一種蛹蟲草液體培養基及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于食用菌栽培領域，具體涉及一種蛹蟲草液體培養基及其制備方法。 技術背景
[0002] 利用蟲草液體培養生產蟲草替代品，既可有效保護蟲草這一珍貴資源，又不受氣 候、地理環境和蟲草寄生條件嚴格的限制，適合于工業化大規模生產。蟲草菌絲體中含有多 種活性成分，如蟲草多糖、膽留醇、真菌留醇、麥角留醇、腺嘌呤核苷、腺嘌呤、尿嘧啶、蛋白 質、多種氨基酸、硬脂酸、軟脂酸、D-甘露醇、維生素、有機酸和微量元素。人工生產出的替 代品如菌絲體其成分和藥效也與天然蟲草相似。目前蛹蟲草的人工培養仍然不能滿足人們 的需求，所以高產量蛹蟲草培養基一直是人們追求的。

【發明內容】

[0003] 為解決上述技術問題，本發明的目的在于提供一種蛹蟲草液體培養基及其制備方 法，該液體培養基培養出的蟲草菌絲體產量高，配方簡單，易于推廣，并且可以滿足人們提 高菌絲體產量的需求。
[0004] 為實現上述目的，本發明采用了如下技術方案：
[0005] 一種蛹蟲草液體培養基，其特征在于：它由糖、蠶蛹提取液、蛋白胨、磷酸二氫鉀、 磷酸二氫鈉、硫酸鎂和水組成，由蠶蛹提取液和蛋白胨聯合作為氮源。
[0006] 作為優選，所述蠶蛹提取液由蠶蛹粉加水，文火煮后冷卻，沉淀后用紗布過濾，濾 液尚心后，從而制得香蛹提取液。
[0007] 作為優選，各組分的濃度為：糖15-30g/L，蠶蛹提取液5-30 (蠶蛹提取液對應的蠶 蛹粉的重量）g/L;蛋白胨5-30g/L;磷酸二氫鉀1. 2-1. 5g/L;磷酸二氫鈉0. 8-1. 2g/L;硫酸 鎂lg/L。
[0008] 作為優選，各組分的濃度為：糖25g/L，蠶蛹提取液15-20 (蠶蛹提取液對應的蠶蛹 粉的重量）g/L;蛋白胨10_15g/L;磷酸二氫鉀1. 5g/L;磷酸二氫鈉lg/L;硫酸鎂lg/L。
[0009]作為優選，所述蠶蛹提取液（對應蠶蛹粉的質量）：蛋白胨的質量比為1-3 :1_2。
[0010] 作為優選，所述蠶蛹提取液（對應蠶蛹粉的質量）：蛋白胨的質量比為1-2 :1。
[0011] 作為優選，所述的糖是可提供碳源的碳水化合物，葡萄糖或麥芽糖。
[0012] 作為優選，所述蠶蛹提取液用的蠶蛹粉是用蠶蛹或繅絲后蠶蛹制得。
[0013] 一種蛹蟲草液體培養基的制備方法，其特征在于包括以下步驟：
[0014] 1)在蠶蛹粉中加入水，文火煮8-60min，冷卻、沉淀后用紗布過濾，取濾液；
[0015] 2)取蠶蛹提取液，加入糖、蛋白胨、磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉和硫酸鎂，攪拌溶解， 加入水定容至所需體積，分裝，121攝氏度1.IMpa下高壓滅菌20-30min，冷卻待用。
[0016] -種蛹蟲草液體培養基在蛹蟲草菌絲體培養中的應用。
[0017]本發明的有益效果是：本發明所述液體培養基培養出的蟲草菌絲體產量高，配方 簡單，易于推廣，并且可以滿足人們提高菌絲體產量的需求。
【附圖說明】
[0018]圖1是本發明不同培養基培養菌絲體質量的示意圖。
【具體實施方式】
[0019] 為使本發明實施例的目的、技術方案和優點更加清楚，下面將結合本發明實施例 中的附圖，對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例是 本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發明中的實施例，本領域普通技術人員 在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發明保護的范圍。
