一種新的二萜類化合物及其制備方法和醫藥用圖
【技術領域】
[0001] 本發明屬于藥物技術領域，具體設及從完花的干燥花蕾中分離得到的一種具有治 療骨破壞性疾病作用的二祗類化合物及其制備方法。
【背景技術】
[0002] 完花又稱紫完花、南完花、頭痛花、藥魚草等，始載于《神農本草經》，列為下品，為 傳統的峻下逐水藥。《本草綱目》列入毒草類，按《吳普本草》謂完花"二月生青葉，加厚則 黑，花有紫、赤、白者，立月實落盡，葉乃生。"韓保昇《蜀本草》謂"近道處處有么苗高二立 尺。葉似白前及柳葉，根皮黃似桑根，正月二月花發，紫碧色，葉未生時收。"結合《本草圖經》 "安徽牆州完花"和"四川錦州完花"附圖看，古今藥用完花品種一致，其原植物均為Daphne genkwasieb.EtZUCC.無疑。《中國藥典》2010版收載其為瑞香科（Thymelaeaceae)瑞香屬 值aphne)植物完花值aphnegenkwasiebetZUCC)的干燥花蕾。謝宗萬曾對完花進行了 本草學考證，確證了歷代本草中所記載的完花應該為紫完花Daphnegenkwasieb.EtZUCC 的干燥花蕾。該植物為全國大多數地區臨床習用的品種，其野生主要產于河南、山東、江蘇、 安徽、四川等省，河南省主要分布在信陽、南陽等地的山區。
[0003] 到目前為止，從完花的花、花蕾、葉、枝條、根中提取分離出化合物有70多種，其中 含有黃酬類成分、二祗原酸醋類成分、香豆素類成分、綠原酸類成分、木脂素類成分、酪巧類 等多種成分。
[0004] 完花為傳統的峻下逐水藥，有毒，功能瀉水逐飲，解毒殺蟲，現代研究表明其具有 W下藥理作用：①利尿作用；②鎮咳桂疲作用；③殺蟲、抗寄生蟲作用；④引產作用；⑥抗 炎、抗腫瘤作用；⑧免疫調節作用。

【發明內容】
陽〇化]本發明的目的是提供一種從完花的干燥花蕾中分離得到的一種具有治療骨破壞 性疾病作用的二祗類化合物及其制備方法。
[0006] 本發明的上述目的是通過下面的技術方案得W實現的：
[0007] 具有下述結構式的化合物（I)，
[0008]
[0009]所述的化合物（I)的制備方法，包含W下操作步驟：(a)將完花的干燥花蕾粉 碎，用70~80 %乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油酸、乙酸乙醋和 水飽和的正下醇萃取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；化）步驟 (a)中乙酸乙醋萃取物用大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個柱體積，再用80%乙醇洗 脫10個柱體積，收集80 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得80 %乙醇洗脫物浸膏；(C)步驟化）中 80 %乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為75:1、45:1、25:1、15:1和1:1的二氯 甲燒-甲醇梯度洗脫得到5個組分；（d)步驟（C)中組分4用正相硅膠進一步分離，依次用 體積比為20:1、15:1和8:1的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟（d)中組分 2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為70%的甲醇水溶液等度洗脫， 收集10~12個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I)。
[0010] 進一步地，所述大孔樹脂為D101大孔吸附樹脂。
[0011] 進一步地，所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為75%。
[0012] 一種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學上可接受的 載體。
[0013] 所述的化合物（I)在制備治療骨破壞性疾病的藥物中的應用。
[0014] 所述的藥物組合物在制備治療骨破壞性疾病的藥物中的應用。
[0015] 本發明化合物用作藥物時，可W直接使用，或者W藥物組合物的形式使用。
[0016] 該藥物組合物含有治療有效量的本發明化合物（I)，其余為藥物學上可接受的、 對人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0017] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 W及藥物制品輔劑。將本發明的藥物組合物W單位體重服用量的形式使用。本發明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質體或乳劑等。
【附圖說明】 陽〇1引圖1為化合物（I)結構式；
[0019]圖2為化合物（I)理論ECD值與實驗ECD值比較。
【具體實施方式】
[0020] 下面結合實施例進一步說明本發明的實質性內容，但并不W此限定本發明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發明作了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解，可W對 本發明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發明技術方案的實質和范圍。
[0021] 實施例1:化合物（I)分離制備及結構確證
[0022] 試劑來源：乙醇、石油酸、乙酸乙醋、正下醇、二氯甲燒為分析純，購自上海凌峰化 學試劑有限公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學試劑有限公司。
