一株拮抗植物病原菌的菌株及其應用的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一株植物病原真菌拮抗菌及其在防治植物病害中的應用。本發明拮抗菌為枯草芽孢桿菌Bacillus?subtilis?ZSH-1，微生物保藏號為CGMCC?NO.9025。本發明的枯草芽孢桿菌Bacillus?subtilis?ZSH-1是從楊樹根部土壤中分離獲得，能防治楊樹炭疽病菌、楊樹腐爛病菌、柳樹腐爛病菌、蘋果腐爛病菌、甘棠腐爛病菌、尖孢鐮刀菌和棗縮果病菌引起的植物病害，并且本發明的拮抗菌產生的抑菌揮發物也能防治楊樹炭疽病菌、楊樹腐爛病菌、柳樹腐爛病菌、蘋果腐爛病菌、甘棠腐爛病菌、尖孢鐮刀菌和棗縮果病菌引起的植物病害。枯草芽孢桿菌Bacillus?subtilis?ZSH-1是一種防效高，防治范圍廣，環境安全性好的生物防治潛力菌株，具有良好的開發應用前景。
【專利說明】一株括抗植物病原菌的菌株及其應用

【技術領域】
[0001]本發明涉及一株細菌菌株，特別涉及一株產抑菌揮發物的植物病原真菌的拮抗細菌及其應用，屬于微生物領域，可用于植物保護，防治植物病害。

【背景技術】
[0002]植物病害的生物防治是指通過人以外的一種或多種生物來降低病原菌數量或減弱病原菌的致病活力，從而減少病害的發生，并且有利于有益生物如作物、樹木、動物、益蟲及微生物。植物病害生物防治上可供利用的微生物種類包括真菌、放線菌、細菌、病毒甚至高等植物等。其中，枯草芽孢桿菌是最常用到的拮抗微生物之一。
[0003]枯草芽胞桿菌是一種廣泛分布于各種不同生活環境中的革蘭氏陽性細菌，在土壤和植物的表面普遍存在，同時還是植物體內常見的一種內生菌，對人畜無害，不污染環境。它生長速度快、營養需求簡單，能產生耐熱抗逆的芽孢，在植物的表面易于存活、定殖和與繁殖，而且生產枯草芽胞桿菌制劑的工藝簡單，制劑穩定，施用方面，存儲期長，是一種理想的生防微生物。近幾年來，國內外專家進行了大量研究，發現枯草芽孢桿菌有很多的抑菌機制。包括營養和空間位點的競爭；分泌抗菌物質，如抗菌肽和蛋白類物質等；溶菌作用，使病原菌菌體破裂、解體等以及促進植物生長的作用。
[0004]植物病害是世界上一種非常普遍的自然災害。植物病害在世界范圍分布廣泛，其種類繁多，侵染的寄主植物廣，造成生態、經濟以及社會的損失巨大。例如，板栗疫病幾乎毀滅了全部美國的美國栗林。榆樹荷蘭病的發生使歐洲許多國家的城市庭園、行道榆樹大量死亡。據聯合國糧農組織((FAO)統計，每年因遭受植物病害引起的減產平均損失為總產量的10%~15%。植物病害在我國也有廣泛的發生，其中楊樹炭疽病就是一種重要的病害。楊樹是我國造林綠化、生態環境建設和社會經濟發展的重要樹種，具有適應性廣、生長速度快等特點。目前，我國楊樹林面積已經超過800萬ha，蓄積量達到4.29億m3，居世界首位，超過其他國家的楊樹人工林面積的總和。近年來，楊樹炭疽病等病害的發生給我們國家造成了巨大的經濟和生態損失。楊樹炭疽病的主要病原為膠孢炭疽菌(Colletotrichumgloeospor1ides)。其主要侵染楊樹的葉片和枝條,引起早期的落葉和枯梢，導致樹勢降低而誘發其它次期性生物災害或枯死。我國南北楊樹栽培區中楊樹炭疽病均有不同的危害。陜西省毛白楊(Populus tomentosa)當年扦插苗發病株率可達78%,4~5年幼樹發病株率可達100%，葉片受害率達100%。京津冀地區作為防護林、行道樹廣泛栽植的北京楊(PopulusXbeijingens)的炭疽病發病尤為嚴重，2005年延慶、昌平防護林的病株率高達 100%。
[0005]目前，植物病害的防治主要是使用化學農藥(殺菌劑)，化學農藥的長期使用不僅使植物病原菌產生抗藥性，而且會污染環境，影響人類健康，破壞生態環境。隨著可持續發展戰略的實施，人們越來越意識到了使用化學農藥的弊端。自20世紀80年代中期，在生物防治蓬勃發展的帶動下，植物病害的生物防治作為了一種安全、有效的控制植物病害的新途徑，漸漸被人們所重視，并成為熱點研究方向。應用枯草芽孢桿菌來防治植物病害已經有很多的報道。從楊樹根部土壤中分離篩選獲得的一株能廣譜的高效抑制植物病原真菌并能產生抑菌揮發物的拮抗菌，使生物防治應用范圍更加廣泛、使用更加靈活，拮抗菌產生的抑菌揮發物為防治植物真菌病害提供了一個新的思路和方法，這些對于植物真菌病害的防治具有非常重要的意義。


