背景技術：

1、固(gu)(gu)相肽(tai)(tai)合(he)成(cheng)(spps)是最常(chang)用(yong)(yong)(yong)(yong)于(yu)合(he)成(cheng)多(duo)肽(tai)(tai)和(he)氨基酸序列的方(fang)法(fa)和(he)系統(tong)。wo?2021/158444描述了spps(wo?2021/158444明確地經此引用(yong)(yong)(yong)(yong)并(bing)入本文)。作為spps序列的一(yi)(yi)部分，用(yong)(yong)(yong)(yong)溶(rong)劑(ji)洗(xi)(xi)滌(di)生(sheng)長(chang)的肽(tai)(tai)-樹(shu)脂(peptide-on-resin)固(gu)(gu)相以(yi)除去殘余試劑(ji)和(he)副產(chan)(chan)物，以(yi)使(shi)該固(gu)(gu)相準備用(yong)(yong)(yong)(yong)于(yu)下一(yi)(yi)次氨基酸添(tian)加。洗(xi)(xi)滌(di)溶(rong)劑(ji)隨后通常(chang)被視為廢(fei)物料流(liu)并(bing)被棄置。由于(yu)這一(yi)(yi)洗(xi)(xi)滌(di)步驟在(zai)多(duo)肽(tai)(tai)合(he)成(cheng)過程中通常(chang)重復(fu)40次以(yi)上(或對于(yu)長(chang)肽(tai)(tai)，甚至更多(duo)次)，使(shi)用(yong)(yong)(yong)(yong)大(da)量(liang)溶(rong)劑(ji)。現今正使(shi)用(yong)(yong)(yong)(yong)spps大(da)規模批量(liang)生(sheng)產(chan)(chan)肽(tai)(tai)藥物，并(bing)且這些生(sheng)產(chan)(chan)方(fang)法(fa)使(shi)用(yong)(yong)(yong)(yong)大(da)量(liang)溶(rong)劑(ji)。減少總溶(rong)劑(ji)用(yong)(yong)(yong)(yong)量(liang)的方(fang)法(fa)將具有(you)經濟和(he)環境效益，并(bing)且是需要(yao)的。

技術實現思路

1、本文公開了一(yi)種洗(xi)(xi)(xi)滌在固相(xiang)肽合成(cheng)(spps)過(guo)程中(zhong)已(yi)經添(tian)加到固相(xiang)樹(shu)脂(zhi)中(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)氨基(ji)酸的(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)法。該方(fang)法包(bao)括添(tian)加第(di)(di)一(yi)量(liang)(liang)(liang)(liang)的(de)(de)(de)(de)(de)洗(xi)(xi)(xi)滌溶(rong)劑(ji)(ji)，其(qi)(qi)中(zhong)一(yi)旦(dan)用(yong)所(suo)(suo)述(shu)第(di)(di)一(yi)量(liang)(liang)(liang)(liang)的(de)(de)(de)(de)(de)洗(xi)(xi)(xi)滌溶(rong)劑(ji)(ji)洗(xi)(xi)(xi)滌完(wan)成(cheng)，將所(suo)(suo)述(shu)第(di)(di)一(yi)量(liang)(liang)(liang)(liang)的(de)(de)(de)(de)(de)洗(xi)(xi)(xi)滌溶(rong)劑(ji)(ji)送(song)(song)至廢物；和添(tian)加第(di)(di)二(er)量(liang)(liang)(liang)(liang)的(de)(de)(de)(de)(de)洗(xi)(xi)(xi)滌溶(rong)劑(ji)(ji)，其(qi)(qi)中(zhong)一(yi)旦(dan)用(yong)所(suo)(suo)述(shu)第(di)(di)二(er)量(liang)(liang)(liang)(liang)的(de)(de)(de)(de)(de)洗(xi)(xi)(xi)滌溶(rong)劑(ji)(ji)洗(xi)(xi)(xi)滌完(wan)成(cheng)，將所(suo)(suo)述(shu)第(di)(di)二(er)量(liang)(liang)(liang)(liang)的(de)(de)(de)(de)(de)洗(xi)(xi)(xi)滌溶(rong)劑(ji)(ji)送(song)(song)至收容器(container)。所(suo)(suo)述(shu)第(di)(di)二(er)量(liang)(liang)(liang)(liang)的(de)(de)(de)(de)(de)洗(xi)(xi)(xi)滌溶(rong)劑(ji)(ji)將用(yong)于(yu)添(tian)加的(de)(de)(de)(de)(de)下一(yi)氨基(ji)酸的(de)(de)(de)(de)(de)第(di)(di)一(yi)次(ci)洗(xi)(xi)(xi)滌。

