5,6-二氫去甲斑蝥素氧代單乙酸鈉鹽及其合成方法和應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及去甲斑蝥素氧代單乙酸鈉鹽及其合成方法和應用，屬于斑蝥素衍生物 領域。
【背景技術】
[0002] 斑蝥是一種昆蟲，又稱"放屁蟲"，是我國傳統中藥材中的一種。我國是最早運用斑 蝥作為藥材的國家，在《本草綱目》、《神龍本草經》等醫藥名著里就曾有過關于斑蝥素入藥 的記載。
[0003] 斑蜜素（cantharidin，CiqH12O 4)是一種從昆蟲體內提取的比較有效果的抗癌物質， 是民間治療惡性腫瘤的有效成分，它與其他的抗腫瘤藥物相比，有許多優點。比如：它和它 的類似物不會抑制人體的免疫功能，另外，可提升人體白細胞等。它對肝癌，卵巢癌，食道癌 等有良好的療效，它是通過改變蛋白質的活性，抗腫瘤侵襲轉移，引起細胞周期阻滯，抑制 腫瘤生長，從而使得其死亡。其抗腫瘤的機制為通過減少癌細胞對氨基酸的攝取，抑制蛋白 質的合成，刺激淋巴細胞、巨噬細胞、多形核細胞產生白細胞介素，從而提高機體免疫力，同 時殺傷腫瘤細胞而達到治療目的。
[0004] 但斑蝥素對泌尿系統和腸胃系統有較大的毒副作用，斑蝥素既是抗腫瘤的活性成 分，同時也是毒性的主要成分。對其進行恰當的結構修飾，會在保留其抗腫瘤活性的基礎 上，大大減低對機體的毒副作用，以去甲斑蝥素衍生物的合成為例。去甲斑蝥素不但保留了 其較強的抗腫瘤活性和升高白細胞的作用，還消除了其對泌尿系統的副作用，后來，以去甲 斑蝥素為先導化合物進行結構改造成為了研究的熱點。這種優勢在抗腫瘤藥物中還是少見 的，所以引起了廣泛的關注，陸續合成了許多減少其毒副作用但同時又保留其活性的同類 藥物，開發更新高效低毒的衍生物是一個很好的研究方向。
[0005] 對斑蝥素進行結構修飾后用于治療癌癥的衍生物近年來陸續的出現，并開始運用 于臨床治療。如去甲斑蝥素，它比斑蝥素少了兩個甲基，其毒性明顯減低，而治療作用卻優 于斑蟊素。另外還有斑蝥素鈉，去甲斑蝥素鈉，甲基斑蝥胺等，這些經結構改造的藥物都有 它們 各自的優點，但這些藥物的水溶性較差，生物利用度不高。
[0006]目前已經用于臨床治療的斑蝥素藥物中（如斑蝥素鈉，去甲斑蝥素鈉等)，均以開 環的方式存在，從化學結構上看，開環的化合物其相應的溶解度較大，其體內生物利用度也 高。因此對斑蝥素的結構進行修飾，尋找高效低毒的斑蝥素抗腫瘤藥物，具有重要的工業應 用價值和廣泛的市場前景。ZL201410163619. 4、ZL201410163711. 0、ZL201410163705. 5 等 公開了制備去甲基斑蝥素酸鹽的方法。

【發明內容】

[0007] 為解決現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種5, 6-二氫去甲斑蝥素氧代 單乙酸鈉鹽及其合成方法和應用，在其結構中引入水溶性基團，增加其生物利用度，達到增 加其治療效果的目的，所得到的5, 6-二氫去甲斑蝥素氧代單乙酸鈉鹽具一定的抗肝癌效 果。
[0008] 為了實現上述目標，本發明采用如下的技術方案： 5, 6-二氫去甲斑蝥素氧代單乙酸鈉鹽，結構式為式I :
5, 6-二氫去甲斑蝥素氧代單乙酸鈉鹽的合成方法，按照如下合成路線進行：以呋喃為 原料，與順丁烯二酸酐在有機溶劑中反應得到5, 6-二氫去甲斑蝥素A，5, 6-二氫去甲斑蝥 素在有機溶劑中經還原劑還原反應得到5, 6-二氫去甲斑蝥素二醇B，5, 6-二氫去甲斑蝥素 二醇與溴乙酸乙酯得到5, 6-二氫去甲斑蝥素氧代單乙酸乙酯C，最后該酯在堿性條件下水 解生成相應的5, 6-二氫去甲斑蝥素氧代單乙酸鈉鹽I :
