一種水稻專用的有機復合生物肥的制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種水稻專用的有機復合生物肥，其通過將粉碎的秸稈和牛糞作為固體有機物料，再添加5‰比例的具有特定腐熟功效的有機物料腐熟劑并加適量的水，與有機物料混合后，保持含水量為60％左右，自然室外溫度下發酵5?10天腐熟形成初肥。再添加適當比例的各類營養元素與發酵物料混合均勻后，添加4‰比例的水稻專用的促生長復合菌劑均勻混合后獲得的生物肥料。本發明解決了單純施用化肥、普通有機肥、農家肥以及純微生物菌肥所存在的種種弊端，并充分結合了水稻各個時期的生長特點及對養分的需求，注意調節其營養生長與生殖生長的矛盾，是一種尤其適用于水稻生長、高效、優質的有機復合生物肥。在水稻生產種植方面具有較好的應用前景。
【專利說明】
-種水稻專用的有機復合生物肥的制備方法
技術領域
[0001] 本發明設及一種有機復合生物肥及其制備方法，尤其適用于水稻，屬于農業生物 有機肥制備的技術領域。
【背景技術】
[0002] 目前我國化肥年使用量在一億Ξ千萬噸左右，廣大農民一直W來都是使用化肥， 然而長期使用化肥產生的弊端隨之而來，±地板結、化學元素殘留、環境污染等等一系列問 題浮出水面。化肥已經不能滿足可持續發展的需要，更不能成為綠色農業的支柱，各國都在 尋找對策。生物有機肥就此而誕生，成為化肥的第二次革命。生物有機肥是指特定功能微生 物與主要W動植物殘體(如畜禽糞便、農作物賴桿等)為來源并經無害化處理、腐熟的有機 物料復合而成的一類兼具微生物肥料和有機肥效應的肥料。
[0003] 而水稻，是一年生禾本科植物，水稻所結稻粒去殼后稱大米或米。世界上近一半人 口，都W大米為食。水稻分葉期植株的生長中屯、是大量生根、生葉、分葉，需要較多的氮素來 形成氮化物。運段時期的營養生理特點，W氮代謝為主，碳水化合物的積累較少，對氮的需 求量大于憐、鐘的吸收量。從穗開始分化到抽穗期，W莖的伸長、穗的形成為生長發育的中 屯、，此階段的營養特點是前期碳、氮代謝旺盛，后期碳的代謝逐漸占優勢，則吸收較多的氮 肥長葉、長莖和幼穗分化，又要積累大量的碳水化合物，供出穗后向穗部轉運，所W對氮、 憐、鐘吸收都較多。抽穗后，莖葉和根的生長基本停止，植株生長中屯、轉向巧粒的形成，其營 養特點是W碳素代謝為主，制造積累大量的碳水化合物，向巧粒中轉運膽藏，所W對憐鐘的 吸收較多。此外，水稻對微量元素娃的需求量比較大。要解決上述問題就要改變現有的生產 模式，從而使養分釋放符合水稻養分吸收要求。隨著科學的發展，生物有機肥在農業中的作 用漸漸顯露出來。

【發明內容】

[0004] 本發明所述的水稻專用的有機復合生物肥是指利用微生物技術，選配具有特定腐 熟功能的菌種制成菌劑，用此菌劑將固體有機物料發酵成初肥，再按適宜的比例添加各類 營養元素，再配W水稻專用促生長復合菌劑所制成的肥料。本發明產品充分利用了具有腐 熟功能菌種的特性，將各類廢棄的固體有機物料發酵腐熟成肥料，變廢為寶，節省資源，大 大減少了環境污染;又添加水稻專用的促生長菌劑，此促生長復合菌劑是經查閱大量的資 料，進行研究總結，根據實際要求選擇幾種針對水稻有特殊功效的有益微生物，然后通過實 際反復實驗，最后確定各微生物的最佳比例，保證水稻各階段的營養需求。通過各菌種之間 的相互作用，起到刺激植物生長、緩解±地板結、改良±壤生態環境、防病抗病等作用，從而 達到增產、高產的目的。
[0005] 本發明產品所選用腐熟菌劑，其采用枯草芽抱桿菌（Bacillus subtil is) CICC10088,米曲霉（Aspergillus nige;r)CICC2436,白腐菌（Phanerochaete c虹ysospo;rium)ACCC30414、里氏木霉(Trichoderma reesei)ACCC30449等具有特殊腐熟功 效的菌種，按適當的比例復合發酵而成的微生物菌劑。所選用各菌種均能夠產生纖維素酶、 木質素酶、半纖維素酶、蠟質素酶、果膠酶等多種生物酶，通過中溫菌和耐高溫菌的協同作 用，快速將各類廢棄的有機物料發酵腐熟成肥料，變廢為寶，節省資源，大大減少了環境污 染。
