果汁飲料中合成色素的快速篩查試劑盒及其使用方法
【專利摘要】本發明屬于食品檢測【技術領域】，具體涉及果汁飲料中合成色素的快速篩查試劑盒及其使用方法。本發明要解決的技術問題是提供一種快速檢測果汁飲料中合成色素的檢測方法。本發明的技術方案是果汁飲料中合成色素的檢測試劑盒，包括非極性有機溶劑。本發明還提供了所述試劑盒的使用方法。本發明的試劑盒操作簡便、費用低廉、結果可靠、能夠現場操作且適合大量樣本的快速篩查，用于檢測果汁飲料中是否含有合成色素。
【專利說明】果汁飲料中合成色素的快速篩查試劑盒及其使用方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于食品檢測【技術領域】，具體涉及果汁飲料中合成色素的快速篩查試劑盒及其使用方法。
【背景技術】
[0002]果汁飲料是以水果為原料經過物理方法如壓榨、離心、萃取等得到的汁液產品。常見的果汁飲料有橙汁、橘汁、蘋果汁、芒果汁、梨汁、西瓜汁、葡萄汁、椰子汁、番茄汁、檸檬汁等。各種果汁飲料因飲用方便，富含維生素等營養素，深受消費者喜愛。
[0003]天然果汁大多具有鮮艷的顏色，給人以好的感官感受，并由此引發消費者的食用欲望。天然的顏色也是一種果汁飲料具有良好品質的重要標志之一。
[0004]天然果汁具有好的品質，但同時也具有較高的價格。為了降低果汁生產制作成本，獲取更多利益，一些果汁生產加工者在生產制作果汁時摻雜使假，既損害消了費者的權益，也擾亂了正常的市場秩序。目前果汁摻假常見的方式主要有兩種，一種是完全配制型，即以甜味劑、糖類、色素和水等調配而成；一種是稀釋摻假型，即稀稀果汁中摻入其它廉價果汁或糖類、有機酸類等。不管是哪種摻假類型，果汁飲料中摻入合成色素已成為果汁摻假的常見手段。因此，檢測果汁飲料中是否含有合成色素通常是識別果汁摻假的重要手段之一。
[0005]合成色素的種類較多，食品加工制作中最常用的合成色素為食用合成著色劑，主要是一類具有水溶性的合成著色劑，常見的有檸檬黃、日落黃、胭脂紅、誘惑紅、莧菜紅、亮藍、靛藍、酸性紅、新紅、喹啉黃等，其中果汁飲料中常見的合成色素有檸檬黃、日落黃、胭月旨紅、誘惑紅、莧菜紅和亮藍等，主要為一些水溶性合成色素。
[0006]目前，對果汁飲料中合成色素的檢測已有較為成熟的檢測方法，如國家標準《食品中合成著色劑的測定》(GB/T5009.35-2003)中規定了食品中合成著色劑的檢測方法，該方法采用了高效液相色譜(HPLC)法、薄層色譜法和極譜法。目前各級食品檢驗機構對食品中常見合成色素的檢測一般采用HPLC法，對一些非食用合成色素除了采用HPLC法外，還采用液相色譜-質譜聯用(LC-MS)法進行檢測，采用HPLC或LC-MS法除了可對樣品中的色素進行準確定性定量分析外，還可對合成色素進行高通量分析。但HPLC或LC-MS法需要專門的儀器設備及專業檢測人員操作才能獲得分析結果，而且檢測成本高，所需時間長，不能滿足基層食品監管機構和廣大消費者對開展快速及低成本檢測的需求。
[0007]目前，有關食品中合成色素的快速檢測方法有較多報道，常見的有酶聯免疫吸附法(ELISA)、紅外光譜法、紙色譜法、薄層色素、微柱法、極譜法、快速檢測儀法等，但這些方法有的仍然需要借助儀器設備如紅外光譜法、極譜法及快速檢測儀法，有的操作仍然較為繁瑣，如ELISA法、微柱法、薄層色譜法，有的篩查效果需要進一步確認。對于果汁飲料中合成色素的快速檢測，有學者報道了一種試劑盒法快速檢測果汁飲料中合成色素的方法，該方法利用不同類型的著色劑在不同PH環境、不同極性溶劑中與纖維著色一脫色能力強弱差異的原理，實現樣品中合成色素的快速檢測，但未見該方法技術細節的報道。
[0008]到目前為止，尚未見非常簡便的對果汁飲料中合成色素進行快速篩查的方法。
【發明內容】

[0009]本發明要解決的技術問題是提供一種快速檢測果汁飲料中合成色素的方法。
[0010]本發明的技術方案是果汁飲料中合成色素的快速篩查試劑盒，包括非極性有機溶劑。