2、本文還公(gong)開了一(yi)(yi)(yi)種用(yong)于(yu)洗(xi)滌在固相肽(tai)合成(cheng)(spps)過程中(zhong)已經添加(jia)到固相樹(shu)脂中(zhong)的(de)(de)(de)氨基(ji)酸(suan)的(de)(de)(de)系(xi)統。該系(xi)統包括第(di)一(yi)(yi)(yi)收容器(qi)和(he)廢(fei)物(wu)接(jie)收器(qi)；和(he)第(di)一(yi)(yi)(yi)量(liang)(liang)的(de)(de)(de)洗(xi)滌溶(rong)(rong)劑(ji)和(he)第(di)二量(liang)(liang)的(de)(de)(de)洗(xi)滌溶(rong)(rong)劑(ji)。一(yi)(yi)(yi)旦(dan)用(yong)所述(shu)(shu)第(di)一(yi)(yi)(yi)量(liang)(liang)的(de)(de)(de)洗(xi)滌溶(rong)(rong)劑(ji)洗(xi)滌完成(cheng)，將所述(shu)(shu)第(di)一(yi)(yi)(yi)量(liang)(liang)的(de)(de)(de)洗(xi)滌溶(rong)(rong)劑(ji)送(song)至(zhi)廢(fei)物(wu)接(jie)收器(qi)。一(yi)(yi)(yi)旦(dan)用(yong)所述(shu)(shu)第(di)二量(liang)(liang)的(de)(de)(de)洗(xi)滌溶(rong)(rong)劑(ji)洗(xi)滌完成(cheng)，將所述(shu)(shu)第(di)二量(liang)(liang)的(de)(de)(de)洗(xi)滌溶(rong)(rong)劑(ji)送(song)至(zhi)第(di)一(yi)(yi)(yi)收容器(qi)。所述(shu)(shu)第(di)二量(liang)(liang)的(de)(de)(de)洗(xi)滌溶(rong)(rong)劑(ji)將用(yong)于(yu)添加(jia)的(de)(de)(de)下一(yi)(yi)(yi)氨基(ji)酸(suan)的(de)(de)(de)第(di)一(yi)(yi)(yi)次洗(xi)滌。

技術特征：

1.一種洗滌在(zai)固相肽合成(spps)過程(cheng)中(zhong)已經添(tian)加到固相樹脂中(zhong)的(de)氨(an)基酸的(de)方(fang)法，其包(bao)括：

2.根據權利(li)要求(qiu)1所述(shu)的(de)方法(fa)，其進(jin)一(yi)(yi)(yi)步(bu)包括第三(san)量的(de)洗(xi)滌(di)(di)溶劑(ji)，其中一(yi)(yi)(yi)旦用(yong)所述(shu)第三(san)量的(de)洗(xi)滌(di)(di)溶劑(ji)洗(xi)滌(di)(di)完成，將(jiang)所述(shu)第三(san)量的(de)洗(xi)滌(di)(di)溶劑(ji)送至收容器，其中所述(shu)第三(san)量的(de)洗(xi)滌(di)(di)溶劑(ji)將(jiang)用(yong)于添(tian)加的(de)下一(yi)(yi)(yi)氨基酸的(de)第二(er)次洗(xi)滌(di)(di)。

