一種酶標板的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及免疫檢測裝置領域，尤其涉及一種酶標板。
【背景技術】
[0002] 免疫檢測是生命科學領域最常見的檢測目標分子的方法，酶聯免疫吸附試驗 (ELISA)是免疫檢測的重要組成部分。ELISA主要分為兩種反應:一種是抗原與抗體之間的 免疫反應，另一種是生物分子與所吸附的固相表面。在酶聯免疫吸附試驗(ELISA)中，參與 免疫學反應的抗原、抗體、標記抗體或抗原的純度、濃度和比例;緩沖液種類、濃度和離子強 度、pH值和反應溫度、時間等條件起著關鍵作用。此外，作為載體的酶標板表面對抗原、抗體 或抗原抗體復合物的吸附也起著非常重要的作用。
[0003] 現有技術中，ELISA酶標板最常用的材質是聚苯乙烯。近年來，為了增加生物分子 與固相表面的親和力、提高反應的靈敏度，增強檢測的穩定性等，酶標板固相材料的選擇和 處理引起了本領域研究人員的極大關注。目前，本領域研究人員多致力于研究通過共價交 聯化學基團活化官能基、化學反應修飾聚苯乙烯表面以及紫外輻照等方法改變聚苯乙烯表 面的化學性質，進而提高酶標板孔表面對生物分子的親和力，且已經取得了長足的進步。
[0004] 然而，聚苯乙烯酶標板仍存在另一問題即酶標板孔與生物分子反應的表面積問 題。現有技術中的酶標板多數為平底(結構如說明書附圖1)、U型底或V型底，平底的折射率 低，適于酶標儀檢測，U型底的酶標板折射率較高，方便加樣、吸樣、混勻等操作，V底的酶標 板可以精確的吸取樣品。但是上述的幾種酶標板的酶標板孔與生物分子反應的表面積較 小，不利于反應的充分快速進行。

【發明內容】

[0005] 有鑒于此，本發明的目的在于提供一種表面積大、上樣量小的酶標板。為了實現上 述發明目的，本發明提供以下技術方案：
[0006] 本發明提供了一種酶標板，其特征在于，包括若干酶標板孔，每個酶標板孔包括半 球狀底部、與所述半球狀底部上邊緣相接的漏斗形結構和與所述漏斗形結構上邊緣相接的 凸出壁。
[0007] 優選的，所述的半球狀底部包括初級半球體結構和位于初級半球體結構內部向內 凸起的次級半球體結構。
[0008] 優選的，所述的初級半球體結構的直徑為0.2~10mm，壁厚為0.1~1.0mm。
[0009] 優選的，每個初級半球體結構內部的次級半球體的個數為3~50個，所述次級半球 體結構平均分布于初級半球體結構的內表面。
[00?0] 優選的，所述的次級半球體結構的直徑為0 · 1~5mm，，壁厚為0 · 1~1 · 0mm，相鄰次 級半球體結構間的孔隙為0.1~1.0mm。
[0011]優選的，所述漏斗形結構由位于下部的空心球缺和與所述空心球缺上邊緣相接的 空心圓臺兩部分組成，所述的空心球缺狀的下邊緣與所述半球狀底部的上邊緣相接;所述 的空心圓臺的上邊緣與所述凸出壁的下邊緣連接。
[0012] 優選的，所述的空心球缺的直徑為0.2~10mm，高度為0.1~5.0mm，壁厚為0.1~ 1.0mm〇
[0013] 優選的，所述的空心圓臺的高度為0.2~6.0mm，壁厚為0· 1~1.0mm，上口半徑為 0 · 1~5 · 0mm，下口半徑為0 · 1~5 · 0mm〇 〇
[0014]優選的，所述凸出壁為空心的柱狀結構，所述凸出壁的高度為0.1~20mm，壁厚為 0.1~1.0_，半徑為0.1~5.0mm。
[0015]優選的，酶標板的面積為10~200X5~200mm酶標板，每個酶標板上優選的包括1 ~500個酶標板孔。
[0016] 本發明的有益效果：
[0017] 本發明提供的酶標板包括若干酶標板孔，每個酶標板孔包括半球狀底部、與所述 半球狀底部上邊緣相接的漏斗形結構和與所述漏斗形結構上邊緣相接的凸出壁。在本發明 提供的酶標板中，所述半球狀底部結構可以增大酶標板的表面積，從而增加目標物質與固 相表面靶分子接觸的機會，同時可以用較少的樣本量檢測目標物質的含量;所述的漏斗形 結構的設置連接酶標板孔的底部和上部，進一步增大酶標板孔的表面積;所述的凸出壁的 設置可防止酶標板孔與酶標板孔之間交叉污染。
【附圖說明】
[0018] 圖1為現有技術公開的酶標板孔的立體圖；
[0019]圖2為本發明實施例1中的酶標板孔結構的俯視圖（2A)和主視圖（2B);
[0020]圖3為實施例1中的酶標板孔結構的剖視圖；
[0021 ]圖4為實施例1中的酶標板孔結構的立體圖；
[0022]圖5為實施例1中20孔及28孔酶標板的俯視圖（5A-1、5B-1)和側視圖（5A-2、5B-2); [0023]圖6為實施例1和2中20孔及28孔酶標板的剖視圖（6A、6B);
