專利名稱：神經生長因子類似物(2s，4s)－2－(2’－取代基)－4－吲哚－3－次甲基)－5，5－二取代 ...的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種神經生長因子類似物，既(2S，4S)-2-(2’-取代基)-4-(吲哚-3-次甲基)-5，5-二取代基-1，3-噁唑烷化合物，該類化合物的制備方法及其應用。
背景技術：
神經生長因子(NGF)是一種天然的蛋白質，其主要功能是維護神經細胞的正常生存、分化等。現在的醫學研究表明，NGF與AlzHeimer’sDisease(AD)有密切關系。此外，NGF還具有廣泛的生理活性，如促進PC12細胞族基因表達(Clusterin gene expression)增加鈣電流，用于發炎與免疫反應中用作調節劑。NGF的缺少在神經細胞受到損傷或因年老導致的神經細胞體積收縮會造成嚴重損害前者不能恢復機體的正常神經活動功能；后者則會造成神經信號在傳遞過程中變慢或發生困難，因此，老年人更容易患AD病。然而NGF很難獲得足夠的量用于臨床上的各種需要，因此，尋找小分子來模擬NGF的所有或部分功能則顯得非常重要。
發明內容
本發明的目的是利用天然生物堿來加以結構改造，提供了一類神經生長因子類似物(2S，4S)-2-(2’-取代基)-4-(吲哚-3-次甲基)-5，5-二取代基-1，3-噁唑烷，并提供了其制備方法及其作為神經生長因子及抗炎和免疫反應中的調節劑的應用。
為了實現本發明的目的，本發明提供了如下技術方案如結構通式(I)所示的神經生長因子類似物(2S，4S)-2-(2’-取代基)-4-(吲哚-3-次甲基)-5，5-二取代基-1，3-噁唑烷化合物 式中，R1，R2＝脂肪基和芳基。
一種制備權利要求1化合物的方法，將脂肪或芳香醛加入(2S)-3-(吲哚-3’-次甲基)-1，1-二取代基-N-甲基-1-丙醇的CH2Cl2溶液中，在冰浴條件下用分子篩去水，然后將該溶液加熱升至室溫，反應在14h后完成(用TLC檢測)，將所得反應物過濾，使濾液在減壓條件下蒸發，其殘余物用硅膠色譜柱分離純化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到通式(I)化合物。
含神經生長因子類似物(2S，4S)-2-(2’-取代基)-4-(吲哚-3-次甲基)-5，5-二取代基-1，3-噁唑烷化合物作為活性成分的神經生長因子。
神經生長因子類似物(2S，4S)-2-(2’-取代基)-4-(吲哚-3-次甲基)-5，5-二取代基-1，3-噁唑烷化合物用作為神經生長因子。
神經生長因子類似物(2S，4S)-2-(2’-取代基)-4-(吲哚-3-次甲基)-5，5-二取代基-1，3-噁唑烷化合物在發炎與免疫反應中用作調節劑。
具體實施例方式下面用實施例來進一步描述本發明的實質性內容，但本發明的內容并不局限于此。
實施例1將2-甲基-丙醛(100mg，2.6eq.)加入(2S)-3-(吲哚-3’-次甲基)-1，1-二乙基-N-甲胺基-1-丙醇(345mg，1.5mmol)的CH2Cl2溶液中，在冰浴條件下用分子篩去水，然后將該溶液加熱至室溫，反應在14h后完成(用TLC檢測)，將所得反應物過濾，使濾液在減壓條件下蒸發，其殘余物用硅膠色譜柱分離純化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到75mg(2S，4S)-2-異丁基-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。
該化合物的結構及結構數據為 (2S，4S)-2-(2’-(4’-溴)-噻吩)-4-(吲哚-3-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.04(1H，s)，7.63(1H，d，J＝7.62Hz)，7.36(1H，d，J＝7.92Hz)，7.15(3H，m)，6.88(2H，q)，4.81(1H，s)，3.02(3H，m)，2.20(3H，s)，1.99(1H，m)，1.63(2H，m)，1.18(1H，m)，0.99(3H，t，J＝7.38Hz)，0.78(3H，t，J＝7.38Hz)。13CNMR(75MHz，CDCl3)δ。147.1，136.3，128.9，127.4，127.1，122.2，122.0，119.3，118.9，114.0，113.0，111.2，93.1，86.1，69.0，36.9，28.3，27.9，24.8，8.0，8.0。MS(FAB+)m/z(％)433[M]+，355(65)，130(100)，112(64)。
