一種雄黃的微生物浸出液的制備方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于微生物浸礦技術，具體涉及雄黃的微生物浸出液的制備方法。
【背景技術】
[0002]近年來一項高新技術一一微生物浸礦技術已經朝氣蓬勃發展起來。它是借助某些微生物的催化作用，使礦石中的金屬溶解的濕法冶金過程，目前這項技術已成功運用于許多硫化礦物，如硫化猛礦、硫化銅礦、硫化金礦、硫化鈾礦和硫化镲礦等。雄黃是一種硫化礦物，存在溶解度小、生物利用度低、毒性大等問題。
[0003]氧化亞鐵硫桿菌(Th1bacillus ferrooxidans, T.f)是一種革蘭氏陰性菌，具有化能自養、好氣、嗜酸、適于中溫環境等特性，廣泛存在于酸性礦山水及含鐵或硫的酸性環境中。

【發明內容】

[0004]鑒于此，本發明目的在于提供一種雄黃的微生物浸出液的制備方法，該方法是利用微生物浸礦技術，制備雄黃的微生物浸出液。
[0005]為解決以上技術問題，本發明提供的技術方案是，提供一種雄黃的微生物浸出液的制備方法，所述微生物為氧化亞鐵硫桿菌，包括以下步驟:
[0006]a)菌種篩選
[0007]從酸性礦水中分離篩選出氧化亞鐵硫桿菌，
[0008]b)嗜酸氧化亞鐵硫桿菌的培養
[0009]取雄黃粉0.1g加入含有10ml浸出用9K培養基搖瓶中作為能源，按3 X 18 ?πιΓ1的濃度，10%的接種量加入氧化亞鐵硫桿菌，于25°C、搖床125rpm恒溫振蕩培養2_3天，培養液顏色逐漸變紅；
[0010]c)雄黃的微生物浸出液的制備
[0011]雄黃的微生物炮制在不含鐵的9K培養基中進行，室溫30 °C，130rpm搖床上培養30天，初始Fe2+濃度為1.0g.L—1;將炮制液3000rpm離心棄沉淀，上清液12000rpm離心兩次去除溶液中的氧化亞鐵硫桿菌，使用EDTA鈉鹽絡合溶液中的部分離子并調節溶液pH值至7.2，然后過0.22 μ m濾膜除菌得到雄黃的微生物浸出液。
[0012]優選地，所述雄黃粉的目度為100目。
[0013]與現有技術相比，上述技術方案中的一個技術方案具有如下優點:
[0014]本發明對氧化亞鐵硫桿菌進行了馴化，對礦物藥雄黃具有明顯的浸出作用，能夠較大限度地降解雄黃，實驗結果表明，雄黃經氧化亞鐵硫桿菌浸出30天后，As離子濃度達到986.2 μ g/ml，遠遠高于水飛的As離子濃度是82.7 μ g/ml。氧化亞鐵硫桿菌廣泛存在于酸性礦山水及含鐵或硫的酸性環境中，通過簡單的實驗就可以分離提取得到，無需進行生物保藏。
【具體實施方式】
[0015]下面結合一個具體實施例進行說明。
[0016]氧化亞鐵硫桿菌廣泛存在于酸性礦山水及含鐵或硫的酸性環境中，本實施例所用氧化亞鐵硫桿菌是從礦區酸性礦水中分離篩選得到。
[0017]取0.lg 100目雄黃粉加入含有10ml浸出用9K培養基搖瓶中作為能源，按3X 18 ^mr1的濃度，10%的接種量加入氧化亞鐵硫桿菌，于25°C、搖床125rpm恒溫振蕩培養2-3天，培養液顏色逐漸變紅。9K液體培養基:(NH4)2SO4, 3.0g ;KC1，0.1g ;Κ2ΗΡ04，0.5g ；MgSO4.7Η20，0.5g ；Ca(NO3)2,0.0lg ；FeS04.7H20，44.78g ;蒸餾水，100mL ；ρΗ1.8，121 °C 滅菌15min，加入經過濾除菌的質量分數為14.7%的FeSO4.7H20溶液300ml，5mol/LH2S0jjf節pH值為1.70。
[0018]雄黃的微生物炮制在不含鐵的9K培養基中進行，初始Fe2+濃度為1.0g.L'培養溫度為30°C，在130rpm搖床上培養30天。9K無鐵液體培養基:(NH4)2S043g，KCl 0.1g,K2HPO40.5g，MgSO4.7H20 0.5g，Ca(NO3)20.0lg，蒸餾水 1000ml，5mol/LH2S04調節 pH 值為
1.70，121°C滅菌 15min。
[0019]炮制完成后，將炮制液3000rpm離心棄沉淀，上清液12000rpm離心兩次去除溶液中的氧化亞鐵硫桿菌，使用EDTA鈉鹽絡合溶液中的部分離子并調節溶液pH值至7.2，然后過0.22 μ m濾膜除菌得到雄黃的微生物浸出液。
[0020]將浸出液稀釋后，利用電感耦合等離子體原子發射光譜測定浸出液中砷濃度，實驗結果表明，As離子濃度達到986.2 μ g/ml，遠遠高于水飛的As離子濃度是82.7 μ g/ml ο
【主權項】
1.一種雄黃的微生物浸出液的制備方法，所述微生物為氧化亞鐵硫桿菌，其特征在于，包括以下步驟: a)菌種篩選 從酸性礦水中分離篩選出氧化亞鐵硫桿菌， b)嗜酸氧化亞鐵硫桿菌的培養 取雄黃粉0.1g加入含有10ml浸出用9K培養基搖瓶中作為能源，按3X 18 ?πιΓ1的濃度，10%的接種量加入氧化亞鐵硫桿菌，于25°C、搖床125rpm恒溫振蕩培養2_3天，培養液顏色變紅； c)雄黃的微生物浸出液的制備 雄黃的微生物炮制在不含鐵的9K培養基中進行，室溫30 °C，130rpm搖床上培養30天，初始Fe2+濃度為1.0g噸―1;將炮制液3000rpm離心棄沉淀，上清液12000rpm離心兩次去除溶液中的氧化亞鐵硫桿菌，使用EDTA鈉鹽絡合溶液中的離子并調節溶液pH值至7.2，然后過0.22 μ m濾膜除菌得到雄黃的微生物浸出液。
2.根據權利要求1所述的雄黃的微生物浸出液的制備方法，其特征在于，所述雄黃粉的目度為100目。
【專利摘要】本發明公開一種雄黃的微生物浸出液的制備方法，所述微生物為氧化亞鐵硫桿菌，包括以下步驟：菌種篩選、嗜酸氧化亞鐵硫桿菌的培養、雄黃的微生物浸出液的制備三個步驟，本發明對氧化亞鐵硫桿菌進行了馴化，對礦物藥雄黃具有明顯的浸出作用，能夠較大限度地降解雄黃，實驗結果表明，雄黃經氧化亞鐵硫桿菌浸出30天后，As離子濃度達到986.2μg/ml，遠遠高于水飛的As離子濃度是82.7μg/ml。氧化亞鐵硫桿菌廣泛存在于酸性礦山水及含鐵或硫的酸性環境中，通過簡單的實驗就可以分離提取得到。
【IPC分類】C22B3-18
【公開號】CN104561542
【申請號】CN201410682323
【發明人】金京勛
【申請人】蘇州嘉禧蘿生物科技有限公司
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2014年11月24日