前述合成方法，具體包括以下步驟： (1) 取順丁烯二酸酐，研細，加入有機溶劑溶解，待完全溶解后滴加呋喃，于35°C~ 45°C反應24h，抽濾，得白色固體產物5, 6-二氫去甲斑蝥素，干燥備用； (2) 室溫下，取步驟（1)中的白色固體產物，加入有機溶劑后溶解，冷卻至0°C，再緩慢 分批加入LiAlH4，攪拌反應過夜，反應結束后抽濾，用乙酸乙酯、水洗滌充分，得澄清液體 5, 6-二氫去甲斑蝥素二醇，干燥備用； (3) 將5, 6-二氫去甲斑蝥素二醇溶于有機溶劑中，冰水冷卻至0°C下，先加入60%NaH， 然后加入溴乙酸乙酯，再在攪拌下繼續反應過夜后抽濾，旋干，剩余物經快速柱層析即得 5, 6-二氫去甲斑蝥素氧代單乙酸乙酯。
[0009] (4)取5, 6-二氫去甲斑蝥素氧代單乙酸乙酯懸浮于水中，在堿性條件下水解生成 相應的5, 6-二氫去甲斑蝥素氧代單乙酸鈉鹽粗品，經柱層析純化后得到純品。
[0010] 前述合成方法中，所述步驟（1)中有機溶劑為乙醚、甲苯、苯、乙酸乙酯、二氯甲烷、 氯仿、乙腈、四氫呋喃中的任一種。
[0011] 前述合成方法中，所述步驟（2)中有機溶劑為四氫呋喃或乙醚。
[0012] 前述合成方法中，所述步驟（3)中的有機溶劑為四氫呋喃，N，N-二甲基甲酰胺，二 甲亞砜，乙腈中的任一種。
[0013] 前述合成方法中，所述的堿為有機堿或無機堿。其中有機堿為三乙胺或吡啶等。無 機堿為氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀等。
[0014] 5, 6-二氫去甲斑蝥素氧代單乙酸鈉鹽在制備抗肝癌藥物中的應用。
[0015] 本發明的有益之處在于：本發明提供的5, 6-二氫去甲斑蝥素氧代單乙酸鈉鹽，經 活性測試證明其具有一定的抗肝癌效果，可作為一種高效低毒的斑蝥素抗腫瘤藥物。本發 明的合成工藝選擇性好，原料易得，成本低廉，合成路線簡單，便于操作實施，并且合成所得 產物毒性小，得率高，產物純度高，因而該工藝具有高效、便捷、低成本的特點。
【具體實施方式】
[0016] 以下結合具體實施例對本發明作進一步的介紹。
[0017] 本發明中使用的呋喃，順丁烯二酸酐，LiAlH4, NaH (60%)，溴乙酸乙酯均來自上海 國藥集團。所用溶劑來自遵義雙巨化工有限公司。除特別說明外，所用試劑均為化學純。
[0018] 實施例15, 6-二氫去甲斑蝥素氧代單乙酸鈉鹽I的合成方法。
[0019] 步驟（1)中間體A、即5, 6-二氫去甲斑蝥素的制備：反應式如下所示：
從試劑瓶中取出一定量的順丁烯二酸酐，置于干燥的研體中研細，再用電子天平稱取 研細的順丁烯二酸酐12. 021g，置于干燥的三口燒瓶中，塞上塞子，再加乙醚攪拌，在乙醚量 為90 mL時順丁烯二酸酐完全溶解。待順丁烯二酸酐完全溶解后，用滴液漏斗緩慢加入13 mL呋喃，用時13min。控制溫度在38°C開始反應。反應Ih后溶液出現白色固體，且時間越 長白色固體越多。反應至24h后抽濾，得白色固體中間體A，即5, 6-二氫去甲斑蝥素。干燥 稱重為17. 459 g，收率85. 75%。熔點：122~123°C，Rf:0. 52(展開劑：石油醚：乙酸乙酯 =3 : O51HNMr(CDCI3) : δ :3.18 (s，2H)，5.47 (s，2H)，6. 58 (s，2H)。
[0020] 上述步驟（I)中用于溶解順丁烯二酸酐的有機溶劑除了乙醚外，還可用甲苯、苯、 乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、乙腈、四氫呋喃等中的任一種代替；所述反應溫度可在35°C~ 45°C之間。
[0021] 步驟（2)中間體B、即5, 6-二氫去甲斑蝥素二醇的制備：
稱取已生成的化合物A 2. 0g，于25ml潔凈燒瓶中，加入25ml除水的THF，冰浴攪拌至 溶液澄清。緩慢地分四批加入