一種具有nedd8激活酶抑制活性的化合物、其制備方法及醫藥用圖
【專利摘要】本發明屬于藥物領域，具體涉及一種具有式I結構的化合物、其立體異構體、或其藥學上可接受的鹽及其制備方法和在制備抗腫瘤藥物中的應用。藥理實驗結果表明，該類化合物可以抑制NEDD8激活酶的活性，并且對多種腫瘤細胞的增殖具有抑制作用，因此可作為NEDD8激活酶抑制劑用于制備抗腫瘤藥物。
【專利說明】
一種具有NEDD8激活酶抑制活性的化合物、其制備方法及醫藥 用途
技術領域
[0001]本發明屬于藥物領域，具體涉及一種具有NEDD8激活酶抑制活性的化合物、其立體 異構體或其藥學上可接受的鹽以及其制備方法和醫藥用途，特別是作為NEDD8激活酶抑制 劑的用途。
【背景技術】
[0002] 蛋白質是生命活動的直接執行者，生命過程中幾乎所有的環節都與蛋白質有關。 蛋白質的合成和降解的平衡對于維持細胞正常生理功能起著至關重要的作用。細胞內蛋白 質平衡的破壞將會阻礙細胞的正常凋亡，誘導其無限增殖，從而誘發癌癥(Natur e，2003， 426:905-909;Science，2008,319:916-919)。在真核細胞中，泛素蛋白酶體系統(UPS)是調 控蛋白質降解的主要通路，80%的"廢棄"蛋白由其介導降解，從而調解細胞內的蛋白質平 衡。UPS調控的蛋白涉及細胞周期、基因表達、抗原提呈以及細胞信號通路中的抑制因子與 激活因子，因此，UPS在細胞分化、細胞繁殖、細胞凋亡、基因轉錄、信號傳導、代謝調控、免疫 監視等基本細胞生命過程中起關鍵作用，其功能的異常與腫瘤的發生與發展密切相關，因 此對UPS的調控已成為癌癥治療中一種重要的方法。
[0003] 在UPS中，泛素分子在ATP的參與下被泛素激活酶(E1)激活，隨后激活的泛素分子 通過轉硫醇作用轉移至泛素結合酶(E2)，最后在泛素連接酶(E3)的作用下泛素分子被標記 到特異性底物蛋白的賴氨酸殘基上，這一過程被稱為泛素化。泛素化的底物蛋白會繼續參 與泛素化過程，進而形成多泛素化的蛋白，最終被蛋白酶體降解。其中，泛素連接酶E3具有 嚴格的底物特異性，在泛素化過程中起著重要的作用。隨著研究的深入，人們發現UPS存在 多條與泛素化過程類似的平行通路，即類泛素通路。其中NEDD8通路由于對部分泛素連接酶 (E3)的活性具有特殊的調控作用，因此引起了人們廣泛的關注。與泛素化類似，NEDD8首先 被NEDD8激活酶(ΝΑΕ)激活，隨之被轉移至NEDD8結合酶，最終在連接酶的作用下與靶蛋白結 合。在NEDD8標記的眾多底物中，Cul 1 in-RING Ligases(CRLs)最為重要。CRLs是泛素連接酶 (E3)中最大的亞家族，它調節眾多細胞蛋白在細胞內的活性和含量，進而控制細胞生長、分 化以及凋亡等生理過程。而CRLs只有經過Cul 1 in-NEDD化才具有催化活性，從而催化各自底 物進行泛素化，進而維持底物蛋白的平衡。由此可見，NEDD8通路在CRLs介導的蛋白質泛素 化過程中起著重要的調節作用(Annu Rev Biochem，2012,81:323-357;Nat Rev Mol Cell 81〇1，2015，16:30-44)。除〇1111丨118外，一些與腫瘤相關的細胞調控蛋白也是呢008的底物， 如著名的癌蛋白MDM2和抑癌蛋白p53(Nat Rev Cancer，2011，11:629-643)〇
[0004] 多項研究表明，NEDD8激活酶過度表達與人類腫瘤的發生、發展和預后不良密切相 關（J Natl Cancer Inst，2014，106:dju083;J Clin Invest，2014，124:835-846;J Pathol，2007，213:303-310 ;Mol Cell Biochem，2007,306:163-169)，因此NEDD8激活酶已 成為近年來抗腫瘤藥物研發的靶點。
[0005] MLN4924是由Millennium公司研發的NEDD8激活酶小分子抑制劑，它可以通過特殊 的底物協同機制抑制NEDD8激活酶的活性，從而達到調控整個NEDD8通路的目的。MLN4924目 前正在開展治療急性髓性白血病、急性淋巴細胞白血病、多發性骨髓癌、淋巴瘤、黑色素瘤 以及其它實體瘤的臨床試驗研究。然而，目前已報道的NEDD8激活酶抑制劑種類和數量很少 且結構單一，因此開展新型NEDD8激活酶抑制劑研發具有重要的意義。

【發明內容】

[0006] 本發明涉及一種具有式I所示化合物、其立體異構體或其藥學上可接受的鹽及其 制備方法和在制備抗腫瘤藥物中的應用。實驗結果表明，該類化合物可以抑制NEDD8激活酶 的活性，并且對多種腫瘤細胞的增殖具有抑制作用。
[0007] 本發明公開通式I所示的化合物、其立體異構體或其藥學上可接受的鹽：
[0009]其中：
[0010] η代表1~8的整數；
[0011] Ri代表氨基或乙酰胺基；
[0012] R2 代表：
[0014] 其中：
[0015] X 代表 S、N或 0;
[0016] Y 代表 ΝΗ、0或 S;
[0017] R3代表氫、鹵素、羥基、硝基、三氟甲基、氰基、&-C8烷基、&-C8烷氧基、C3_C 6環烷基 或 NR4R5;
[0018] R4和抱可相同或不相同，任選自：氫Xi-Cs烷基或1?4和他與和它們相連的氮一起形 成5-7元雜環基，其中所述的雜環基可任選地包含一個或多個選自0、S或N的其它雜原子，并 且該雜環基可任選地由下述相同或不同的取代基單取代至五取代，所述取代基包括：鹵素、 羥基、硝基、氰基、氨基、&-C8烷基或&-C8烷氧基；
[0019] 其中，下式化合物(LZ3)除外：
[0021] 進一步地，具有通式I所述的化合物、其立體異構體或其藥學上可接受的鹽，其特 征在于：
[0022] η代表1~6的整數；
[0023]辦代表氨基或乙酰胺基；
[0024] R2 代表：
[0026] X 代表 S、N或 0;
[0027] Y 代表 ΝΗ、0或 S;
[0028] R3代表氫、鹵素、羥基、氰基Xi-Cs烷基、&-C8烷氧基或C3_C 6環烷基。