3.根(gen)據權利要求2所述的方法，其中將(jiang)所述溶(rong)劑重(zhong)復(fu)用于下一(yi)氨基酸(suan)的過程迭代重(zhong)復(fu)，直至用新鮮(xian)溶(rong)劑完成最后一(yi)次洗滌。

4.根(gen)據權(quan)利要(yao)求1至3任一項所(suo)述(shu)(shu)的(de)方法(fa)，其中所(suo)述(shu)(shu)洗滌溶劑是n,n-二甲(jia)基(ji)甲(jia)酰胺(dmf)。

5.根據(ju)權利要求(qiu)1至3任一項所述的方法，其中所述洗滌溶劑是乙酸異丙酯(ipac)。

6.根據權利要求1至(zhi)5任一(yi)項(xiang)所述的(de)方法，其中(zhong)堿與(yu)氨基酸和固相樹(shu)脂一(yi)起存在，并且(qie)所述洗(xi)滌將堿濃度降低(di)至(zhi)與(yu)全部使用新鮮洗(xi)滌溶劑時相同的(de)水平。

7.根據權利要求6所(suo)述的方法，其中將所(suo)述堿濃度降低至小于大約(yue)1000ppm。

8.根據權利要求6所述(shu)的方法，其中將所述(shu)堿濃(nong)度降低至小于大(da)約(yue)500ppm。

9.根(gen)據(ju)權利要求6至8任(ren)一項所(suo)(suo)述的方法，其(qi)中所(suo)(suo)述堿是仲胺(an)。

10.根據權(quan)利要求9所(suo)述(shu)的方法，其中(zhong)所(suo)述(shu)仲胺(an)是哌啶。

11.根據權利要求1至10任一(yi)項所(suo)述的方(fang)法，其(qi)中(zhong)與僅(jin)使用(yong)新鮮洗滌溶劑(ji)相比，將(jiang)所(suo)用(yong)洗滌溶劑(ji)的總量減(jian)少至少大(da)約(yue)75％。

12.根據權利(li)要(yao)求1至10任(ren)一(yi)項所述的(de)(de)方(fang)法，其中(zhong)與(yu)僅(jin)使用新(xin)鮮洗滌溶劑相比(bi)，將所用洗滌溶劑的(de)(de)總(zong)量減(jian)少至少大約80％。

13.根(gen)據權利要求1至10任一項所(suo)述的方(fang)法，其中與(yu)僅使用新(xin)鮮洗滌(di)溶劑相比(bi)，將所(suo)用洗滌(di)溶劑的總量減少大約75％。

14.根據權利(li)要求1至10任一項所述的方法，其中與僅使用(yong)新鮮洗滌溶劑(ji)(ji)相比，將所用(yong)洗滌溶劑(ji)(ji)的總量減少大約80％。

15.根據權利要求1至14任(ren)一項所述(shu)(shu)的(de)方法(fa)(fa)，其中自動控制所述(shu)(shu)方法(fa)(fa)步驟。

16.根據權利要(yao)求1至15任一項所(suo)述的(de)方法(fa)，其中(zhong)將(jiang)兩個或更多個所(suo)述量的(de)洗(xi)滌(di)溶(rong)劑合并(bing)成單(dan)個體(ti)積(ji)并(bing)作為活塞流式(shi)洗(xi)滌(di)施加至所(suo)述樹(shu)脂，其中(zhong)將(jiang)洗(xi)滌(di)流出(chu)物的(de)部分分流到(dao)所(suo)述洗(xi)滌(di)接收器或收容器。

17.一種(zhong)用于洗滌在(zai)固相(xiang)肽合成(spps)過(guo)程中已經(jing)添加到固相(xiang)樹脂(zhi)中的氨基酸的系(xi)統，其包括：

