青黛的經油萃取的產物及其制備方法與用圖
【專利說明】
[00011本申請是申請日為2011年10月21日，申請號為201110328749.5,發明名稱為"青黛 的經油萃取的產物及其制備方法與用途"的申請的分案申請。
技術領域
[0002]本發明涉及一種青黛的經油萃取的產物及其制備方法，特別是涉及一種使用該青 黛的經油萃取的產物來治療干癬(特別是皮膚干癬以及指甲干癬）。
【背景技術】
[0003]干癬(psoriasis)[也被稱為銀肩病(Yin Xie Bing)]是一種與遺傳有關聯的慢性 發炎性皮膚病(chronic inflammatory skin disease)，它會侵犯全身的皮膚，其中較常見 的部位包括：頭皮、四肢的外側、手肘以及膝蓋等。干癬患者通常在皮膚上會出現紅色 (redness)且邊界明顯的丘疹(papular)或斑塊(plaque )，并且皮膚病灶的表面會覆蓋有銀 白色的鱗肩(silvery-white scale)，而部分患者甚至會同時并發關節炎等病狀。
[0004] 目前臨床上，干癬可依照患者的皮膚病狀而被區分為下面4種常見的類型：（1)慢 性斑塊性干癬（chronic plaque psoriasis)[也被稱為尋常性干癬（vulgaris psoriasis)]，它是所有干癬類型當中最為常見者，大約有80%-90%的干癬患者都是屬于 此種類型；（2)點滴狀干癬(guttatepsoriasis)，其特征在于病患的皮膚上會帶有多數小的 呈粉紅色或紅色的淚滴狀病灶(teardrop-shaped lesions)，通常發生于7歲至10歲的兒童 身上，并且大多數的患者在發病前的1至2周內曾遭受到一鏈球菌感染（streptococcal infection); (3)紅皮性干癬(erythrodermic psoriasis)，其特征在于患者的全身或超過 90 %的體表面積上的皮膚會出現紅斑(erythema)或剝落(exf 〇 I iat ion)的現象，而嚴重者 可能會全身搔癢（itching)，并且伴隨有發燒(fever)以及不適(malaise)，甚至引起全身性 的急性膿皰性干癬（generalized acute pustular psoriasis);以及（4)膿皰性干癬 (pustular psoriasis)，其可分為全身性胺皰性干癬（generalizedpustular psoriasis) 與局部膿皰性干癬（local ized pustularpsoriasis)[例如，掌妬膿皰癥（pustulosis palmaris et plantaris)以及稽留性肢端皮膚炎（acrodermatitis perstans)] 〇
[0005] 此外，大約有10%的干癬患者會并發干癬性關節炎化8〇1^31：；[031'1：111'；[1^8)，它是 一種會影響患者的韌帶（ligaments)、腱（tendons)、筋膜(fascia)以及脊椎或周邊關節 (spinal or peripheral joints)的CD8T細胞驅動的自體免疫發炎（CD8T cell-driven auto immune inf lammat ion );而有高達90%的干癬患者曾經患有指甲干癬（nail psoriasis)0
[0006] 由于干癬的病理狀況與癥狀相當復雜，至今對于它的發病機制(pathogenesis)仍 不清楚，已有研究顯示:遺傳（inheritance)在干癬的發病機制上扮演一個重要的角色，而 外傷(trauma)、感染（infection)、壓力（stress)、內分泌因素 （endocrine factors)、代謝 因素 (metabolismf actors)、氣候以及藥物等都可能誘發或者加重干癬的發病。干癬患者一 旦發病，此病將會終其一生反復地發作而無法根除。
[0007] 現今西方醫學大多是依照干癬患者的年齡、性別、職業、智力、病灶的形態與分布 情形、對于先前所采用的療法的反應以及其它相關病史等來采用最適當的治療方式，而主 要的治療方式包括：
[0008] (1)局部性療法（topical therapy):例如，皮質類固醇（corticosteroids)、蒽三 酸(anthralin)(商品名稱為Marg丨ton')、煤焦油（coal tar)(商品名稱為Po i ytar*)、 促鈣三醇（calcitriol)(商品名稱為S M k ? S.u )、他扎羅汀（tazarotene)(商品名稱為 Taz.〇_r.a<3?;)以及水楊酸(salicylic acid)等，它們適用于具有輕微病況的干癬患者；
[0009] (2)全身性療法（systemic therapy):例如，胺甲碟呤(methotrexate，MTX)、環抱 素（〇5^1〇8。01'；[11)以及類視色素(代1：；[110丨(18)等口服制劑(0瓜]^代。3抑1：；[0118)，它們適用于 具有中度至嚴重病況的干癬患者；
[00?0] (3)生物制劑（biologies)的注射：例如，阿法賽特（alefacept)(商品名稱為 知BviveK!)、依法利珠單抗(efalizumab)(商品名稱為Rapt i va?)、依那西普(etanercept) (商品名稱為En b r e I )以及阿達木單抗(Ad a I i mumab)(商品名稱為H um丨r a?:)，它們也適 用于具有中度至嚴重病況的干癬患者；以及