[0006] 本發明所選用水稻專用的促生長復合菌劑，其含有大量的對水稻生長發育有特殊 功效的有益微生物，其采用枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis)ACCC 01183、巨大芽抱桿菌 (Bacillus megateriunOACCC 10010、地衣芽抱桿菌（Bacillus licheniformis) CICC10037、膠質芽抱桿菌(Bacillus mucilaginosus)CGMCC 1.153等菌種發酵液混合后作 為混合菌劑，經再次發酵而制備的微生物復合菌劑。本發明選取各菌種是經查閱大量的文 獻資料，進行研究總結，根據實際要求選擇幾種針對水稻生長發育有特殊功效的有益微生 物，然后通過實際反復實驗，最后確定各微生物的最佳比例，從而保證水稻各階段的營養需 求。
[0007] 具體的本發明所述水稻專用的有機復合生物肥的制備方法，該方法包括如下步 驟：
[0008] (一)有機物料腐熟劑的制備
[0009] 將菌種數量分別達到108個/mLW上的枯草芽抱桿菌（Bacillus subtilis) CICC10088,米曲霉（Aspergillus nige;r)CICC2436,白腐菌（Phanerochaete chrysospo;rium)ACCC30414、里氏木霉（Trichoderma reesei )ACCC30449的菌種發酵液按 1.5~2.0:0.8~1.3:0.8~1.3:0.8~1.3的體積比混合均勻后，接種于盛有復合菌劑培養 基A的發酵罐中，接種量為復合菌劑培養基A總體積的5%，復合菌劑培養基A的pH 6.0~ 8.0,30°C下培養4~7天，使發酵液中總菌數達到108個/mL，即得到有機物料腐熟劑；
[0010] 所述復合菌劑培養基A配方為：玉米面0.5~1.5g/L、玉米賴桿粉15~17g/L、教皮 0.2~0.4g/L、豆餅粉0.2~0.4g/L、Vogel' S母液4mL/100mL，抑值6.0~8.0;
[0011] 步驟(一)的具體制備過程為：
[001 ^ 1.菌種活化:將所述各菌種接于斜面培養基上;枯草芽抱桿菌28~32 °C，pH為7.2 ~7.4,培養時間為1~3天;米曲霉培養溫度25~28°C，抑為6.0~6.5,培養時間為4~7天； 白腐菌培養溫度25~28°C，培養時間為4~7天；
[001引2.-級菌種培養:將所述菌種分別接種于盛有液體培養基的50mL錐形瓶中，培養 基pH為6.0~8.0，錐形瓶放入搖床振蕩培養，溫度為30°C，振蕩24~48h;采用血球計數板計 數，菌液中菌種數量分別達到108個/mL;
[0014] 3.二級發酵:將所述菌種分別接種于盛有液體培養基的lOOOmL錐形瓶中，培養基 pH6.0~8.0，放入搖床振蕩，溫度為30°C，振蕩48~72h;從而獲得菌種數量分別達到108個/ mLW上的枯草芽抱桿菌（Bacillus subtil is )CICC10088,米曲霉（Aspergillus niger) CICC2436，白腐菌（Phanerochaete ch;rysospo;rium)ACCC30414、里氏木霉（Trichoderma reesei)ACCC30449。
[0015] 所述斜面培養基配方為：
[0016] 1.枯草芽抱桿菌采用的斜面培養基配方為:牛肉浸液1.化，蛋白腺lOg，化C15.0g， 瓊脂20.0-20.5g，PH7.2-7.4，牛肉浸液的制備：瘦牛肉洗凈，切碎，稱取550g浸泡于1375mL 水中，浸泡一夜，過濾，過濾分裝后0.化奸/cm2 40min備用。
[0017] 2.米曲霉采用的斜面培養基配方為：5 OBe麥芽汁瓊脂，5 OBe麥芽汁1.化，瓊脂 15.0g，自然PH。
[0018] 3.白腐菌的斜面培養基配方為:PDA培養基，取去皮的馬鈴馨200克，切成小塊，加 水1000毫升煮沸30分鐘濾去馬鈴馨塊，將濾液補足至1000毫升，加葡萄糖20克，瓊脂15克， 溶化后分裝，15磅滅菌30分鐘；自然PH。
[0019] 4.里氏木霉的斜面培養基配方:同白腐菌。
[0020] 所述液體培養基為斜面培養基不加瓊脂即可。
[0021] (二)混拌、發酵
[0022] 將步驟(一）制備好的有機物料腐熟劑按發酵物料總質量的5%。比例混合，再兌入 適量的水，使總水分控制在60 %左右，在發酵池經過5-10天發酵，即制得初肥；
