單羥酚類代謝物尿液檢測試劑及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于尿液檢測試劑，具體涉及一種單羥酚類代謝物尿液檢測試劑及其制備 方法，所述單羥酚類代謝物比如酪氨酸、對羥基苯丙氨酸、色氨酸和5-羥吲哚乙酸可以作 為腫瘤標志物。
【背景技術】
[0002] 腫瘤的早期診斷和早期治療是提高腫瘤治愈率的關鍵。現臨床常用的確診手段有 胸透、B超、CT、核磁共振等，常常是伴隨著穿刺、抽血等加重病人痛苦甚至有可能發生交叉 感染的手段，而且價格昂貴，更重要的是通過這些手段能檢測出的腫瘤一般都處于中晚期， 給病人帶來極大的痛苦和經濟負擔。所以研宄一種操作簡單快捷、成本低、靈敏度高、重復 性好的的檢測方法勢在必行。
[0003] 癌細胞的核苷酸代謝異常會生成一種單羥酚類代謝物，具體是指酪氨酸、對羥基 苯丙氨酸、色氨酸和5-羥吲哚乙酸，且含量遠高于正常人，而這種物質能夠通過尿液排放。 檢測單羥酚類代謝物的含量，可以推斷人體是否患有癌癥，能夠及早的發現腫瘤，挽救生 命，無需額外的開支，免去病人的恐懼和痛苦。但尿液中某些微量成分或者因其他病因導致 的代謝異常產物同樣會與檢測試劑中的汞離子、亞汞離子結合生成顏色沉淀，會嚴重干擾 檢測結果的準確性，因此目前的尿液代謝物檢測試劑雖然靈敏很高，但常常會出現假陽性 問題，大大降低了檢測的準確性，造成誤診，限制了其應用價值。

【發明內容】

[0004] 本發明提供了一種尿液中單羥酚類代謝物的檢測試劑及其制備方法，用以解決檢 測準確性低的問題。
[0005] 為了解決上述技術問題，本發明的技術方案是：所述單羥酚類代謝物尿液檢測試 劑，是包括硝酸、硫酸、硝酸亞汞、硫酸汞、硝酸鎳、磷鉬酸和硫酸鈷的水溶液。
[0006] 進一步，所述水溶液中硫酸采的濃度為0. 4?2.lmol/L，硝酸亞采濃度為0. 3? 0? 9mol/L，硝酸鎳的濃度為0? 01?0? 06mol/L，磷鉬酸濃度為3. 2?14.lmmol/L，硫酸鈷濃 度為 0. 1 ?0. 4mol/L。
[0007] 癌前病變及早中晚期患者體內的腫瘤細胞會異常增殖從而引發一系列的應激反 應，引發體內單羥酚類物質代謝增強，使得尿液中單羥酚類代謝物含量遠超常人。單羥酚類 代謝物是一類小分子物質，具體是指酪氨酸、對羥基苯丙氨酸、色氨酸和5-羥吲哚乙酸，作 為代謝終端物質因而比較穩定。本發明通過試劑中的亞汞離子會與單羥酚類物質反應產生 紅色、類紅色沉淀，經試驗證明水溶液中亞汞離子能與單羥酚類代謝物反應得到很好的顏 色沉淀，可以從顏色的深淺可以初步定性判斷患者是否有攜帶癌細胞的可能。而適宜的硫 酸汞、硝酸鎳濃度能與尿液中其他的陰離子（如鹵素離子、亞硝酸根離子）反應生成白色 絡合物沉淀有效排除陰離子干擾，磷鉬酸如果濃度太低則不能有效的與尿液中的生物堿反 應，不能有效的排除生物堿類干擾，從而造成試劑的假陽性結果；如果濃度太高則可能與溶 液中的陽離子如汞離子，亞汞離子結合，使之不能與對應物質反應造成假陰性結果，提高了 檢測試劑的特異性；硫酸鈷溶液是呈紅色的，如果加入的硫酸鈷濃度過高則可能掩蓋試劑 與尿液反應的顏色，造成干擾產生假陽性結果，如果濃度太低的話又不能很好的與單羥酚 類物質反應，更關鍵的是汞離子、亞汞離子易水解，尤其當溫度變化較大時更影響著二者的 水解，如果鈷離子濃度太低的話不能起到很好的穩定汞離子、亞汞離子水解的效果。