【發明內容】

[0006]本發明的目的之一是針對植物病害防治中存在的植物病原菌產生抗藥性的技術問題提供一株抑菌譜廣、植物病原真菌抑制效率高、而且還能產生抑菌揮發物的枯草芽孢桿菌 Bacillus subtilis ZSH-1。
[0007]本發明從楊樹根部土壤中分離篩選獲得的拮抗菌菌株Bacillus subtilis ZSH-1對多種植物病原真菌具有高效拮抗作用并且還能產生揮發性抑菌物質，是一種廣譜生防細菌菌株，應用本發明的拮抗菌Bacillus subtilis ZSH-1的菌株解決了目前植物病害化學農藥防治難，環境污染嚴重的問題。
[0008]本發明的目的之二是提供上述拮抗菌株Bacillus subtilis ZSH-1在防治植物病原真菌方面的用途，拮抗菌株Bacillus subtilis ZSH-1在防治楊樹炭疽病菌、楊樹腐爛病菌、柳樹腐爛病菌、蘋果腐爛病菌、甘棠腐爛病菌、尖孢鐮刀菌和棗縮果病菌上的多種應用，特別是在防治由膠孢炭疽菌引起的楊樹炭疽病方面的用途。
[0009]本發明的上述目的是通過以下技術方案來實現的:
[0010]本發明的拮抗菌為枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1,其微生物保藏號是:CGMCC N0.9025 ;分類命名是:Bacillus subtilis ;保藏時間:2014年4月9日；保藏地址:北京市朝陽區北辰西路，中國科學院微生物研究所；保藏單位:中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC)。
[0011]本發明的拮抗菌菌株Bacillus subtilis ZSH-1能高效防治楊樹炭疽病,抑制楊樹炭疽病菌、楊樹腐爛病菌、柳樹腐爛病菌、蘋果腐爛病菌、甘棠腐爛病菌、尖孢鐮刀菌和棗縮果病菌；而且還能產生抑菌揮發物，產生的抑菌揮發物也能很好的抑制楊樹炭疽病菌、楊樹腐爛病菌、柳樹腐爛病菌、蘋果腐爛病菌、甘棠腐爛病菌、尖孢鐮刀菌和棗縮果病菌的生長。
[0012]本發明所述拮抗楊樹炭疽病菌的細菌菌株的形態特征:
[0013]枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1為革蘭氏陽性桿菌，菌體大小約0.5-0.8umXl.2-2.5um，有芽孢，周生鞭毛，能運動。
[0014]菌體在LB培養基平板上呈白色，不透明，菌落光滑，圓形，中央隆起，邊緣完整。
[0015]其中，每100ml所述LB培養基含有胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCl 10g，瓊脂粉 15g，水 1000ml, ρΗ7.0-7.2。
[0016]本發明拮抗楊樹炭疽病菌的細菌菌株Bacillus subtilis ZSH-1的分離篩選方法:
[0017]I)取楊樹根部土壤5g,裝入裝有45mL無菌水的滅菌三角瓶中，于28°C下180rpm振蕩30min，靜置，得到的菌懸液(即為KT1的土壤稀釋液，也就是稀釋10倍的土壤溶液)；然后用10倍梯度稀釋法依次稀釋得到10_3、10_4、10_5濃度梯度的稀釋液，從各個濃度梯度懸浮液中分別取0.lmL，用無菌涂布棒涂于LB培養基平板上，以無菌水為對照，涂抹均勻后放到恒溫箱中28°C恒溫倒置培養。
[0018]2)連續觀察8天后，挑取菌落形態不同的菌株，再次在LB培養基平板上進行劃線純化培養，獲得多株楊樹根部土壤細菌菌株，并在4°C下保存備用。
[0019]3)將楊樹炭痕病囷(購自中國林業微生物囷種保減管理中心，保減編號CFCC80308)接種于馬鈴薯瓊脂培養基PDA (每100mL含有馬鈴薯200g，葡萄糖20g，，瓊脂粉17g，水1000ml，pH7.0-7.2)平板上，在28°C條件下，恒溫培養7d后用6mm打孔器打取菌餅，并將新鮮的、直徑為6mm的楊樹炭疽病菌菌餅置于另一 PDA平板中央，接著用接種環分別挑取少許步驟2)分離純化后的土壤細菌，并在距離楊樹炭疽菌菌餅2cm處輕輕劃線，放置于培養箱中，28°C恒溫倒置對峙培養，每個對峙實驗平行重復3次。