[0023] 所述發酵具體為:將混合攬拌均勻的發酵物料放進發酵設施，壓實填滿排去空氣， 發酵池頂部覆蓋一層塑料薄膜，上蓋密封發酵、適時翻煤，翻堆時補充水分，將總水分控制 在60%左右，原料手握成團，指縫有水但不滴，而松手即散為好。
[0024] 在優選的技術方案中，步驟(二）的發酵時間是指:一般夏天4-5天，春秋6-7天，冬 季10天。
[0025] (Ξ)深加工
[0026] 將初肥進行粉碎、烘干，按初肥質量百分比，具體添加如下營養元素：
[0027] 氮3.0-4.0 %、憐1.0-2.5 %、鐘1.5-3.0 %、娃2.0-5.0 %、腐植酸類肥料5.0~ 10.0%;
[00%]優選情況下，添加營養元素的比例為：
[0029] a.大量元素(氮、憐、鐘)的添加比例:氮3.0%、憐1.5%、鐘2.0%;
[0030] b.微量元素(娃)的添加比例:3.0% ;
[0031] C.腐植酸類肥料的添加比例:5.0%。
[0032] (四）水稻專用促生長復合菌劑的制備
[0033] 將菌種數量分別達到108個/mLW上的枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis)ACCC 01183、巨大芽抱桿菌（Baci 1 lus megateriunOACCC 10010、地衣芽抱桿菌（Baci 1 lus lichenifo;rmis)CICC10037、膠質芽抱桿菌(Bacillus mucilaginosus)CGMCC 1.153的菌種 發酵液，按(30~40% ): (10~20% ):巧~10% ): (30~40% )的比例混合均勻后作為混合菌 劑，接種于盛有復合菌劑培養基B的發酵罐中，接種量為復合菌劑培養基B總體積的5%，復 合菌劑培養基B的pH 6.5~7.5，30°C下培養4~7天，使發酵液中總菌數達到6~10X 108個/ mL，即得到水稻專用微生物復合菌劑，抑為6.8，總有效活菌數為9 X 108個/mM
[0034] 所述復合菌劑培養基B的配方為：玉米粉15~18g/100mU豆粗粉5~8g/100mL、酵 母膏0.1 ~0.2g/100血、K出P〇4 0.2~2g/100mL、K2HP〇4 0.5~2g/100mL、MgS〇4.7出0 0.001 ~0.02g/100mL、NaCl 0.5~0.8g/100mL、（NH4)2S04 0.001 ~0.0 lg/lOOmL，其余為蒸饋水；
[0035] 所述步驟（四）的具體過程如下：
[0036] 1.接種:將所述各菌種(膠質芽抱桿菌、地衣芽抱桿菌、巨大芽抱桿菌、枯草芽抱桿 菌)分別接于斜面培養基上;膠質芽抱桿菌(鐘細菌)培養溫度25~35°C，pH為7.5~8.0,培 養時間為5天;地衣芽抱桿菌培養溫度25~30°C，pH為7.0~8.0,培養時間為5天；巨大芽抱 桿菌為27~37°C，pH為6.5~7.5，培養時間為4天;枯草芽抱桿菌培養溫度27~37°C，pH為 6.5~7.5，培養時間為4天；
[0037] 2.-級菌種培養:將所述步驟1制備的菌種分別按接種環一環的量接種于盛有相 應液體培養基的50mL錐形瓶中，培養基pH為6.5~7.5，錐形瓶放入搖床振蕩，溫度為30°C， 振蕩24~4她;采用血球計數板計數，菌液中菌種數量分別達到108個;
[0038] 3.二級發酵:將所述步驟2制備的菌種分別按5%接種于盛有液體培養基的lOOOmL 錐形瓶中，培養基抑6.5~7.5，放入搖床振蕩，溫度為30°C，振蕩48~72h;使菌種數量分別 達到108個/mLW上，從而制得菌種數量分別達到108個/mLW上的枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis)ACCC 01183、巨大芽抱桿菌（Bacillus megaterium)ACCC 10010、地衣芽抱桿菌 (Bacillus licheniformis)CICC10037、膠質芽抱桿菌（Bacillus mucilaginosus)CGMCC 1.153的菌種發酵液。
[0039] 所述水稻微生物復合菌劑制備過程中用到的斜面培養基配方為：