[0029] 更進一步地，具有通式I所述的化合物、其立體異構體或其藥學上可接受的鹽，其 特征在于：
[0030] η代表1~6的整數；
[0031]辦代表氨基或乙酰胺基；
[0032] R2 代表：
[0034] X代表 S或 N;
[0035] Y 代表 ΝΗ、0或 S;
[0036] R3代表氫、鹵素或&_(：8烷氧基。
[0037]具體來說，通式I所述的化合物、其立體異構體或其藥學上可接受的鹽，其立體異 構體或其藥學上可接受的鹽優選自下列化合物：
[0038] (Z)-3-[2-亞胺基-5-(2-甲氧基苯乙烯基)-4-羰基噻唑-3-基]-N-4-(氨磺酰基苯 基)丙酰胺(LW-1);
[0039] (Z)-3-[4-(2-甲氧基苯乙烯基)-5-氧代-2-硫代咪唑-1-基]-N-4-(氨磺酰基苯 基)丙酰胺(LW-2);
[0040] (Z)-3-[4-(2-甲氧基苯乙烯基)-2,5_二氧代咪唑烷-1-基]-N-4-(氨磺酰基苯基） 丙酰胺(LW-3);
[0041 ] (Z)-2-[5-(2-甲氧基苯乙烯基)-2,4_二羰基噻唑-3-基]-N-4-(氨磺酰基苯基）乙 酰胺(LW-4);
[0042] (Z)-2-[4-(2-甲氧基苯乙烯基)-5-氧代-2-硫代咪唑-1-基]-N-4-(氨磺酰基苯 基）乙酰胺(LW-5);
[0043] (Z)-4-[5-(2-甲氧基苯乙烯基)-2,4_二羰基噻唑-3-基]-N-4-(氨磺酰基苯基)丁 酰胺(LW-6);
[0044] (Z)-4-[4_(2-甲氧基苯乙烯基)-5_氧代-2-硫代咪唑-1-基]-N-4_(氨磺酰基苯 基)丁酰胺(LW-7);
[0045] (Z)-3-[5-(3-甲氧基苯乙烯基)-2,4_二羰基噻唑-3-基]-N-4_(氨磺酰基苯基)丙 酰胺(LW-8);
[0046] (Z)-3-[5-(4-甲氧基苯乙烯基)-2,4-二羰基噻唑-3-基]-N-4_(氨磺酰基苯基)丙 酰胺(LW-9);
[0047] (Z)-3-[5-(2-氟苯乙烯基)-2,4_二羰基噻唑-3-基]-N-4-(氨磺酰基苯基)丙酰胺 (LW-10)；
[0048] (Z)-3-[5-(2-氯苯乙烯基)-2,4_二羰基噻唑-3-基]-N-4-(氨磺酰基苯基)丙酰胺 (LW-11)；
[0049] (Z)-N-[4-(乙酰磺酰基)苯基]-3-[5-(2-溴苯乙烯基)-2,4_二羰基噻唑-3-基]丙 酰胺(LW-12);
[0050] (Z)-3-[5-(2-甲氧基苯乙烯基)-2,4_二羰基噻唑-3-基]-N-3-(氨磺酰基苯基)丙 酰胺(LW-13);
[0051] (Z)-3-(5-苯乙烯基-2,4-二羰基噻唑-3-基)-N-4-(氨磺酰基苯基）丙酰胺(LW-l4);
[0052] 3-(2,3_二氧吲哚-1基)-N-(4-氨磺酰基苯基)丙酰胺(LW-15);
[0053] 3-(5-氟-2,3-二氧吲哚-丨基)-^*-氨磺酰基苯基)丙酰胺(LW-16);
[0054] 3-(5-氯-2,3-二氧吲哚-1基)-N-(4-氨磺酰基苯基)丙酰胺(LW-17);
[0055] 3-(5-溴-2,3-二氧吲哚-1基)-N_(4-氨磺酰基苯基)丙酰胺(LW-18);
[0056] 3-(5-甲氧基-2,3-二氧吲哚-1基)-N-(4-氨磺酰基苯基)丙酰胺(LW-19);
[0057]下面藥理實驗中涉及的化合物代號等同于此處代號所對應的化合物。
[0058]本發明的另一目的在于提供通式I所示化合物的制備方法，其特征在于：
[0059]
，通式I所示化合物的制備方法為:?取代的磺酰基苯胺與 氯烷基酰氯反應生成中間體2，R3取代的苯甲醛與五元雜環酮反應制得中間體3,2與3縮合 反應制得通式I所示的化合物，其合成路線如下：
[0061 ]其中，RdPR2的定義如權利要求1所述。
[0062]
，通式I所示化合物的制備方法為：由中間體2與R3取代的靛 紅反應制得通式I所示的化合物，其合成路線如下：
[0064]其中，RjPR2的定義如權利要求1所述。
[0065] 本發明的進一步目的在于提供一種藥物組合物，其由治療上有效量的權利要求Ια 中任一項所述的化合物、其立體異構體或其藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的載體或 輔料組成。
[0066] 本發明的再一目的是提供具有通式I和II的化合物、其立體異構體或其藥學上可 接受的鹽在制備抗腫瘤藥物中的應用，其中所述的腫瘤為結腸癌、乳腺癌、白血病、淋巴瘤 或多發性骨髓瘤。
【具體實施方式】
[0067] 為了進一步闡明本發明，下面給出一系列實施例，這些實施例完全是例證性的，它 們僅用來對本發明具體描述，不應當理解為對本發明的限制。
[0068] 實施例1
[0069] 2-亞胺-4-噻唑酮(2a)的制備
[0071] 將硫脲（1 · 52g，0 · 02mo 1)加至10mL95 %乙醇中，攪拌回流lOmin，慢慢滴加氯乙酸 乙酯（2.16mL，0.02mo 1)，滴畢回流3h，冷卻至室溫，抽濾，少量乙醇洗滌，干燥得白色固體 2.518，產率92%，1^ 255-257。(：。1!1-匪1?(3001!^，015〇-(16)3(??111) :11.88(8，1!〇,9.87(8， lH)，3.84(s，2H).
[0072] (Z) -2-亞胺基-5-( 2-甲氧基苯乙烯基)噻唑烷-4-酮(2b)的制備
[0074] 將2a(0· 5g，4· 31mmol)和鄰甲氧基苯甲酸(0 · 586g，4· 31mmol)溶于20mL醋酸中，加 入無水醋酸鈉(40mg，0.48mmol)，回流6h，冷卻，將反應液倒入100mL水中，析出黃色固體，抽 濾，醋酸重結晶，干燥得黃色固體0.85g，產率84 %，mp 260-262 °C。MMR(300MHz，DMS0-d6)J(ppm):12.58(s，1H)，9.87(s，1H)，7.98(s，1H)，7.53-7.36(m，2H)，7.20-7.04(m，2H)， 3.89(s,3H).
