5(R/S)-羥基-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物158)1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(1(S)，5(R/S)-二羥基-5-乙基-6(R)-氟-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物159)1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(1(S)-乙氧基-5-乙基-6(R)-氟-2-庚炔-5(R/S)-羥基-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物160)本說明書所用的下列術語具有所示含義“烷基”指從烷烴中任意碳原子除去氫原子所得任意一價基團，分別包括正烷基(n-烷基)亞類和伯、仲與叔烷基亞類，具有指定數量的碳原子，例如包括(C1-C3)烷基、(C1-C6)烷基、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基和正己基。烷烴指具有通式CnH2n+2的非環直鏈或支鏈烴，因此完全由氫原子和飽和碳原子組成。
“(C7-C9)芳烷基”指任意被芳基、例如苯基取代的烷基，具有指定總數的碳原子，優選為(C7-C8)芳烷基。實例是芐基、2-苯基-乙基、鄰甲基芐基、間甲基芐基和對甲基芐基。
“鹵素”表示相同或不同的氟、氯、溴和碘。
本發明提供迄今未公開的一系列維生素D類似物，它是以在側鏈26位另外存在羥基或鹵原子為特征的。與現有技術的維生素D類似物相比，以CB1093為例，本發明的新維生素D類似物確實具有所需性質(表1)(在大鼠鈣尿模型中)鈣血活性減半或更低，(在S-9大鼠肝勻漿模型中)代謝穩定性更高，以及(在兩種不同的癌癥測定中U937白血病細胞測定(Kissmeyer，A.-M.等Biochem.Pharmacol.1997，53，1087)和MCF-7乳腺癌細胞測定(Danielsson等J.Cellular Biochem.1997，66，552))抗增殖活性僅有輕微減少。而且，本發明化合物I在牛皮癬模型HaCaT測定(Kissmeyer，A.-M.等Biochem.Pharmacol.1997，53，1087)中的活性略高于CB1093。本發明的26-羥基或26-鹵素維生素D類似物的有利性質完全是料想不到的，因為已知類似地在seocalcitol中引入26-羥基導致化合物在U937和HaCaT測定中的活性戲劇性地減少。所有四種可能的26-羥基-seocalcitol類似物都已經顯示是seocalcitol的大鼠體外與體內和人體外的天然代謝產物(Binderup，E.等Vitamin D，Proceedings of the Tenth Workshop on Vitamin D，Strasbourg，France，1997，University of California，Riverside，1997，pp 89-90；Kissmeyer，A.-M.等Biochem.Pharmacol.1997，53，1087)。
表1化合物 1α，25(OH)2D3No.103§ No.108§ CB1093§，$25/26構型 25(S)，26(S) 25(S)，26(R) 無26-OH測定U937，-log IC507.5±0.3 9.0±0.2 8.9±0.2 9.5±0.1U937.rel.*1.03649 74MCF-7，-log IC50 7.7±0.3 9.9±0.1 9.8±0.2 10.2±0.3MCF-7.rel.*1.0153 89 311HaCaT，-log IC50 7.4±0.3 9.0±0.3 8.8±0.2 8.7±0.9HaCaT，rel.*1.03830 18S-9，體外代謝產物#0.43 0.29 0.02鈣血，體內 1.00.11 0.16 0.27表1注§R＝乙基，n＝1和22(S)-構型$參照化合物無26-OH基團；否則結構與化合物103/108相同
*比例的幾何平均值，相對1α，25(OH)2D3而言，在所涉及的測定中來自有關化合物的所有實驗；數值越高，化合物的效力越大#溫育1小時后的部分全文采用下列標準縮寫AcOH＝乙酸18C6＝18-冠醚-6b.p.＝沸點Bn＝芐基Bu＝正丁基Comp＝化合物編號DMAP＝4-二甲氨基吡啶DMF＝N，N-二甲基甲酰胺Et＝乙基EtOAc＝乙酸乙酯Exam＝實施例編號eqv＝當量(摩爾)乙醚＝二乙醚G.P.＝通用操作編號Hal＝Cl、Br或Ih＝小時Me＝甲基m.p.＝熔點Ms＝甲磺酸鹽PG＝保護基團Ph＝苯基Pr＝正丙基Prep＝制備例編號PPTS＝吡啶鎓對-甲苯磺酸鹽Pv＝吡啶TBAF＝氟化四正丁基銨TBS＝四丁基二甲基甲硅烷基Tf＝三氟甲磺酰基THF＝四氫呋喃THP＝四氫-4H-吡喃-2-基TMS＝三甲基甲硅烷基Tol＝甲苯Ts＝4-甲苯磺酰基如表4所述式I化合物可以通過流程1的通用方法加以制備
流程1
流程1注一般說明X1＝O-PG2、F、Cl、Br或IPG1和PG2＝氫或保護基團相同或不同，或混合的雙官能團。
Q＝H或Me3Si；n＝1、2或3。
(a)CH3NH-OCH3，HCl；EtMgBr(3eqv)(b)i)Q-C≡C-(CH2)n-Met；(Met＝-Li，-MgHal；-AlBr2，-Br+SmI2)；如果需要的話(僅就Q＝H而言)PG1＝TMS，X1＝O-PG2＝O-TBS，Q＝H；ii)Me3SiCl/Et3N/CH2Cl2/DMAP，或者如果需要的話PG1-PG2＝-C(CH3)2-，即X1＝O-PG2(-PG1-)，Q＝Hii)TBAF/THF，(→PG1＝PG2＝Q＝H)iii)CH2＝C(CH3)-O-CH3或(CH3)2C(OCH3)2/TsOH或者如果需要的話PG1＝TMS，X1＝F化合物509或510(例如按流程1a制備)代替流程1的化合物503和504；或者如果需要的話PG1＝TMS，X1＝F，Cl，Br或I，Q＝Hii)TBAF/THF，(→PG1＝PG2＝Q＝H，即X1＝OH)iii)X1(＝OH)向X1＝F，Cl，Br或I的轉化，例如流程2所示；iv)非必須地PG1＝H向PG1＝TMS的轉化，例如使用Me3SiCl/Et3N/CH2Cl2/DMAP(c)i)II+BuLi；ii)1；iii)非必須地22-OH與RZ/堿的烷基化(Z＝良好的離去基團，例如Hal，Ms，Ts或Tf)(d)i)三重致敏的維生素D三烯的光異構化，從5(6)(E)到5(6)(Z)；ii)非必須地22-OH與RZ/堿的烷基化(e)i)用HF/CH3CN/EtOAc或TBAF/THF脫保護，非必須地在PPTS/EtOH之前或之后。
流程1a 流程1a注(a)KF，HCONH2，70℃(Fritz-Langhals等Tetr.Lett.1993，34，293的方法)(b)CH3NH-OCH3，HCl；EtMgBr(3eqv)化合物I可以從得自維生素D的醛化合物1制備，其合成已有報道(Calverley，M.J.Tetrahedron 1987，43，4609)，例如通過流程1所述途徑，與通式II的側鏈構件的有機金屬衍生物反應。
用于制備其中X＝OH的化合物I的化合物II可以如下合成用叔丁基二甲基甲硅烷基氯通過甲硅烷基化作用，將L(-)乳酸乙酯或D(+)乳酸乙酯(或相應的甲基酯)保護起來，得到相應的TBS-乳酸乙酯(501，502)。通過Williams，J.M.等(Tetr.Lett.1995，36，5461)的方法，直接用溴化乙基鎂處理，經由中間體N-甲氧基-N-甲基酰胺，轉化為相應的乙基酮(503，504)。
通過與Q-C≡C-(CH2)n-Met(Met＝-Li，-MgHal；-AlBr2；-Hal+例如SmI2；Q＝H或Me3Si；n＝1，2或3)型有機金屬試劑的反應，酮503或504轉化為通式II的部分被保護的側鏈合成子。在Q-C≡C-(CH2)n-Hal+例如SmI2的情況下，涉及鹵化物、酮與金屬/金屬鹽之間的Barbier型反應。
通常生成兩種非對映異構體的混合物在流程1中標為(25)的碳原子上的R與S異構體，該碳原子結果是最終式I化合物中的碳原子C(25)。如果需要的話，可以在該階段分離這兩種非對映異構體，或者如果更方便的話在側鏈合成子II的合成后期進行分離。
完全被保護的側鏈合成子II合成的后續步驟是1)如果Q是三甲基甲硅烷基，那么例如借助一種堿通過脫保護作用使Q轉化為氫。2)例如通過甲硅烷基化作用，用TMS-Cl將標為(25)的碳原子上的未保護羥基保護起來；如此PG1＝TMS(PG2＝TBS)。
或者，例如可以用TBAF除去化合物II的TBS基團(PG2)(如果Q＝TMS，與此同時轉化為H)。然后可以在一個步驟中保護分別標為(25)和(26)的碳原子上的兩個羥基，例如借助于2-甲氧基丙烯或2，2-二甲氧基丙烷和酸轉化為環狀縮醛或縮酮，例如丙酮化合物(亞異丙基縮酮)，以致PG1和PG2連接在一個基團上-C(CH3)2-。1，2-二醇的其他保護方法描述在文獻中，例如Greene，T.W.和Wuts，P.G.M.《有機合成中的保護基團》第二版，John Wiley and Sons，New York 1991，pp118-142。使用環狀縮醛或縮酮、例如丙酮化合物作為化合物II的保護基團的優點是它們特別適合于通過核Overhauser增強(NOE)NMR波譜學建立碳(25)與(26)上的立體化學。
用于制備其中X＝F的化合物I的化合物II可以從酮509或510加以制備，并使用流程1a方法和表1a中間體表1a流程1a的氟化側鏈構件PrepComp G.P. C(26)42 50511 R43 50611 S44 50712 S45 50812 R46 5091a S47 5101a R用于制備其中X是Cl、Br或I的化合物I的化合物II優選是從其中O-PG1和O-PG2(＝X1)都是OH的相應化合物II加以制備的，例如流程2所示流程2 流程2注其中X1＝Cl或I的化合物II可以彼此轉化或者轉化為其中X1＝F或Br的相應化合物，標準的轉化方法例如R.C.Larock《綜合有機轉化》VCH Publishers，Inc.，New York，N.Y.，USA，1989，pp.337-339，引用在此作為參考文獻。表2通式II的側鏈構件(流程1)Prep Comp G.P. Qn C(25) C(26) PG1PG242012H1S S HTBS52024H1S S HH62035H1S S -C(CH3)2-72046H1S S TMS TBS82052H1R S HTBS92064H1R S HH102075H1R S -C(CH3)2-112086H1R S TMS TBS122092H1R R HTBS132106H1R R TMS TBS142112H1S R HTBS152126H1S R TMS TBS162133H0S S HTBS172143a TMS 0S S HTBS182154H0S S HH192165a H0S S -C(CH3)2-162173H0R S HTBS172183a TMS 0R S HTBS182194H0R S HH202205a H0R S -C(CH3)2-表2注X1＝O-PG2