[0040] 1.膠質芽抱桿菌采用的斜面培養基配方為:K出Κ)4 0.06g、MgS化· 7出0 0.05g、 [0041 ] CaS〇4 ·甜2〇 0.004g、蛋白腺5g、玉米漿（50%干重）2.5g、乳糖 15g、化Cl 4g、蒸饋 水lOOOmL、瓊脂25g、抑 7.1;
[0042] 2.地衣芽抱桿菌采用的斜面培養基配方為：
[0043] 蛋白腺lO.Og，牛肉浸取物3.0g，氯化鋼5.0g，、瓊脂15g、蒸饋水lOOOmL、抑7.0;
[0044] 3.巨大芽抱桿菌采用的斜面培養基配方為：牛肉膏3g、蛋白腺5g、瓊脂15g、化C1 5邑、蒸饋水lOOOmL、抑7.0;
[0045] 4.枯草芽抱桿菌采用的斜面培養基配方為:牛肉膏lOg、蛋白腺10g、NaCl 5g、葡萄 糖lOg，瓊脂15g，蒸饋水lOOOmL，抑7.0;
[0046] 所述液體培養基配方為斜面培養基不加瓊脂制得。
[0047] (五）按步驟(Ξ)深加工所獲得的發酵物料總質量的3~5%。比例添加步驟（四）獲 得的水稻專用的促生長復合菌劑獲得終產品，將物料混合均勻后，經造粒機造粒或成粉，檢 測合格后，包裝入庫。
[0048] 對于上述技術方案，在優選的情況下，步驟(一)所述復合菌劑培養基A配方為：玉 米面0.5g/L、玉米賴桿粉 15g/L、教皮0.25g/L、豆餅粉0.25g/L、Vogel' S 母液4mL/100mL，抑 8.5〇
[0049] 對于上述技術方案，在優選的情況下，步驟（一）所述枯草芽抱桿菌（Bacillus subtil is )CICC10088,米曲霉（Aspergillus η ige;r)CICC2436，白腐菌（Phanerochaete c虹ysospo;rium)ACCC30414、里氏木霉(Trichoderma reesei)ACCC30449的菌種發酵液按2: 1:1:1的比例混合均勻。
[0050] 對于上述技術方案，在優選的情況下，步驟(二)所述發酵有機物料為粉碎的玉米 賴桿與動物糞便按1~2:0.5~2質量比混合，所述動物糞便通常為雞糞或牛糞。
[0051] 對于上述技術方案，在優選的情況下，步驟(Ξ)所述復合菌劑培養基B的配方為： 玉米粉 16g/100mL、豆粗粉7g/100mL、酵母膏0 . lg/100mL、K出P〇4 lg/100mL、K2冊〇4 Ig/ 100血、MgS〇4.7出0 O.Olg/lOOmL、化Cl 0.6g/100血、（NH4)2S04 O.Olg/100血，其余為蒸饋 水。
[0052] 本發明的技術方案是經過近幾年的不懈努力，結合水稻各個時期的生長特點及對 養分的需求，注意調節其營養生長與生殖生長的矛盾，最終研制出一種高效優質的生物有 機肥。其綜合運用了微生物技術、化肥工業和農業技術等最新成果，優先制備了一種高效的 富含有機質、N · P · K營養元素和某些微量元素、植物生長調節劑等物質有機結合起來，由 特定工藝最終形成了W有機質為主體的營養合理、N ·P · K比例適當的顆粒狀營養源。該種 肥料不僅具有高利用率、肥效期長的優點，而且具有改良±壤、提高農作物品質，增強作物 抗逆性，增加產量，減少污染，刺激作物生長發育等特點，省時省工，具有良好的社會效益和 經濟效益。
[0化3]有益效果
[0054] 本發明所述的水稻專用的有機復合生物肥是選用具有特定具有腐熟功能的菌種 制成菌劑，用此菌劑將有機固體物料發酵腐熟成初肥，再按適宜的比例添加大量元素(氮、 憐、鐘）、微量元素(娃)及其他特殊物質，再配W功效相應的促進水稻生長的菌劑及其他特 殊物質所制成的肥料。腐熟劑中含有大量的枯草芽抱桿菌、米曲霉、里氏木霉、白腐菌等，能 夠產生纖維素酶、木質素酶、半纖維素酶、蠟質素酶、果膠酶等多種生物酶，通過中溫菌和耐 高溫菌的協同作用，快速將各類廢棄的固體有機物料發酵腐熟成肥料，變廢為寶，節省資 源，大大減少了環境污染;又添加各類營養元素及水稻專用的促生長復合菌劑，通過對水稻 有特殊功效的有益微生物枯草芽抱桿菌、地衣芽抱桿菌、巨大芽抱桿菌、膠質芽抱桿菌等各 菌種之間的相互作用，起到刺激植物生長、緩解上地板結、改良上壤生態環境、從而達到增 產、高產的目的。
【具體實施方式】
