同時檢測n-乙烯基吡咯烷酮和2-吡咯烷酮的方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及同時檢測N-乙烯基吡咯烷酮和2-吡咯烷酮的方法，尤其是同時檢測 聚維酮K30中N-乙烯基吡咯烷酮和2-吡咯烷酮的方法。
【背景技術】
[0002] 根據《中華人民共和國藥典》2015年版四部可知，聚維酮K30的質量標準只有對 N-乙烯基吡咯烷酮的限度進行滴定檢測，滴定檢測法所受主觀因素影響太大，使精確度受 到很大的影響。另外標準中缺乏2-吡咯烷酮含量限定的檢測項目，導致其對聚維酮K30的 質量控制不夠全面和準確，從而成隱患。
[0003] 根據美國藥典，聚維酮K30的質量標準中要求檢測的雜質有、N-乙烯基吡咯烷酮、 2_吡咯烷酮、甲酸，醛，過氧化物，前三種雜質要求使用液相來檢測，檢測項目繁多，不利于 進行大量樣品檢測。

【發明內容】

[0004] 為了克服現有檢測技術的不足，本發明的目的在于提供一種同時檢測N-乙烯基 吡咯烷酮和2-吡咯烷酮的方法，該方法能準確有效的控制聚維酮K30的質量，從而確保用 藥安全性。
[0005] 為了實現上述的發明目的，本發明提供以下技術方案：
[0006] 同時檢測N-乙烯基吡咯烷酮和2-吡咯烷酮的方法，該方法是利用液相色譜法對 N-乙烯基吡咯烷酮、2-吡咯烷酮的含量進行測定，操作步驟如下：
[0007] 色譜條件：
[0008] a、十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充柱；
[0009] b、以體積比90:7:5的水-乙腈-甲醇為流動相，流速為1.0ml/min ;
[0010] c、檢測波長為205nm ;
[0011] 對照品溶液制備：取N-乙烯基吡咯烷酮對照品加甲醇制成溶液，取適量溶液，置 量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為第一對照品溶液，取2-吡咯烷酮對照品加水制成 第二對照溶液，將第一對照液和第二對照液混合，制得對照品溶液；
[0012] 供試品溶液的制備：取聚維酮K30加流動相制成第一供試品溶液，取聚維酮K30加 水制成第二供試品供試品溶液，將第一供試品溶液和第二供試品溶液混合，制得供試品溶 液；
[0013] 測定法：分別吸取對照品溶液和供試品溶液，注入液相色譜儀進行測定。
[0014] 優選的是：所述對照品溶液及供試品溶液制備的具體過程如下：
[0015] 對照品溶液制備：取N-乙烯基吡咯烷酮對照品加甲醇制成每1ml含5ug的溶液， 取5ml，置100ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為第一對照品溶液，取2-吡咯烷酮 對照品加水制成25ug/ml的溶液，作為第二對照溶液，將第一對照液和第二對照液按1:1體 積比混合，制得對照品溶液；
[0016] 供試品溶液的制備：取聚維酮K30加流動相制成25mg/ml溶液，作為第一供試品溶 液，取本品加水溶解制成5mg/ml的溶液，作為第二供試品供試品溶液，將第一供試品溶液 和第二供試品溶液按1:1體積比混合，制得供試品溶液。
[0017] 優選的是：所述測定法中對照品溶液和供試品溶液進樣量均為20 μ 1。
[0018] 本發明利用液相色譜法對Ν-乙烯基吡咯烷酮和2-吡咯烷酮進行檢測，該檢測方 法準確度高、線性范圍廣、專屬性強、精密度與重復性均良好、靈敏度高，可以作為同時檢測 Ν-乙烯基吡咯烷酮和2-吡咯烷酮含量限度控制依據。可以更好的控制聚維酮Κ30質量，可 以有效的監督生產，保證產品質量的穩定，患者用藥的安全性。
【附圖說明】
[0019] 圖1 :以0· 0278ug/ml~2. 7803ug/ml的系列ηνρ溶液濃度為橫坐標，以峰面積為 縱坐標繪制的線性回歸圖。
【具體實施方式】
[0020] 下面進一步描述本發明的技術方案，但要求保護的范圍并不局限于所述。下面結 合具體實施例，對本發明作進一步詳細的闡述，但本發明的實施方式并不局限于實施例表 示的范圍。這些實施例僅用于說明本發明，而非用于限制本發明的范圍。此外，在閱讀本發 明的內容后，本領域的技術人員可以對本發明作各種修改，這些等價變化同樣落于本發明 所附權利要求書所限定的范圍。
[0021] 以下實施例及考察性試驗中對照品均由中國藥品生物制品檢定所提供。
[0022] 所述的液相色譜法按照中國藥典2010年版一部附錄液相色譜法進行。
[0023] 實施例
[0024] 對照品溶液制備：取Ν-乙烯基吡咯烷酮對照品加甲醇制成每1ml含5ug的溶液， 取5ml，置100ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為第一對照品溶液，取2-吡咯烷酮 對照品加水制成25ug/ml的溶液，作為第二對照溶液，將第一對照液和第二對照液按1:1體 積比混合，制得對照品溶液；