實施例2.將3-噻吩甲醛(100mg，2.6eq.)加入(2S)-3-(吲哚-3’-次甲基)-1，1-二乙基-N-甲胺基-1-丙醇(345mg，1.5mmol)的CH2Cl2溶液中，在冰浴條件下用分子篩去水，然后將該溶液加熱至室溫，反應在14h后完成(用TLC檢測)，將所得反應物過濾，使濾液在減壓條件下蒸發，其殘余物用硅膠色譜柱分離純化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到72mg(2S，4S)-2-(3’-噻吩)-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。
該化合物的結構及結構數據為 (2S，4S)-2-(3’-噻吩)-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.14(1H，s)，7.68(1H，d，J＝7.62Hz)，7.26(6H，m)，7.01(1H，d，J＝2.01Hz)，4.73(1H，s)，3.08(3H，m)，2.20(3H，s)，2.03(1H，m)，1.72(2H，m)，1.19(1H，m)，1.05(3H，t，J＝7.41Hz)，0.81(3H，t，J＝7.41Hz)。13CNMR(75MHz，CDCl3)δ142.0，136.3，127.4，126.7，125.9，124.5，122.1，121.9，119.2，118.9，113.0，111.2，93.5，85.3，69.3，36.8，28.4，28.1，24.6，8.0，7.9 MS(FAB+)m/z(％)355[M]+，130(100)，112(68)。
實施例3.將正丁醛(100mg，2.6eq.)加入(2S)-3-(吲哚-3’-次甲基)-1，1-二乙基-N-甲胺基-1-丙醇(345mg，1.5mmol)的CH2Cl2溶液中，在冰浴條件下用分子篩去水，然后將該溶液加熱至室溫，反應在14h后完成(用TLC檢測)，將所得反應物過濾，使濾液在減壓條件下蒸發，其殘余物用硅膠色譜柱分離純化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到78mg(2S，4S)-2-丙基-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。
該化合物的結構及結構數據為 (2S，4S)-2-丙基-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.11(1H，s)，7.64(1H，d，J＝7.72Hz)，7.37(1H，d，J＝7.92Hz)，7.21(1H，m，J＝6.96Hz)，7.06(1H，s)，3.78(1H，d，J＝3.56Hz)，3.03(1H，t，J＝7.76Hz)，2.95(2H，t，J＝7.04Hz)，2.24(3H，s)，1.78(1H，m)，1.60(5H，m)，1.31(1H，m)，1.12(1H，m)，0.98(6H，m)，0.73(3H，t，J＝7.28Hz)。13CNMR(100MHz，CDCl3)δ136.4，127.6，122.1，121.0，119.3，119.1，113.8，111.1，96.4，84.1，69.9，37.8，36.4，28.5，27.9，24.9，17.9，14.3，7.9，7.9。m/z(FAB+)＝315.2378，Cal.Mass＝315.2436。IR(KBr)cm-13260(s)，2880(m)，1440(s)，1345(m)，1230(m)，1180(m)，950(m)，790(w)，745(s)。
實施例4.將異戊醛(100mg，2.6eq.)加入(2S)-3-(吲哚-3’-次甲基)-1，1-二乙基-N-甲胺基-1-丙醇(345mg，1.5mmol)的CH2Cl2溶液中，在冰浴條件下用分子篩去水，然后將該溶液加熱至室溫，反應在14h后完成(用TLC檢測)，將所得反應物過濾，使濾液在減壓條件下蒸發，其殘余物用硅膠色譜柱分離純化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到90mg(2S，4S)-2-異丁基-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。