[0055] 本發明的下述非限制性實施例可W使本領域的普通技術人員更全面地理解本發 明，但不W任何方式限制本發明。實施例中所用的生物材料均可W由商業途徑獲得。
[0056] 實施例一:水稻專用生物有機肥的制備
[0057] 本發明水稻專用的有機復合生物肥產品是指利用微生物技術，選配具有特定腐熟 功能的菌種制成菌劑，用此菌劑將有機固體物料發酵腐熟成初肥，再配W各種營養元素及 水稻專用的促生長復合菌劑所制成的生物肥料。其【具體實施方式】如下：
[0058] (一)有機物料腐熟劑的制備
[0059] 采用枯草芽抱桿菌（Bacillus subtilis)CICC10088,米曲霉（Aspergillus niger )CICC2436，白腐菌（Phanerochaete chrysospor ium) ACCC30414、里氏木霉 (化ichoderma reesei)ACCC30449等具有高效腐熟作用的菌種按適當的比例復合發酵而成 的腐熟困劑。
[0060] 1.菌種活化:將所述各菌種接于斜面培養基上;枯草芽抱桿菌28~32 °C，pH為7.2 ~7.4,培養時間為1~3天;米曲霉培養溫度25~28°C，抑為6.0~6.5,培養時間為4~7天； 白腐菌培養溫度25~28°C，培養時間為4~7天；
[0061] 2.-級菌種培養:將所述菌種分別接種于盛有液體培養基的50mL錐形瓶中，培養 基pH為6.0~8.0，錐形瓶放入搖床振蕩培養，溫度為30°C，振蕩24~48h;采用血球計數板計 數，菌液中菌種數量分別達到1〇8個/mL;
[0062] 3.二級發酵:將所述菌種分別接種于盛有液體培養基的lOOOmL錐形瓶中，培養基 PH6.0~8.0,放入搖床振蕩，溫度為30°C，振蕩48~72h;使菌種數量分別達到108個/mLW 上，將各菌種按所述菌種的質量百分比混合；
[0063] 4.Ξ級發酵：分別將枯草芽抱桿菌（Bacillus subtilis)CICC10088,米曲霉 (Aspergillus nige;r)CICC2436，白腐菌（Phanerochaete chrysospo;rium)ACCC30414、、里 氏木霉（Trichoderma reesei)ACCC30449的菌種發酵液按2:1: : 1:1的比例混合均勻后，接 種于盛有復合菌劑培養基的發酵罐中，復合菌劑培養基pH 6.0~8.0，接種量為5%，30°C下 培養4~7天，使發酵液中菌數達到108個/mL，即得到有機物料賴桿腐熟劑。
[0064] 所述斜面培養基配方為：
[0065] 1.枯草芽抱桿菌采用的斜面培養基配方為:普通瓊脂:牛肉浸液1.化，蛋白腺lOg， NaC15. Og，瓊脂20.0-20.5g，PH7.2-7.4，牛肉浸液的制備:瘦牛肉洗凈，切碎，稱取550g浸泡 于1375mL水中，浸泡一夜，過濾，過濾分裝后0.化奸/cm240min備用。
[0066] 2 .米曲霉采用的斜面培養基配方為：5° Be麥芽汁瓊脂，5° Be麥芽汁1.0L，瓊脂 15.0g，自然PH。
[0067] 3.白腐菌的斜面培養基配方為:PDA培養基，取去皮的馬鈴馨200克，切成小塊，加 水1000毫升煮沸30分鐘濾去馬鈴馨塊，將濾液補足至1000毫升，加葡萄糖20克，瓊脂15克， 溶化后分裝，15磅滅菌30分鐘。自然PH。
[0068] 4.里氏木霉的斜面培養基配方為：同白腐菌配方。
[0069] 所述液體培養基為斜面培養基不加瓊脂即可。
[0070] 所述復合菌劑培養基配方為：玉米面0.5g/L、玉米賴桿粉15g/L、教皮0.25g/L、豆 餅粉0.25g/L、4mL/100mL Vogel'S母液，pH值8.5。
[OOW 仁)混拌、發酵
[0072] 準備500kg粉碎的玉米賴桿與200kg牛糞作為發酵的原始有機物料，將制備好的有 機物料腐熟劑按發酵物料總質量的5%。兌入適量的水中，與有機物料均勻混拌，原料手握成 團，指縫有水但不滴，而松手即散為好(總水分在60%左右）。將混合攬拌均勻的發酵物料放 進發酵設施，壓實填滿排去空氣，發酵池頂部覆蓋一層塑料薄膜，上蓋密封發酵、適時翻煤， 翻堆時補充水分，將總水分控制在60%左右。經過10天發酵，即制得初肥。
[0073] (Ξ)各類營養元素的添加
