一種高得率蘿卜硫素的制備方法
【技術領域】
[0001]本發明公開了一種高得率蘿卜硫素的制備方法，屬于蘿卜硫素提取領域。
【背景技術】
[0002]據世界衛生組織統計，目前全球每年因癌癥死亡的人數高達700萬，但至今為止，人們尚未找到攻克癌癥的辦法。因此，研究和控制腫瘤是當今生命科學領域的重大課題。流行病學及藥理學研究表明:癌癥發病率低的地方，人們飲食中的蔬菜、水果所占比例較大。究其原因，是蔬菜水果中存在一種或多種阻止或減緩癌癥發展的活性成分，如番茄中的番茄紅素、大豆制品中的大豆異黃酮、漿果中的鞣化酸以及十字花科蔬果中的蘿卜硫素、吲哚類物質，均已證實具有良好的防癌抗癌作用。在眾多含有抗癌活性成分的蔬菜中，十字花科(洋白菜、花莖甘藍、球莖甘藍、青花椰菜、芥藍、白蘿卜和高麗菜等)富含硫代葡萄糖苷(硫甙)，其在蔬菜本身具有的黑芥子酶作用下能降解成異硫代氰酸鹽類抗癌物質。
[0003]蘿卜硫素屬于異硫代氰酸鹽中的一種，是至今為止蔬菜中發現的防癌抗癌能力最強的天然產物之一，對多種癌細胞有明顯的阻斷作用，并且具有抗菌、提高機體抗氧化能力和增強免疫力等藥理作用，對人體無明顯的不良反應，具有被開發成新型抗癌藥或者保健品的潛力，具有廣闊的市場前景，目前蘿卜硫素主要來源于西蘭花種子。
[0004]目前生產蘿卜硫素的方法主要有化學合成法和植物提取法，化學合成法過程難以控制，合成的蘿卜硫素為消旋體，藥理活性明顯偏低，功能減弱，具有一定的毒副作用，也難以實現工業化生產;而植物提取法雖沒有毒副作用，但生產條件和工藝設備要求非常高，且得率較低。
[0005]除此以外，蘿卜硫素本身很不穩定，溫度、pH、光照都會對其穩定性產生影響，雖然可以從植物中提取的手段獲得蘿卜硫素，但是蘿卜硫素在分離純化的過程中非常容易降解，對生產條件和工藝設備要求非常高，而且蘿卜硫素的保存、儲藏、運輸也存在很大困難。
[0006]因此，尋找一種合適的蘿卜硫素生產方法，是非常有必要的。

【發明內容】

[0007]本發明主要解決的技術問題:針對目前蘿卜硫素在生產的過程中，化學合成法難以控制，合成的蘿卜硫素藥理活性偏低，具有一定的毒副作用，而植物提取法雖可以從植物中以提取的手段獲得蘿卜硫素，但還是存在穩定性差、在分離純化過程中非常容易降解、對生產條件和工藝設備要求非常高以及保存、儲藏、運輸困難的現狀，提供了一種將蘿卜和鰍魚煮熟，待發霉后囤起，利用南風使其自行酸化，隨后收集酸化液浸泡切碎的西蘭花，并用乙醇對其進行抽提，得抽提液，最后將抽提液通過真空濃縮、冷凍干燥以及旋蒸，從而得到高得率蘿卜硫素的制備方法。該方法操作簡便，對設備要求低，制得的蘿卜硫素不僅得率高、穩定性好、藥理活性強，而且在分離純化過程中不易降解，便于保存、儲藏和運輸，屬于典型的綠色環保工藝。
[0008]為了解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案是: (1)挑選500?600g無霉斑、無病蟲害、無腐爛的白蘿卜，用清水洗凈外皮殘留的污物后，用刀均勾切分成長5?8cm、厚2?3cm的條狀，放于菠蘿篩中瀝去殘留水份；
(2)選擇5?7條個體重量在30?40g的鰍魚，經宰殺、去頭、去尾、內臟后，用清水反復清洗，直至無任何血水洗出，隨后將洗后的鰍魚切成長I?3cm的魚塊，放入煮鍋中，并向其中加入上述步驟得到的白蘿卜塊以及白蘿卜質量I?2倍清水，混合均勻，在90?100 0C下沸煮30?35min，待沸煮結束，將煮后的混合物取出，放于容器中，用紗布遮蓋，在溫度為25?32°C，空氣相對濕度為65?68%處，放置10?15天；
(3)待上述混合物產生霉菌時，用濃度為1.3mol/L的亞硫酸鈉溶液，調節pH為5.6?6.3，每隔2h對混合物產生的霉菌進行一次淋洗，直至長出2?3cm菌絲時，停止淋洗，將其放入腌缸中，并在腌缸四周裹上一層厚稻草，上面鋪上一層草連子，讓其在4月份的南風下自行酸化20?25天，待酸化結束，取出酸化混合物，置于離心機中，在1200?1300r/min的轉速下離心處理10?15min，去渣，收集酸化液；