表2a通式II的氟化側鏈構件(流程1)Prep Comp G.P. Q nC(25) C(26) PG1X1482212aH 1 R/S S H F492226 H 1 R/S S TMS F502232aH 1 R/S R H F512246 H 1 R/S R TMS F可以通過有機金屬試劑向羰基化合物的標準親核加成方法進行醛1與得自側鏈構件II的有機金屬試劑的反應；也就是在適合的無水溶劑中，例如乙醚和/或THF，使炔中間體II與格利雅試劑反應，例如溴化乙基鎂，或者與烷基鋰反應，例如丁基鋰(通用操作7)，生成金屬乙炔化物，然后加入1，經過通常的水化處理(正常情況下隱含在所有流程1反應中)后得到III。一般地，反應產物III是兩種可能的C-22差向異構體的混合物，這里稱為IIIA和IIIB。通常優選的是分離IIIA與IIIB差向異構體，這適宜用層析法進行。
表3和3a給出這類式III化合物的非限制性例證。化合物IIIA的收率比相應的IIIB差向異構體高得多，比例通常約95比5。化合物IIIA、IVA和IA具有22(S)立體化學，相應帶有后綴B的化合物具有22(R)立體化學。化合物IA是優選的。
通式III或IV的22-羥基化合物經過非必須地的烷基化作用，得到其中R是(C1-C6)烷基、苯基或(C7-C9)芳烷基的相應化合物III或IV，這可以按照專業人員熟知的標準方法進行。表3列舉了例證性而非限制性的這類化合物。
在烷基化反應中，優選使用烷基化劑RZ，其中Z代表良好的離去基團，例如Hal、Ms、Ts、Tf；RZ可以與適當化合物III或IV(R＝H)的陰離子反應，該陰離子是借助適合的強堿從中衍生的，例如堿金屬醇化物、烷基堿金屬或堿金屬氫化物。可以加入適合的冠醚作為相轉移劑，以加速烷基化過程。通用操作9描述了一種有用的方法。
在三重致敏劑的存在下，例如蒽，借助UV光進行維生素D三烯、即流程1化合物III5(6)(E)的光異構化，得到流程1化合物IV5(6)(Z)；通用操作8和8a描述了有用的方法。表3和3a給出這類通式IV化合物的非限制性例證，以及每種化合物的制備。
維生素D三烯、即化合物III5(6)(E)的三重致敏的光異構化得到流程1化合物IV5(6)(Z)，和(非必須地)用RHal/堿烷基化22-OH基團生成其中R≠H的22-O-R化合物，二者可以按任意順序進行，根據是在每種情況下哪一種順序是最方便的。
表4列舉了本發明化合物I的實例，其合成的最后一步是一步或多步脫保護操作，以除去流程1通式IV化合物的所有保護基團。脫保護例如可以用TBAF進行，以除去甲硅烷基，如TMS或TBS(通用操作4)，或者用HF進行，它除去甲硅烷基和酸敏感性保護基團，例如亞異丙基(縮酮)基團(通用操作10)。或者，如果兩種類型的保護基團都要除去，可以按順序采用兩種不同的選擇性操作，例如WO97/46522所述(G.P.7)用TBAF除去甲硅烷基，然后用PPTS選擇性除去酸敏感性保護基團；或相反順序。
表3通式III與IV的中間體(流程1)TypePrepCompG.P.RnC(25)C(26)PG1PG2IIIA21 301 7 H1SSTMSTBSIIIB21 302 7 H1SSTMSTBSIVA 22 401 8 H1SSTMSTBSIVA 23 402 9 Me 1SSTMSTBSIVA 24 403 9 Et 1SSTMSTBSIVA 25 404 9 Pr 1SSTMSTBSIVA 26 405 9 Bn 1SSTMSTBSIIIA27 303 7 H1RSTMSTBSIVA 28 406 8 H1RSTMSTBSIVA 29 407 9 Et 1RSTMSTBSIIIA30 304 7 H1RRTMSTBSIVA 31 408 8 H1RRTMSTBSIVA 32 409 9 Et 1RRTMSTBSIIIA33 305 7 H1SRTMSTBSIVA 34 410 8 H1SRTMSTBSIVA 35 411 9 Et 1SRTMSTBSIIIA36 306 7a H0SS -C(CH3)2-IVA 37 412 8 H0SS -C(CH3)2-IVA 38 413 9 Et 0SS -C(CH3)2-IIIA39 307 7a H0RS -C(CH3)2-IVA 40 414 8 H0RS -C(CH3)2-IVA 41 415 9 Et 0RS -C(CH3)2-表3注X1＝O-PG2
表3a通式III與IV的氟化中間體(流程1)類型 Prep Comp G.P.Rn C(25) C(26) PG1X1IIIA 52308 7 H1 R/S STMSFIVA 53416 8a H1 R/S STMSFIVA 54417 9 Et 1 R/S S H FIIIA 55309 7 H1 R/S RTMSFIVA 56418 8a H1 R/S RTMSFIVA 57419 9 Et 1 R/S R H F表4列舉了本發明的示范性化合物I，帶編號的實施例給出例證性合成方法的參考，以及示范性化合物的波譜數據。
化合物110、112-113、115和117-156的合成步驟順序類似于化合物101-109、111、114、116和157-160、實施例1-12和16-19的制備所采用的順序按照通用操作7(G.P.7)，使化合物1與適當的通式II側鏈構件H-C≡C-(CH2)n-C(C2H5)(OPG1)-CH(X1)CH3反應，得到相應的式III化合物。
如果表2或2a中沒有提到，可以按照與表2或2a所列化合物II的合成所用相似的方法制備有關化合物II。
按照G.P.8或8a，使式III化合物光異構化，得到相應的式IV化合物。
非必須地，按照G.P.9，使式IV化合物與適當的烷基化劑RZ反應，得到其中R≠H的相應式IV化合物。如果需要的話，光異構化步驟和烷基化步驟可以按相反順序進行。
至于最后一步，按照G.P.4或G.P.10，使式IV化合物脫保護，得到有關化合物I。
表4通式I化合物TypeExamCompG.P.RnXC(25)C(26)IA 1101 4 H1OH SSIA 2102 4 Me 1OH SSIA 3103 4 Et 1OH SSIA 4104 4 Pr 1OH SSIA 5105 4 Bn 1OH SSIA 6106 4 Et 1OH RSIA 7107 4 Et 1OH RRIA 8108 4 Et 1OH SRIA 9109 10 H0OH SSIA 110 10 Me 0OH SSIA 10111 10 Et 0OH SSIA 112 10 Pr 0OH SSIA 113 10 Bn 0OH SSIA 11114 10 H0OH RSIA 115 10 Me 0OH RSIA 12116 10 Et 0OH RSIA 117 10 Pr 0OH RSIA 118 10 H0OH RRIA 119 10 Et 0OH RRIA 120 10 H0OH SRIA 121 10 Me 0OH SRIA 122 10 Et 0OH SRIA 123 10 Pr 0OH SRIA 124 10 H1OH RSIA 125 10 Me 1OH RSIA 124 10 H1OH RRIA 125 10 Me 1OH RRIA 126 10 H1OH SRIA 127 10 Me 1OH SRIA 128 10 Pr 1OH SRIA 129 10 Bn 1OH SRTypeExamCompG.P.RnXC(25)C(26)IA 131 10 H2OH SSIA 132 10 Me 2OH SSIA 133 10 Et 2OH SSIA 134 10 Pr 2OH SSIA 135 10 Bn 2OH SSIA 136 10 Et 2OH RSIA 137 10 Et 2OH RRIA 138 10 H2OH SRIA 139 10 Me 2OH SRIA 140 10 Et 2OH SRIA 141 10 Pr 2OH SRIB 142 10 Et 1OH SSIA 143 10 Me 0FSSIA 144 10 Me 0FSRIA 145 10 Et 0FSSIA 146 10 Et 0FSRIA 147 10 Me 1FSSIA 148 10 Me 1FSRIA 149 10 Et 1FSSIA 150 10 Et 1FSRIA 151 10 Et 2FSSIA 152 10 Me 0Cl SSIA 153 10 Et 0Cl SSIA 154 10 Me 1Cl SSIA 155 10 Et 1Cl SSIA 156 10 Et 1Cl SRIA 16 157 10 H1FR/S SIA 17 158 10 Et 1FR/S SIA 18 159 10 H1FR/S RIA 19 160 10 Et 1FR/S R
本發明化合物打算用在藥物組合物中，該組合物可用于局部或系統治療或預防人和動物疾病，例如牛皮癬，包括掌跖膿皰病、持續性肢皮炎和指甲牛皮癬，和其他角化作用障礙；與HIV有關的皮膚病；傷口愈合；各種癌癥，例如白血病、乳腺癌、腦神經膠質腫瘤、骨肉瘤、骨髓纖維變性、黑素瘤、其他皮膚癌癥；免疫系統的疾病或失調，例如宿主對移植物和移植物對宿主的反應；移植排斥；自體免疫疾病，包括盤狀與系統性紅斑狼瘡；糖尿病；自體免疫類型的慢性皮膚病，例如硬皮病和尋常天皰瘡；炎性疾病，例如哮喘和類風濕性關節炎；以及大量其他疾病狀態，包括甲狀旁腺機能亢進，特別是與腎衰有關的繼發性甲狀旁腺機能亢進；認知缺損或老年性癡呆(阿爾茨海默氏病)，和其他神經變性疾病；高血壓；痤瘡；脫發；皮膚萎縮，例如甾體誘導的皮膚萎縮；皮膚老化，包括光老化；還用于促進骨生成和治療/預防骨質疏松和骨軟化。
本發明化合物可以與其他藥物或處置方法結合使用。在牛皮癬的治療中，本發明化合物可以與其他抗牛皮癬藥結合使用，例如甾體，或者與其他療法結合使用，例如光-或UV光-療法或混合的PUVA-療法。在癌癥的治療中，本發明化合物可以與其他抗癌藥或抗癌療法結合使用，例如放射療法。在移植物排斥和移植物對宿主反應的預防中，或者在自體免疫疾病的治療中，本發明化合物可以有利地與其他免疫抑制藥/免疫調節藥或療法結合使用，例如環孢菌素A。
式I化合物(以下稱為活性成分)為達到治療效果所需的量當然將因特定化合物、給藥途徑和接受治療的哺乳動物而異。本發明化合物可以通過腸胃外、關節內、腸內或局部途徑給藥。它們在腸內給藥后被充分吸收，這在系統性障礙的治療中是優選的給藥途徑。在皮膚病學障礙、如牛皮癬或眼部疾病的治療中，局部或腸內方式是優選的。