[0074] 物料發酵完成后，按肥劑型要求進行粉碎、烘干，而后添加各類營養元素，包括大 量元素(氮、憐、鐘）、微量元素(娃），按發酵物料質量計算，具體添加比例如下：
[00對 a.大量元素(氮、憐、鐘)的添加比例:氮3.0%、憐1.5%、鐘2.0%;
[0076] b.微量元素(娃)的添加比例:3.0% ;
[0077] C.腐植酸錠的添加比例:5.0%。
[0078] (四）水稻專用促生長復合菌劑制備及添加
[00巧]采用膠質芽抱桿菌（Bacillus mucilaginosus)CGMCC 1.153，褐色球形固氮菌 (Azotobacter chroococcunOCGMCC 1.142，巨大芽抱桿菌（Bacillus megateriunOACCC 10010,枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis)ACCC 01183等具有特殊功效的菌種發酵液混合 后作為混合菌劑，經再次發酵而制備的微生物復合菌劑。
[0080] 所述的水稻微生物復合菌劑制備步驟如下：
[0081] 1.接種:將所述各菌種(膠質芽抱桿菌、地衣芽抱桿菌、巨大芽抱桿菌、枯草芽抱桿 菌)分別接于斜面培養基上;膠質芽抱桿菌(鐘細菌)培養溫度25~35°C，pH為7.5~8.0,培 養時間為5天;地衣芽抱桿菌培養溫度25~30°C，pH為7.0~8.0,培養時間為5天；巨大芽抱 桿菌為27~37°C，pH為6.5~7.5，培養時間為4天;枯草芽抱桿菌培養溫度27~37°C，pH為 6.5~7.5，培養時間為4天；
[0082] 2.-級菌種培養:將所述步驟1制備的菌種分別按接種環一環的量接種于盛有相 應液體培養基的50mL錐形瓶中，培養基pH為6.5~7.5，錐形瓶放入搖床振蕩，溫度為30°C， 振蕩24~4她;采用血球計數板計數，菌液中菌種數量分別達到108個;
[0083] 3.二級發酵:將所述步驟2制備的菌種分別按5%接種于盛有液體培養基的lOOOmL 錐形瓶中，培養基抑6.5~7.5，放入搖床振蕩，溫度為30°C，振蕩48~72h;使菌種數量分別 達到108個/mLW上，從而制得膠質芽抱桿菌(鐘細菌)發酵液、褐色球形固氮菌發酵液、巨大 芽抱桿菌發酵液和枯草芽抱桿菌發酵液。
[0084] 將各菌種按質量百分比混合后進行再次發酵：膠質芽抱桿菌（鐘細菌）發酵液 35%、巨大芽抱桿菌發酵液25%、地衣芽抱桿菌發酵液10%、枯草芽抱桿菌發酵液30%。
[0085] 4.Ξ級發酵:將所述步驟3制備的混合后的菌液接種于盛有復合菌劑培養基的發 酵罐中，復合菌劑培養基抑6.5~7.5，接種量為復合菌劑培養基總質量的5%，3(TC下培養 4~7天，使發酵液中菌數達到6~10 X108個/mL，即得到水稻專用微生物復合菌劑，pH為 5.0，菌數含量均達到109個/mL。
[0086] 所述斜面培養基配方為：
[0087] 1.膠質芽抱桿菌采用的斜面培養基配方為:K肥P04 0.06g、MgS04 · 7肥0 0.05g、
[0088] CaS〇4 ·甜2〇 0.004g、蛋白腺5g、玉米漿（50%干重）2.5g、乳糖 15g、化Cl 4g、蒸饋 水lOOOmL、瓊脂25g、抑 7.1;
[0089] 2.地衣芽抱桿菌采用的斜面培養基配方為:蛋白腺10.Og，牛肉浸取物3.Og，氯化 鋼5.0g，、瓊脂15g、蒸饋水lOOOmL、抑7.0;
[0090] 3.巨大芽抱桿菌采用的斜面培養基配方為：牛肉膏3g、蛋白腺5g、瓊脂15g、化C1 5邑、蒸饋水lOOOmL、抑7.0;
[0091] 4.枯草芽抱桿菌采用的斜面培養基配方為:牛肉膏lOg、蛋白腺10g、NaCl 5g、葡萄 糖lOg，瓊脂15g，蒸饋水lOOOmL，抑7.0;
[0092] 所述液體培養基配方為斜面培養基不加瓊脂制得。
[0093] 所述復合菌劑培養基配方為:玉米粉2~20g/100血、豆粗粉1~lOg/100血、酵母膏 0.05~0.2g/100血、K出P04 0.2~2g/100mL、K抽P〇4 0.5~2g/100血、MgS〇4.7出0 0.001 ~ 0.02g/100mL、NaCl 0.5~0.8g/100mL、（NH4)2S04 0.001 ~0.Olg/100血，其余為蒸饋水。