[0020]4)培養7天后觀察并記錄抑菌帶的有無以及大小，選出對楊樹炭疽病菌具有最強抑制效果，抑菌帶最寬的土壤細菌菌株。
[0021]觀察結果表明ZSH-1菌株的抑菌效果最好，抑菌帶寬度最寬，抑菌帶寬度> 10mm。
[0022]本發明枯草芽孢桿菌菌株Bacillus subtilis ZSH-1的篩選及防治楊樹炭疽病菌特性測定采用的培養基如下:
[0023]篩選培養基(LB平板培養基)成分:胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCl 10g，瓊脂粉 15g，水 1000ml, ρΗ7.0-7.2。
[0024]NB液體培養基成分:蛋白胨10g，牛肉膏3g，NaCl 5g，水1000ml, ρΗ7.0-7.2。
[0025]馬鈴薯瓊脂(PDA)平板培養基成分:馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂粉17g，水1000ml, ρΗ7.0-7.2。
[0026]發酵培養基(液體)成分:葡萄糖10.0g，蛋白胨5.0g，大豆粉5.0g, KH2PO4L Og,MgSO4.7H20 0.5g, NH4Cl 3.0g, Na2HPO4 1.0g，酵母浸粉 0.5g，水 1000ml, ρΗ7.0-7.2。
[0027]TYB固體培養基成分:胰蛋白胨10g，酵母浸粉5g，牛肉膏3g，葡萄糖20g，KH2PO40.5g, MgSO4 0.3g，MnSO4 0.07g, FeSO4 0.3g，檸檬酸 0.3g，瓊脂 15g，水 1000ml，ρΗ7.0_7.2。
[0028]本發明的枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1的培養特性:
[0029]本發明的枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1生長溫度范圍為10°C~50°C，最適生長溫度范圍為28°C~30°C;生長pH范圍為5~10，最適生長pH范圍為6~7.5 ;能在0.2%~10%的NaCl濃度的NB培養基中生長。能氧化L-阿拉伯糖、甘露醇、D-木糖，產酸；能氧化葡萄糖，但不產氣，接觸酶、氧化酶、V-P實驗呈陽性，具有水解淀粉、酪蛋白、卵磷脂的能力，不能水解酪氨酸、苯丙氨酸，能利用丙二酸鹽，不能利用檸檬酸鹽，具有糖酵解能力、硝酸鹽還原能力，能產硫化氫，能液化明膠，石蕊牛奶實驗變紅。
[0030]根據《常見細菌鑒定手冊》，對照菌株ZSH-1的形態特征、生理生化特性以及系統發育樹分析鑒定菌株ZSH-1為Bacillus屬菌株，并確認本發明菌株為枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1。
[0031]本發明還包括以上述菌株的能高效防治楊樹炭疽病的菌株枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1，微生物保藏號為CGMCC N。.9025的各種代謝產物。
[0032]以上述枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1，微生物保藏號為CGMCC N0.9025為活性成分的生物制劑也屬于本發明的保護范圍。在需要的時候，該菌劑中還可包含菌劑制備中常用的載體和輔料。
[0033]本發明的拮抗楊樹炭疽病菌的枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1在防治楊樹炭疽病中的應用；所述應用還包括枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1菌液、無菌濾液、培養物、生長過程中產生揮發性代謝物(抑菌揮發物)在防治楊樹炭疽病中的應用；所述應用又包括枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1菌液、抑菌揮發物對楊樹炭疽病病菌的離體防治。