盡管有可能將活性成分作為化學原藥單獨給藥，不過優選的是制成藥物制劑。活性成分適宜占制劑重量的0.1ppm至0.1％。
本發明的獸醫與人類醫學用制劑因而包含活性成分和藥學上可接受的載體和非必須地的其他成分。載體在與制劑其他成分相容并且對其受者無害的意義上必須是“可接受的”。
制劑例如包括適合于口服、眼部、直腸、腸胃外(包括皮下、肌內和靜脈內)、透皮、關節內與局部、鼻部或頰部給藥的那些。
術語“劑量單位”表示單元的、即單一的劑量，該劑量能夠對患者給藥，易于處理和包裝，保持為物理與化學穩定的單位劑量，其中包含活性物質本身或其與固體或液體藥物稀釋劑或載體的混合物。
制劑可以適宜地是劑量單位形式，可以按藥學領域熟知的方法加以制備。所有方法包括使活性成分與載體結合的步驟，它們構成一種或多種助劑成分。一般地，制劑是這樣制備的，使活性成分與液體載體或微細粉碎的固體載體或二者均勻和緊密結合，然后如果必要的話，使產物成型為所需的制劑。
適合于口服給藥的本發明制劑可以是不連續單位的形式，例如膠囊劑、扁囊劑、片劑或錠劑，各自含有預定量的活性成分；粉劑或顆粒劑的形式；在水性液體或非水性液體中的溶液或懸液的形式；或者水包油乳劑或油包水乳劑的形式。活性成分也可以以大丸劑、藥糖劑或糊劑的形式給藥。
用于直腸給藥的制劑可以是栓劑的形式，其中結合有活性成分和載體，或者灌腸劑的形式。
適合于腸胃外給藥的制劑適宜包含活性成分的滅菌油性或水性制劑，它優選地是與受者血液等滲的。透皮制劑可以是硬膏劑的形式。
適合于關節內或眼部給藥的制劑可以是活性成分的滅菌水性制劑的形式，活性成分可以是微晶形式，制劑例如是水性微晶懸液的形式。還可以使用脂質體制劑或生物可降解聚合物系統進行活性成分的關節內和眼部給藥。
適合于局部或眼部給藥的制劑包括液體或半液體制劑，例如搽劑、露劑、凝膠劑、涂劑、水包油或油包水乳劑，例如霜劑、軟膏劑或糊劑；或者溶液或懸液，例如滴劑。
適合于對鼻腔或頰腔給藥的制劑包括粉劑、自推進劑和噴霧劑，例如氣霧劑和霧化劑。
除了上述成分以外，本發明的制劑還可以包括一種或多種另外的成分，例如稀釋劑、粘合劑、防腐劑等。
組合物可以進一步含有其他常用于治療上述病理狀態的治療活性化合物，例如用于治療免疫疾病的免疫抑制劑或用于治療皮膚疾病的甾體。
本發明進一步涉及治療患有上述病理狀態之一的患者的方法，所述方法是對需要治療的患者給以有效量的一種或多種式I化合物，單獨或者與其他一種或多種常用于治療所述病理狀態的治療活性化合物結合。可以同時或者按一定間隔用本發明化合物和/或其他治療活性化合物進行治療。
在系統治療中，式I化合物的每日給藥劑量為0.001-2μg每千克體重，優選為0.002-0.3μg/kg哺乳動物體重，例如0.003-0.2μg/kg，通常相當于成人的每日劑量為0.2至15μg。在皮膚病學障礙的局部治療中，將含有0.1-500μg/g、優選為0.1-100μg/g式I化合物的軟膏劑、霜劑或洗劑給藥。關于眼用軟膏劑的局部使用，將含有0.1-500μg/g、優選為0.1-100μg/g式I化合物的滴劑或凝膠劑給藥。優選地將口服組合物配制成片劑、膠囊劑或滴劑，每劑量單位含有0.05-50μg、優選為0.1-25μg式I化合物。
下列通用操作、制備例和實施例進一步闡述本發明實施例通用操作、制備例和實施例一般說明THF經過4A分子篩干燥。反應例行在氬氣氛下進行，另有注解除外。在標準的后處理操作中，將反應混合物倒在水中，用適合的有機溶劑萃取三次。有機層用水和飽和氯化鈉溶液洗滌，經無水硫酸鈉干燥，在真空中濃縮，得到產物，經過硅膠(40-63μm)層析、結晶或蒸餾法純化。
關于1H核磁共振波譜(300MHz)和13C NMR(75.6MHz)，引用氘代氯仿溶液的化學位移值(δ)(ppm)，除非另有注解，內標為四甲基硅烷δ＝0.00或氯仿δ＝7.25，或氘代氯仿(13C NMRδ＝76.81)。關于多重峰，無論是確定的(雙峰(d)、叁峰(t)、四重峰(q))與否(m)，數值都是在大約中點處給出的，引用范圍的除外(s＝單峰，b＝寬峰)。
通用操作通用操作1酮503和504的合成在一小時內，向適當的甲硅烷基化乳酸乙酯、化合物501或502(23.2g，0.1mol)與N，O-二甲基羥胺鹽酸鹽(12.2g，0.125mol)的無水THF(800ml)溶液/懸液中加入3.0摩爾溴化乙基鎂的乙醚溶液(167ml，0.5mol)，同時攪拌并冷卻至-5℃。繼續在25℃下攪拌18小時，然后將反應混合物倒在氯化銨(160g)的水(1.2l)溶液中進行水解。用乙醚后處理后，粗產物經過層析法純化(洗脫劑含0％至1％乙醚的石油醚)，得到所需化合物。
變例通用操作1a酮509和510的合成在一小時內，向適當的R或S的2-氟丙酸甲酯或乙酯(0.1mol)與N，O-二甲基羥胺鹽酸鹽(10.7g，0.11mol)的無水THF(300ml)溶液/懸液中加入3.0摩爾溴化乙基鎂的乙醚溶液(107ml，0.32mol)，同時攪拌并冷卻至0至-5℃。繼續在0℃下攪拌4小時，再在25℃下攪拌16小時，然后在劇烈攪拌下向反應混合物中加入25％氯化銨水溶液(300ml)進行水解。借助熱水浴使溫度上升至約35℃并維持；用pH計監測pH(pH約8)。15分鐘后，用4N鹽酸水溶液調節pH至3，繼續攪拌15分鐘。分離所得兩相混合物，含水相用乙醚(50ml)萃取兩次。合并有機相，用飽和氯化鈉溶液(25ml)萃取兩次，經無水硫酸鈉干燥。利用高效蒸餾器(1/16”Dixon網狀環，裝7cm柱)在大氣壓下蒸餾除去乙醚和一些THF，使粗物質溶液濃縮。利用連接有干冰冷凝器和收集器的15cm Vigreux柱分餾殘余物(約200g)。逐漸降低壓力至0.25巴，收集由THF和遞增的標題化合物組成的餾分(剩留高沸點中間體和副產物)。如果需要的話，可以通過重蒸餾濃縮第一部分。純標題化合物的b.p.為約45℃/27毫巴；不過，在干燥并用NMR測定標題化合物的百分比后，與THF混合的餾分可用于下面的合成步驟。
通用操作2叔炔丙醇化合物II的合成將鋁屑(0.45g)、氯化汞(II)(12mg)與無水THF(10ml)的混合物攪拌20分鐘。在25-30℃下，在20分鐘內，加入炔丙基溴(1.88ml，2.97g，25mmol)的無水THF(5ml)溶液，并攪拌。繼續在40℃下攪拌30分鐘。在25℃下，在10分鐘內，加入適當酮化合物503或504(5.0g，23mmol)的無水THF(10ml)溶液；將反應混合物在25℃下進一步攪拌1.5小時，然后用乙醚后處理。粗產物經過層析法純化，用含1％乙醚的石油醚作為洗脫劑，該操作重復兩次，合并適合的餾分，得到純凈狀態下的兩種異構的標題化合物。
變例通用操作2a氟化叔炔丙醇化合物II的合成將1.5M溴化丙二烯基鎂的乙醚溶液(13ml，約20mmol)(L.Brandsma《制備型炔化學》》第2版，Elsevier，Amsterdam 1988，pp.35-36)冷卻至-40℃，在30分鐘內加入酮509或510(16mmol)的無水THF(20ml)溶液，并攪拌，然后攪拌10分鐘，同時冷卻至-30至-40℃。將反應混合物倒在25％氯化銨水溶液(50ml)中，同時攪拌并在冰中冷卻。含水相用乙醚(20ml)萃取，合并有機相，用硫酸鎂干燥，在真空中濃縮，得到標題化合物，為一種油。該產物由兩種差向異構體組成，比例為約3∶1，用于下面的合成步驟無需進一步純化。
通用操作3叔炔醇化合物II的合成在35℃下，在20分鐘內，向攪拌著的乙炔化鋰乙二胺配合物(5.3g，58mmol)的無水THF(250ml)懸液中加入適當酮化合物503或504(12.5g，58mmol)的無水THF(50ml)溶液。繼續在25℃下攪拌4小時，然后將反應混合物倒在氯化鈉(70g)的水(200ml)溶液中進行水解。用乙醚后處理后，粗產物經過層析法純化(洗脫劑含0％至2％乙醚的石油醚)，得到兩種異構的標題化合物的僅部分可分離但純凈的混合物。該混合物直接用于下面除去甲硅烷基保護基團的步驟，然后可以借助層析法分離兩種異構的25，26-二醇。
通用操作3a三甲基甲硅烷基叔炔醇化合物II的合成在-60℃下，在10分鐘內，向攪拌著的三甲基甲硅烷基乙炔(0.25ml，0.177g，1.8mmol)的無水THF(6ml)溶液中加入1.6摩爾丁基鋰的己烷溶液(0.83ml，1.3mmol)。繼續在-60℃下攪拌10分鐘，再在25℃下攪拌30分鐘。將所得三甲基甲硅烷基乙炔化鋰溶液再次冷卻至-60℃，在2分鐘內加入適當酮化合物503或504(0.3g，1.4mmol)的無水THF(1ml)溶液，繼續在-60℃下攪拌3小時，然后將反應混合物倒在氯化銨(2g)的水(20ml)溶液中進行水解。用乙醚后處理后，粗產物經過層析法純化(洗脫劑含0％至1％乙醚的石油醚)，得到兩種異構的標題化合物的不可分離的混合物。該混合物直接用于下面除去兩個甲硅烷基保護基團的步驟，然后可以借助層析法分離兩種異構的25，26-二醇。
通用操作4用TBAF脫保護甲硅烷基保護的化合物向適當的單-甲硅烷基保護的化合物(0.4mmol)或二-甲硅烷基保護的化合物(0.2mmol)或四-甲硅烷基保護的化合物(0.1mmol)的THF(10ml)溶液中加入TBAF三水合物(0.32g，1.0mmol)(也就是2.5molTBAF每摩爾當量甲硅烷基保護基團)，將混合物加熱至回流達一小時，并攪拌。加入1M碳酸氫鈉(10ml)后，用乙醚或乙酸乙酯后處理混合物。殘余物經過層析法純化，得到所需化合物。
通用操作5用2-甲氧基丙烯保護25，26-二醇II為丙酮化合物將含有3A分子篩(1/16”棒，約0.1g)的、未被保護的25，26-二醇化合物II(0.35mmol)、2-甲氧基丙烯(50mg，0.7mmol)與對-甲苯磺酸(1mg)的無水DMF(2ml)溶液加熱至70℃達30分鐘，并攪拌。用乙醚后處理后，粗產物經過層析法純化，用含5％乙醚的石油醚作為洗脫劑，得到純的丙酮化合物II。
通用操作5a用2，2-二甲氧基丙烷保護25，26-二醇II為丙酮化合物將未被保護的25，26-二醇化合物II (2.0mmol)、2，2-二甲氧基丙烷(2ml，1.7g，16mmol)與對-甲苯磺酸(38mg)的無水丙酮(10ml)溶液在25℃下攪拌2小時。加入三乙胺(1ml)，在約b.p.30℃/0.4巴下，用短(約3cm)Vigreux柱濃縮反應混合物至約2ml。加入水(2ml)和1M碳酸氫鈉(1ml)，混合物用乙醚萃取(3×8ml)。合并乙醚萃取液，用硫酸鎂干燥，(如上)濃縮至約0.5ml。粗產物經過層析法純化，用含5％乙醚的石油醚作為洗脫劑。合并適當的餾分，(如上)濃縮后，得到純的丙酮化合物II。