[0023] 制備方法：(a)將完花的干燥花蕾（10kg)粉碎，用75%乙醇熱回流提取（2^X3 次），合并提取液，濃縮至無醇味（3L)，依次用石油酸（化X3次）、乙酸乙醋（化X3次）和水 飽和的正下醇0LX3次）萃取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物（431g)和正下醇 萃取物；化）步驟（a)中乙酸乙醋萃取物用D101大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個柱體 積，再用80 %乙醇洗脫10個柱體積，收集80 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得80 %乙醇洗脫物浸 膏（161g) ;(c)步驟化）中80%乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為75:1(8個 柱體積）、45:1(8個柱體積）、25:1 (8個柱體積）、15:1 (10個柱體積）和1:1巧個柱體積） 的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到5個組分；（d)步驟（C)中組分4 (52g)用正相硅膠進一步 分離，依次用體積比為20:1(8個柱體積）、15:1 (10個柱體積）和8:1(8個柱體積）的二氯 甲燒-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟（d)中組分2(26g)用十八烷基硅烷鍵合的反 相硅膠分離，用體積百分濃度為70%的甲醇水溶液等度洗脫，收集10-12個柱體積洗脫液， 洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I) (237mg)。
[0024] 結構確證：白色無定形粉末；HR-ESIMS顯示[M+Na]+為m/z537. 2502,結合核磁 特征可得分子式為〔29&8〇8,不飽和度為11。核磁共振氨譜數據5H(ppm，DMS0-de，500MHz): H-l(2. 51，t，J= 13. 5)，H-1(1. 59，br，d，J= 13. 5)，H-2(2. 50，m)，H-3(5. 51，t，J= 4. 0)， H-4 (3. 16,d，J= 4. 0)，H-7 (1. 79,t，J= 15. 5)，H-7 (1. 25,dd，J= 15. 5,4. 0)，H-8 (1. 97， m)，H-8(1.48,t，J= 13.W，H-9(3. 40,dd，J= 10. 0,5.W，14,d，J=l.W， H-12(4.ll，d，J= 1. 5)，H-16(1.01，d，J= 7. 5)，H-17(1.ll，s)，H-18〇). 91，s)，H-19(0. 89， s)，H-20(l. 17,s)，H-2,（7.57,br，d，J= 7.0)，H-3,（7.33,br，t，J= 7.0)，H-4,（7.35,br， t，J= 7. 0)，H-5,（7. ：M，br，t，J= 7. 0)，H-6,（7. 58,br，d，J= 7. 0)，H-7,（7. 69,d，J= 16. 5)，H-8' 巧.62，d，J= 16. 5)，9-0H(4. 60，d，J= 5. 5)，11-OH巧.38，s)，12-OH巧.37，s)， 15-OH化.55,s);核磁共振碳譜數據 5c(卵m，DMS0-d6，125MHz) :41.7(邸2，1-〇,35. 4(CH， 2-C)，78. 0(CH，3-C)，54. 1 (CH，4-C)，211. 7(C，5-C)，49. 1 (C，6-C)，31. 8(畑2,7-〇， 28. 6 (邸2, 8-C)，79. 7 (CH，9-C)，38. 4 (C，10-C)，81. 1 (CH，11-C)，71. 6 (CH，12-C)，56. 3 (C， 13-C)，207. 3 (C，14-C)，85. 7 (C，15-C)，15. 9 (邸3,16-C)，18. 3 (邸3,17-C)，25. 2 (邸3,18-C)， 11.7(邸3，19-〇，10. 1(邸3,20-〇 ,134.8 (C，r-0,128.3 (CH，2, -0,127.2 (CH，3, -C)， 130. 5(CH，4' -C)，129. 2(CH，5' -C)，128. 3(CH，6' -C)，145. 1(CH，7' -C)，118. 7(CH，8' -C)， 167. 1(C，9' -C);碳原子標記參見圖1。紅外光譜表明該化合物含有徑基（3587, 3502和 3376cm1)，幾基（1708和1686cm1)和芳環（1605和1498cm1)基團。電NMR譜顯示該化合 物含有一個反式肉桂酸醋基團[δH7. 57 (br，山J= 7.OHz，H-2'），7. 33化r，t，J= 7.OHz， H-3,），7.35 化r，t，J= 7.0Hz，H-4,），7.:34 化r，t，J= 7.0Hz，H-5,），7.58 化r，d，J= 7. 0Hz，H-6'），7. 69(d，J= 16.甜z，H-7'），6. 62(d，J= 16.甜z，H-8'）； 5C134. 8(1' -0， 128. 3 (2, -C)，127. 2 (3, -C)，130. 5 (4, -C)，129. 2 (5, -C)，128. 3 化'-C)，145. 1 (7, -C)， 118. 7(8，-C)，167.U9，-C)]，四個含氧次甲基[δΗ5. 51(t，J= 4. 0Hz，H-3)，3. 40(dd，J= 10.OHz和 5.甜z，H-9)，3. 14化J= 1.甜z，H-ll)和 4.ll(d，J= 1.甜ζ，Η-12)]，Ξ個亞甲 基，W及五個甲基[δHI. 01 (d，J= 7.甜z，&-16