[0034]其中，枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1的菌液、無菌濾液及抑菌揮發物對楊樹炭疽病菌的平板抑制作用明顯。菌株ZSH-1的菌液在6d內對楊樹炭疽病菌的平板抑制率達到100%，ZSH-1的無菌濾液在6d內對楊樹炭疽病菌的平板抑制率隨著培養時間的增加而減小，在第Id時抑制率達到100%，在第6d時抑制率達到48.49%。ZSH-1生長過程中產生揮發性代謝物(抑菌揮發物)在60h內對楊樹炭疽病的平板抑制率隨著培養時間的增加而增大，在60h時，其抑制率達到30.06%。
[0035]另外，枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1的菌液和生長過程中產生揮發性代謝物(抑菌揮發物)對楊樹炭疽病菌的離體葉片防治效果明顯。ZSH-1的菌液在不同的處理下對楊樹炭疽病菌的離體葉片防治效果明顯。其中，先在離體葉片上接種ZSH-1菌液，培養2d后再接種楊樹炭疽病菌孢子的處理的離體葉片防治效果最好，抑制率達到100%。ZSH-1的抑菌揮發物對楊樹炭疽病菌也有很好的離體葉片防治效果，其抑制率達到35.83%。
[0036]另一方面，本發明的枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1用于拮抗楊樹炭疽病菌、楊樹腐爛病菌、柳樹腐爛病菌、蘋果腐爛病菌、甘棠腐爛病菌、尖孢鐮刀菌、棗縮果病菌；還包括枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1菌液、無菌濾液、培養物、生長過程中產生揮發性代謝物(抑菌揮發物)用于拮抗楊樹炭疽病菌、楊樹腐爛病菌、柳樹腐爛病菌、蘋果腐爛病菌、甘棠腐爛病菌、尖孢鐮刀菌、棗縮果病菌。
[0037]ZSH-1無菌濾液對楊樹腐爛病菌、柳樹腐爛病菌、海棠腐爛病菌、尖孢鐮刀菌、棗縮果病菌的抑制效果強烈，對蘋果腐爛病菌也有很好的抑制作用，其中對楊樹腐爛病菌的抑制率達到100%。另外，ZSH-1抑菌揮發物也對這些植物病原真菌的平板抑制效果明顯，其對楊樹腐爛病菌、柳樹腐爛病菌、海棠腐爛病菌的抑制活性很強，對蘋果腐爛病菌和棗縮果病菌的抑制活性也比較好，對尖孢鐮刀菌也有一定的抑制活性，其中，ZSH-1抑菌揮發物對楊樹腐爛病菌的抑制作用最強，抑制率達到63.22%。
[0038] 本發明的拮抗楊樹炭疽病菌的枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1在防治楊樹炭疽病方面的作用極為顯著，對楊樹炭疽病菌有很強的抑制作用，能明顯抑制楊樹炭疽病菌菌絲的生長，并且枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1能產生抑菌揮發物，抑制楊樹炭疽病菌菌絲的生長。另外，枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1的無菌濾液和抑菌揮發物對楊樹腐爛病菌、柳樹腐爛病菌、蘋果腐爛病菌、甘棠腐爛病菌、尖孢鐮刀菌、棗縮果病菌也有很好的平板抑制活性。枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1作為生物防治菌株，具有很好的防治楊樹炭疽病菌引起的植物病害的潛力，同時它也有生物防治菌株來防治楊樹腐爛病菌、柳樹腐爛病菌、蘋果腐爛病菌、甘棠腐爛病菌、尖孢鐮刀菌、棗縮果病菌引起的植物病害的潛力，為防治由楊樹炭疽病菌、楊樹腐爛病菌、柳樹腐爛病菌、蘋果腐爛病菌、甘棠腐爛病菌、尖孢鐮刀菌、棗縮果病菌引起的植物病害提供了一條環保、簡單、有效的途徑，利于環境保護。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0039]圖1為本發明枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1在LB平板培養基的菌落形態圖。