該化合物的結構及結構數據為 (2S，4S)-2-異丁基-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.07(1H，s)，7.61(1H，d，J＝7.84Hz)，7.34(1H，d，J＝8.04Hz)，7.18(1H，t，J＝7.2Hz)，7.1 1(1H，t，J＝7.48Hz)，7.01(1H，s)，3.77(1H，dd，J＝2.16Hz，7.72Hz)，3.00(1H，m)，2.89(2H，m)，2.21(3H，s)，1.86(1H，m)，1.73(2H，m)，1.54(4H，m)，1.41(2H，m)，1.07(1H，m)，0.94(6H，m)，0.70(3H，t，J＝7.40Hz)。13CNMR(100MHz，CDCl3)δ136.4，127.6，122.1，122.0，119.3，119.1，113.8，111.1，95.3，84.1，69.8，43.7，37.8，28.7，28.1，25.0，23.8，22.6，18.2，7.9。MS(FAB+)found 329.2539，Cal.Mass＝329.2592。IR(KBr)cm-13419(m)，3305(b.m)，3058(w)，2960(s)，2934(s)，2877(m)，1620(w)，1457(s)，1352(m)，1174(m)，1057(m)，1013(m)，924(w)，844(w)，739(vs)。
實施例5.將2，2-二甲基丁醛(100mg，2.6eq.)加入(2S)-3-(吲哚-3’-次甲基)-1，1-二乙基-N-甲胺基-1-丙醇(345mg，1.5mmol)的CH2Cl2溶液中，在冰浴條件下用分子篩去水，然后將該溶液加熱至室溫，反應在14h后完成(用TLC檢測)，將所得反應物過濾，使濾液在減壓條件下蒸發，其殘余物用硅膠色譜柱分離純化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到91mg(2S，4S)-2-新戊基-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。
該化合物的結構及結構數據為 (2S，4S)-2-新戊基-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.03(1H，s)，7.60(1H，d，J＝7.68Hz)，7.34(1H，d，J＝8.00Hz)，7.18(1H，t，J＝7.2Hz)，7.11(1H，t，J＝7.76Hz)，7.02(1H，s)，3.75(1H，d，J＝8.32Hz)，3.02(1H，m)，2.92(1H，m)，2.82(1H，m)，2.19(3H，s)，1.71(1H，m)，1.47(3H，m)，1.38(1H，m)，1.07(3H，m)，0.95(9H，m)，0.70(3H，t，J＝7.36Hz)。13CNMR(100MHz，CDCl3)δ136.4，127.6，122.1，122.0，119.3，119.1，113.9，111.1，94.4，84.2，69.6，48.1，37.7，30.2，29.7，28.9，28.1，25.0。m/z(FAB+)＝342.2754，Cal.Mass＝343.2749。IR(KBr)cm-13140(m)，2920(s)，2840(m)，1440(s)，1340(m)，1050(m)，730(s)。
實施例6將2-噻吩甲醛(100mg，2.6eq.)加入(2S)-3-(吲哚-3’-次甲基)-1，1-二甲基-N-甲胺基-1-丙醇(345mg，1.5mmol)的CH2Cl2溶液中，在冰浴條件下用分子篩去水，然后將該溶液加熱至室溫，反應在14h后完成(用TLC檢測)，將所得反應物過濾，使濾液在減壓條件下蒸發，其殘余物用硅膠色譜柱分離純化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到71mg(2S，4S)-2-(2’-噻吩)-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二甲基-1，3-噁唑烷。
該化合物的結構及結構數據為 (2S，4S)-2-(2’-噻吩)-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二甲基-1，3-噁唑烷1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.07(1H，s)，7.65(1H，d，J＝7.56Hz)，7.35(2H，t)，7.25(4H，m)，6.96(1H，m)，4.92(1H，s)，3.15(1H，m)，2.91(2H，q)，2.29(3H，s)，1.41(3H，s)，1.03(3H，s)。
13CNMR(75MHz，CDCl3)δ145.0，136.3，127.4，127.0，126.6，126.3，122.3，122.1，119.3，119.0，112.5，111.2，92.2，82.2，72.8，36.6，27.6，24.9，24.3。
MS(FAB+)m/z(％)326[M]+，194(100)，129(65)，83(89)。
