用于培養金針菇菌絲體的液體培養基及培養方法
【技術領域】
[0001] 本發明設及一種菌種培養領域，且特別設及一種用于培養金針茹的液體培養基及 液體深層發酵培養方法。
【背景技術】
[0002] 食用菌作為一種重要的生物資源，不僅味道鮮美、低脂肪、低能量，還富含膳食纖 維、維生素和蛋白質等營養素，正發展成為繼動物性食品、植物性食品之外的第=類食品， 即菌物性食品。此外，食用菌還可W提高人體免疫功能、防治多種慢性病，在抗衰老等方面 也具有顯著的功效。在眾多食用菌中，金針茹因其美味的口感，較高的營養價值，簡單的種 植條件而被廣泛食用。金針茹是由子實體和菌絲組成的，在適宜的條件下，菌絲發育到一定 階段便會分化形成子實體，子實體成熟后又散出大量的擔抱子，擔抱子萌發形成分生抱子， 分生抱子再萌發生成菌絲。
[0003] 隨著金針茹日益受到廣大消費者的喜愛，市場需求量越來越大。W前小作坊式的 固體培養方式已經遠遠不能滿足金針茹產業快速發展的趨勢，大規模機械化的生產已是必 然，因此采用現代生物工程技術的液體深層發酵培養越來越受到重視。液體深層發酵培養 是采用生物發酵培養設備，通過液體深層培養(發酵的方式)生產食用菌菌球，作為食用菌 栽培的種子或作為有效成分提取分離及深加工的原料。相較于固體培養方式，液體深層發 酵培養具有不可比擬的優勢:生產周期短，營養利用率高，產品種性穩定，產物污染小。
[0004] 雖然液體深層發酵培養的優勢很大，但是目前的液體培養基對于液體深層發酵培 養金針茹菌絲體的培養效果不佳，而且液體培養基的成本較高，不適合大規模工業生產。同 時液體深層發酵培養金針茹菌絲體的工藝還處于小規模的搖瓶階段，鮮有在較大規模發酵 罐中進行。而對于大規模的液體深層發酵培養，培養過程中的各種參數的控制對整個發酵 的質量起著相當重要的作用，但是目前還沒有能適用于大規模的液體深層發酵培養金針茹 的工藝。

【發明內容】

[0005] 本發明的目的在于提供一種用于培養金針茹菌絲體的液體培養基，此液體培養基 對金針茹菌絲體的培養效果好，成本低，適用于大規模的液體深層發酵培養金針茹菌絲體。
[0006] 本發明的另一目的在于提供一種液體深層發酵培養金針茹菌絲體的方法，適用于 大規模的液體深層發酵培養金針茹菌絲體。
[0007] 本發明解決其技術問題是采用W下技術方案來實現的。
[0008] 本發明提出一種用于培養金針茹菌絲體的液體培養基，其由固體原料與水配制而 成，固體原料按占液體培養基的重量百分數計包括：
[0009] 2%-4% 碳源；
[0010] 3.5%-6.5% 氮源；
[0011] 0.035%-0.065%無機鹽；W及
[0012] 0.005%-0.01% 維生素；
[0013] 其中，碳源包括葡萄糖、可溶性淀粉和薦糖中的至少一種;氮源包括硫酸錠、蛋白 腺和黃豆粉中的至少一種;無機鹽包括KCl、K出P〇4和K2HP化中的至少一種;維生素包括VBi， VB2和VBs中的至少一種。
[0014] 進一步地，在本發明較佳實施例中，上述固體原料按占液體培養基的重量百分數 計包括：
[0015] 2.5%-3.5% 碳源；
[0016] 4 %-6 % 氮源；
[0017] 0.04%-0.06% 無機鹽；W 及 [001 引 0.0065 %-0.0085 % 維生素。
[0019] 進一步地，在本發明較佳實施例中，上述碳源為可溶性淀粉;氮源為黃豆粉。
[0020] 進一步地，在本發明較佳實施例中，上述無機鹽為K出K)4;維生素為VB2。
[0021] -種液體深層發酵培養金針茹菌絲體的方法，其包括：
[0022] 準備液體培養基，將金針茹菌種接種于液體培養基，振蕩發酵培養，得到金針茹菌 絲體，金針茹菌種的加入量為液體培養基的質量的8%-15%，液體培養基由固體原料與水 配制而成，固體原料按占液體培養基的重量百分數計包括：
[0023] 2%-4% 碳源；
[0024] 3.5%-6.5% 氮源；
[0025] 0.035%-0.065%無機鹽；W及
[0026] 0.005 %-0.01 % 維生素；