[0040]圖2為本發明枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1的顯微形態圖(10X 500)。
[0041]圖3為本發明枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1基于16S rDNA序列的系統發育樹；；圖中拉丁名后為相應囷株在Genbank的編號。
[0042]圖4為本發明枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1菌液、無菌濾液對楊樹炭疽病菌的平板抑制效果圖，其中A為空白對照組平板培養圖；B為ZSH-1菌液對楊樹炭疽病菌抑制效果圖；C為ZSH-1無菌濾液對楊樹炭疽病菌的平板抑制效果圖。
[0043]圖5為本發明枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1培養過程中產生抑菌揮發物對楊樹炭疽病菌的平板抑制效果圖，其中A為空白對照組平板培養圖；B為枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1抑菌揮發物對楊樹炭疽病菌抑制效果圖。
[0044]圖6為本發明枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1對楊樹炭疽病的離體葉片防治效果圖，其中A為空白對照組的離體葉片防治效果圖；B為處理I組的離體葉片防治效果圖；C為處理II組的離體葉片防治效果圖；D為處理III組的離體葉片防治效果圖。
[0045]圖7為本發明枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1培養過程中產生抑菌揮發物對楊樹炭疽病菌的離體葉片防治效果圖，其中A為對照組的離體葉片防治效果圖；B為拮抗處理組離體葉片防治效果圖。

【具體實施方式】
[0046]下面結合具體實施例來進一步描述本發明，本發明的優點和特點將會隨著描述而更為清楚。但這些實施例僅是范例性的，并不對本發明的范圍構成任何限制。本領域技術人員應該理解的是，在不偏離本發明的精神和范圍下可以對本發明技術方案的細節和形式進行修改或替換，但這些修改和替換均落入本發明的保護范圍內。
[0047]下述實施例中的方法，無特別說明，均為常規方法。下述實施例中的百分含量，無特殊說明，均為質量百分含量。
[0048]實施例1枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1的分離、篩選及其鑒定
[0049]1、枯草芽抱桿菌Bacillus subtilis ZSH-1的分離與篩選
[0050]本發明的菌株采集自北京市海淀區北京林業大學森林保護實驗站楊樹實驗田土壤中。
[0051]1A)取楊樹根部土壤5g,裝入裝有45mL無菌水的滅菌三角瓶中，置于搖床上,在28°C條件下ISOrpm振蕩30min，靜置，得到的菌懸液(即為KT1濃度的土壤稀釋液)；然后采用10倍梯度稀釋法依次稀釋得到10_3、10_4、10_5濃度梯度的稀釋液，從各個濃度梯度懸浮液中分別取0.lmL，用無菌涂布棒涂于LB培養基平板上，以無菌水為對照，涂抹均勻后放到恒溫箱中28°C恒溫倒置培養；每個處理設置水平重復3組，其中LB培養基:胰蛋白胨10g，酵母提取物 5g, NaCl 10g，瓊脂粉 15g，水 1000ml, ρΗ7.0-7.2。
[0052]IB)連續觀察8天后，挑取菌落形態不同的菌株，再次在LB培養基平板上進行劃線純化培養，獲得多株土壤細菌菌株，并在4°C下保存備用。