[0075] 4-N_( 3-氯丙酰基)-苯磺酰胺(3)的制備
[0077] 將對氨基苯磺酰胺（lg，5.8lmmol)加入20mL無水THF中，攪拌溶解，加入N-甲基嗎 啉（1.28mL，11.6lmmol)，冰浴下逐滴加入3-氯丙酰氯（1.1 lmL，11.6lmmol)，加畢，室溫反應 4h，過濾，濾液旋干，乙醇重結晶，干燥得白色固體1.35g，產率88 %，mp 228-230 °C。h-NMR (300MHz，DMS〇-d6)J(ppm): 10.05(s，lH)，7.76(d，J = 2.0Hz，4H)，7.27(s，2H)，3.89(t，J = 6.2Hz，2H)，2.87(t，J = 6.2Hz，2H).
[0078] (Z)-3-[2-亞胺基-5-(2-甲氧基苯乙烯基)-4-羰基噻唑-3-基]-N-4-(氨磺酰基苯 基)丙酰胺(LW-1)的制備
[0080]將3 (0 · 2g，0 · 76mmo 1)和2b (0 · 178g，0 · 76mmo 1)加入20mL DMF中攪拌溶解，加入氫 氧化鈉(0.0618，1.53臟〇1)，加熱至120°(：反應1211，將反應液倒入1001^水中，稀鹽酸調節?!1 至3,乙酸乙酯萃取，無水MgS〇4干燥，過濾，旋干，柱層析[E:P = 4:1]得黃色固體0.12g，產率 34.3 % ,mp 274-276 °C 〇ESI-MS :459.1 [M-H]- ； ^-NMRC 300MHz, DMSO-de) ： δ (ppm) ： 10.47 (s, lH)，9.15(s，lH)，7.76(d，J = 2.0Hz，4H)，7.53(d，J = 7.8Hz，lH)，7.36(m，2H)，7.28(s，2H)， 7.20-7.04(m，2H)，6.76(s，lH)，3.83(s，3H)，3.74(t，J = 6.1Hz，2H)，2.55(t，J = 6.1Hz， 2H).
[0081 ] 實施例2
[0082] 1 -乙酰基硫代乙內酰脲(5a)的制備
[0084] 將甘氨酸（1 · 28g，llmmol)和硫氰酸按（0 · 76g，lOmmol)溶于15mL乙酸酐中，加入 lmL冰醋酸，緩慢加熱至100°C，攪拌40min，冷卻，倒入100mL冰水中，析出黃色固體，水洗，乙 醇重結晶，干燥得淡黃色固體1.2g，產率76%，mp ne-nSOc/H-NMRUOOMHzJMSO-c^J (ppm):12.01(s，lH)，4.1(s，2H)，1.9(s，3H).
[0085]硫代乙內酰脲(5b)的制備
[0087] 將5a( lg，6.3mmol)加入20mL濃鹽酸中，回流攪拌lh，濃縮，冷卻，析出固體，抽濾， 水洗，乙醇重結晶，干燥得淡黃色固體〇.65g，產率88.5%，mp 224-2271:,11-^^(30010^, DMS0-d6)j(ppm):11.66(s，lH)，9.87(s，lH)，4.08(s，lH).
[0088] (Z)-2-亞胺基-5-(2-甲氧基苯乙烯基)-2硫代咪唑烷-4-酮(5c)的制備
[0090] 參照2b的制備方法，由5b和鄰甲氧基苯甲醛反應得黃色固體，產率81%，111?205- 208°C</H-NMR(300MHz，DMS0-d6) :δ(ρρπι) :12.01 (s，lH)，10.47(s，lH)，8.01(s，1Η)，7·53-7·36(m，2H)，7·20-7·04(m，2H)，3·89(s，3H)·
[0091] (Z)-3-[4-(2-甲氧基苯乙烯基)-5-氧代-2-硫代咪唑-1-基]-N-4-(氨磺酰基苯 基)丙酰胺(LW-2)的制備
[0093] 參照LW-1的制備方法，由5c和3反應得黃色固體，產率38%，1^ 267-269°(：(^31-MS：459.2[M-H]_；1H-NMR(300MHz,DMS0-d6)：5(ppm)：12.01(saH)a0.47(saH),8.01(s, 1H)，7.76(d，J=2.0Hz，4H)，7.53-7·36(m，2H)，7.28(s，2H)，7·20-7.04(m，2H)，3.83(s， 3H)，3.79(t，J = 6.2Hz，2H)，2.57(t，J = 6.2Hz，2H).
[0094] 實施例3
[0095] 乙內酰脲(6a)的制備
[0097]將氯乙酸（1 · 25g，13 · lmmol)溶于10mL水中，再加入5a( 1.8g，11.4mmol)，回流2h， 濃縮成粘稠狀液體，加入2mL乙醇，析出固體，抽濾，干燥得白色固體0.98g，產率86 %，mp 215-217tC<31H-MMR(300MHz，DMS0-d6) :S(ppm):12.01(s，lH)，10.47(s，lH)，3.87(s，2H)· (Z)-5-(2-甲氧基苯乙烯基)-噻唑烷-2，4-二酮(6b)的制備
[0099] 參照2b的制備方法，由6a和鄰甲氧基苯甲醛反應得黃色固體，產率79%，111?155-157°C</H-NMR(300MHz，DMS0-d6) :δ(ρρπι) :12.01 (s，lH)，10.47(s，lH)，8.01(s，1Η)，7·53-7·36(m，2H)，7·20-7·04(m，2H)，3·83(s，3H)·
[0100] (Z)-3-[4-(2-甲氧基苯乙烯基)-2,5-二氧代咪唑烷-1-基]-N-4-(氨磺酰基苯基） 丙酰胺(LW-3)的制備
[0102] 參照LW-1的制備方法，由6b和3反應得黃色固體，產率39%，1^ 258-260°(：(^31-MS：443.2[M-H]_；1H-NMR(300MHz,DMS0-d6)：5(ppm)：11.21(saH)a0.40(saH),7.92(s, lH)，7.75(t，J = 2.1Hz，lH)，7.58(s，lH)，7.51-7.39(m，2H)，7.33(t，J = 7.9Hz，lH)，7.25 (s，1H)，7.10-6.93(m，2H)，6.89(s，2H)，3.84(t，J = 6.1Hz，2H)，2.58(t，J = 6.1Hz，2H).