[0024]圖7為實施例1和2中酶標板的立體圖（7A、7B);
【具體實施方式】
[0025]本發明提供了一種酶標板，包括若干酶標板孔，所述的酶標板孔包括三個組成部 分:每個酶標板孔包括半球狀底部、與所述半球狀底部相接設置于中部的漏斗形結構和與 所述漏斗形結構相接設置于上部的凸出壁。
[0026]本發明中，對所述的酶標板的面積為10~200X5~200mm酶標板，每個酶標板上優 選的包括1~500個酶標板孔，更優選的包括10~400個酶標板孔，最優選的為包括16或40個 酶標板孔。所述酶標板上酶標板孔的密度優選的為〇. 2~8.0個/cm2，更優選的為0.5~4個/ cm2。本發明對所述酶標板孔的排列方式沒有特殊的限定，采用本領域技術人員熟知的酶標 板中酶標板孔排列的方式即可;在本發明的實施例中，所述酶標板孔優選的采用矩形陣列 排列，更優選采用4 X 5矩形陣列排列的20孔酶標板或4 X 7矩形陣列排列的28孔酶標板。
[0027]本發明中，酶標板孔的結構如圖3所示，每個酶標板孔包括半球狀底部，底部設置 為半球狀結構增加了酶標板的表面積，從而增加目標物質與固相表面靶分子接觸的機會， 同時可以用較少的樣本量檢測目標物質的含量。在本發明中，所述的半球狀底部優選包括 初級半球體結構(2)和位于初級半球體結構內部向內凸起的次級半球體結構(3)。本發明中 所述的初級半球體結構的直徑優選的為0.2~10_，更優選的為2~8mm，最優選的為6-7_。
[0028] 本發明優選的在每個初級半球體結構內部設置向內凸起的次級半球體結構，每個 初級半球體結構中次級半球體的個數優選的為3~50個，更優選的為5~15個，最優選的為7 ~9個;在本發明中所述次級半球體結構平均分布于初級半球體結構的內表面。
[0029] 本發明中所述的次級半球體結構的直徑優選的為0.1~5mm，更優選的為0.5~ 3mm，最優選的為1~2mm。在本發明中所述相鄰次級半球體結構間的弧長優選的為0.1~ 2 · 0mm，本發明中相鄰次級半球體結構間的孔隙優選的為0 · 1~1 · 0mm，更優選的為0 · 4~ 0 · 6mm，最優選的為0 · 5mm。在本發明中，所述相鄰次級半球體結構間的孔隙為酶標板孔的液 體流動通道，從而允許液體在酶標板孔內部自由流動，增加目標物質與固相表面靶分子接 觸的機會。
[0030] 在本發明中，每個酶標板孔包括與所述半球狀底部上邊緣相接的漏斗形結構(4)， 所述的漏斗形狀結構設置于酶標板孔的中部，向上與所述凸出壁(7)的下邊緣相連接。在本 發明中，所述漏斗形結構由漏斗形結構下部的空心球缺結構(5)和漏斗形結構上部的空心 圓臺（6)兩部分組成;所述的空心球缺狀結構的下邊緣與酶標板孔底部的半球狀底部的上 邊緣連接;所述的空心圓臺的上邊緣與所述凸出壁的下邊緣連接。
[0031] 在本發明中，所述的空心球缺的直徑優選的為0.2~10mm，更優選的為3~8mm，最 優選的為4.8mm;所述的空心球缺的高度優選的為0.1~5.0mm，更優選的為0.5~3mm，最優 選的為〇 · 8mm;所述的空心球缺的壁厚優選的為0 · 1~1 · 0mm，更優選的為0 · 3~0 · 8mm，最優 選的為〇.7mm
[0032] 在本發明中，漏斗形結構上部的空心圓臺的高度優選的為0.2~mm，更優選的0.3 ~3mm，最優選的為0 · 4mm;所述空心圓臺的壁厚優選的為0 · 1~1 · 0mm，更優選的為0 · 2~ 0 · 8mm，最優選的為0 · 7mm;所述空心圓臺的上口半徑優選的為0 · 1~5 · 0mm，更優選的為1~ 4mm;下口半徑優選的為0.1~5mm，更優選的為1~4mm。
[0033] 在本發明中，與漏斗形結構上邊緣相接且設置于上部的凸出壁優選的為空心的柱 狀結構，所述凸出壁的高度優選的為〇. 1~20mm，更優選的為0.5~5.0,最優選的為1.0mm; 所述凸出壁的壁厚優選的為0 · 1~1 · 〇mm，更優的為0 · 3~0 · 8mm，最優選的為0 · 7mm;所述凸 出壁空心的柱狀結構的半徑優選的為0.1~5.0mm，更優選的為1.0~4.0;本發明中凸出壁 的作用是防止實驗過程中酶標板孔之間的交叉污染。
[0034] 在本發明中，每個酶標板孔中半球狀底部內壁與所述漏斗形結構的內壁平滑相 連，所述漏斗形結構上邊緣內壁與所述的凸出壁的內壁平滑相連。
[0035] 下面結合實施例對本發明提供的酶標板進行詳細的說明，但是不能把它們理解為 對本發明保護范圍的限定。
[0036] 實