[0008] 本發明還提供了單羥酚類代謝物尿液檢測試劑的制備方法，包括如下步驟：
[0009] 1)A溶液的制備：稱取硫酸汞溶于3mol/L的硫酸水溶液中獲得A溶液；
[0010] 2)B溶液的制備：稱取硝酸亞汞溶于4mol/L的硝酸水溶液中獲得B溶液；
[0011] 5)C溶液的制備：稱取硝酸鎳溶于雙蒸水中獲得C溶液；
[0012] 3)D溶液的制備：稱取磷鉬酸溶于雙蒸水中獲得D溶液；
[0013] 4)E溶液的制備：稱取硫酸鈷溶于雙蒸水中獲得E溶液；
[0014] 6)混合：將步驟1)、2)、3)、4)和5)中制備的A、B、C、D和E溶液按1: (1? 1. 6) : (0. 1?0. 7) : (0. 2?0. 3) : (0. 7?1. 5)體積比混合，即得所述單羥酚類代謝物尿液 檢測試劑。
[0015] 優選地是，所述A溶液中硫酸采含量為0. 5?2g/ml。
[0016] 優選地是，所述B溶液中硝酸亞采含量為0. 6?1. 5g/ml。
[0017] 優選地是，所述C溶液中硝酸鎳含量為0. 1?0. 3g/ml。
[0018] 優選地是，所述D溶液中磷鉬酸含量為0. 1?0. 3g/ml。
[0019] 優選地是，所述E溶液中硫酸鈷含量為0. 1?0. 5g/ml。
[0020] 本發明提供的技術方案，原材料易得，低廉，制備過程簡單，獲得的試劑性能穩定， 用于癌癥檢測具有普適性強、靈敏度高和特異性好等特點，檢測過程簡單，時間短，易于判 斷，特別適合于大規模的人群普查及癌癥臨床輔助診斷和療效動態檢查。
【具體實施方式】
[0021] 所有原材料均為分析純級別的普通化學制劑，制備過程也都在常溫、常壓下進行。
[0022] 實施例1
[0023] 所述單羥酚類代謝物尿液檢測試劑，為包括硝酸、硫酸、硫酸汞、硝酸亞汞、硝 酸鎳、磷鉬酸和硫酸鈷的水溶液，其中硫酸汞的濃度為0. 67mol/L，硝酸亞汞的濃度為 0. 36mol/L，硝酸鎳的濃度為0. 14mol/L，磷鉬酸的濃度為6. 4mmol/L，硫酸鈷的濃度為 0.10mol/L〇
[0024] 制備過程如下：
[0025] 1)A溶液的制備：稱取適量硫酸汞溶于3mol/L的硫酸水溶液中，得A溶液，其中硫 酸汞的濃度為lg/ml;
[0026] 2)B溶液的制備：稱取適量硝酸亞汞溶于4mol/L的硝酸溶液中，得B溶液，其中硝 酸亞汞的濃度為0. 6g/ml;
[0027] 3)C溶液的制備：稱取適量的硝酸鎳溶于雙蒸水中，得C溶液，其中硝酸鎳的濃度 為 0? 3g/ml
[0028] 4)D溶液的制備：稱取適量磷鉬酸溶于雙蒸水中，得D溶液，其中磷鉬酸的濃度為 0.2g/ml；
[0029] 5)E溶液的制備：稱取適量硫酸鈷溶于雙蒸水中，得E溶液，其中硫酸鈷的濃度為 0.lg/ml；
[0030] 6)混合：將步驟1)、2)、3)、4)和5)中制備的A、B、C、D和E溶液按 1:1. 6:0. 7:0. 3:1. 5體積比混合，即得所述單羥酚類代謝物尿液檢測試劑。
[0031] 實施例2
[0032] 所述單羥酚類代謝物尿液檢測試劑，為包括硝酸、硫酸、硫酸汞、硝酸亞汞、硝酸 鎳、磷鉬酸和硫酸鈷的水溶液，其中硫酸采的濃度為2.Omol/L，硝酸亞采的濃度為0. 8mol/ L，硝酸鎳的濃度為0?Olmol/L，磷鉬酸的濃度為3. 2mmol/L，硫酸