[0103] 實施例4
[0104] 4-N-(2-氯丙酰基)-苯磺酰胺(4)的制備
[0106] 參照3的制備方法，由對氨基苯磺酰胺和2-氯乙酰氯反應得白色固體，產率80%， Γηρ217-21%~</Η-匪 R(300MHz，DMS0-d6):S(ppm):10.70(s，lH)，7.88-7.63(m，J = 2.8Hz， 4H)，7.37-7.16(m，2H)，4.30(s，2H).
[0107] 2,4_噻唑二酮(4a)的制備
[0109] 將2&(18,8.62臟〇1)加入151^20%的稀鹽酸中，回流1011，濃縮，冷卻，析出白色固 體，抽濾，水洗，70 %的乙醇重結晶，干燥得白色針狀結晶0.78g，產率77.2 %，mp 125-128 〇C〇1H-NMR(300MHz,DMS0-d6)：5(ppm)：12.11(saH),4.1(s,2H).
[0110] (Z)-5-(2-甲氧基苯乙烯基)-2,4_噻唑烷二酮(4b)的制備
[0112] 參照2b的制備方法，由4a和鄰甲氧基苯甲醛反應得黃色固體，產率81%，mp 235-237Γ ,Η-匪R(300MHz，DMS0-d6):S(ppm) :12.58(s，lH)，7.98(s，1Η)，7 ·53-7·36(ι?，2H)， 7.20-7.04(m，2H)，3.89(s，3H).
[0113] (Z)-2-[5-(2-甲氧基苯乙烯基)-2,4-二羰基噻唑-3-基]-N-4-(氨磺酰基苯基）乙 酰胺(LW-4)的制備
[0115] 將4b(0.2g，0.76mmol)和3(0.18g，0.76mmol)溶于 10mL THF溶液中，攪拌下加 DIPEA(0.2mL，1.52mmol)，加熱至40°C，反應6h，旋干，乙醇重結晶，干燥得黃色固體0.14g， 產率40 %，mp 268-27(TC iSI-MS: 448 · 1 [M+H] +;咕-匪R( 300MHz，DMS〇-d6): δ (ppm): 10 · 47 (s，1H)，7·98(s，1H)，7.76(d，J=2.0Hz，4H)，7.53-7.36(m，2H)，7.27(s，2H)，7.20-7.04(m， 2H)，3.89(s，3H)，3.76(t，J = 6.2Hz，2H)，2.87(t，J = 6.2Hz，2H).
[0116] 實施例5
[0117] (Z)-2-[4-(2-甲氧基苯乙烯基)-5-氧代-2-硫代咪唑-1-基]-N-4-(氨磺酰基苯 基)乙酰胺(LW-5)的制備
[0119] 參照LW-1的制備方法，由4和5c反應得黃色固體，產率39.5%，1^ 254-256°(：(^31-MS：446.1[M-H]_；1H-NMR(300MHz,DMS0-d6)：5(ppm)：12.01(saH)a0.47(saH),8.01(s, 1H)，7 · 76(d，J = 2 · 0Hz，4H)，7 · 53-7 · 36(m，2H)，7.28(s，2H)，7 ·20-7·04(ι?，2H)，4.52(s， 2H)，3.83(s，3H).
[0120] 實施例6
[0121] 4-N_(4-氯丁酰基)_苯磺酰胺(5)的制備
[0123] 參照3的制備方法，由對氨基苯磺酰胺和4-氯丁酰氯反應得白色固體，產率79%， mp245-247 °C。七-匪以300MHz，DMS〇-d6): δ (ppm): 10 · 30(s，1H)，7 · 67-7 · 83 (m，4H)，7 · 2(s， lH)，3.78(t，J = 7.2Hz，2H)，2.45(t，J = 7.2Hz，2H)，2.0(m，2H).
[0124] (Z)-4-[5-(2-甲氧基苯乙烯基)-2,4-二羰基噻唑-3-基]-N-4-(氨磺酰基苯基)丁 酰胺(LW-6)的制備
[0126] 參照LW-4的制備方法，由5和4b反應得黃色固體，產率39.5%，1^ 258-261°(：(^31-MS: 474 · 3 [M-H] -;七-匪以 300MHz，DMS〇-d6): δ (ppm): 10 · 30 (s，1H)，8 · 05 (s，1H)，7 · 67-7 · 83 (m，4H)，7.55(t，J = 8.2Hz，lH)，7.45(d，J = 8.2Hz，lH)，7.(U-7.21(m，2H)，3.92(s，3H)， 3.78(t，J = 7.2Hz，2H)，2.45(t，J = 7.2Hz，2H)，2.0(m，2H).
[0127] 實施例7
[0128] (Z)-4-[4-(2-甲氧基苯乙烯基)-5-氧代-2-硫代咪唑-1-基]-N-4-(氨磺酰基苯 基)丁酰胺(LW-7)的制備
[0130] 參照LW-1的制備方法，由5和5c反應得黃色固體，產率42%，mp 274-276°(：<^31-MS:474.2[M-H]-JH-匪 R(300MHz，DMS0-d6):S(ppm):12.01(s，lH)，10.33(s，lH)，7.95(s， 1H)，7.67-7.83(m，4H)，7.55(t，J = 8.2Hz，lH)，7.45(d，J = 8.2Hz，lH)，7.01-7.21(m，2H)， 3.92(s，3H)，3.75(t，J = 7.2Hz，2H)，2.42(t，J = 7.2Hz，2H)，2.0(m，2H).
[0131] 實施例8
[0132] (Z)-5_(3-甲氧基苯乙烯基)-2,4_噻唑烷二酮(7a)的制備
[0134] 參照2b的制備方法，由3-甲氧基苯甲醛和4a反應得淡黃色固體，產率79%，mp 165-167tC<31H-Mffi(300MHz，DMS0-d 6):S(ppm):12.64(s，lH)，7.76(d，J = 2.1Hz，lH)，7.44 (td，J = 8.2,2.1Hz，lH)，7.15(dt，J = 4.2，1.9Hz，2H)，7.09-6.97(m，lH)，3.80(s，3H).
[0135] (Z)-3-[5-(3-甲氧基苯乙烯基)-2,4-二羰基噻唑-3-基]-N-4_(氨磺酰基苯基)丙 酰胺(LW-8)的制備
[0137] 參照LW-4的制備方法，由3和7a反應得淡黃色固體，產率45%，1^ 243-245°(：(^31-MS:459.2[M-H] -JH-匪 R(300MHz，DMS0-d6):S(ppm):10.41(s，lH)，7.93(s，lH)，7.70(s， 4H)，7.45(d，J = 8.1Ηz，1Η)，7.27(s，2H)，7.15(d，J=10.3Hz，2H)，7.09(s，lH)，3.98(s， 2H)，3.77(s，3H)，2.76(s，2H).