[0011]優選的，所述的非極性有機溶劑為乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酸乙酯、丁酸乙酯、正己烷、環己烷、二氯甲烷、三氯甲烷或甲基叔丁基醚中的至少一種。
[0012]進一步的，所述試劑盒還含有透明離心管或試管，吸管。
[0013]本發明還提供了上述試劑盒的使用方法，包括如下步驟:
[0014]a、吸取0.5?3mL的果汁飲料置于透明離心管或試管中；
[0015]b、向離心管或試管中加入樣品體積0.6?2.0倍的非極性有機溶劑，加蓋后充分混勻；
[0016]C、將樣品管靜置,待管中液體分層；
[0017]d、肉眼觀察有機相和水相的顏色變化，若水相呈現肉眼可見的顏色，提示樣品中含有合成色素。
[0018]進一步的，上述方法還包括步驟e，即通過本發明試劑盒的初步檢測，對步驟d篩查出含有合成色素的樣品，采用HPLC或LC-MS進行定量分析。具體的操作步驟可參照食品中合成著色劑標準檢測方法或自建方法進行。
[0019]本發明中步驟c中可借助離心機加速液體分層。
[0020]本發明的有益效果:本發明中的試劑盒可對果汁飲料中的合成色素進行快速篩查，初步判斷樣品中是否含有合成色素。該篩查方法操作簡單，準確度高，檢測成本低，能在短時間內篩查大批量樣品。對于可疑的含合成色素的樣品，進一步采用HPLC或LC-MS分析確認，大大提高儀器分析的針對性。該試劑盒的應用，將在果汁飲料中合成色素的檢測中發揮重要作用。
【具體實施方式】
[0021]本發明的技術方案是果汁飲料中合成色素的快速篩查試劑盒，包括非極性有機溶劑。
[0022]優選的，所述的非極性有機溶劑為乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酸乙酯、丁酸乙酯、正己烷、環己烷、二氯甲烷、三氯甲烷或甲基叔丁基醚中的至少一種。
[0023]進一步的，所述試劑盒還含有透明離心管或試管，吸管。
[0024]本發明還提供了上述試劑盒的使用方法，包括如下步驟:
[0025]a、吸取0.5?3mL的果汁飲料置于透明離心管或試管中；
[0026]b、向離心管或試管中加入樣品體積0.6?2.0倍的非極性有機溶劑，加蓋后充分混勻；
[0027]C、將樣品管靜置，待管中液體分層；
[0028]d、肉眼觀察有機相和水相的顏色變化，若水相呈現肉眼可見的顏色，提示樣品中含有合成色素。
[0029]進一步的，上述方法還包括步驟e，即通過本發明試劑盒的初步檢測，對步驟d篩查出含有合成色素的樣品，采用HPLC或LC-MS進行定量分析。具體的操作步驟可參照食品中合成著色劑標準檢測方法或自建方法進行。
[0030]本發明中步驟c中可借助離心機加速液體分層。
[0031]本發明的檢測原理為:
[0032]果汁飲料中的天然色素與水溶性合成色素在水溶液和非極性有機溶劑中的分配系數不同，向果汁飲料中加入非極性有機溶劑，充分混勻后，靜置分層，由于果汁飲料中的天然色素大多為脂溶性，轉移到有機相中，而水溶性合成色素停留在水相中。通過肉眼觀察有機層和水層中色素的分布，初步判斷樣品中是否含有合成色素。
[0033]實施例1試劑盒的組成
[0034]試劑盒由以下部分組成，其制備方法如下:
[0035]1.透明帶蓋(或塞)離心管(或試管)
[0036]選擇帶蓋(或塞)的透明離心管(或試管)，可為玻璃或塑料材質，體積I?10mL。
[0037]2.帶吸頭的吸管
[0038]吸管為帶吸頭的玻璃或塑料吸管，可有刻度或無刻度。
[0039]3.試劑A (即非極性有機試劑)
[0040]試劑A可為乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酸乙酯、丁酸乙酯、正己烷、環己烷、二氯甲烷、三氯甲烷或甲基叔丁基醚中的任意一種，或者其任意比例的混合溶液等，將其置于密閉的塑料或玻璃瓶中。
[0041]實施例2果汁飲料中合成色素快速篩查試劑盒的組建
[0042]組建蘇丹染料快速篩查試劑盒，使其包含下述組分:
[0043](I)透明帶蓋(或塞)離心管(或試管)
[0044](2)帶吸頭的吸管
[0045](3)試劑 A