通用操作6通過三甲基甲硅烷基化作用保護25-單羥基化合物II在0℃下，在10分鐘內，將三甲基氯硅烷(1.08g，10mmol)加入到攪拌著的25-羥基-26-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-(或26-氟-)化合物II(5.0mmol)、三乙胺(1.51g，15mmol)與DMAP(5mg)的無水二氯甲烷(10ml)溶液中。繼續在25℃下攪拌48小時。(用乙醚)后處理后，粗產物經過層析法純化，用石油醚作為洗脫劑，得到純的25-三甲基甲硅烷氧基-26-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-(或26-氟-)化合物II。
通用操作7從化合物1和側鏈構件II合成化合物III在2分鐘內，向冷卻至-78℃并在氬氣氛下攪拌的、適當的側鏈構件化合物II(3.0mmol)的無水THF(5ml)溶液中滴加正丁基鋰(1.6M己烷溶液；1.5ml)。繼續在-78℃下攪拌15分鐘，再在20℃下攪拌另15分鐘。將混合物再次冷卻至-78℃，在4分鐘內滴加醛化合物1(1.5mmol)的無水THF(5ml)溶液；然后繼續在-78℃下攪拌30分鐘。(用乙醚)后處理反應混合物，得到含有異構的22-羥基化合物A(弱極性)與B(強極性)的粗產物。通過層析法分離它們(用乙酸乙酯與石油醚的混合物作為洗脫劑)，得到純化合物III。
變例通用操作7a除了使用1.87ml正丁基鋰(1.6M)和3mmol化合物1以外，遵循G.P.7。
通用操作8化合物III向化合物IV的光異構化作用在約10℃的25ml圓底Pyrex燒瓶內，用來自TQ760Z2型高壓紫外燈(Hanau)的700W UV光照射適當化合物III(0.28mmol)、蒽(0.1g)與三乙胺(0.20ml，1.4mmol)的二氯甲烷(16ml)溶液達30分鐘(0.08mmol規模15分鐘)，同時攪拌。在真空中蒸發反應混合物，殘余物用石油醚處理(2×2ml)，過濾。將濾液濃縮，經過層析法純化，得到所需化合物IV。
變例通用操作8a在約10℃的10ml圓底Pyrex試管內，用來自TQ150Z2型高壓紫外燈(Hanau)(150W)的UV光照射適當化合物III(0.13mmol)、9-乙酰基蒽(23mg)與三乙胺(0.10ml，0.7mmol)的甲苯(5ml)溶液達60分鐘。將反應混合物冷卻至-20℃，過濾。在真空中蒸發濾液，殘余物經過層析法純化，得到所需化合物IV，以及一些9-乙酰基蒽，在最后的(脫保護)步驟后除去之。
通用操作9C-22-羥基化合物III或IV的烷基化作用在20℃和氬氣氛下攪拌的同時，向適當22-羥基化合物(R＝H)(0.5mmol)的無水THF(5ml)溶液中加入20％氫化鉀的礦物油懸液(0.2ml)，然后加入烷基化劑RZ(1.5mmol)，最后在5分鐘內加入18-冠醚-6(0.13g)的無水THF(2ml)溶液。繼續在25℃下攪拌兩小時，然后(用乙醚)后處理反應混合物。粗產物經過層析法純化(用乙醚與石油醚的混合物作為洗脫劑)，得到所需烷氧基化合物III或IV。
通用操作10
用HF脫保護化合物IV合成化合物I向攪拌著的適當化合物IV(0.25mmol)的乙酸乙酯(3ml)溶液中加入乙腈(6ml)，然后加入5％氫氟酸的乙腈-H2O 7∶1溶液(4ml)。在25℃下攪拌2小時后，加入乙酸乙酯(40ml)和1M碳酸氫鈉，(用乙酸乙酯)后處理反應混合物。殘余物經過層析法純化，得到所需化合物I。
通用操作11乳酸酯甲磺酸鹽的合成在一小時內，將甲磺酰氯(18.6ml，27.5g，0.24mol)的叔丁基甲基醚(100ml)溶液加入到攪拌著的適當R或S的乳酸甲酯或乙酯(0.20mol)、三乙胺(28.3g，0.28mol)與DMAP(0.24g，0.002mol)的叔丁基甲基醚(200ml)溶液中，同時在冰浴中冷卻。繼續在冰浴中攪拌1/2小時，然后在25℃下攪拌2小時。將反應混合物再次在冰浴中冷卻，緩慢加入水(250ml)，保持溫度低于10℃。攪拌20分鐘以上后，分離各相，含水相用乙醚(100ml)萃取兩次。合并有機相，用1N硫酸(100ml)、水(100ml)、1M碳酸氫鈉(100ml)、水(2×100ml)和飽和氯化鈉水溶液(100ml)萃取。用硫酸鈉干燥后，濃縮溶液(35℃和0.2巴)，利用45cmPodbielniak型柱在真空中分餾殘余物，得到所需標題化合物。
通用操作12R或S的2-氟丙酸甲酯或乙酯的合成在約27毫巴真空下，在約一小時內，將適當乳酸酯甲磺酸鹽(0.125mol)溶液加入到攪拌并在60℃油浴中加熱的、(冷凍干燥的)氟化鉀(29g，0.5mol)的甲酰胺(70ml)溶液/懸液中。燒瓶裝有Claisen型側臂，后者連接有干冰冷卻器和干冰冷卻的收集器，在其中冷凝從反應中連續蒸餾的2-氟丙酸酯。繼續在60℃和20mmHg下攪拌，直至不再有蒸餾產物被冷凝。這需要4-5小時。將蒸餾產物(含有一些水)用乙醚(40ml)稀釋，用硫酸鎂干燥，經過蒸餾法純化，條件類似于上述制備，保持浴溫恒定在50-60℃，逐漸降低壓力，直至在收集器內收集到純的標題化合物。
制備例1
化合物502將(+)-乙基D-乳酸酯(R-異構體，非天然)(5.2g，44mmol)、咪唑(13.6g)與叔丁基二甲基甲硅烷基氯(15g)的無水DMF(50ml)溶液在25℃下攪拌1小時。加入乙酸乙酯(200ml)，有機溶液用水(2×100ml)、3M CaCl2(2×100ml)、水(100ml)和35％NaCl(100ml)萃取，用硫酸鈉干燥，在真空中濃縮。粗產物經過層析法純化，用含1％乙醚的石油醚作為洗脫劑，得到化合物502，為一種油。[α]D20+30.5°(c2.14，CHCl3)13C NMRδ173.9，68.3，60.5，25.5，21.1，18.1，14.0，-5.1，-5.5制備例2化合物503方法通用操作1原料(S)-(-)-O-叔丁基二甲基甲硅烷基乳酸乙酯(化合物501)層析洗脫劑含0％至5％乙醚的石油醚[α]D20-10.8°(c2.17，CHCl3)13C NMRδ214.7，74.6，29.9，25.5，20.8，17.8，7.1，-4.9，-5.3制備例3化合物504方法通用操作1原料化合物502層析洗脫劑含0％至5％乙醚的石油醚13C NMRδ214.7，74.6，29.9，25.5，20.8，17.8，7.1，-4.9，-5.3制備例4化合物201(+化合物205)方法通用操作2原料化合物503層析洗脫劑含1％乙醚的石油醚13C NMRδ1H NMR d 81.1，75.6，71.3，70.0，26.5，25.8，25.6，17.8，17.1，7.4，-4.3，-5.2制備例5化合物202方法通用操作4原料化合物201層析洗脫劑含25％至50％乙醚的石油醚13C NMRδ80.7，75.5，71.2，71.1，27.1，26.0，17.1，7.6制備例6化合物203方法通用操作5原料化合物202層析洗脫劑含5％乙醚的石油醚13C NMRδ106.8，82.4，80.2，78.2，70.8，28.3，26.7，25.6，25.0，14.6，7.2制備例7化合物204方法通用操作6原料化合物201層析洗脫劑石油醚[α]D20-4.4°(c1.8，CHCl3)13C NMRδ82.2，80.1，71.4，70.3，28.8，25.8，24.9，17.9，17.3，7.5，2.4，-4.4，-4.9制備例8化合物205(+化合物201)方法通用操作2原料化合物503層析洗脫劑含1％乙醚的石油醚13C NMRδ80.8，75.1，72.3，70.2，27.8，25.6，24.4，17.8，17.6，7.4，-4.3，-5.2制備例9化合物206方法通用操作4原料化合物205層析洗脫劑含25％至50％乙醚的石油醚13C NMRδ80.8，75.2，71.6，71.1，29.1，24.7，17.0，7.4制備例10化合物207方法通用操作5原料化合物206層析洗脫劑含5％乙醚的石油醚13C NMRδ106.9，83.1，81.0，76.8，70.1，28.4，28.2，26.5，24.5，14.5，8.1制備例11化合物208方法通用操作6原料化合物205層析洗脫劑石油醚[α]D20+6.9°(c1.6，CHCl3)13C NMRδ82.0，79.8，72.7，70.5，27.9，27.0，25.8，25.7，17.6，8.3，2.5，-4.4，-5.0制備例12化合物209(+化合物211)方法通用操作2原料化合物504層析洗脫劑含1-2％乙醚的石油醚13C NMRδ81.1，75.6，71.3，70.0，26.5，25.8，25.6，17.8，17.1，7.4，-4.3，-5.2制備例13化合物210方法通用操作6原料化合物209層析洗脫劑石油醚[α]D20+4.1°(c2.1，CHCl3)13C NMRδ82.2，80.1，71.4，70.3，28.8，25.8，25.0，17.9，17.3，7.5，2.4，-4.4，-4.9制備例14化合物211(+化合物209)方法通用操作2原料化合物504層析洗脫劑含1-2％乙醚的石油醚13C NMRδ80.8，75.1，72.3，70.2，27.8，25.6，24.4，17.8，17.6，7.4，-4.3，-5.2制備例15化合物212方法通用操作6原料化合物211層析洗脫劑石油醚[α]D20-7.0°(c1.2，CHCl3)13C NMRδ82.0，79.8，72.8，70.5，27.9，27.0，25.7，17.8，17.6，8.3，2.5，-4.4，-5.0制備例16化合物213+化合物217方法通用操作3原料化合物503層析洗脫劑含0％至2％乙醚的石油醚化合物2131H NMRδ3.70(q，1H)，2.51(s，1H)，1.80(m，1H)，1.64(m，1H)，1.25(d，3H)，0.98(t，3H)，0.88(s，9H)，0.20(s，6H)化合物21713C NMRδ83.9，74.7，73.3，73.1，31.0，25.6，25.5，18.6，8.1，-4.3，-5.1制備例17化合物214+化合物218方法通用操作3a原料化合物503
層析洗脫劑含0％至1％乙醚的石油醚化合物21413C NMRδ105.9，89.2，74.6，73.5，30.9，25.7，18.7，17.2，8.3，-0.3，-4.5，-4.9化合物21813C NMRδ105.9，89.6，75.1，73.4，30.9，25.7，25.6，18.7，8.3，-0.3，-4.2，-5.0制備例18化合物215+化合物219方法通用操作4原料化合物213+化合物217或化合物214+化合物218層析洗脫劑a)含40％乙醚的石油醚b)含33％乙醚的石油醚化合物2151H NMRδ3.84(1H，q)，2.49(1H，s)，1.74(1H，m)，1.61(1H，m)，1.27(3H，d)，1.09(3H，t)化合物219從乙醚/正庚烷中結晶的m.p.52-53℃1H NMRδ3.65(q，1H)，2.46(s，1H)，1.65(m，2H)，1.31(d，3H)，1.08(t，3H)制備例19化合物216方法通用操作5a原料化合物219層析洗脫劑含5％乙醚的石油醚13C NMRδ108.6，83.9，79.3，79.2，72.8，29.3，28.3，26.0，13.6，8.2制備例20化合物220方法通用操作5a原料化合物215層析洗脫劑含5％乙醚的石油醚13C NMRδ108.6，82.8，81.3，78.4，75.1，31.3，27.6，27.1，15.8，8.8