[0094] 按發酵物料總質量的4%。比例添加水稻專用的促生長復合菌劑，再次混合均勻。 [00M](五)造粒或成粉，檢測、包裝、入庫
[0096] 將物料混合均勻后，經造粒機造粒或成粉，檢測合格后，包裝入庫。
[0097] 實施例二:水稻專用有機復合生物肥在水稻上的應用效果
[0098] 采用本發明制備的水稻專用有機復合生物肥在水稻種植中應用的效果試驗：
[0099] 1.試驗目的
[0100] 水稻專用有機復合生物肥是大連Ξ科生物工程有限公司最新研制的針對水稻生 長有特殊功效的生物肥料，為明確其對水稻幼苗生長發育的影響，2015年我公司在水稻田 進行了田間小區試驗。
[0101] 2.試驗條件:試驗地點為粘壤±，地報勢平整，排灌方便，已種植水稻多年，有機質 含量2.6%，pH值7.0，±壤肥力中等。
[0102] 3.試驗材料與方法
[0103] 供試品種:秀水11〇(梗稻）
[0104] 試驗方法:試驗設置為兩組，采用隨機排列，分別Ξ次重復，每個試驗小區面積500 平方米。
[01化]所述的兩組處理：
[0106] ①對照組，常規施肥;②試驗組，嚴格按照有機復合生物肥產品使用說明施用。
[0107] 經實際調查，2015年水稻生育期自然條件較好，無特殊惡劣天氣，有利于水稻的生 長。
[0108] 4.調查記錄方法
[0109] ①水稻秩苗素質調查:移栽前5月5日在每處理小區取25株秩苗，做秩苗素質分析 (苗高、葉齡、根數、鮮重、充實度等）。
[0110] ②作物產量調查:水稻收獲后考種測產，分小區取樣估測產量，并且同時記錄水稻 千粒重及水稻株高。
[0111] 5.水稻畝產量計算方式:按下式進行
[0112] 水稻畝產量(公斤/畝）=每畝有效穗數X每穗實數X千粒重(克)/1000 X 1000
[0113] 6.本發明制備的水稻專用有機復合生物肥在水稻種植中應用的試驗結果見表1和 表2:
[0114] 表1.水稻專用有機復合生物肥對水稻秩苗素質的影響
[0115]
[0116] 從表1數據可W看出，試驗組的水稻秩苗株高、根數、葉齡、鮮重及充實度都明顯高 于對照組，因此說明施用水稻專用有機復合生物肥能夠使水稻秩苗根系發達、莖變粗，能提 局提局水稚秩苗的素質。
[0117] 表2.水稻專用有機復合生物肥對水稻產量及形狀影響
[011 引
[0119] 從表2數據可W看出，試驗組水稻株高、穗數千粒重等都明顯高于對照組，畝產量 也顯著提高，比對照組增加13.7%。因此說明，施用水稻專用有機復合生物肥不僅能提高水 稻的秩苗素質還能顯著提高水稻的產量。
[0120] 7.結論
[0121] 水稻施用水稻專用有機復合生物肥后，植株生長健壯，根系發達，葉片深綠，葉面 積增加，光合能力增強，水稻仔粒飽滿，且增產效果明顯，能顯著提高經濟效益和社會效益。
[0122] 水稻專用有機復合生物肥在水稻上的試驗效果證明，該產品可在水稻生產中擴大 示范面積，并進行大面積推廣使用。
【主權項】
1. 一種水稻專用的有機復合生物肥的制備方法，其特征在于： (一) 有機物料腐熟劑的制備 將菌種數量分別達到1〇8個/mL以上的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)CICC10088， 米曲霉（Aspergi 1 lus niger )CICC2436，白腐菌（Phanerochaete chrysosporium) ACCC30414、里氏木霉（Trichoderma reesei )ACCC30449的菌種發酵液按1 · 5~2 · 0:0 · 8~ 1.3:0.8~1.3:0.8-1.3的體積比混合均勻后，接種于盛有復合菌劑培養基A的發酵罐中，接 種量為復合菌劑培養基A總體積的5%，復合菌劑培養基A的pH 6.0~8.0，30°C下培養4~7 天，使發酵液中總菌數達到1〇8個/mL，即得到有機物料腐熟劑； 所述復合菌劑培養基A配方為：玉米面0.5~1.5g/L、玉米猜桿粉15~17g/L、麩皮0.2~ 0 · 4g/L、_a 餅粉0 · 2 ~0 · 4g/L、Vogel ' s母液4mL/100mL，pH 值6 · 0 ~8 · 0; (二) 混拌、發酵 將步驟(一）制備好的有機物料腐熟劑按發酵有機物料總質量的5%。