[0053]1C)將楊樹炭疽病菌(購自中國林業微生物菌種保藏管理中心，保藏編號CFCC80308)接種于馬鈴薯瓊脂培養基PDA平板上，在28°C條件下，恒溫培養7d后用6mm打孔器打取菌餅，并將新鮮的、直徑為6_的楊樹炭疽病菌菌餅置于另一 PDA平板中央，接著用接種環分別挑取少許步驟1B)分離純化后的土壤細菌，并在距離楊樹炭疽菌菌餅2cm處輕輕劃線，放置于培養箱中，28°C恒溫倒置對峙培養，每個對峙實驗平行重復3次，其中，PDA平板培養基:馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂17g，水1000ml，pH7.0-7.2。
[0054]ID)培養7天后觀察并記錄抑菌帶的有無以及大小，選出對楊樹炭疽病菌具有最強抑制效果的I株楊樹土壤細菌菌株。
[0055]結果表明ZSH-1菌株的抑菌效果最好，抑菌帶寬度最寬，抑菌帶寬度> 10mm。
[0056]2、菌株ZSH-1的鑒定
[0057]參照東秀珠等人編著的《常見細菌系統鑒定手冊》(北京:科學出版社，2001:349-398)以及蔡妙英等人編著的《芽孢桿菌屬》(北京:農業出版社，1983:19-108)中介紹的方法以及16S rDNA對ZSH-1菌株進行鑒定，鑒定出該菌株屬于枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis。
[0058]2A)枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis ZSH-1在LB培養基(每100mL含有胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCl 10g，瓊脂粉15g，水1000ml, ρΗ7.0-7.2)平板上呈白色，不透明，菌落光滑，圓形，中央隆起，邊緣完整，如圖1所示。
[0059]2Β)通過顯微鏡觀察表明Bacillus subtilis ZSH-1菌體大小約
0.5-0.8umXl.2-2.5um之間，有芽孢，周生鞭毛，革蘭氏染色呈陽性，如圖2所示。
[0060]2C)生化實驗結果表明，Bacillus subtilis ZSH-1，好氧，接觸酶、氧化酶、V-P實驗呈陽性，具有水解淀粉、酪蛋白、卵磷脂的能力，不能水解酪氨酸、苯丙氨酸，能利用丙二酸鹽，不能利用檸檬酸鹽，具有糖酵解能力、硝酸鹽還原能力，能產硫化氫，能液化明膠，石蕊牛奶實驗變紅。
[0061]依據《常見細菌鑒定手冊》，進一步對Bacillus subtilis ZSH-1菌株的形狀、大小、其它生理生化反應進行檢測，明確形態和基本生理生化特性。本發明的Bacillussubtilis ZSH-1菌株的形態和基本生理生化特征如表1所示。
[0062]表1 Bacillus subtilis ZSH-1菌株的形態和基本生理生化特性
[0063]

【權利要求】
1.一株拮抗植物病原真菌的細菌菌株枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis ZSH-1)，其微生物保藏號為CGMCC N0.9025。
2.如權利要求1所述的細菌菌株，其特征是所述植物病原菌為楊樹炭疽病菌、楊樹腐爛病菌、柳樹腐爛病菌、蘋果腐爛病菌、甘棠腐爛病菌、尖孢鐮刀菌、棗縮果病菌。
3.如權利要求1所述的細菌菌株的菌株培養物、發酵培養液、發酵培養液的過濾液或培養過程中產生的揮發性代謝物。
4.如權利要求1或2所述的細菌菌株為活性成分的生物菌劑。
5.如權利要求1所述的細菌菌株在拮抗楊樹炭疽病中的應用。
6.如權利要求1所述的細菌菌株在拮抗植物病原菌中的應用，其中，所述的病原菌為楊樹腐爛病菌、柳樹腐爛病菌、蘋果腐爛病菌、甘棠腐爛病菌、尖孢鐮刀菌、棗縮果病菌。
7.如權利要求3所述的菌株培養物、發酵培養液、發酵培養液的過濾液或培養過程中產生的揮發性代謝物在拮抗病原菌中的應用，其中，所述病原菌為楊樹炭疽病菌、楊樹腐爛病菌、柳樹腐爛病菌、蘋果腐爛病菌、甘棠腐爛病菌、尖孢鐮刀菌、棗縮果病菌。
【文檔編號】A01N63/00GK104164394SQ201410379855
【公開日】2014年11月26日 申請日期:2014年8月4日 優先權日:2014年8月4日
【發明者】田呈明, 黃華毅, 梁英梅, 于地美, 孫妍 申請人:北京林業大學