制備例21化合物301+化合物302方法通用操作7原料化合物204層析洗脫劑含0％至10％乙醚的石油醚化合物30113C NMRδ153.4，142.8，135.3，121.5，116.4，106.5，83.2，82.9，80.3，71.6，70.1，67.0，64.6，56.0，51.4，45.5，43.8，41.0，39.6，36.4，29.0，28.7，26.4，25.8，25.7，25.6，25.2，23.2，21.9，18.1，17.9，17.9，17.3，13.0，12.4，7.6，2.5，-4.3，-5.0，-5.1化合物30213C NMRδ152.5，141.9，134.3，120.5，115.4，105.5，82.3，82.0，79.3，70.7，69.1，66.0，64.7，55.1，51.1，44.6，42.8，41.5，39.2，35.5，28.0，27.7，26.0，24.9，24.7，24.6，24.4，22.3，21.0，17.1，17.0，16.9，16.4，12.4，10.8，6.6，1.5，-5.3，-5.8，-5.9制備例22化合物401方法通用操作8原料化合物301層析洗脫劑含0％至2％乙醚的石油醚13C NMRδ148.2，140.4，135.0，122.9，117.9，111.0，03.1，02.9，00.3，71.0，71.6，67.3，64.6，55.9，51.4；45.8，45.3，44.6，41.0，39.7，29.0，28.6，26.5，25.8，25.7，25.6，25.2，23.2，21.8，18.0，17.9，17.3，13.0，12.3，7.6，2.5，-4.3，-4.9，-5.0，-5.3制備例23化合物402方法通用操作9原料化合物401層析洗脫劑含0％至1％乙醚的石油醚13C NMRδ148.2，140.6，134.9，122.9，117.8，111.0，83.9，80.8，80.4，73.6，71.8，71.7，67.4，56.0，55.8，51.4，45.8，45.3，44.6，40.4，39.4，29.1，28.7，26.5，25.9，25.7，25.6，25.3，23.3，21.8，19.2，18.0，18.0，17.4，13.8，12.4，7.6，2.5，-4.4，-4.9，-5.0，-5.3
制備例24化合物403方法通用操作9原料化合物401層析洗脫劑含0％至1％乙醚的石油醚13C NMRδ148.2，140.7，134.8，123.0，117.7，111.0，83.3，81.4，80.4，72.0，71.8，71.7，67.4，63.8，55.9，51.4，45.8，45.4，44.6，40.3，39.3，29.1，28.7，26.4，25.9，25.7，25.6，25.3，23.3，21.8，18.1，18.0，17.4，15.0，13.9，12.4，7.6，2.5，-4.4，-4.9，-5.0，-5.3制備例25化合物404方法通用操作9原料化合物401烷基化劑丙基溴層析洗脫劑含0％至1％乙醚的石油醚13C NMRδ148.2，140.8，134.8，123.0，117.7，111.0，83.3，81.5，80.5，72.1，71.8，71.7，70.1，67.4，55.9，51.4，45.8，45.4，44.6，40.4，39.5，29.1，28.7，26.3，25.9，25.7，25.6，25.3，23.3，22.9，21.8，18.0，18.0，17.3，13.9，12.4，10.7，7.6，2.5，-4.4，-4.9，-5.0，-5.3制備例26化合物405方法通用操作9原料化合物401烷基化劑芐基溴層析洗脫劑含0％至1％乙醚的石油醚13C NMRδ148.2，140.7，138.5，134.9，128.2，128.0，127.6，127.4，127.1，122.9，117.7，111.0，84.1，81.0，80.4，71.8，71.7，70.1，67.4，55.8，51.4，45.8，45.4，44.6，40.4，39.4，29.2，28.7，26.3，25.9，25.7，25.6，25.3，23.2，21.8，18.0，18.0，17.4，14.0，12.4，7.7，2.5，-4.4，-4.8，-4.9，-5.0，-5.3制備例27
化合物303方法通用操作7原料化合物208層析洗脫劑含0％至5％乙醚的石油醚13C NMR 153.4，142.8，135.3，121.5，116.4，106.5，83.1，82.9，80.0，77.0，72.9，70.1，67.0，64.6，56.0，51.4，45.5，43.8，41.0，39.6，36.4，28.7，28.0，27.2，26.4，25.8，25.7，25.7，25.6，23.2，21.9，18.1，17.9，17.7，13.0，12.4，8.4，2.5，-4.4，-5.0 ，-5.1，-5.1制備例28化合物406方法通用操作8原料化合物303層析洗脫劑含0％至5％乙醚的石油醚13C NMRδ148.2，140.5，135.0，122.9，117.9，111.0，83.1，82.9，80.0，72.9，71.8，67.3，64.6，55.9，51.4，45.8，45.3，44.6，41.0，39.7，28.6，28.0，27.2，26.5，25.8，25.7，25.7，25.6，23.2，21.8，18.0，17.9，17.9，17.7，13.0，12.3，8.4，2.5，-4.4，-4.9，-4.9，-5.0，-5.3制備例29化合物407方法通用操作9原料化合物406烷基化劑乙基溴層析洗脫劑含0％至2％乙醚的石油醚13C NMRδ148.2，140.8，134.8，123.0，117.7，111.0，83.1，81.4，80.1，72.9，71.9，71.8，67.4，63.8，55.9，51.4，45.8，45.4，44.6，40.4，39.4，28.7，28.0，27.2，26.5，25.8，25.7，25.6，23.3，21.8，18.0，18.0，17.9，17.7，15.0，13.9，12.4，8.3，2.4，-4.4，-4.9，-4.9，-5.0，-5.3制備例30化合物304方法通用操作7原料化合物210
層析洗脫劑含5％乙醚的石油醚13C NMRδ153.4，142.8，135.3，121.5，116.4，106.5，83.2，82.9，80.3，71.6，70.1，67.0，64.6，56.0，51.4，45.5，43.8，41.0，39.6，36.4，28.9，28.7，26.4，25.8，25.7，25.6，25.2，23.2，21.9，18.1，18.0，17.9，17.3，13.0，12.4，2.6，2.5，-4.3，-4.9，-5.0，-5.1，-5.1制備例31化合物408方法通用操作8原料化合物304層析洗脫劑含5％乙醚的石油醚13C NMRδ148.2，140.4，135.0，122.9，117.9，111.0，83.1，83.0，80.3，71.8，71.6，67.3，64.6，55.9，51.4，45.8，45.3，44.6，41.0，39.7，28.9，28.6，26.5，25.8，25.7，25.7，25.6，25.2，23.2，21.8，18.0，17.9，17.3，13.0，12.3，7.6，2.5，-4.3，-4.9，-5.0，-5.3制備例32化合物409方法通用操作9原料化合物408烷基化劑乙基溴層析洗脫劑含1％乙醚的石油醚13C NMRδ148.2，140.7，134.8，123.0，117.7，111.0，83.4，81.4，80.4，72.0，71.8，71.7，67.8，67.4，63.8，55.9，51.3，45.8，45.4，44.6，40.3，39.3，29.0，28.7，26.3，25.8，25.7，25.6，25.4，25.3，23.3，21.8，18.0，18.0，17.4，15.0，14.0，12.4，7.6，2.5，-4.4，-4.9，-5.0，-5.3制備例33化合物305方法通用操作7原料化合物212層析洗脫劑含3％乙醚的石油醚13C NMRδ263.2，153.4，142.8，135.3，121.5，116.4，106.5，82.9，80.0，72.9，70.1，67.0，64.7，56.0，51.4，45.5，43.8，41.0，39.6，36.4，28.7，28.0，27.2，26.4，25.7，25.7，25.6，23.2，21.9，18.1，17.9，17.6，13.0，12.4，8.4，2.5，-4.4，-5.0，-5.1
制備例34化合物410方法通用操作8原料化合物305層析洗脫劑含3％乙醚的石油醚13C NMRδ148.2，140.5，135.0，122.9，117.9，111.0，83.1，82.9，80.0，72.9，71.8，67.3，64.7，55.9，51.4，45.8，45.3，44.6，41.0，39.7，28.7，28.0，27.2，26.5，25.7，25.7，25.6，23.2，21.8，18.1，18.0，17.9，17.6，13.0，12.3，8.4，2.5，-4.4，-4.9，-4.9，-5.0，-5.3制備例35化合物411方法通用操作9原料化合物410層析洗脫劑含1％乙醚的石油醚13C NMRδ148.2，140.8，134.8，123.0，117.7，111.0，83.0，81.4，80.1，72.9，72.0，71.8，67.4，63.8，55.9，51.4，45.8，45.4，44.7，40.3，39.3，28.7，28.0，27.2，26.4，25.8，25.7，25.6，23.3，21.8，18.0，18.0，17.9，17.6，15.0，14.0，12.4，8.4，2.5，-4.4，-4.9，-4.9，-5.0，-5.3制備例36化合物306方法通用操作7a原料化合物216層析洗脫劑含0％至20％乙醚的石油醚13C NMRδ153.4，142.7，135.4，121.5，116.4，108.1，106.5，85.6，84.8，79.3，78.9，70.1，67.0，64.4，55.9，51.2，45.5，43.8，40.6，39.5，36.4，28.7，28.2，28.0，26.2，25.9，25.7，25.6，23.2，21.9，18.1，17.9，13.5，13.1，12.4，8.2，-5.0，-5.1，-5.1制備例37化合物412方法通用操作8