[0138] 實施例9
[0139] (Z)-5_(4-甲氧基苯乙烯基)-2,4_噻唑烷二酮(7b)的制備
[0141] 參照2b的制備方法，由4-甲氧基苯甲醛和4a反應得淡黃色固體，產率82%，mp 240-242tC<31H-Mffi(300MHz，DMS0-d 6):S(ppm):12.53(s，lH)，7.75(d，J = 3.2Hz，lH)，7.56 (dd，J = 9.2,2.9Hz，2H)，7.10(dq，J = 8.5,2.3，1.4Hz，2H)，3.82(d，J = 2.0Hz，3H).
[0142] (Z)-3-[5-(4-甲氧基苯乙烯基)-2,4_二羰基噻唑-3-基]-N-4-(氨磺酰基苯基)丙 酰胺(LW-9)的制備
[0144] 參照LW-4的制備方法，由3和7b反應得淡黃色固體，產率43%，1^ 247-249°(：』31- MS:459.2[M-H] -JH-匪 R(300MHz，DMS0-d6):S(ppm):10.41(s，lH)，7.89(s，lH)，7.71(s， 4H)，7.63-7.47(m，2H)，7.25(s，2H)，7.17-7.01(m，2H)，3.95(s，2H)，3.82(s，3H)，2.71(s， 2H).
[0145] 實施例10
[0146] (Z)-5_(2-氟苯乙烯基)-2,4_噻唑烷二酮(8a)的制備
[0148] 參照2b的制備方法，由2-氟苯甲醛和4a反應得淡黃色固體，產率78%，mp210-211 °C</H-NMR(300MHz，DMS0-d6)J(ppn) :12.40(s，lH)，7.98(s，lH)，7.53-7.36(m，2H)，7.20-7.04(m，2H).
[0149] (Z)-3-[5-(2-氟苯乙烯基)-2,4_二羰基噻唑-3-基]-N-4-(氨磺酰基苯基)丙酰胺 (LW-10)的制備
[0151] 參照LW-4的制備方法，由3和8a反應得淡黃色固體，產率47%，1^ 263-265°(：(^31-MS:448.2[M-H] -;1H-NMR(300MHz，DMS0-d6)J(ppm) :10.41(s，lH)，7.92(s，lH)，7.72(q，J = 8.9,8.5Hz，4H)，7.59(t，J = 7.4Hz，2H)，7.40(t，J = 8.2Hz，2H)，7.25(s，2H)，3.97(t，J = 7.0Hz，2H)，2.74(t，J = 7.0Hz，2H).
[0152] 實施例11
[0153] (Z) -5- (2-氯苯乙烯基)-2，4-噻唑烷二酮(9a)的制備
[0155] 參照2b的制備方法，由2-氯苯甲醛和4a反應得淡黃色固體，產率78%，mp 220-221 Γ ,Η-匪R(300MHz，DMS0-d6):δ(ρρπ〇 :12.77(s，lH)，7.92(s，lH)，7·68-7·62(ι?，1H)，7.60-7.55(m，lH)，7.51(dt，J = 5.9,2.2Hz，2H).
[0156] (Z)-3-[5-(2-氯苯乙烯基)-2,4-二羰基噻唑-3-基]-N-4-(氨磺酰基苯基)丙酰胺 (LW-11)的制備
[0158] 參照LW-4的制備方法，由3和9a反應得淡黃色固體，產率48%，1^ 268-270°(：(^31- MS:464.1[M-H] -;咕-匪1?(3001抱，015〇-(16):3(??111):1〇.41(8，1!〇,7.98((1，了 = 2.9抱，1!〇， 7.78-7.49(m，8H)，7.24(s，2H)，3.97(t，J = 7.3Hz，2H)，2.74(t，J = 7.3Hz，2H).
[0159] 實施例12
[0160] N_[ (4-乙酰氨基苯基)磺酰基]乙酰胺（10a)的制備
[0162] 將磺胺（2.1 g，12.2mmo 1)加入20mL醋酸酐中溶解，回流8h，冷卻，倒入40mL冰水中， 析出大量白色固體，抽濾，水洗，異丙醇重結晶，干燥得白色固體2.2g，產率70 %，mp253-255 Γ</Η-ΜΚ(300ΜΗζ，0Μ50-(?6):δ(ρρπι):11·99(8，1Η)，10·40(8，1Η)，7·80(α，Ι = 9·0Ηζ，4Η)， 2.09(s，3H)，1.90(s，3H).
[0163] N-(4_乙酰氨基苯基）乙酰胺（10b)的制備
[0165] 將1(^(]^，4.7_31)加入2〇11^1.1251]1〇1/1的氫氧化鈉溶液中，回流反應211，冷卻， 用4N鹽酸溶液調pH至8，抽濾，再繼續使用4N鹽酸溶液調pH至4，在冰箱中冷卻24h，析出大量 白色固體，熱水重結晶，干燥得白色固體0.25g，產率30%，mp 183-184°C。七-匪以300MHz， DMS0-d6)J(ppm):11.99(s，lH)，10.40(s，lH)，7.80(q，J = 9.0Hz，4H)，6.09(s，2H)，1.9(s， 2H).
[0166] N_[ 4-(N_乙酰磺酰基)苯基]-3-氯丙酰胺(10c)的制備
[0168] 在20mL水中加入碳酸鉀（2·5g，18mmol)攪拌溶解，加入10b(2·3g，10·74mmol)，攪 拌均勻，冰浴下滴加3-氯丙酰氯（1.23mL，12.89mmol)，加畢室溫反應2h，抽濾，干燥得產物 1.8 8，產率92.3%。1^ 234-236。(：。1!1-匪1?(3001抱，0150-(16)3(??11) :10.10(8，1!1)，7.65-7.56(m，2H)，7.34-7.26(m，2H)，7.05(td，J = 7.3，1.3Hz，lH)，3.88(t，J = 6.2Hz，2H)，2.82 (t，J = 6.3Hz，2H).
[0169] (Z)-N-[4-(乙酰磺酰基)苯基]-3-[5-(2-溴苯乙烯基)-2,4_二羰基噻唑-3-基]丙 酰胺(LW-12)的制備
[0171] 參照LW-4的制備方法，由10c和4b反應得淡黃色固體，產率48 %，mp 289-291°C。 ESI-MS: 502 · 1 [M-H] -;七-匪以 300MHz，DMS〇-d6): δ (ppm): 11 · 47 (s，1H)，7 · 98 (s，1H)，7 · 76 (d，J=2.0Hz，4H)，7.53-7.36(m，2H)，7.27(s，2H)，7.20-7.04(m，2H)，3.89(s，3H)，3.76(t， J = 6.2Hz，2H)，2.87(dd，J = 7.3,5.3Hz，2H)，1.96(s，2H).