[0027] 其中，碳源包括葡萄糖、可溶性淀粉和薦糖中的至少一種;氮源包括硫酸錠、蛋白 腺和黃豆粉中的至少一種;無機鹽包括KCl、K出P〇4和K2HP化中的至少一種;維生素包括VBi， VB2和VBs中的至少一種。
[0028] 進一步地，在本發明較佳實施例中，上述液體培養基發酵培養的抑為5.0-7.0。
[0029] 進一步地，在本發明較佳實施例中，上述振蕩發酵培養的振蕩速度為120-18化/ min,溫度為18-26°C，培養時間為4-12天。
[0030] 進一步地，在本發明較佳實施例中，上述金針茹菌種的培養方法包括：
[0031 ]準備斜面培養基，將金針茹母種接種于斜面培養基進行培養，得到初活化菌種，金 針茹母種的加入量為斜面培養基的質量的3%-5%，斜面培養基包括:150-250g/L的去皮馬 鈴馨，15-25g/L的瓊脂粉，15-25g/L的薦糖，余量的水；
[0032] 準備活化培養基，將初活化菌種接種于活化培養基進行培養，得到金針茹菌種，初 活化菌種的加入量為活化培養基的3-6g/L，活化培養基包括：150-250g/L的去皮馬鈴馨， 15-25g/L的薦糖，余量的水。
[0033] 進一步地，在本發明較佳實施例中，上述初活化菌種的培養方法包括：
[0034] 按重量份數計，稱取150-250份去皮馬鈴馨，加水煮沸18-22min，用3-5層紗布過濾 得濾液，在濾液中加入15-25份瓊脂粉，15-25份薦糖，補加水至瓊脂粉的質量濃度為15-25g/L，薦糖的質量濃度為15-25g/L，混勻、融化、分裝，于120-122°C滅菌18-22min，恒溫培 養2-3d，得到斜面培養基；
[0035] 將金針茹母種接種于斜面培養基，將接種后的斜面培養基放置于26-3(TC恒溫培 養3-5d。
[0036] 進一步地，在本發明較佳實施例中，上述金針茹菌種的培養方法包括：
[0037] 按重量份數計，稱取150-250份去皮馬鈴馨，加水煮沸18-22min，用3-5層紗布過濾 得濾液，在濾液中加入15-25份薦糖，補加水至薦糖的質量濃度為15-25g/L，混勻、融化、分 裝，于120-122°C滅菌18-22min，恒溫培養2-3d，得到活化培養基；
[0038] 將初活化菌種接種于活化培養基，將接種的活化培養基在27-28°C，120-130r/min 條件下搖床培養4-5d。
[0039] 本發明實施例的用于培養金針茹菌絲體的液體培養基及培養方法的有益效果是： 液體培養基按重量百分數計包括2 %-4%碳源，3.5 % -6.5 %氮源，0.035 %-0.065 %無機 鹽;0.005%-0.01%維生素和水，液體培養基選用合適的碳源、氮源、無機鹽和維生素和配 比，液體培養基的各原料協同作用，對金針茹菌絲體的培養效果好，且成本低，適用于大規 模的液體深層發酵培養金針茹菌絲體。液體深層發酵培養金針茹菌絲體的方法利用液體培 養基對金針茹原母種進行多次活化擴大發酵培養，適用于大規模的液體深層發酵培養金針 茹菌絲體。
【具體實施方式】
[0040] 為使本發明實施例的目的、技術方案和優點更加清楚，下面將對本發明實施例中 的技術方案進行清楚、完整地描述。實施例中未注明具體條件者，按照常規條件或制造商建 議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者，均為可W通過市售購買獲得的常規產 品。
[0041] 下面對本發明實施例的用于培養金針茹菌絲體的液體培養基及培養方法進行具 體說明。
[0042] 本發明實施例提供一種用于培養金針茹菌絲體的液體培養基，其由固體原料與水 配制而成，固體原料按占液體培養基的重量百分數計包括：
[0043] 2%-4% 碳源；3.5%-6.5% 氮源；0.035%-0.065%無機鹽；^及0.005%-0.01% 維生素。優選的，固體原料包括2.5%-3.5%碳源;4%-6%氮源;0.04%-0.06%無機鹽；W 及0.0065 % -0.0085 % 維生素。
[0044] 其中，碳源包括葡萄糖、可溶性淀粉和薦糖中的至少一種，碳源優選為可溶性淀 粉。氮源包括硫酸錠、蛋白腺和黃豆粉中的至少一種，氮源優選為黃豆粉。無機鹽包括KC1、 K此P化和K2冊化中的至少一種，無機鹽優選為K此P〇4。維生素包括VBi，VB2和VBs