一種樣品釋放墊處理液的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種樣品釋放墊處理液，解決了現有預處理試劑僅僅只是防止物質非特異地吸附到免疫層析試紙條上時，不能更好地提高檢測的靈敏度和準確度的問題。本發明包括緩沖物質、封閉劑、親水性大分子物質、表面活性劑、金屬螯合劑、防腐劑和氯化鈉。本發明能更好地提高檢測的靈敏度和準確度，效果十分顯著。
【專利說明】
一種樣品釋放墊處理液
技術領域
[0001] 本發明涉及一種處理液，具體涉及一種樣品釋放墊處理液。
【背景技術】
[0002] 現有技術中，為了能達到更好的檢測靈敏度和準確度，常規的方法是使用樣品清 洗液、樣品墊和結合釋放墊處理液等類似的組合物質進行處理，該組合物質用于主動地沖 洗未在免疫層析試紙條上展開而殘留的標記抗體，防止物質非特異地吸附到免疫層析試紙 條上。而為了達到該效果，通常該組合物質的組成中包含有封閉試劑、表面活性劑和緩沖液 等。
[0003] 如，對比文件CN201310124432.9公開了一種樣品墊和結合釋放墊預處理試劑，該 試劑為包含表面活性劑、蛋白、糖類或生物相容性高聚物的緩沖溶液，采用該試劑對樣品墊 與結合釋放墊進行預處理，該試劑能夠有效使納米粒子抗體標記物復溶，進而達到提高檢 測效果的目的。本對比文件中提高檢測效果的實現原理也是采用優化試劑組成成份，進而 有效防止樣品墊與結合釋材料對物質非特異地吸附到免疫層析試紙條上。

【發明內容】

[0004] 本發明所要解決的技術問題是:現有預處理試劑僅僅只是防止物質非特異地吸附 到免疫層析試紙條上時，不能更好地提高檢測的靈敏度和準確度，提供解決上述問題的一 種樣品釋放墊處理液。
[0005] 本發明通過下述技術方案實現： 一種樣品釋放墊處理液，包括緩沖物質、封閉劑、親水性大分子物質、表面活性劑、金屬 螯合劑、防腐劑和氯化鈉。
[0006] 本發明的原理是:通過封閉劑、親水性大分子物質、表面活性劑有效防止樣本物質 非特異地吸附到免疫層析試紙條上；并通過金屬螯合劑的使用螯合樣本中的多種金屬離 子，以消除可抑制抗原抗體反應活性的金屬離子，從而提高抗原抗體反應活性，達到提高靈 敏度的目的。即，本發明通過封閉劑、表面活性劑的作用可排除材料吸附方面的非特異性干 擾，金屬螯合物可有效排除樣本中其他干擾。因而，本發明不僅僅能夠對材料的非特異性吸 附起到排除干擾的作用，還能有效排除因抗原抗體的反應活性產生副作用的干擾作用，這 對于提高檢測靈敏度有意想不到的效果。
[0007] 進一步，所述處理液中緩沖物質的濃度為5~500mmol/L，封閉劑的濃度為1~50g/ L，親水性大分子物質的濃度為0.001g/L~100g/L，表面活性劑的濃度為0.001g/L~50g/L， 金屬螯合劑的濃度為〇. 〇5g/L~50g/L，防腐劑的濃度為0.1~10mL/L，氯化鈉的濃度為0.05 ~1000mmol/L〇
[0008] 通過上述濃度的設置，能使檢測靈敏度得到最大化地提高，通過該濃度的優選設 置，通過實施例和對照試驗檢測出的熒光信號值的對比結果可知:本發明中各組分的過量 或不足均不能達到較好地檢測靈敏度的效果。
[0009] 優選地，所述緩沖物質為1.19~119g/L的4-羥乙基哌嗪乙磺酸，或1.82~ 181.20g/L的哌嗪-N，N'_二(2-羥基丙磺酸）。所述封閉劑為酪蛋白。所述親水性大分子物質 為聚乙烯吡咯烷酮或聚乙烯吡咯烷酮。所述表面活性劑為Pluronic F-68或Brij35或 Tetronic 1307。所述金屬螯合劑為乙二胺四乙酸二鈉、乙二胺四乙酸二鉀、乙二胺四乙酸 二鈉鎂鹽或乙二胺四乙酸鐵鈉。所述防腐劑為Proc 1 in300。
[0010] 本發明與現有技術相比，具有如下的優點和有益效果： 1、 本發明不僅僅能夠對材料的非特異性吸附起到排除干擾的作用，還能有效排除抗原 抗體的反應活性產生副作用的干擾作用，這對于提高檢測靈敏度有意想不到的效果； 2、 通過本發明濃度的優選設置，能明顯提高檢測結果的靈敏度。
【具體實施方式】
[0011] 為使本發明的目的、技術方案和優點更加清楚明白，下面結合實施例，對本發明作 進一步的詳細說明，本發明的示意性實施方式及其說明僅用于解釋本發明，并不作為對本 發明的限定。 實施例
[0012] 一種樣品釋放墊處理液，包括緩沖物質、封閉劑、親水性大分子物質、表面活性劑、 金屬螯合劑、防腐劑和氯化鈉。
[0013] 所述緩沖物質為HEPES或P0PS0,該HEPES為4-羥乙基哌嗪乙磺酸，該P0PS0為哌 嗪-N，N'_二(2-羥基丙磺酸）。所述封閉劑為酪蛋白。所述親水性大分子物質為聚乙烯吡咯 烷酮，該聚乙烯吡咯烷酮優選為PVP-30或PVP-90。所述表面活性劑為Pluronic F-68、 Bri j35或Tetronic 1307。所述金屬螯合劑為乙二胺四乙酸二鈉、乙二胺四乙酸二鉀、乙二 胺四乙酸二鈉鎂鹽或乙二胺四乙酸鐵鈉。所述防腐劑為Proclin300。