[0025] 供試品溶液的制備：取聚維酮K30加流動相制成25mg/ml溶液，作為第一供試品溶 液，取本品加水溶解制成5mg/ml的溶液，作為第二供試品供試品溶液，將第一供試品溶液 和第二供試品溶液按1:1體積比混合，制得供試品溶液。
[0026] 色譜條件如下：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充柱，以體積比90:7:5的水-乙 腈-甲醇為流動相，流速為1. 〇ml/min，設定檢測波長為205nm。分別吸取對照品溶液和供 試品溶液20 μ 1，注入液相色譜儀進行測定。
[0027] 利用液相色譜法同時檢測聚維酮Κ30中Ν-乙烯基吡咯烷酮和2-吡咯烷酮的方法 可行性考察試驗如下：
[0028] 根據美國藥典，Ν-乙烯基吡咯烷酮檢測方法為：
[0029] 取本品約0. 25g，精密稱定，置10ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勾，作 為供試品溶液；另取N-乙烯基吡咯烷酮對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解并稀釋制成每 lml約含5ug的溶液，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照 品溶液。
[0030] 另取N-乙烯基吡咯烷酮對照品和乙酸乙烯酯適量，加甲醇溶解并制成每1ml中含 N-乙烯基吡咯烷酮lug與乙酸乙烯酯50ug的溶液，作為系統適用性試驗溶液。照高效液相 色譜法（通則0512)測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-水（10:90)為流動 相，檢測波長為235nm。取系統適用性試驗溶液20ul，注入液相色譜儀，調整流速使N-乙烯 基吡咯烷酮色譜峰保留時間約為10分鐘，N-乙烯基吡咯烷酮峰和乙酸乙烯酯峰的分離度 應大于2。
[0031 ] 精密量取供試品溶液與對照品溶液各20ul，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按 外標法以峰面積計算，不得過0. 001 %。
[0032] 2-吡咯烷酮檢測方法為：
[0033] 取2-吡咯烷酮對照品適量，精密稱定，加水溶解并稀釋為25ug/ml的溶液，作為對 照溶液。取本品適量，精密稱定，加水溶解并稀釋為5mg/ml的溶液，作為供試品溶液。照高 效液相色譜法（通則0512)測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以水-乙腈-甲醇為 流動相（90 :5 :5)，檢測波長為205nm〇
[0034] 系統適用性試驗：精密量取對照溶液25ul，注入液相色譜儀，六次峰面積的相對 標準偏差不得過2.0%。
[0035] 檢測法：精密量取對照品溶液和供試品溶液各20ul，分別注入液相色譜儀，記錄 色譜圖，按外標法峰面積計算，不得過〇. 5%。
[0036] -、根據美國藥典對聚維酮K30中的雜質2-吡咯烷酮的檢測方法，進行如下專屬 性和耐用性試驗。
[0037] 1.專屬性
[0038] 精密量取2-吡咯烷酮對照品溶液，連續進樣兩針，保留時間及峰面積詳見表1。
[0039] 表1對2-吡咯烷酮對照品保留時間及峰面積
[0041] 2.耐用性
[0042] 將色譜條件中的流動相水-乙腈-甲醇的比例分別調整為90 :7 :5、90:5:5、 90:3: 5。精密量取2-吡咯烷酮對照品溶液，連續進樣兩針，保留時間、峰面積及拖尾因子詳 見表2。
[0043] 表2 2-吡咯烷酮對照品保留時間、峰面積及拖尾因子
[0044]
[0045] 綜合表2數據，求得2-吡咯烷酮對照品保留時間、峰面積及拖尾因子平均值，詳見 表3〇
[0046] 表3 2-吡咯烷酮對照品保留時間及峰面積及拖尾因子平均值
[0048] 結論：根據以上的數據可知，在流動相輕微改變的條件下，2-吡咯烷酮峰拖尾因 子〈2. 0,并與其他雜質峰達到基線分離；流動相中的乙腈的含量越大，2-吡咯烷酮的出峰 時間提前；流動相的改變對峰面積沒有顯著的影響，故該色譜條件耐用性良好。
[0049] 所以當本發明將流動相設為水-乙腈-甲醇=90:7:5時，2-吡咯烷酮依舊可以被 準確的檢出。
[0050] 二、N-乙烯基吡咯烷酮（ηvp)在流動相為水-乙腈-甲醇=90:7:5,檢測波長為 205nm，流速為1.0ml/min，柱溫為室溫，色譜柱為250nm的高效液相色譜液相條件下進行如 下的方法學驗證。其中所述N-乙烯基吡咯烷酮對照品、供試品按美國藥典記載的方法進行 配置。
[0051] 1.專屬性
[0052] 精密量取nvp對照品溶液l、nvp對照品溶液2連續進樣兩針，保留時間、峰面積詳 見表4。所述nvp對照品溶液1是按照美國藥