原料化合物306層析洗脫劑含10％乙醚的石油醚13C NMRδ148.1，140.3，135.0，122.9，117.9，111.0，108.1，85.6，84.7，79.3，78.9，71.9，67.3，64.4，55.8，51.2，45.8，45.3，44.6，40.6，39.5，28.6，28.2，28.0，26.2，25.9，25.7，25.6，23.1，21.8，18.0，17.9，13.5，13.1，12.4，8.2，-4.9，-5.0，-5.3制備例38化合物413方法通用操作9原料化合物412烷基化劑乙基溴層析洗脫劑含0％至2％乙醚的石油醚1H NMRδ6.22(d，1H)，6.00(d，1H)，5.17(d，1H)，4.85(d，1H)，4.36(m，1H)，4.30(q，1H)，4.20(d，1H)，4.16(m，1H)，3.72(m，1H)，3.30(m，1H)，2.82(dd，1H)，2.43(dd，1H)，2.20(dd，1H)，1.99(t，1H)，2.0-0.8(m，15H)，1.44(s，3H)，1.40(s，3H)，1.26(d，3H)，1.18(t，3H)，1.07(t，3H)，1.00(d，3H)，0.87(s，18H)，0.51(s，3H)，0.05(s，12H)制備例39化合物307方法通用操作7a原料化合物220層析洗脫劑含0％至20％乙醚的石油醚13C NMRδ153.4，142.7，135.3，121.5，116.4，108.2，106.5， 87.9，83.8，81.2，78.4，70.1，67.0，64.4，55.9，51.3，45.4，43.8，40.7，39.5，36.4，31.3，28.7，27.6，26.8，26.3，25.7，25.6，23.2，21.9，18.1，17.9，15.8，13.1，12.4，8.7，-5.0，-5.1，-5.1制備例40化合物414方法通用操作8原料化合物307無層析粗產物用于下面的步驟13C NMRδ6.22(1H，d)，6.01(1H，d)，5.17(1H，d)，4.85(1H，d)，4.67(1H，s)，4.36(1H，m)，4.17(1H，m)，3.85(1H，q)，2.82(1H，dd)，2.43(1H，dd)，2.21(1H，dd)，1.89(1H，t)，1.85-1.00(13H，m)，1.68(2H，q)，1.51(3H，s)，1.35(3H，d)，1.33(3H，s)，1.06(3H，t)，1.04(3H，d)，0.87(18H，s)，0.53(3H，s)，0.05(12H，s)制備例41化合物415方法通用操作9原料化合物414烷基化劑乙基溴層析洗脫劑含0％至2％乙醚的石油醚13C NMRδ148.1，140.7，134.9，122.9，117.8，111.0，108.1，86.5，84.2，81.3，78.5，71.9，71.8，67.3，63.9，55.9，51.4，45.9，45.4，44.6，40.2，39.3，31.4，28.7，27.5，26.9，26.3，25.7，25.6，23.3，21.8，18.0，18.0，15.8，15.0，14.0，12.4，8.8，-4.9，-5.0，-5.3制備例42化合物505方法通用操作11原料(R)-(+)-乳酸甲酯純化蒸餾；b.p.94℃/1.3毫巴；[α]D20+54.4°(c2.29，CHCl3)13C NMRδ170.0，74.1，52.8，39.1，18.4制備例43化合物506方法通用操作11原料(S)-(-)-乳酸乙酯純化蒸餾；b.p.98℃/1.5毫巴；[α]D20-53.1°(c2.03，CHCl3)(文獻值Breitschuh，R.等Synthesis 1992，1170[α]D20-54.6°(c4.36，CHCl3)制備例44化合物507方法通用操作12
原料化合物505純化蒸餾；b.p.39℃/53毫巴；[α]D20-2.8°(c2.21，CHCl3)1H NMRδ5.02(dq，1H)，3.80(s，3H)，1.58(dd，3H)制備例45化合物508方法通用操作12原料化合物506純化蒸餾；b.p.34℃/27毫巴；[α]D20+3.8°(c2.32，CHCl3)13C NMRδ170.5，85.7，61.5，18.3，14.1制備例46化合物509方法通用操作1a原料化合物507純化蒸餾；b.p.約45℃/27毫巴；[α]D20約-51.6°(c2.1，CHCl3∶THF4∶1)1H NMRδ4.88(dq，1H)；2.64(m，2H)；1.4/(dd，3H)；1.08(t，3H)制備例47化合物510方法通用操作1a原料化合物508純化蒸餾；b.p.約45℃/27毫巴；[α]D20約+43.3°(c2.0，CHCl3∶THF7∶3)13C NMRδ210.8，92.6，30.7，17.7，6.8制備例48化合物221方法通用操作2a原料化合物509純化無13C NMRδMajor 93.4，79.6，74.3，71.3，27.8，25.0，14.8，7.4Minor 93.0，80.0，74.6，71.0，27.0，25.4，14.7，7.2制備例49化合物222方法通用操作6原料化合物221層析洗脫劑石油醚制備例50化合物223方法通用操作2a原料化合物210純化無13C NMRδMajor93.4，79.7，74.3，71.4，27.8，25.0，14.8，7.4Minor93.0，80.0，74.8，71.0，27.0，25.4，14.7，7.2制備例51化合物224方法通用操作6原料化合物223層析洗脫劑石油醚13C NMRδMajor93.2，80.4，78.3，70.5，28.1，25.9，14.9，7.7，2.1Minor92.5，80.6，78.2，70.3，27.9，25.1，14.6，7.2，2.1制備例52化合物308方法通用操作7原料化合物1和化合物222層析洗脫劑含0％至20％乙醚的石油醚制備例53化合物416方法通用操作8a原料化合物308層析洗脫劑含50％二氯甲烷的石油醚制備例54化合物417方法通用操作9原料化合物416烷基化劑乙基溴層析洗脫劑含0％至10％乙醚的石油醚制備例55化合物309方法通用操作7原料化合物1和化合物224層析洗脫劑含0％至20％乙醚的石油醚13C NMRδ153.4，142.7，135.4，121.5，116.4，106.5，93.3，83.1，81.5，78.5，70.1，67.0，64.6，55.9，51.4，45.5，43.8，41.2，40.9，39.6，36.4，28.9，28.7，28.3，27.5，26.3，25.7，25.6，23.2，22.4，21.9，20.2，19.2，18.1，17.9，15.1，14.8，14.1，13.0，12.4，11.2，7.8，2.2，-5.0，-5.1，-5.1制備例56化合物418方法通用操作8a原料化合物309層析洗脫劑含50％二氯甲烷的石油醚1H NMRδ6.22(d，1H)，6.02(d，1H)，5.17(d，1H)，4.85(d，1H)，4.62(dq，1H)，4.60(m，1H)，4.37(m，1H)，4.18(m，1H)，2.83(d，1H)，2.50-0.80(m，24H)，1.31(dd，3H)，1.01(d，3H)，0.85(s，18H)，0.83(d，3H)，0.12(s，9H)，0.06(d，12H)
制備例57化合物419方法通用操作9原料化合物418烷基化劑乙基溴層析洗脫劑含0％至10％乙醚的石油醚13C NMRδ148.1，140.6，134.9，122.9，117.8，111.0，93.4，82.6，80.5，74.3，71.9，67.3，64.0，55.8，51.3，45.9，45.4，44.6，40.1，39.3，28.7，27.8，26.2，25.7，25.6，25.0，23.3，21.8，18.0，17.9，14.7，14.0，12.4，7.2，2.2，-4.9，-5.0，-5.3實施例實施例11(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5-乙基-1(S)，5(S)，6(S)-三羥基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯化合物101方法通用操作4原料化合物401層析洗脫劑含50％至0％石油醚的乙酸乙酯13C NMR(CD3OD)δ149.8，142.5，135.8，124.9，119.0，112.1，84.3，82.4，77.1，71.6，71.5，67.4，65.5，57.3，52.7，46.9，46.2，43.7，42.4，40.9，30.1，28.5，27.0，26.2，24.5，23.2，17.3，14.0，13.1，7.9實施例21(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5(S)，6(S)-二羥基-5-乙基-1(S)-甲氧基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯化合物102方法通用操作4原料化合物402層析洗脫劑含50％至0％石油醚的乙酸乙酯13C NMRδ147.7，142.9，133.1，124.9，117.2，111.8，82.4，82.0，75.6，73.8，71.3，70.9，66.8，56.4，56.0，51.5，45.7，45.3，42.9，40.3，39.4，29.1，27.2，26.5，26.4，23.5，22.1，17.1，14.1，12.6，7.7
