可拆卸的載玻片孵育器的使用方法
【專利說明】 可拆卸的載玻片孵育器的使用方法
[0001]本申請是申請號:201410008291.9、申請日:2014.1.9、名稱“可拆卸的載玻片孵育器”的分案申請。
技術領域
[0002]本發明涉及一種可拆卸的載玻片孵育器。
【背景技術】
[0003]在進行生命科學的研宄中，人們經常需要使用特異性強、靈敏度高的免疫組織化學技術對組織細胞的特定物質進行定位和定量。免疫組織化學技術的基本原理是首先利用免疫學的已知抗體(第一抗體)與觀察組織中抗原結合。由于在組織和細胞上進行的抗原抗體反應一般是不可見的，需要用標記的方法將某種標記物(如酶、熒光素)結合到第一抗體上，再用組織化學方法顯示此標記物或在熒光顯微鏡、激光共聚集顯微鏡或超高分辨率顯微鏡下觀察熒光素發出的熒光。做到將研宄對象組織中的某些物質可視化。在實現上述提到的用標記的方法將某種標記物(如酶、熒光素)結合到第一抗體上時，人們往往采用已結合上某種標記物的第二抗體與第一抗體的特異性結合的方法。
[0004]在用免疫組織化學技術對組織細胞的特定物質進行定位和定量時，人們往往采用貼片染色法來保持實驗中組織切片良好形態和明確各組織切片的前后順序。貼片染色法的基本原理是在切片機上切下組織片后，立即將該組織切片按切片順序粘貼在載玻片上。組織切片后續的封閉、第一抗體孵育、洗滌、第二抗體孵育、再洗滌、脫水、透明和封片等實驗操作均是在該組織切片粘貼在載玻片的條件下進行。
[0005]在上述的組織切片的封閉、洗滌、再洗滌、脫水、透明和封片過程中，由于用到的有關試劑成本較低，加之洗滌過程中，洗滌液的用量較大。為了得到良好的實驗效果，人們往往采用將整個粘貼有組織切片的載玻片放置在上述相關液體中的方法來處理。但在進行第一抗體和第二抗體孵育時，由于抗體價格較高(目前一般的單克隆第一抗體ΙΟΟμΙ的售價是3000元左右，特殊的單克隆第一抗體的價格會更高)，且使用時能稀釋的倍數又不能很大。因此，抗體尤其是第一抗體是整個實驗成本的主要部分。所以在用免疫組織化學技術對組織細胞的特定物質進行定位和定量時，不能采用將整個粘貼有組織切片的載玻片放置在抗體孵育液中的方法來完成。
[0006]在用貼片法進行免疫組織化學染色時，人們通常采用將抗體孵育液直接加在載玻片粘附的組織切片上的方法。但使用這一方法時，抗體孵育液加多了會保存不了而漫出載玻片流失，加少了組織切片上的抗體孵育液會在孵育的過程中，因孵育液中水分蒸發而不能保持載玻片上的組織切片始終浸泡在抗體孵育液中。有時，人們也會使用在載玻片貼附的組織切片周圍用油性材料畫一個框的方法，并在該油性畫框內加抗體孵育液，來防止抗體孵育液的溢出。但該方法雖然比將抗體孵育液直接加在載玻片貼附的組織切片上的方法有所改進，但使用該方法，由于油性畫框阻止抗體孵育液外溢的能力很差，也不能保證在整個抗體孵育過程中，組織切片始終浸泡在抗體孵育液中。而且在抗體孵育、洗滌、脫水、透明過程中，這些油性材料會脫落而失去阻止抗體孵育過程中的抗體孵育液外溢的作用；并會發生油性材料脫落而粘附在組織切片上，影響組織切片觀察的情況；當油性材料在組織切片處理中還會溶入相關的實驗試劑中，因污染實驗試劑而影響的實驗試劑的重復利用和組織切片的處理效果。

【發明內容】

[0007]本發明的目的在于提供一種結構合理，所有的實驗步驟能方便高效進行，能得到良好的免疫組織化學染色的實驗結果的可拆卸的載玻片孵育器。
[0008]本發明的技術解決方案是:
一種可拆卸的載玻片孵育器，其特征是:包括不銹鋼孵育框，不銹鋼孵育框壓在載玻片上，與其下面的硅膠墊層共同由中間的矩形空間以載玻片為底面形成孵育小室；所述硅膠墊層有與不銹鋼孵育框相同的中間矩形空間，并粘附在不銹鋼孵育框上，與載玻片接觸，防止孵育液的泄漏；不銹鋼孵育框的外周尺寸及硅膠墊層的外周尺寸均與載玻片外周尺寸相同；另設有將不銹鋼孵育框及硅膠墊層夾持在載玻片上的彈性夾持器；所述彈性夾持器包括彈性夾持器根部、彈性夾持器的夾持部及彈性夾持器的夾持口 ；彈性夾持器根部連接彈性夾持器夾持部，并提供彈性夾持器在形成載玻片孵育器和拆卸載玻片孵育器操作時的手持位置；通過彈性夾持器的夾持口將彈性夾持器夾持在孵育框和載玻片上，彈性夾持器的夾持部將孵育框和載玻片夾持在一起形成孵育小室。
[0009]其使用方法是:將不銹鋼孵育框及硅膠墊層壓在貼附有組織切片的載玻片上，確保所有組織切片都在孵育框與載玻片形成的孵育小室底部；選擇不銹鋼孵育框與載玻片上下重疊四個邊中的任意一邊，手持彈性夾持器根部，將彈性夾持器的夾持口對準孵育框與載玻片上下相疊的結構，將彈性夾持器推入孵育框與載玻片上下相疊的結構，保證彈性夾持器的夾持部將孵育框與載玻片緊壓在一起，其余三邊重復上述的動作將彈性夾持器夾入，確保孵育框與載玻片緊密連接，形成不泄漏的孵育小室；向孵育小室中加入第一抗體孵育液，保證在孵育小室底部的組織切片能浸泡在第一抗體孵育液中，按要求進行組織切片的孵育；第一次孵育完成后，取出含特異的第一抗體孵育液，卸下孵育框與載玻片上下相疊結構四邊的彈性夾持器，從載玻片上拆卸下孵育框對粘貼在載玻片上的組織切片進行洗滌處理；進行第二抗體孵育時，重復上述動作。
[0010]本發明結構合理，在進行組織的免疫組織化學染色時，可通過多次使用彈性夾持器將孵育框緊緊的壓在粘貼有組織切片的載玻片上，形成一個不泄漏的孵育小室。在進行抗體孵育時，只使用微量的抗體孵育液，就保證了粘貼在載玻片上的所有組織切片在孵育的過程中，完全浸泡在抗體孵育液中，節約了科學研宄的實驗成本。同時，通過多次卸下孵育框，又保證了載玻片前處理、組織貼片、洗滌、脫水、透明、封片等實驗步驟能不受孵育框的影響，并避免了在組織切片周圍用油性材料畫框的缺點。使所有的實驗步驟能方便高效進行，確保最終能得到一個良好的免疫組織化學染色的實驗結果。
【附圖說明】
[0011]下面結合附圖和實施例對本發明作進一步說明。
[0012]圖1是可拆卸的載玻片孵育器的孵育框立體示意圖。
[0013]圖2是可拆卸的載玻片孵育器的載玻片立體示意圖。
[0014]圖3是可拆卸的載玻片孵育器的彈性夾持器立體示意圖。
[0015]圖4是可拆卸的載玻片孵育器縱剖面示意圖。
[0016]圖中:1.不銹鋼孵育框:壓在載玻片上，與其下面的硅膠墊層共同由中間的矩形空間以載玻片為底面形成孵育小室。
[0017]2.不銹鋼孵育框的硅膠墊層:有與不銹鋼孵育框相同的中間矩形空間，并粘附在不銹鋼孵育框上，與載玻片接觸，防止孵育液的泄漏。
[0018]3.載玻片:承載組織切片，并作為孵育小室的底面。
[0019]4.彈性夾持器根部:連接彈性夾持器夾持部，并提供彈性夾持器在形成載玻片孵育器和拆卸載玻片孵育器操作時的手持位置。
[0020]5.彈性夾持器的夾持部:將孵育框和載玻片夾持在一起形成孵育小室。
[0021]6.彈性夾持器的夾持口:通過該夾持口將彈性夾持器夾持在孵育框和載玻片上。
[0022]7.孵育小室:形成微小的空間存放孵育液，做到