(4)取300?400g新鮮西蘭花，去除花梗和腐爛部分后，放入清水中洗凈，隨后將洗后的西蘭花花球粉碎，過80?85目篩，得西蘭花渣，置于反應釜中，并向反應釜中加入上述步驟收集得到的酸化液，使其完全浸沒西蘭花渣，在常溫下密閉7?14天；
(5)待密閉結束，打開反應釜，向其中加入西蘭花渣質量50?55%質量濃度為80%的乙醇溶液，混合均勻后，放入索式抽提器中，抽提45?55min，得抽提液，隨后將得到的抽提液先于50?55°C下真空濃縮，除去70?80%乙醇，再提升溫度至65?70°C，真空濃縮，除盡乙醇，得蘿卜硫素粗提液；
(6)將上述得到的蘿卜硫素粗提液放入旋轉蒸發器中，旋轉去除水分，使其濃縮為原體積2/3時，停止旋蒸，冷凍干燥后，即可得到一種高得率蘿卜硫素。
[0009]本發明的應用方法是:將本發明制得的蘿卜硫素均勻裝入藥袋中，制成袋裝蘿卜硫素沖劑，其中每包藥袋中放入10?15g蘿卜硫素，食用時，取出一袋，倒入裝有250?300mL的溫開水中，用勺子均勻攪拌后服用，即可，其中每天三餐后食用，堅持食用7?14天，可感覺人體抵抗了得到了提高，特別對于癌癥患者，具有極好的抗癌功效。
[0010]本發明的有益效果是:
(1)本發明操作簡便，不但工藝流程短、技術條件要求簡單，而且污染源少，屬于典型的綠色環保工藝，適合大規模推廣應用；
(2)本發明使得蘿卜硫素的得率達到了98%以上，提高了生產效率；
(3)本發明制得的蘿卜硫素穩定性好、藥理活性強，且在分離純化過程中不易降解，便于保存、儲藏和運輸。
【具體實施方式】
[0011]首先挑選500?600g無霉斑、無病蟲害、無腐爛的白蘿卜，用清水洗凈外皮殘留的污物后，用刀均勾切分成長5?8cm、厚2?3cm的條狀，放于菠蘿篩中瀝去殘留水份;然后選擇5?7條個體重量在30?40g的鰍魚，經宰殺、去頭、去尾、內臟后，用清水反復清洗，直至無任何血水洗出，隨后將洗后的鰍魚切成長I?3cm的魚塊，放入煮鍋中，并向其中加入上述步驟得到的白蘿卜塊以及白蘿卜質量I?2倍清水，混合均勻，在90?100 0C下沸煮30?35min，待沸煮結束，將煮后的混合物取出，放于容器中，用紗布遮蓋，在溫度為25?32°C，空氣相對濕度為65?68%處，放置10?15天;待上述混合物產生霉菌時，用濃度為1.3mol/L的亞硫酸鈉溶液，調節PH為5.6?6.3，每隔2h對混合物產生的霉菌進行一次淋洗，直至長出2?3cm菌絲時，停止淋洗，將其放入腌缸中，并在腌缸四周裹上一層厚稻草，上面鋪上一層草連子，讓其在4月份的南風下自行酸化20?25天，待酸化結束，取出酸化混合物，置于離心機中，在1200?1300r/min的轉速下離心處理10?15min，去渣，收集酸化液;接下來取300?400g新鮮西蘭花，去除花梗和腐爛部分后，放入清水中洗凈，隨后將洗后的西蘭花花球粉碎，過80?85目篩，得西蘭花渣，置于反應釜中，并向反應釜中加入上述步驟收集得到的酸化液，使其完全浸沒西蘭花渣，在常溫下密閉7?14天;待密閉結束，打開反應釜，向其中加入西蘭花渣質量50?55 %質量濃度為80 %的乙醇溶液，混合均勻后，放入索式抽提器中，抽提45?55min，得抽提液，隨后將得到的抽提液先于50?55°C下真空濃縮，除去70?80%乙醇，再提升溫度至65?70°C，真空濃縮，除盡乙醇，得蘿卜硫素粗提液;最后將上述得到的蘿卜硫素粗提液放入旋轉蒸發器中，旋轉去除水分，使其濃縮為原體積2/3時，停止旋蒸，冷凍干燥后，即可得到一種高得率蘿卜硫素。
[0012]實例I
首先挑選500g無霉斑、無病蟲害、無腐爛的白蘿卜，用清水洗凈外皮殘留的污物后，用刀均勻切分成長5cm、厚2cm的條狀，放于菠蘿篩中瀝去殘留水份;然后選擇5條個體重量在30g的鰍魚，經宰殺、去頭、去尾、內臟后，用清水反復清洗，直至無任何血水洗出，隨后將洗后的鰍魚切成長I cm的魚塊，放入煮鍋中，并向其中加入上述步驟得到的白蘿卜塊以及白蘿卜質量I倍清水，混合均勻，在90°C下沸煮30min，待沸煮結束，將煮后的混合物取出，放于容器中，用紗布遮蓋，在溫度為250C，空氣相對濕度為65 %處，放置10天;待上述混合物產生霉菌時，用濃度為1.3mol/L的亞硫酸鈉溶液，調節pH為5.6，每隔2h對混合物產生的霉菌進行一次淋洗，直至長出2cm菌絲時，停止淋洗，將其放入腌缸