[0014] 因親水性大分子物質、表面活性劑、金屬螯合劑均可以為多種具體物質，且其作用 原理相同，故本實施例僅舉例每一類物質中的一種具體物質。具體設置如表1所示。
[0015] 表1
本發明處理液的制備方法如下： 用量筒量取800mL去離子水于適合量程燒杯中，稱取上述表1中各實例和對照例的物質 加入到該燒杯中，充分攪拌至完全溶解，調pH至8.0，定容至1L。
[0016]分別量取50mL上述不同配比的處理液，分別對PCT熒光層析檢測試紙條的樣品釋 放墊進行浸泡處理，浸泡后干燥，最后將干燥后的樣品釋放墊運用到PCT熒光層析檢測試紙 條上，并采用該試紙條進行零濃度和低濃度的熒光檢測，其中零濃度樣本的濃度為O.OOng/ ml，低濃度樣本的濃度為0.50ng/ml。零濃度樣本用于檢測各實施例是否存在假陽性;低濃 度樣本用于檢測各實施例靈敏度的高低。本實施例的具體檢測結果如表2所示。
[0017] 表2
信號值是指:樣本在試紙條上反應完成后，通過熒光檢測儀對試紙條檢測線上累積的 熒光信號進行采集的結果，數值越高說明檢測的樣本中可能含有被分析物的濃度越高。對 于零濃度樣本出現較高的信號值，說明該試紙條檢測存在假陽性，可能對分析物濃度產生 誤判。對于低濃度樣本，信號值越高，說明可以分辨的分析物靈敏度越高，檢測結果越準確。
[0018] 通過表2可知:通過對照例3可知，在沒有添加金屬螯合劑的處理液處理的試紙條， 其檢測結果雖無假陽性問題，但檢測靈敏度偏低;通過對照例1和對照例2的結果可知，優化 后的本發明的濃度配比能更好地提高檢測的靈敏度和準確度，同時避免出現假陽性的現 象，對于無需稀釋的高靈敏度檢測項目存在明顯優勢。
[0019] 采用不同種類和濃度的金屬螯合劑處理樣品釋放墊，其它條件均與實例3相同，采 用上述不同種類和濃度的金屬螯合劑處理后的釋放墊制備試紙條，并用該試紙條檢測含低 濃度PCT的血清樣本(濃度單位為ng/ml)，檢測后采集檢測線的信號值數據，具體數據如表3 所示。
[0020] 表 3
通過表3的結果可知:通過上述數據可知，當不添加金屬螯合劑時，低濃度下的信號值 只有幾十，檢測結果的靈敏度和準確度均不能滿足需求，本發明加入上述金屬螯合劑后能 更好地提高檢測的靈敏度和準確度。
[0021]以上所述的【具體實施方式】，對本發明的目的、技術方案和有益效果進行了進一步 詳細說明，所應理解的是，以上所述僅為本發明的【具體實施方式】而已，并不用于限定本發明 的保護范圍，凡在本發明的精神和原則之內，所做的任何修改、等同替換、改進等，均應包含 在本發明的保護范圍之內。
【主權項】
1. 一種樣品釋放墊處理液，其特征在于，包括緩沖物質、封閉劑、親水性大分子物質、表 面活性劑、金屬螯合劑、防腐劑和氯化鈉。2. 根據權利要求1所述的一種樣品釋放墊處理液，其特征在于， 所述處理液中緩沖物質的濃度為5~500mmol/L，封閉劑的濃度為1~50g/L，親水性大 分子物質的濃度為〇. 〇〇lg/L~100g/L，表面活性劑的濃度為O. OOlg/L~50g/L，金屬螯合劑 的濃度為〇.〇5g/L~50g/L，防腐劑的濃度為0. 1~10mL/L，氯化鈉的濃度為0.05~ 1000mmol/L〇3. 根據權利要求1或2所述的一種樣品釋放墊處理液，其特征在于， 所述緩沖物質為1.19~119g/L的4-羥乙基哌嗪乙磺酸，或1.82~181.20g//L的哌嗪-Ν，Ν'-二(2-羥基丙磺酸）。4. 根據權利要求1或2所述的一種樣品釋放墊處理液，其特征在于，所述封閉劑為酪蛋 白。5. 根據權利要求1或2所述的一種樣品釋放墊處理液，其特征在于，所述親水性大分子 物質為聚乙烯吡咯烷酮。6. 根據權利要求1或2所述的一種樣品釋放墊處理液，其特征在于，所述表面活性劑為 Pluronic F_68、Brij35或Tetronic 1307。7. 根據權利要求1或2所述的一種樣品釋放墊處理液，其特征在于，所述金屬螯合劑為 乙二胺四乙酸二鈉、乙二胺四乙酸二鉀、乙二胺四乙酸二鈉鎂鹽或乙二胺四乙酸鐵鈉。8. 根據權利要求1或2所述的一種樣品釋放墊處理液，其特征在于，所述防腐劑為 Proclin300〇
【文檔編號】G01N33/558GK105891468SQ201610216289
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2016年4月8日
【發明人】代敏, 林 源, 譚韜
【申請人】四川新健康成生物股份有限公司