實施例7將2-噻吩(100mg，2.6eq.)加入(2S)-3-(吲哚-3’ -次甲基)-1，1-乙基-N-甲胺基-1-丙醇(345mg，1.5mmol)的CH2Cl2溶液中，在冰浴條件下用分子篩去水，然后將該溶液加熱至室溫，反應在14h后完成(用TLC檢測)，將所得反應物過濾，使濾液在減壓條件下蒸發，其殘余物用硅膠色譜柱分離純化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到110mg(2S，4S)-2-(2’-噻吩)-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。
該化合物的結構及結構數據為
(2S，4S)-2-(2’-噻吩)-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.03(1H，s)，7.64(1H，d，J＝7.62Hz)，7.35(2H，t)，7.15(4H，m)，6.95(1H，q，J＝3.81Hz)，4.89(1H，s)，3.05(3H，m)，2.21(3H，s)，2.01(1H，m)，1.62(2H，m)，1.13(1H，m)，1.01(3H，t，J＝7.32Hz)，0.78(3H，t，J＝7.32Hz)。13CNMR(75MHz，CDCl3)δ145.1，136.3，127.4，126.9，126.6，126.1，122.2，122.0，119.3，119.0，113.2，111.2，93.2，85.8，69.2，36.9，28.4，28.1，24.7，8.0，8.0，MS(FAB+)m/z(％)355[M]+，130(100)，112(62)。
實施例8 將2-噻吩甲醛(100mg，2.6eq.)加入(2S)-3-(吲哚-3’-次甲基)-1，1-二丙基-N-甲胺基-1-丙醇(345mg，1.5mmol)的CH2Cl2溶液中，在冰浴條件下用分子篩去水，然后將該溶液加熱至室溫，反應在14h后完成(用TLC檢測)，將所得反應物過濾，使濾液在減壓條件下蒸發，其殘余物用硅膠色譜柱分離純化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到108mg(2S，4S)-2-(2’-噻吩)-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二丙基-1，3-噁唑烷。
該化合物的結構及結構數據為 (2S，4S)-2-(2’-噻吩)-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二丙基-1，3-噁唑烷。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.03(1H，s)，7.64(1H，d，J＝7.62Hz)，7.35(2H，t)，7.15(4H，m)，6.94(1H，m)，4.87(1H，s)，3.12(2H，m)，2.99(1H，q)，2.21(3H，s)，1.98(1H，s)，1.56(3H，m)，1.33(3H，m)，1.10(1H，m)，0.96(3H，t，J＝6.48Hz)，0.68(3H，t，J＝6.96Hz)。13CNMR(75MHz，CDCl3)δ145.1，136.3，127.4，126.9，126.7，126.0，122.2，122.0，119.3，119.0，113.1，111.2，93.2，85.6，69.5，36.2，35.7，25.6，24.7，23.6，23.1，14.2，13.8。
實施例9將正戊醛(100mg，2.6eq.)加入(2S)-3-(吲哚-3’-次甲基)-1，1-二鄰甲苯基-N-甲胺基-1-丙醇(345mg，1.5mmol)的CH2Cl2溶液中，在冰浴條件下用分子篩去水，然后將該溶液加熱至室溫，反應在14h后完成(用TLC檢測)，將所得反應物過濾，使濾液在減壓條件下蒸發，其殘余物用硅膠色譜柱分離純化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到72mg(2S，4S)-2-丁基-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二鄰甲苯基-1，3-噁唑烷。