[0020] -種蛹蟲草液體培養基，它由糖、蠶蛹提取液、蛋白胨、磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉、 硫酸鎂和水組成，由蠶蛹提取液和蛋白胨聯合作為氮源。所述的糖是可提供碳源的碳水化 合物，葡萄糖或麥芽糖。所述蠶蛹提取液用的蠶蛹粉是用蠶蛹或繅絲后蠶蛹制得。本發明 所述蠶蛹提取液是在水中加入5-100g/L蠶蛹粉，文火煮后冷卻，沉淀后上清用紗布過濾， 濾液尚心后取上清，從而制得香蛹提取液。
[0021] 本發明所述各組分的濃度為：糖15-30g/L，蠶蛹提取液5-30 (蠶蛹提取液對應的 蠶蛹粉的重量）g/L;蛋白胨5-30g/L;磷酸二氫鉀1. 2-1. 5g/L;磷酸二氫鈉0. 8-1. 2g/L;硫 酸鎂lg/L。更為優選的，其各組分的濃度為：糖25g/L，蠶蛹提取液15-20 (蠶蛹提取液對應 的蠶蛹粉的重量）g/L;蛋白胨10-15g/L;磷酸二氫鉀1. 5g/L;磷酸二氫鈉lg/L;硫酸鎂lg/ L〇
[0022] 本發明所述的蠶蛹提取液（對應蠶蛹粉的質量）：蛋白胨的質量比為1-3 :1-2。更 為優選的，蛋白胨的質量比為1-2 :1。
[0023] 一種蛹蟲草液體培養基的制備方法，包括以下步驟：
[0024] 1)在蠶蛹粉中加入水，文火煮8-60min，冷卻、沉淀后用紗布過濾，取濾液；
[0025] 2)取蠶蛹提取液，加入糖、蛋白胨、磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉和硫酸鎂，攪拌溶解， 加入水定容至所需體積，分裝，121攝氏度、1.IMpa下高壓滅菌20-30min，冷卻待用。
[0026] -種蛹蟲草液體培養基在蛹蟲草菌絲體培養中的應用。
[0027] 實施例1
[0028] 一種蛹蟲草液體培養基及其制備方法，包括如下步驟：
[0029] 1、培養基的配制
[0030]A、蠶蛹提取液的配制
[0031] 按照5-100g/L稱取所需蠶蛹粉（優選30g/L)，加入水中攪拌均勻，文火 煮8-60min(優選30min)，冷卻、沉淀后用8-16層紗布過濾（優選8層），取濾液， 5000-10000rpm(優選8000rpm)離心5-10min(優選8min)，取上清，補水至初始加入水的體 積，混勻備用。
[0032]B、培養基配制
[0033]稱（量）取培養基各組分，培養基的組成成分為：葡萄糖或麥芽糖（優選葡萄 糖）15-30g/L，磷酸二氫鉀1. 2-1. 5g/L;磷酸二氫鈉0. 8-1. 2g/L，蠶蛹提取液0-50 (蠶蛹提 取液對應的蠶蛹粉的重量）g/L;蛋白胨0-50g/L;硫酸鎂lg/L。按下文中表1的比例稱取 以上各固體成分，加入對應比例的蠶蛹提取液，然后加入水混勻，定容到所需體積。本實施 例具體獲得如表1所示的10種不同培養基各3瓶，每瓶100ml。
[0034]表1各培養基成分表（單位g/100ml)
[0036] C、培養基滅菌
[0037] 將配置好的液體培養基高壓蒸汽滅菌1.lMpa、121°C、20min。冷卻后備用。
[0038] 2、一種蛹蟲草液體培養基的應用，
[0039] 1)蟲草菌絲體培養
[0040] 在超凈臺中或無菌狀態下接種蟲草菌體（菌種為Cordycepsmilitaris(L) Link)，液體菌種，密度控制在3-5個菌球/mL，按體積比1:100接種，每種培養基做三個重 復。在溫度22°C條件下避光靜置培養24h，然后22°C、170rpm繼續避光培養72h。
[0041] 2)收集菌絲體
[0042] 收集菌液，8000r/min離心lOmin，除去上清液，將沉淀（菌絲體）60°C烘干至恒重， 冷卻稱重，各種培養基獲得菌絲體重量如表2和圖1所示。
[0043] 表2各組分培養基培養菌絲體重量（單位g)
[0044]
