一種提高酵母空間誘變菌株甘露聚糖含量的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于微生物發酵領域，具體涉及一種提高酵母空間誘變菌株甘露聚糖含量的方法。
【背景技術】
[0002]酵母細胞壁占細胞干重的20-25%，甘露聚糖存在于酵母細胞壁外層，占細胞壁干重的40%左右，賦予細胞生物學活性和控制細胞壁孔徑。甘露聚糖具有多種免疫學功能，可以調節腸道菌群平衡、增強免疫、結合或者吸附霉菌毒素、抗氧化等，具有廣闊的應用前景。
[0003]空間誘變酵母菌株通常是由釀酒酵母經過搭載衛星空間誘變后得到的，生長延遲期縮短，對數生長期延長，生長速度加快、生物量增加等特點。培養基組分可影響酵母細胞的生物活性以及細胞壁的合成，從而影響其產量。酵母甘露聚糖產量的高低不僅受碳源、氮源、生長因子和無機離子等培養基組分的影響，培養條件對酵母發酵的影響也較大，培養條件則主要包括起始PH值、接種量、溫度、轉速與裝液量等。胞外的起始pH值對微生物的生長與多糖的合成都有顯著影響。溫度是影響酵母生長的一個重要因子，酵母生長的最適溫度因菌種不同而各異等。

【發明內容】

[0004]本發明要解決的技術問題是如何提高釀酒酵母的甘露聚糖產量。
[0005]為了解決上述問題，本發明首先提供了一種發酵培養基。
[0006]本發明提供的發酵培養基包括溶質，所述溶質由碳源、氮源和酶激活劑組成。
[0007]上述發酵培養基中，所述碳源、所述氮源和所述酶激活劑的質量比為4.02-4.87:4.43-5.07:1.20。
[0008]上述發酵培養基中，所述碳源、所述氮源和所述酶激活劑的質量比為4.51:4.76:1.20。
[0009]上述發酵培養基中，所述發酵培養基還包括溶劑，其由溶質和溶劑組成，所述溶劑為水；
[0010]所述碳源在所述發酵培養基中的濃度為4.02-4.87g/100ml ；
[0011]所述氮源在所述發酵培養基中的濃度為4.43-5.07g/100ml ；
[0012]所述酶激活劑在所述發酵培養基中的濃度為0.96-1.56g/100mlo
[0013]上述發酵培養基中，
[0014]所述碳源在所述發酵培養基中的濃度為4.51g/100ml ;
[0015]所述氮源在所述發酵培養基中的濃度為476g/100ml ;
[0016]所述酶激活劑在所述發酵培養基中的濃度為1.20g/100mlo
[0017]上述發酵培養基中，所述碳源為蔗糖；所述氮源為玉米漿；所述酶激活劑為甘油。
[0018]為了解決上述技術問題，本發明還提供了上述發酵培養基在酵母生產甘露聚糖中的應用；或上述發酵培養基在提高酵母甘露聚糖含量和/或生物量中的應用。
[0019]為了解決上述技術問題，本發明最后提供了一種生產甘露聚糖的方法。
[0020]本發明提供的生產甘露聚糖的方法包括如下步驟:將酵母在上述發酵培養基中進行發酵培養，得到甘露聚糖。
[0021]上述方法中，所述將釀酒酵母在培養基中進行發酵培養的方法包括如下步驟:將所述酵母在所述發酵培養基中進行活化處理，得到活化的酵母；再將所述活化的酵母進行發酵培養，得到發酵產物，即為甘露聚糖。
[0022]上述方法中，所述發酵培養的條件為26_28°C培養72h。
[0023]上述方法中，所述發酵培養為在450r/min條件下振蕩培養。
[0024]上述方法中，所述活化處理為26-28 °C處理12h。
[0025]述方法中，所述活化處理為在200r/min條件下振蕩處理。
[0026]上述方法中，所述酵母為釀酒酵母；所述釀酒酵母為釀酒酵母CGMCC N0.3730。
[0027]本發明的優點在于:
[0028]1、本發明培養基優化中碳源、氮源和酶激活劑的選擇均為普通物質，成本低，生物利用率高，無環境污染，可得到高產量的甘露聚糖；
[0029]2、本發明培養條件優化采用的均為常規儀器，簡單，便捷，安全，且適合產業化生產，可完全實現產業化規模生產；
[0030]3、本發明在實際應用中可大大降低企業的生產成本，提高利用率，增加企業效益；
[0031]4、本發明可實現工業副產物廢啤酒酵母的綜合利用，增加工業副產物的利用率和附加價值，具有重大的經濟效益和環保意義。
[0032]本發明以釀酒酵母突變菌株(Saccharomycescerevisiae)FFLM2.0016CGMCCN0.3730的細胞壁為原料，采用含有碳源、氮源與酶激活劑的培養基和優化后的培養條件對其進行發酵培養，得到的甘露聚糖的含量及其生物量分別為321.89±1.94mg/100ml和3846.22±9.28mg/100ml，與基礎培養基YEPD相比，分別提高了 75.69%和91.24%。本發明的方法不僅克服現有發酵手段單一、提取多糖含量較低等不足，且采用的設備均可以實現工業化生產的需要、成本低、經濟效益高，具有很好的應用前景。
【具體實施方式】
[0033]下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規方法。
[0034]下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。
[0035]下述實施例中所用的的震蕩培養箱型號為HZQ-F160 ；
[0036]釀酒酵母突變菌株FFLM2.0016的保藏號為CGMCC N0.3730，在公開號為CN101880635A的專利中公開過，公眾可從中國農業科學院農產品加工研宄所獲得。
[0037]實施例1、一種提高酵母空間誘變菌株甘露聚糖含量的方法
[0038]一、發酵培養基的制備
[0039]發酵培養基的制備方法:將4.51g蔗糖(北京化學試劑)、4.76g玉米漿(山東省鄒平縣豐霖飼料有限公司)、1.20g甘油(北京化學試劑)和水混勻，且定容到100ml，得到發酵培養基，使蔗糖在發酵培養基中的濃度為4.51g/100ml、玉米漿在發酵培養基中的濃度為4.76g/100ml、甘油在發酵培養基中的濃度為1.20g/100ml。
[0040]二、釀酒酵母突變菌株FFLM2.0016的發酵培養
[0041]1、菌種活化處理
[0042]用將步驟一的發酵培養基對釀酒酵母突變菌株FFLM2.0016進行活化處理，具體步驟如下:挑取斜面保藏的釀酒酵母突變菌株FFLM2.0016菌種2_3環接種于內裝有50ml步驟一制備的發酵培養基的三角瓶中，26°C，200r/min下振蕩培養12h，得到活化的釀酒酵母。
[0043]2、發酵培養
[0044]將步驟I的活化的釀酒酵母以4%