比例混合，再兌入 適量的水，使總水分控制在60 %左右，在發酵池經過5-10天發酵，即制得初肥； (三) 深加工 將初肥進行粉碎、烘干，按初肥質量百分比，具體添加如下營養元素： 氮3.0-4.0%、磷 1.0-2.5%、鉀1.5-3.0%;硅2.0-5.0%;腐植酸類肥料5.0~10.0%; (四） 水稻專用促生長復合菌劑的制備 將菌種數量分別達到1 〇8個/mL以上的枯草芽孢桿菌(Baci 11 us subti 1 i s)ACCC 01183、 巨大芽抱桿菌（Bacillus megaterium)ACCC 10010、地衣芽抱桿菌（Bacillus licheniformis)CICC10037、膠質芽抱桿菌（Bacillus mucilaginosus)CGMCC 1 · 153的菌種 發酵液，按(30~40% ): (10~20% ): (5~10% ): (30~40% )的比例混合均勻后作為混合菌 劑，接種于盛有復合菌劑培養基B的發酵罐中，接種量為復合菌劑培養基B總體積的5%，復 合菌劑培養基B的pH 6.5~7.5，30°C下培養4~7天，使發酵液中總菌數達到6~10 X 108個/ mL，即得到水稻專用微生物復合菌劑，pH為6.8，總有效活菌數為9 X 108個/mL; 所述復合菌劑培養基B的配方為：玉米粉15~18g/100mL、豆栢粉5~8g/100mL、酵母膏 0.1 ~0.2g/100mL、KH2P04 0.2~2g/100mL、K2HP〇4 0.5~2g/100mL、MgS〇4.7H20 0.001 ~ 0 · 02g/100mL、NaCl 0 · 5~0 · 8g/100mL、（NH4)2S〇4 0 · 001 ~0 · 01g/100mL，其余為蒸餾水； (五） 按步驟(三)深加工所獲得的發酵物料總質量的3~5%。比例添加步驟（四）獲得的 水稻專用的促生長復合菌劑獲得終產品。2. 根據權利要求1所述的水稻專用的有機復合生物肥的制備方法，其特征在于，步驟 (一)所述復合菌劑培養基A配方為:玉米面0.5g/L、玉米秸桿粉15g/L、麩皮0.25g/L、豆餅粉 0·25g/L、Vogel's母液4mL/100mL，pH 7·2。3. 根據權利要求1所述的水稻專用的有機復合生物肥的制備方法，其特征在于，步驟 (一） 所述枯草芽抱桿菌（Bacillus subtil is )CICC10088,米曲霉(Aspergillus niger) CICC2436，白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414，里氏木霉（Trichoderma reesei )ACCC30449的菌種發酵液按2:1:1:1的比例混合均勻。4. 根據權利要求1所述的水稻專用的有機復合生物肥的制備方法，其特征在于，步驟 (二) 所述發酵有機物料為粉碎的玉米秸桿與動物糞便按0.5~1.5:0.2~1.0質量比混合。5. 根據權利要求1所述的水稻專用的有機復合生物肥的制備方法，其特征在于，步驟 (三)所述營養元素為氮3.0%、磷1.5%、鉀2.0%;硅3.0%;腐植酸類肥料5.0%，腐植酸類 肥料為腐植酸銨或者腐植酸鉀。6.根據權利要求1所述的水稻專用的有機復合生物肥的制備方法，其特征在于，步驟 (三）所述復合菌劑培養基B的配方為：玉米粉16g/100mL、豆栢粉7g/100mL、酵母膏0. lg/ 100mL、KH2P〇4 lg/100mL、K2HP〇4 lg/100mL、MgS〇4.7H20 0.01g/100mL、NaCl 0.6g/100mL、 (NH4)2S〇4 0.01g/100mL，其余為蒸餾水。
【文檔編號】C05F17/00GK106083444SQ201610383049
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年6月1日 公開號201610383049.9, CN 106083444 A, CN 106083444A, CN 201610383049, CN-A-106083444, CN106083444 A, CN106083444A, CN201610383049, CN201610383049.9
【發明人】崔昌娜, 崔國臣
【申請人】大連三科生物工程有限公司