實施例31(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5(S)，6(S)-二羥基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯化合物103方法通用操作4原料化合物403層析洗脫劑含50％至0％石油醚的乙酸乙酯13C NMRδ147.7，142.9，133.2，124.8，117.2，111.8，82.6，81.9，75.6，72.3，71.3，70.8，66.8，64.2，56.0，51.5，45.8，45.3，42.8，40.2，39.3，29.1，27.2，26.4，26.3，23.5，22.2，17.1，15.2，14.2，12.7，7.7實施例41(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5(S)，6(S)-二羥基-5-乙基-1(S)-(1-丙氧基)-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯化合物104方法通用操作4原料化合物404層析洗脫劑含50％至0％石油醚的乙酸乙酯13C NMRδ147.7，143.0，133.0，125.0，117.1，111.8，82.9，81.7，75.6，72.4，71.3，70.9，70.5，66.9，56.0，51.5，45.8，45.3，42.9，40.3，39.5，29.1，27.2，26.5，26.3，23.5，23.1，22.2，17.1，14.2，12.7，10.9，7.7實施例51(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(1(S)-芐氧基-5(S)，6(S)-二羥基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯化合物105方法通用操作4原料化合物405層析洗脫劑含50％至0％石油醚的乙酸乙酯13C NMRδ147.7，142.9，138.5，133.1，128.2，127.7，127.4，124.9，117.1，111.8，82.6，82.2，75.6，71.9，71.3，70.8，70.4，66.8，56.0，51.5，45.8，45.3，42.9，40.3，39.4，29.0，27.2，26.4，26.3，23.5，22.1，20.8，17.1，12.7，7.7實施例61(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5(R)，6(S)-二羥基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯化合物106方法通用操作4原料化合物407層析洗脫劑含50％至0％石油醚的乙酸乙酯13C NMRδ147.7，142.8，133.2，124.8，117.2，111.8，82.9，81.9，75.4，72.3，71.2，70.8，66.8，64.2，56.0，51.5，45.8，45.2，42.9，40.2，39.3，29.2，29.1，26.2，25.1，23.5，22.2，17.1，15.2，14.2，12.7，7.5實施例71(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5(R)，6(R)-二羥基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯化合物107方法通用操作4原料化合物409層析洗脫劑含50％至0％石油醚的乙酸乙酯13C NMRδ147.7，142.9，133.2，124.9，117.2，111.8，82.6，81.9，75.6，72.3，71.3，70.8，66.8，64.2，56.0，51.5，45.8，45.2，42.8，40.2，39.3，29.1，27.2，26.4，26.3，23.5，22.1，17.1，15.2，14.2，12.7，7.7實施例81(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5(S)，6(R)-二羥基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯化合物108方法通用操作4原料化合物411層析洗脫劑含50％至0％石油醚的乙酸乙酯13C NMRδ147.7，142.8，133.2，124.8，117.2，111.8，83.0，81.9，75.4，72.3，71.2，70.8，66.8，64.2，56.0，51.5，45.8，45.2，42.9，40.2，39.3，29.3，29.1，26.3，25.1，23.5，22.1，17.1，15.2，14.2，12.7，7.5實施例91(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4-乙基-1(S)，4(S)，5(S)-三羥基-2-己炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯化合物109方法通用操作10
原料化合物412層析洗脫劑乙酸乙酯1H NMR(CD3OD)δ6.32(d，1H)，6.08(d，1H)，5.28(d，1H)，4.90(d，1H)，4.57(d，1H)，4.35(t，1H)，4.12(m，1H)，3.63(q，1H)，2.86(dd，1H)，2.55(dd，1H)，2.25(dd，1H)，2.0-1.0(m，16H)，1.27(d，3H)，1.23(d，3H)，1.05(t，3H)，0.56(s，3H)實施例101(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4(S)，5(S)-二羥基-1(S)-乙氧基-4-乙基-2-己炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯化合物111方法通用操作10原料化合物413層析洗脫劑含50％至0％石油醚的乙酸乙酯1H NMRδ6.37(d，1H)，6.01(d，1H)，5.32(t，1H)，5.00(d，1H)，4.42(t，1H)，4.41(m，2H)，3.81(q，1H)，3.73(m，1H)，3.31(m，1H)，2.83(dd，1H)，2.59(dd，1H)，2.31(m，2H)，2.1-1.0(m，14H)，1.25(d，3H)，1.21(t，3H)，1.08(t，3H)，1.02(d，3H)，0.55(s，5H)實施例111(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4-乙基-1(S)，4(R)，5(S)-三羥基-2-己炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯化合物114方法通用操作10原料化合物414層析洗脫劑乙酸乙酯13C NMRδ(CD3OD)149.9，142.4，135.8，130.2，124.9，119.1，112.1，73.5，71.5，67.4，65.3，61.6，57.3，52.7，46.9，46.2，43.8，42.2，40.9，32.1，30.1，27.1，24.6，23.2，18.3，14.5，14.0，13.0，9.0實施例121(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4(R)，5(S)-二羥基-1(S)-乙氧基-4-乙基-2-己炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯化合物116方法通用操作10原料化合物415層析洗脫劑含50％至0％石油醚的乙酸乙酯13C NMRδ147.6，142.9，133.0，125.0，117.1，111.9，85.8，85.3，75.5，73.2，72.0，70.9，66.9，64.3，56.0，51.5，45.7，45.3，42.9，40.2，39.4，31.0，29.1，26.4，23.5，22.1，18.5，15.2，14.2，12.7，8.3實施例13含有化合物103的膠囊劑將化合物103溶于花生油至最終濃度為1μg化合物103/ml油。在加熱下，將10重量份明膠、5重量份甘油、0.08重量份山梨酸鉀和14重量份蒸餾水混合在一起，形成軟明膠膠囊。然后在每粒膠囊內填充100μl化合物103的油溶液，以便每粒膠囊含有0.1μg化合物103。
實施例14含有化合物102的皮膚霜劑在1g杏仁油中溶解0.05mg化合物102。向該溶液中加入40g礦物油和20g半乳化蜂蠟。將混合物加熱至液化。加入40ml熱水后，使混合物充分混合。所得霜劑含有大約0.5μg化合物102每克霜劑。
實施例15含有化合物108的注射液化合物108(活性物質) 10μg磷酸氫二鈉二水合物(緩沖劑) 15.4mg磷酸二氫鈉二水合物(緩沖劑) 2mg氯化鈉 0.8mg抗壞血酸鈉(抗氧化劑)5mg來自BASF的SolutolHS15(增溶劑)5mg注射用水加至1ml加熱至溫度最高80℃，將SolutolHS 15溶于注射用水。覆蓋一層氮。加入緩沖物質和氯化鈉，然后將溶液冷卻至最高30℃。然后加入抗壞血酸鈉，最后將化合物108溶于所得溶液。
將溶液無菌過濾，在適當時間-溫度條件下高壓滅菌。
實施例161(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(1(S)，5(R/S)-二羥基-5-乙基-6(S)-氟-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯化合物157方法通用操作10原料化合物416
層析洗脫劑含50％至0％石油醚的乙酸乙酯實施例171(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(1(S)-乙氧基-5-乙基-6(S)-氟-2-庚炔-5(R/S)-羥基-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯化合物158方法通用操作10原料化合物417層析洗脫劑含50％石油醚的乙酸乙酯實施例181(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(1(S)，5(R/S)-二羥基-5-乙基-6(R)-氟-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯化合物159方法通用操作10原料化合物418層析洗脫劑含50％至0％石油醚的乙酸乙酯13C NMRδ147.7，142.7，133.2，124.9，117.3，111.8，93.4，84.2，80.5，74.5，70.9，66.9，64.8，56.0，51.5，45.7，45.3，42.9，41.0，39.6，29.0，28.0，26.4，25.3，23.4，22.1，14.9，13.3，12.6，7.5實施例191(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(1(S)-乙氧基-5-乙基-6(R)-氟-2-庚炔-5(R/S)-羥基-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯化合物160方法通用操作10原料化合物419層析洗脫劑含50％石油醚的乙酸乙酯1H NMRδ6.37(d，1H)，6.02(d，1H)，5.33(s，1H)，5.00(s，1H)，4.68(dq，1H)，4.43(m，1H)，4.23(m，1H)，4.13(s，1H)，3.73(m，1H)，3.30(m，1H)，2.84(dd，1H)，2.58(m，2H)，2.40(dd，1H)，2.31(dd，1H)，2.05-1.20(m，19H)，1.38(dd，3H)，1.20(t，3H)，1.01(d，3H)，0.96(t，3H)，0.54(s，3H)