18.根據權利要(yao)求(qiu)17所述(shu)(shu)的(de)系統(tong)，其(qi)進一(yi)(yi)步包括第(di)二(er)收(shou)(shou)容(rong)器(qi)(qi)和第(di)三量的(de)洗(xi)滌(di)(di)溶(rong)劑，其(qi)中(zhong)一(yi)(yi)旦(dan)用所述(shu)(shu)第(di)三量的(de)洗(xi)滌(di)(di)溶(rong)劑洗(xi)滌(di)(di)完成，將所述(shu)(shu)第(di)三量的(de)洗(xi)滌(di)(di)溶(rong)劑送至第(di)二(er)收(shou)(shou)容(rong)器(qi)(qi)，收(shou)(shou)容(rong)器(qi)(qi)，其(qi)中(zhong)所述(shu)(shu)第(di)三量的(de)洗(xi)滌(di)(di)溶(rong)劑將用于添加的(de)下一(yi)(yi)氨(an)基(ji)酸的(de)第(di)二(er)次(ci)洗(xi)滌(di)(di)。

19.根(gen)據(ju)權利要求17或18所(suo)述(shu)的(de)系統，其中堿與氨基酸和固相樹脂(zhi)一起存在，并且所(suo)述(shu)系統將堿濃度(du)降低至與全部使用新(xin)鮮洗滌溶(rong)劑時相同的(de)水平。

20.根據(ju)權利要(yao)求(qiu)17至19任(ren)一項(xiang)所(suo)述的系統，其中所(suo)述系統將(jiang)堿濃(nong)度降低(di)至小于大(da)約1000ppm。

21.根據權(quan)利要(yao)求17至20任一項所述的系統，其(qi)中所述系統將堿濃度降低至小于大約500ppm。

22.根據權利要(yao)求17至(zhi)21任一(yi)項所述的(de)系統，其中與(yu)僅使用新鮮洗(xi)(xi)滌溶劑相(xiang)比，將所用洗(xi)(xi)滌溶劑的(de)總體積減少(shao)至(zhi)少(shao)大約75％。

23.根據權(quan)利要求17至22任一項所述(shu)的系(xi)統(tong)，其(qi)中與僅使用新(xin)鮮洗(xi)滌(di)溶劑(ji)相比，將所用洗(xi)滌(di)溶劑(ji)的總體(ti)積減少至少大約80％。

24.根據權利要(yao)求(qiu)17至23任(ren)一(yi)項所述的(de)系統，其(qi)中(zhong)與僅使用新鮮洗(xi)滌溶劑(ji)相(xiang)比(bi)，將(jiang)所用洗(xi)滌溶劑(ji)的(de)總體積減(jian)少大約75％。

25.根(gen)據權利(li)要求17至24任一項所述的系統，其中與僅使用新鮮洗滌(di)溶(rong)劑(ji)相比(bi)，將所用洗滌(di)溶(rong)劑(ji)的總(zong)體積減少(shao)大約80％。

26.根據權利要(yao)求(qiu)17至(zhi)25任一項所(suo)述的系統(tong)，其中所(suo)述系統(tong)是適(shi)于連(lian)接(jie)到(dao)spps系統(tong)的獨(du)立(li)擴(kuo)展系統(tong)。

技術總結
公開了一種洗滌在固相肽合成(SPPS)過程中已經添加到固相樹脂中的氨基酸的方法，其包括：添加第一量的洗滌溶劑，其中一旦用所述第一量的洗滌溶劑洗滌完成，將所述第一量的洗滌溶劑送至廢物；和添加第二量的洗滌溶劑，其中一旦用所述第二量的洗滌溶劑洗滌完成，將所述第二量的洗滌溶劑送至收容器，其中所述第二量的洗滌溶劑將用于添加的下一氨基酸的第一次洗滌。

技術研發人員：M·R·伯格倫德
受保護的技術使用者：伊萊利利公司
技術研發日：
技術公布日：2024/9/29