該化合物的結構及結構數據為 (2S，4S)-2-丁基-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二鄰甲基-1，3-噁唑烷。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.88(1H，s)，7.59(1H，d，J＝7.8Hz)，7.52(1H，d，J＝6.72Hz)，7.33(1H，d，J＝8.00Hz)，7.21-7.00(9H，m)，6.83(1H，s)，4.31(1H，m)，3.65(1H，dd，J＝2.92Hz，6.00Hz)，2.34(1H，m)，2.20(1H，m)，2.16(6H，s)，2.04(3H，s)，1.65(3H，m)，1.42(3H，m)，0.95(3H，t，J＝7.12Hz，14.28Hz)。13CNMR(100MHz，CDCl3)δ140.3，139.1，136.3，133.3，131.6，128.4，127.7，127.2，125.1，123.9，121.6，119.2，118.4，111.2，94.0，67.5，38.9，34.6，32.2，26.9，22.7，22.3，21.7，14.0。IR(KBr)cm-13226(b.m)，3061(w)，2954(s)，2928(s)，2861(m)，1623(w)，1484(m)，1458(s)，1353(m)，1234(m)，1131(m)，1017(m)，916(w)，813(w)，754(s)，739(s)。
從本發明的化合物中通過活性試驗發現該類化合物有強烈的殺死PC12細胞的活性。表明這一類化合物有潛在的能起到NGF的部分功能特性，為此，在此結構基礎上，本發明合成了此類化合物用于體外PC12細胞的活性篩選。發現化合物4、9有較強的促進PC12細胞體積增加的功能。這是一個非常有意義的發現。它符合用小分子來模擬NGF的所有或部分功能的典型特征。有關試驗結果可以從表1中得到。
從表1中可得出結論1、結果可認為無明顯區別。2.對照為添加同樣體積溶劑的化合物。3.細胞是在顯微鏡下觀察得到的。
本發明化合物對PC12細胞生長的影響見表1表1.化合物對PC12細胞生長的影響(相對于對照)化合物編號 觀測結果1 ＜10μg/ml±5％的細胞生長＞50μg/ml4天以后細胞死亡數增加(用量分別為50μg/ml和100μg/ml時細胞減少45％)2 ＜10μg/ml±10％的細胞生長＞50g/ml4天以后細胞死亡數增加(用量分別為50μg/ml和100μg/ml時細胞減少30％和40％)3 所有的濃度(0.1 to 10％μg/ml)均表現±5％的抑制1，同對照一致4 可促進PC12細胞的生長，當用量從0.1μg/ml到10μg/ml時細胞有1％到15％的生長5 所有的濃度(0.1 to 10％μg/ml)均表現±5％的抑制，同對照一致6 ＜50μg/ml±5％的細胞生長100μg/ml4天以后細胞死亡數增加(用量為100μg/ml時細胞減少20％)7 所有的濃度均表現±5％的生長8 ＜10μg/ml±10％的細胞生長＞50g/ml4天以后細胞死亡數增加(用量分別為50μg/ml和100μg/ml時細胞減少45％)9 可促進PC12細胞的生長，當用量從0.1μg/ml到10μg/ml時細胞有3％到16％的生長
權利要求
1.如結構通式(I)所示的神經生長因子類似物(2S，4S)-2-(2’-取代基)-4-(吲哚-3-次甲基)-5，5-二取代基-1，3-噁唑烷化合物 式中，R1，R2＝脂肪基和芳基。
2.一種制備權利要求1化合物的方法，其特征在于將脂肪或芳香醛加入(2S)-3-(吲哚-3’-次甲基)-1，1-二取代基-N-甲基-1-丙醇的CH2Cl2溶液中，在冰浴條件下用分子篩去水，然后將該溶液加熱升至室溫，反應在14h后完成(用TLC檢測)，將所得反應物過濾，使濾液在減壓條件下蒸發，其殘余物用硅膠色譜柱分離純化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到通式(I)化合物。
3.含權利要求1的神經生長因子類似物(2S，4S)-2-(2’-取代基)-4-(吲哚-3-次甲基)-5，5-二取代基-1，3-噁唑烷化合物作為活性成分的神經生長因子。
4.權利要求1的神經生長因子類似物(2S，4S)-2-(2’-取代基)-4-(吲哚-3-次甲基)-5，5-二取代基-1，3-噁唑烷化合物用作為神經生長因子。
5.權利要求1的神經生長因子類似物(2S，4S)-2-(2’-取代基)-4-(吲哚-3-次甲基)-5，5-二取代基-1，3-噁唑烷化合物在發炎與免疫反應中用作調節劑。
全文摘要
如結構通式(I)所示的神經生長因子類似物(2S，4S)－2－(2’－取代基)－4－(吲哚－3－次甲基)－5，5－二取代基－1，3－噁唑烷化合物，該化合物的制備方法，將脂肪或芳香醛加入(2S)－3－(吲哚－3’－次甲基)－1，1－二取代基－N－甲基－1－丙醇的CH
文檔編號C07D413/00GK1539837SQ0313576
公開日2004年10月27日 申請日期2003年9月3日 優先權日2003年9月3日
發明者朱華結, 李良春 申請人:中國科學院昆明植物研究所