[0172] 實施例13
[0173] 3-氯-N_(3-氨磺酰基苯基)丙胺(11)的制備
[0175] 參照中間體3的制備方法，由間氨基苯磺酰胺和3-氯丙酰氯反應得白色固體，產率 87%,mp 228-230〇C〇1H-NMR(300MHz,DMS0-d6)：5(ppm)：10.39(saH),8.27-8.13(maH), 7.74(tt，J = 6.1，3.1Hz，lH)，7.58-7.47(m，2H)，7.38(s，2H)，3.90(t，J = 6.2Hz，2H)，2.86 (t，J = 6.2Hz，2H). ·
[0176] (Z)-3-[5-(2-甲氧基苯乙烯基)-2,4_二羰基噻唑-3-基]-N-3_(氨磺酰基苯基)丙 酰胺(LW-13)的制備
[0178] 參照LW-4的合成方法，由11和4b反應制得黃色固體，產率53 %，mp 245-247°C。 ESI-MS:459.2[M-H] -jH-NMRUOOMHz，DMS〇-d6):S(ppm) :10.39(s，lH)，8·27-8·13(ι?，1H)， 7.95(s，lH)，7.74(tt，J=6.1，3.1Hz，lH)，7.58-7.47(m，2H)，7.45-7.39(m，2H)，7.38(s， 2H)，7.20-7.04(m，2H)，3.90(t，J = 6.2Hz，2H)，2.86(t，J = 6.2Hz，2H).
[0179] 實施例14
[0180] (Z)-5-苯乙烯基噻唑2,4-噻唑二酮（12)的制備
[0182] 參照2b的制備方法，由苯甲醛和4a反應得淡黃色固體，產率78%，mp248-250°C。 4-匪1?(3001抱，015〇-(16):3(??111):12.62(8,2!〇,7.98(8，1!〇,7.74-7.24(111，5!〇·
[0183] (Z)-3-(5-苯乙烯基-2,4-二羰基噻唑-3-基)-N-4-(氨磺酰基苯基）丙酰胺（LW-l4)的制備
[0185] 參照LW-4的制備方法，由12和3反應得淡黃色固體，產率45%，111? 282-284°(：(^31-MS:430·2[M-H] -;七-匪以300MHz，DMS〇-d6):δ(ppm): 10·42(s，1H)，8·00-7.85(m，lH)，7.73 (qd，J = 7.9,7.2,3.7Hz，4H)，7.63(d，J = 6.1Hz，2H)，7.60-7.46(m，3H)，7.25(s，2H)，3.96 (d，J = 7.5Hz，2H)，2.73(t，J = 7.1Hz，2H).
[0186] 實施例15
[0187] 3-(2,3-二氧吲哚-1基)-N_(4-氨磺酰基苯基)丙酰胺(LW-15)的制備
[0189] 將3 (0 · 2g，0 · 76mmo 1)和靛紅（0 · 15g，0 · 82mmo 1)加入 15mL DMF溶液中，加入K2⑶3 (0.2g，1.52mmol)，加熱至110°C反應8h，加水50mL，旋干溶劑，柱層析純化[Cl2CH 2:Me0H=15 :1 ]得黃色固體0 · 21g，產率73 · 4%，mp 300-304°C iSI-MS: 372 · 2[M-H]-; iH-NMRUOOMHz， DMS〇-d6)J(ppm) :10.58: (s，lH)，7.88-7.68(m，4H)，7.57(d，J = 7.8Hz，lH)，7.38-7.24(m， 2H)，6.79(d，J = 8.4Hz，lH)，6.53(t，J = 7.5Hz，lH)，3.52(t，J = 6.5Hz，2H)，2.89(t，J = 4.1Hz,2H).
[0190] 實施例16
[0191] 3-(5-氟-2,3-二氧吲哚-氨磺酰基苯基)丙酰胺( LW-16)的制備
[0193] 參照LW-15的制備方法，由5-氟靛紅和3反應得黃色固體，產率78%，mp 310-313 roESI-MSdgO.UM-HrjH-MffiUOOMHzJMSO-cUhSCppmhIO.SSCsaHhT.TSdJ: 8·2Ηζ，3Η)，7.59(s，2H)，7.43(s，lH)，7.26(s，2H)，6.84(d，J=5.5Hz，lH)，3.52(s，2H)， 2.75(s,2H).
[0194] 實施例17
[0195] 3-(5-氯-2,3-二氧吲哚-1基)-N-(4-氨磺酰基苯基)丙酰胺(LW-17)的制備
[0197] 參照LW-15的制備方法，由5-氯靛紅和3反應得黃色固體，產率62%，mp 317-319 CoESI-MSdOe.UM-HrjH-MffiUOOMHzJMSO-c^JbpnOilO.SSCsaHhT.TeCsdH)， 7.54(d，J = 2.6Hz，lH)，7.36(d，J = 9.3Hz，lH)，7.27(s，2H)，6.86(d，J = 9.1Hz，lH)，3.76 (s，2H)，2.70(t，J = 6.5Hz，2H).
[0198] 實施例18
[0199] 3-(5-溴-2,3-二氧吲哚-1基)-N-(4-氨磺酰基苯基)丙酰胺(LW-18)的制備
[0201] 參照LW-15的制備方法，由5-溴靛紅和3反應得黃色固體，產率62%，mp 320-323 roESI-MSdSO.UM-HrjH-MffiUOOMHzJMSO-cUhSCppmhIO.SSCsaHhT.TSdJ: 7.7Hz，4H)，7.55-7.41(m，lH)，7.27(s，2H)，6.82(d，J=9.1Hz，lH)，3.65(s，2H)，2.83(m， 2H).
[0202] 實施例19
[0203] 3-(5-甲氧基-2,3-二氧吲哚-1基)-N-(4-氨磺酰基苯基)丙酰胺(LW-19)的制備
[0205] 參照LW-15的制備方法，由5-甲氧基靛紅和3反應得黃色固體，產率68%，111? 308- 310。(：』51-]\^:402.1[]\1-!1]-;咕-匪1?(3001抱，〇15〇-(16) :3(??111):10.55(8，1!〇,7.75((1，了 = 7 ·7Ηζ，4Η)，7· 55-7 ·41(ι?，lH)，7.27(s，2H)，6.82(d，J = 9.1Hz，lH)，3.65(s，3H)，2.68(s， 2H)，2.42(s，2H).