[0046]實施例3果汁飲料中合成色素的快速篩查
[0047]1.取樣操作
[0048](I)吸取果汁飲料置于內徑為Icm的的塑料離心管中，使其液面高度約為Icm ；
[0049](2)向離心管中加入與樣品等體積的非極性有機試劑(例如乙酸乙酯)，加蓋后手動振搖I?2min，充分混勻；
[0050](3)將樣品管靜置，待管中液體分層后觀察結果。
[0051]2.篩查結果分析
[0052]肉眼觀察有機相和水相的顏色變化，若水相呈現肉眼可見的顏色，提示樣品中含有合成色素；
[0053]3.篩查結果的確認分析
[0054]檢測結果的確認分析:對篩查出含有合成色素的樣品，采用HPLC法分析確認。操作方法如下:
[0055]樣品處理方法:取5mL果汁飲料于離心管中，加入等體積的無水乙醇，充分混勻，以3000rpm離心5min，取上清用0.45 μ m微孔濾膜過濾后供HPLC分析。
[0056]推薦的HPLC分析條件:
[0057](I)儀器條件[0058]V18柱(4.6\250臟，5 4 111);柱溫:301:;流動相4為甲醇乙腈(1: I),B為0.02mol/L乙酸銨溶液；流速:1.0mL/min ;梯度洗脫程序:0~12.0min, 5% A ; 12.0~30.0min, 5 % ~35 % A ；30.0 ~35.0min, 35 % ~98 % A ;35.0 ~35.1min, 98 % ~5 % A ;35.1~55min ；5%A0檢測器:二極管陣列檢測器，掃描范圍:200~SOOnm ;進樣量=IOyL0選擇4種波長同時檢測，4種波長分別為254nm、400nm、500nm和600nm。
[0059](2)標準曲線
[0060]將18種色素配制成質量濃度均為100mg/L的混合標準儲備液(選擇的合成色素對照品包括檸檬黃、莧菜紅、靛藍、胭脂紅、日落黃、羅丹明B、喹啉黃、皂黃、堿性橙I1、堿性嫩黃O、誘惑紅、偶氮玉紅、赤蘚紅、酸性橙I1、堿性橙21、堿性橙22、亮藍、專利藍)，儲存于4°C冰箱。將混合標準儲備液用20%甲醇依次稀釋成0.5、1.0,2.0,5.0,10.0,20.0mg/L的標準系列溶液(現用現配)，繪制標準曲線。
[0061](3)定性及定量分析
[0062]依據保留時間及對照品光譜圖對待檢目標化合物定性，外標法定量。
[0063]實施例4樣品篩查結果的重復性
[0064]分別對含合成色素和不含合成色素的果汁樣品按實施例3所述方法進行多次重復分析，用乙酸乙酯為試劑，觀察結果見表1。由表1可見，同一樣品多次重復分析結果一致，重復性好。
[0065]表1對含合成色素和不含合成色素的果汁飲料的多次重復篩查結果
【權利要求】
1.果汁飲料中合成色素的快速篩查試劑盒，其特征在于:包括非極性有機溶劑。
2.如權利要求1所述的果汁飲料中合成色素的快速篩查試劑盒，其特征在于:所述的非極性有機溶劑為乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酸乙酯、丁酸乙酯、正己烷、環己烷、二氯甲烷、三氯甲烷或甲基叔丁基醚中的至少一種。
3.如權利要求1或2所述果汁飲料中合成色素的快速篩查試劑盒，其特征在于:所述試劑盒還含有透明離心管或試管，吸管。
4.果汁飲料中合成色素的快速篩查試劑盒的使用方法，其特征在于:包括如下步驟: a、吸取0.5~3mL的果汁飲料置于透明離心管或試管中； b、向離心管或試管中加入樣品體積0.6~2.0倍的非極性有機溶劑，加蓋后充分混勻； C、將樣品管靜置，待管中水相和有機相液體分層； d、肉眼觀察有機相和水相的顏色變化，若水相呈現肉眼可見的顏色，說明樣品中含有合成色素。
5.如權利要求4所述的方法，其特征在于:還包括步驟e、對步驟d中篩查出含有合成色素的樣品，采用HPLC或LC-MS進行定量分析。
【文檔編號】G01N30/02GK103604759SQ201310590374
【公開日】2014年2月26日 申請日期:2013年11月20日 優先權日:2013年11月20日
【發明者】朱永紅, 趙博 申請人:重慶市計量質量檢測研究院