[0045] 從實驗結果我們可以總結出，在相同培養條件下，蛋白胨和蠶蛹提取液同時作為 氮源同時添加時，其菌絲體的產量明顯高于只用蛋白胨和蠶蛹提取液其中一種作為氮源培 養基培養的菌絲體產量，且差異顯著。另外當蠶蛹提取物和蛋白胨同時添加到培養基時，當 蠶蛹提取物和蛋白胨的質量比例在1:2以上時菌絲體產量相對較高，其中當蠶蛹提取物和 蛋白胨的質量比例在時菌絲體產量最高。這里所說的蠶蛹提取物和蛋白胨的質量 比例是指制得培養基中所含蠶蛹提取液對應的蠶蛹粉的質量與蛋白胨的質量比。
[0046] 以上所述實施例僅是為充分說明本發明而所舉的較佳的實施例，本發明的保護范 圍不限于此。本技術領域的技術人員在本發明基礎上所作的等同替代或變換，均在本發明 的保護范圍之內。
【主權項】
1. 一種蛹蟲草液體培養基，其特征在于：它由糖、蠶蛹提取液、蛋白胨、磷酸二氫鉀、磷 酸二氫鈉、硫酸鎂和水組成，由蠶蛹提取液和蛋白胨聯合作為氮源。2. 如權利要求1所述的蛹蟲草液體培養基，其特征在于：所述蠶蛹提取液是在水中加 入5-100g/L蠶蛹粉，文火煮后冷卻，沉淀后上清用紗布過濾，濾液離心后取上清，從而制得 香蛹提取液。3. 如權利要求1所述的蛹蟲草液體培養基，其特征在于：各組分的濃度為：糖15-30g/ L，蠶蛹提取液5-30 (蠶蛹提取液對應的蠶蛹粉的重量）g/L ;蛋白胨5-30g/L ;磷酸二氫鉀 I. 2-1. 5g/L ;磷酸二氫鈉 0. 8-1. 2g/L ;硫酸鎂 lg/L。4. 如權利要求1所述的蛹蟲草液體培養基，其特征在于：各組分的濃度為：糖25g/L， 蠶蛹提取液15-20(蠶蛹提取液對應的蠶蛹粉的重量）g/L ;蛋白胨10-15g/L ;磷酸二氫鉀 I. 5g/L ;磷酸二氫鈉lg/L ;硫酸鎂lg/L。5. 如權利要求1所述的蛹蟲草液體培養基，其特征在于：蠶蛹提取液（對應蠶蛹粉的 質量）：蛋白胨的質量比為1_3 :1_2。6. 如權利要求5所述的蛹蟲草液體培養基，其特征在于：蠶蛹提取液（對應蠶蛹粉的 質量）：蛋白胨的質量比為1-2:1。7. 如權利要求1所述的蛹蟲草液體培養基，其特征在于：所述的糖是可提供碳源的碳 水化合物，葡萄糖或麥芽糖。8. 如權利要求1所述的蛹蟲草液體培養基，其特征在于所述蠶蛹提取液用的蠶蛹粉是 用蠶蛹或繅絲后蠶蛹制得。9. 一種如權利要求1-8任一項所述蛹蟲草液體培養基的制備方法，其特征在于包括以 下步驟： 1) 在蠶蛹粉中加入水，文火煮8-60min，冷卻、沉淀后用紗布過濾，取濾液； 2) 取蠶蛹提取液，加入糖、蛋白胨、磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉和硫酸鎂，攪拌溶解，加入 水定容至所需體積，分裝，121攝氏度、I. IMpa下高壓滅菌20-30min，冷卻待用。10. -種權利要求1-8中任一項所述蛹蟲草液體培養基在蛹蟲草菌絲體培養中的應 用。
【專利摘要】本發明涉及一種蛹蟲草液體培養基及其制備方法，其特征在于：它由糖、蠶蛹提取液、蛋白胨、磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉、硫酸鎂和水組成，由蠶蛹提取液和蛋白胨聯合作為氮源，其中各組分的濃度為：糖15-30g/L，蠶蛹提取液5-30(蠶蛹提取液對應的蠶蛹粉的重量)g/L；蛋白胨5-30g/L；磷酸二氫鉀1.2-1.5g/L；磷酸二氫鈉0.8-1.2g/L。本發明所述液體培養基培養出的蟲草菌絲體產量高，配方簡單，易于推廣，并且可以滿足人們提高菌絲體產量的需求。
【IPC分類】C05G1/00
【公開號】CN104973909
【申請號】CN201510319206
【發明人】陳劍清, 呂正兵, 蔣彩英, 舒特俊, 陳健, 聶作明, 舒建洪
【申請人】浙江理工大學
【公開日】2015年10月14日
【申請日】2015年6月11日