[0206] 實施例20
[0207] 細胞內ΝΑΕ活性評價
[0208] 1)試驗方法
[0209] 采用Western Blot進行細胞內ΝΑΕ活性測試，陽性對照為LZ3(J Chem Inf Model， 2014,54(6):1785-1797.)〇 [0210] 2)實驗材料
[0211] BCA蛋白含量檢測試劑盒、RIPA細胞裂解液、配膠試劑盒(江蘇碧云天生物技術研 究所）；一抗Ubcl2(BostonBiochem公司）；二抗Anti-rabbit IgG、蛋白預染Marker (Bioworld公司）；0-catenin(南京金斯瑞生物科技有限公司）。
[0212] 3)實驗步驟
[0213] (1)提蛋白（冰上操作）
[0214]①將6孔板中的培養基吸出（每兩個一組），加 lmL7令的PBS洗，將PBS吸盡。
[0215] ②用刮刀將細胞刮至一側，加100_150yL裂解液，用槍吹打數下，使裂解液和細胞 充分接觸。
[0216] ③然后將裂解液吸至EP管，冰上裂解30min。
[0217] ④各孔重復此過程，4°C，12000rpm，15min，然后小心的吸取上清。
[0218] ⑵蛋白含量的測定
[0219] ①取0.8mL蛋白標準配制液加入到-管蛋白標準(20mg BSA)中，充分溶解后配制成 25mg/mL的蛋白標準溶液。配制后可立即使用，也可以-20°C長期保存。
[0220] ②取20yL 25mg/mL蛋白標準，加入980yL PBS稀釋至終濃度為0.5mg/mL的蛋白標 準液，-20 °C長期保存。
[0221] ③根據樣品數量，按50體積BCA試劑A加1體積BCA試劑B(50:1)配制適量BCA工作 液，充分混勻。例如5mL BCA試劑A加100yL BCA試劑B，混勻，配制成5.1mL BCA工作液。BCA工 作液室溫24h內穩定。
[0222] ④將標準品按0，1，2，4，8，12，16，20yL加到96孔板的標準品孔中，加標準品稀釋液 補足到20yL。
[0223] ⑤加2yL樣品到96孔板的樣品孔中，加18yL PBS到20yL。
[0224] ⑥各孔加入200yL BCA工作液，37°C放置20-30min。
[0225] ⑦測定A570的波長，根據標準曲線計算出樣品的蛋白濃度。
[0226] (3)樣品制備
[0227] ①根據所測蛋白濃度，用PBS將蛋白稀釋至所測的最低濃度
[0228] ②向蛋白樣品中分別加入5XSDS凝膠上樣緩沖液，沸水煮lOmin，同樣準備蛋白質 分子量標準物。
[0229] (4)SDS_PAGE 電泳
[0230]按相同體積加入各蛋白樣品及預染蛋白marker，使蛋白含量不低于20yg/孔。將電 泳裝置與電源接通，樣品在濃縮膠中泳動時電壓為80V，30-40min后當溴酚藍進入分離膠 后，將電壓增至120V，繼續電泳直到溴酚藍接近分離膠底部，關閉電源。
[0231] (5)轉膜
[0232] 從電泳裝置上取下玻璃板，小心撓開玻璃板。參照預染蛋白maker，確定目的蛋白 所在的位置，剪切大小適合的PVDF膜及濾紙。PVDF膜以甲醇活化10s，然后與濾紙一起浸入 轉移緩沖液中。用轉移緩沖液潤濕海綿，按海綿-雙層濾紙-膠-PVDF膜-雙層濾紙-海綿的順 序組裝凝膠轉移夾層，用玻璃棒趕走氣泡，合上夾板，放入轉移槽中。加入轉移緩沖液，接通 電源，300mA恒流電轉移45min-3h(根據轉移蛋白分子量的大小來確定具體的轉移）。
[0233] (6)免疫印跡雜交
[0234] 轉移完畢，取出PVDF膜，在TBST溶液中洗滌3次，每次5min，然后放入5 %脫脂奶粉 封閉液中，置搖床上室溫封閉2h。封閉過的膜用TBST洗滌3次，每次5min。將膜放入雜交袋 中，加入一抗(anti-Ubcl2 1:500稀釋)4°C孵育過夜，使抗原抗體充分結合。隔天，將膜從雜 交袋中取出，用TBST洗滌3次，每次5min;再放入新雜交袋中，加入HRP標記的二抗以結合一 抗，置搖床上室溫孵育2h。
[0235] (7)Western blot結果檢測
[0236] 取出PVDF膜，用TBST洗滌3次，每次SmiruECL化學發光法檢測，將混合好的發光液 滴加到膜上，用凝膠成像系統拍照成像。利用凝膠成像系統軟件，分析蛋白條帶密度。
[0237] (8)數據統計
[0238]所有實驗結果以均數±標準誤(means±SEM)表示，統計分析采用兩樣本均數比較 的組間t檢驗，用SPSS軟件進行結果分析。實驗重復三次。
[0239] (9)數據處理
[0240] ΝΑΕ活性抑制率（％ ) = (1-A鵬/A?) X 100 %
[0241] 其中：A加藥代表給藥組混合體系中Ubcl2-NEDD8蛋白的灰度值;A空白代表空白對 照。根據此公式計算化合物對ΝΑΕ的抑制活性，結果見表1。
[0242] (10)實驗結果
[0243]表1本發明的化合物對MCF-7細胞內ΝΑΕ的抑制活性
[0245] 注:Α:表示IC5Q值在0.1~10μΜ;Β:表示IC5Q值在10~30yM;C:表示
[0246] IC5〇>30yM。
[0247] 實施例21
[0248] 本發明化合物細胞增殖抑制活性測試
[0249 ]采用四甲基氮唑藍比色法(MTT)評價本發明部分化合物對細胞增殖的抑制活性。 MTT法已廣泛用于大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感測定等。 [0250] 人源性細胞株:乳腺癌細胞MCF-7,結腸癌HCT116細胞，白血病細胞KG-1，淋巴癌細 胞0CI-LY99，多發性骨髓瘤細胞U-266。
[0251] 陽性對照藥為LZ3。
[0252] 實驗方法：取對數生長期的細胞配成4.5 X105/mL細胞懸液，接種至96孔培養板 中，每孔180yL，每組設5個平行孔，分別加入不同濃度受試物各20yL。置于恒溫⑶ 2培養箱中 培養72h，將四甲基氮唑藍加入96孔板中，每孔20yL，繼續培養4h。吸去上清液，加入DMS0，每 孔150yL，平板搖床上振搖5min。用酶聯免疫檢測儀在波長為490nm處測定每孔的吸收度，以 上實驗各重復3次。由下式計算細胞增殖抑制率，根據抑制率建立直線回歸方程求得半數抑 制濃度IC 5Q值。結果見表2。