權利要求
1.式I化合物，包括任意一種可能的式I非對映異構體的純凈形式和式I非對映異構體的任意混合物 其中式R代表氫，或者R代表(C1-C6)烷基、苯基或(C7-C9)芳烷基，非必須地被一個或多個選自(C1-C3)烷基、F和苯基的基團取代；n是整數0、1或2；X代表羥基或鹵素。
2.根據權利要求1的化合物，其中R選自由甲基、乙基、丙基、異丙基、芐基、鄰甲基芐基、間甲基芐基和對甲基芐基組成的組。
3.根據任意前述權利要求之一的化合物，其中n是0或1，優選地n是1。
4.根據任意前述權利要求之一的化合物，其中X代表選自OH、F和Cl的取代基。
5.根據任意前述權利要求之一的化合物，具有構型22(S)，25(S)，26(S)或22(S)，25(S)，26(R)。
6.根據權利要求1的化合物，選自1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5-乙基-1(S)，5(S)，6(S)-三羥基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物101)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5(S)，6(S)-二羥基-5-乙基-1(S)-甲氧基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物102)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5(S)，6(S)-二羥基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物103)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5(S)，6(S)-二羥基-5-乙基-1(S)-(1-丙氧基)-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物104)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(1(S)-芐氧基-5(S)，6(S)-二羥基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物105)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5(R)，6(S)-二羥基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物106)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5(R)，6(R)-二羥基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物107)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5(S)，6(R)-二羥基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物108)，(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4-乙基-1(S)，4(S)，5(S)-三羥基-2-己炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物109)，(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4(S)，5(S)-二羥基-1(S)-乙氧基-4-乙基-2-己炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物111)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4-乙基-1(S)，4(R)，5(S)-三羥基-2-己炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物114)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4(R)，5(S)-二羥基-1(S)-乙氧基-4-乙基-2-己炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物116)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(1(S)-乙氧基-5-乙基-6(S)-氟-5(S)-羥基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物149)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(1(S)-乙氧基-5-乙基-6(R)-氟-5(S)-羥基-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物150)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(1(S)，5(R/S)-二羥基-5-乙基-6(S)-氟-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物157)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(1(S)-乙氧基-5-乙基-6(S)-氟-2-庚炔-5(R/S)-羥基-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物158)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(1(S)，5(R/S)-二羥基-5-乙基-6(R)-氟-2-庚炔-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物159)，和1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(1(S)-乙氧基-5-乙基-6(R)-氟-2-庚炔-5(R/S)-羥基-1-基)-9，10-開環孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物160)。
7.制備權利要求1的式I化合物的方法，其特征在于a)使1(S)，3(R)-雙-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-20(R)-甲酰基-9，10-開環孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯與得自側鏈構件HC≡C-(CH2)n-C(C2H5)(O-PG1)(CHX1-CH3)的有機金屬試劑反應，其中n和R具有上述含義；X1代表O-PG2、氟、氯、溴或碘；PG1和PG2都代表選自三甲基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基的相同或不同基團；或者PG1和PG2一起構成一個雙官能的亞異丙基縮酮保護基團；生成式III化合物，b)非必須地分離步驟a)所生成的化合物的非對映異構體，c)使步驟a)或步驟b)所生成的化合物受到三重致敏的光異構化作用，得到5(Z)異構體，d)非必須地在堿和相轉移催化劑的存在下，用(C1-C6)烷基或(C7-C9)芳烷基溴化物或碘化物烷基化步驟c)所生成的化合物的22-羥基，e)脫保護步驟c)或步驟d)所生成的化合物，生成式I化合物。
8.藥物組合物，含有有效量的一種或多種權利要求1-6的化合物，以及藥學上可接受的無毒載體和/或助劑。
9.治療和/或預防以異常細胞分化和/或細胞增殖為特征的疾病的方法，例如牛皮癬，包括掌跖膿皰病、持續性肢皮炎和指甲牛皮癬，和其他角化作用障礙；與HIV有關的皮膚病；傷口愈合；各種癌癥，例如白血病、乳腺癌、腦神經膠質腫瘤、骨肉瘤、骨髓纖維變性、黑瘤、其他皮膚癌癥；免疫系統的疾病或失調，例如宿主對移植物和移植物對宿主的反應；移植排斥；自體免疫疾病，包括盤狀與系統性紅斑狼瘡；糖尿病；自體免疫類型的慢性皮膚病，例如硬皮病和尋常天皰瘡；炎性疾病，例如哮喘和類風濕性關節炎；以及大量其他疾病狀態，包括甲狀旁腺機能亢進，特別是與腎衰有關的繼發性甲狀旁腺機能亢進；認知缺損或老年性癡呆(阿爾茨海默氏病)，和其他神經變性疾病；高血壓；痤瘡；脫發；皮膚萎縮，例如甾體誘導的皮膚萎縮；皮膚老化，包括光老化；和它們用于促進骨生成和治療或預防骨質疏松和骨軟化的方法，該方法在于在需要時對患者給以根據權利要求8的藥物組合物。
10.根據任意權利要求1-6之一的化合物在藥物制備中的用途，該藥物用于治療和/或預防以異常細胞分化和/或細胞增殖為特征的疾病，例如牛皮癬，包括掌跖膿皰病、持續性肢皮炎和指甲牛皮癬，和其他角化作用障礙；與HIV有關的皮膚病；傷口愈合；各種癌癥，例如白血病、乳腺癌、腦神經膠質腫瘤、骨肉瘤、骨髓纖維變性、黑瘤、其他皮膚癌癥；免疫系統的疾病或失調，例如宿主對移植物和移植物對宿主的反應；移植排斥；自體免疫疾病，包括盤狀與系統性紅斑狼瘡；糖尿病；自體免疫類型的慢性皮膚病，例如硬皮病和尋常天皰瘡；炎性疾病，例如哮喘和類風濕性關節炎；以及大量其他疾病狀態，包括甲狀旁腺機能亢進，特別是與腎衰有關的繼發性甲狀旁腺機能亢進；認知缺損或老年性癡呆(阿爾茨海默氏病)，和其他神經變性疾病；高血壓；痤瘡；脫發；皮膚萎縮，例如甾體誘導的皮膚萎縮；皮膚老化，包括光老化；還用于促進骨生成和治療或預防骨質疏松和骨軟化。
全文摘要
本發明涉及式(I)化合物,其中式R代表氫,或者R代表(C
文檔編號A61P25/28GK1372544SQ00812345
公開日2002年10月2日 申請日期2000年7月11日 優先權日1999年8月4日
發明者C·A·S·布萊亭 申請人:里奧藥物制品有限公司