[0254]表2本發明部分化合物對腫瘤細胞增殖的抑制活性Κ：5〇(μΜ)
[0256] 注:A:表示 IC5Q 值在 0.1 ~10μΜ;Β:表示 IC5Q 值在 10 ~30yM;C:表示 IC5〇>30yM。
[0257] 細胞內ΝΑΕ抑制活性實驗結果表明，本發明提供的化合物具有明顯的ΝΑΕ抑制活 性，其中化合物LW-6和LW-7的活性優于化合物LZ3。體外抗增殖實驗表明：本發明的化合物 對人源腫瘤細胞有不同程度的抑制活性，其中化合物LW-6和LW-7對MCF-7的抑制活性優于 LZ3，化合物LW-7和LW-8對0CI-LY99的抑制活性優于LZ3，和化合物8對0CI-LY99的抑制活性 優于LZ3化合物LW-5和LW-6對U-266的抑制活性優于化合物LZ3。由于ΝΑΕ在腫瘤細胞的生長 和凋亡中具有重要作用，因此本發明所提供化合物可以用于預防和治療與ΝΑΕ異常相關的 疾病，尤其是腫瘤的治療。
【主權項】
1. 通式I所示的化合物、其立優忌抝優成I葯堂H可培凈的鹽. 其中：η代表1~8的整數； Ri代表氨基或乙酰胺基；R2代表： 其中： X 代表 S、NSO; Y代表ΝΗ、0或S; R3代表氫、鹵素、羥基、硝基、三氟甲基、氰基、C1-C8烷基、C1-C 8烷氧基、C3-C6環烷基或 NR4R5； R4和抱可相同或不相同，任選自：氫X1-C8烷基或RjPR5與和它們相連的氮一起形成5-7 元雜環基，其中所述的雜環基可任選地包含一個或多個選自0、S或N的其它雜原子，并且該 雜環基可任選地由下述相同或不同的取代基單取代至五取代，所述取代基包括：鹵素、羥 基、硝基、氰基、氨基、C 1-C8烷基或C1-C8烷氧基； 其中，下式化合物除外：2. 根據權利要求1所述的化合物、其立體異構體或其藥學上可接受的鹽，其特征在于： η代表1~6的整數； Ri代表氨基或乙酰胺基；R2代表： X 代表 S、NSO; Y代表ΝΗ、0或S; R3代表氫、鹵素、羥基、氰基、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基或C 3-C6環烷基。3. 根據權利要求1所述的化合物、其立體異構體或其藥學上可接受的鹽，其特征在于： η代表1~6的整數； Ri代表氨基或乙酰胺基； R2代表：X代表S或N; Y代表NH、O或S; R3代表氫、鹵素或Cl_C8烷氧基。4.根據權利要求1所述的化合物、其立體異構體或其藥學上可接受的鹽，其特征在于所 述化合物優先選自： (Z)-3-[2-亞胺基-5-(2-甲氧基苯乙烯基)-4-羰基噻唑-3-基]-N-4-(氨磺酰基苯基） 丙酰胺； (Z)-3-[4-(2-甲氧基苯乙烯基)-5-氧代-2-硫代咪唑-1-基]-N-4-(氨磺酰基苯基)丙 酰胺； (Z)-3-[4-(2-甲氧基苯乙烯基)-2,5_二氧代咪唑烷-1-基]-N-4-(氨磺酰基苯基)丙酰 胺； (Z)-2-[5-(2-甲氧基苯乙烯基）-2,4_二羰基噻唑-3-基]-N-4-(氨磺酰基苯基）乙酰 胺； (Z)-2-[4-(2-甲氧基苯乙烯基)-5-氧代-2-硫代咪唑-1-基]-N-4-(氨磺酰基苯基）乙 酰胺； (Z)-4-[5-(2-甲氧基苯乙烯基）-2,4_二羰基噻唑-3-基]-N-4-(氨磺酰基苯基）丁酰 胺； (Z)-4-[4-(2-甲氧基苯乙烯基)-5-氧代-2-硫代咪唑-1-基]-N-4-(氨磺酰基苯基)丁 酰胺； (Z)-3-[5-(3-甲氧基苯乙烯基)-2,4_二羰基噻唑-3-基]-N-4-(氨磺酰基苯基）丙酰 胺； (Z)-3-[5-(4-甲氧基苯乙烯基)-2,4_二羰基噻唑-3-基]-N-4-(氨磺酰基苯基）丙酰 胺； (Z) -3- [ 5- (2-氟苯乙烯基)-2，4-二羰基噻唑-3-基]-N-4-(氨磺酰基苯基)丙酰胺； (Z) -3- [ 5- (2-氯苯乙烯基)-2，4-二羰基噻唑-3-基]-N-4-(氨磺酰基苯基)丙酰胺； (Z)-N-[4-(乙酰磺酰基）苯基]-3-[5-(2-溴苯乙烯基）-2,4_二羰基噻唑-3-基]丙酰 胺； (Z)-3-[5-(2-甲氧基苯乙烯基)-2,4_二羰基噻唑-3-基]-N-3-(氨磺酰基苯基）丙酰 胺； (Z) -3- (5-苯乙烯基-2，4-二羰基噻唑-3-基)-N-4-(氨磺酰基苯基)丙酰胺； 3-(2,3_二氧吲哚-1基)-N-(4-氨磺酰基苯基)丙酰胺； 3-(5-氟_2,3_二氧吲哚-1基)-N-(4-氨磺酰基苯基)丙酰胺； 3-(5-氯_2,3_二氧吲哚-1基)-N-(4-氨磺酰基苯基)丙酰胺； 3-(5-溴_2,3_二氧吲哚-1基)-N-(4-氨磺酰基苯基)丙酰胺； 3-(5-甲氧基_2,3_二氧吲哚-1基)-N-(4-氨磺酰基苯基)丙酰胺。5. 根據權利要求1所述的化合物的制備方法，其特征在于： a) 當Rf，通式I所示化合物的制備方法為:1^取代的磺酰基苯胺與氯 烷基酰氯反應生成中間體2，R3取代的苯甲醛與五元雜環酮反應制得中間體3,2與3縮合反 應制得通式I所示的化合物，其合成路線如下：其中，RjPR2的定義如權利要求1所述。 b) 當R2)時，通式I所示化合物的制備方法為：由中間體2與R3取代的靛紅反 應制得通式I所示的化合物，其合成路線如下：其中，RjPR2的定義如權利要求1所述。6. -種治療腫瘤的藥物組合物，其由治療上有效量的權利要求1-4中任一項所述的化 合物、其立體異構體或其藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的載體或輔料組成。7. 權利要求1-4中任一項所述的化合物、其立體異構體、其藥學上可接受的鹽或權利要 求6所述的組合物在制備抗腫瘤藥物中的應用。8. 根據權利要求7所述的應用，其中所述的腫瘤為結腸癌、乳腺癌、白血病、淋巴瘤或多 發性骨髓瘤。
【文檔編號】C07D277/54GK105884712SQ201610300373
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2016年5月9日
【發明人】賴宜生, 王輝, 孫其銳, 章穎溢, 李月珍, 張奕華
【申請人】中國藥科大學