[0011] (4)光療法（phototherapy ):例如，紫外線B光療法[ultraviolet B(UVB) phototherapy]、光化學療法（photochemotherapy)[諸如，補骨脂素加紫外線A(psoralen plus ultraviolet A，PUVA)]等，它們適用于具有嚴重病況的干癬患者。
[0012] 然而，長期使用上述的治療方式可能會導致患者產生嚴重的副作用（side effect)或藥物耐受性(drug tolerance)，進而降低順從性(compliance)。有鑒于此，已有 許多研究人員嘗試從傳統中藥(1：抑(1；[1：；[01^101；[116 86 1116(1；[(3；[116 8，1'0\0中來尋找可用于治 療干癬的活性組分(activecomponents) 0
[0013]青黛[英文名稱為：indigo naturalis或natural indigo;漢語拼音為：qing dai; 中文俗名為:靛花(dian hua)、青蛤粉(qing ge fen)、青缸花(qing gang hua)、藍露（lan lou)、淀花（dian hua)以及靛沫花(dian mo hua)等]是一種從靛藍-生成植物（indigo-producing plant) [諸如 ，爵床科植物馬藍 (Baphicacanthus Cusia(Nees)Bremek.) 、寥科 植物寥藍（Polygonum tinctorium Lour.)以及十字花科植物務藍（lsatis indigotica Fort.)等]的葉子中所萃取出的呈深藍色的植物色素。青黛在傳統中醫學的臨床使用上具 有清熱涼血（clearing the heat and cooling the blood)的功用，而在現代醫學的臨床 使用上則常被用來治療慢性骨髓白血病（chronic myeloid leukemia)、干癬、聰腺炎 (mumps)、各種潰瘍[例如消化性潰瘍（pepticulcer)、口腔潰瘍（oral ulcer)等]、肝炎 (hepatitis)、帶狀皰疼(herpes zoster)以及外耳道炎(otitis external)等。
[0014]已知從得自于不同的靛藍-生成植物的青黛中可以分離出各種活性成分，其中較 常見的有靛藍（indigo )、靛玉紅（indirubin)以及異靛藍（isoindigo)等。有研究發現，靛玉 紅具有抗腫瘤（anti-tumor)、抗發炎（anti-inflammation)以及免疫調節 (immunomodulation)等功效，并且被認為具有發展成為一供用于治療阿茲海默癥 (Alzheimer's disease)的藥物的潛力（G.Eisenbrand et al.(2000)，J.Cancer Res . Cl in . Oncol.,130：627-635；T.Kunikata et al.(2000),European Journal of Pharmacology,410:93-100；N.K.Mak et al.(2004),Biochemical Pharmacology,67：167- 174;S.Leclerc et al.(2001)，The Journal of biological Chemistry，276:251_260)。 [0015]已有文獻報導，青黛的水溶性(water solubility)較差，因此目前最常使用有機 溶劑來萃取青黛，以獲得各種活性成分。在Q.S.Zhang et al.(2006)，J Guangxi Normal University:Natural Science Edition，24:58-60中，Q·S·Zhang等人主要是分別以75%乙 醇、氯仿（chloroform)、乙酸乙酯（ethyl acetate)以及丙酮(acetone)來萃取青黛，借此而 得到4種不同的有機萃取物，繼而比較所述有機萃取物中所含有的靛玉紅的含量。經由實驗 結果顯示：當使用乙酸乙酯來進行青黛的萃取時，所得到的靛玉紅的含量最高，其次分別是 使用丙酮、氯仿以及75%乙醇。
[0016] 有研究發現，青黛的經有機溶劑萃取的產物（organic solvent-extracted product of indigo naturalis)具有顯著的抗發炎(anti-inflammation)或抗干癬(anti-psoriasis)的活性。例如，在 Y.K.Lin et al.(2009)，Journal of Dermatological Science ,54:168-174中，Y.K. Lin等人將青黛粉末以一為1:10(w/v)的比例溶于二甲亞砜 (dimethylsulfoxide，DMS0)中，繼而借由過濾來滅菌而得到一青黛的經DMSO萃取的產物。 該青黛的經DMSO萃取的產物被證實會減少經培養的正常人類表皮角質細胞(normal human epidermal keratinocyte，NHEK)的細胞數目，并且會促使該NHEK細胞的細胞周期是停滯在 G0/G1期(GO/Glphase)。此外，該青黛的經DMSO萃取的產物中所含有的2種主要活性成分(也 就是靛藍以及靛玉紅)也被證實能引起角質細胞的細胞周期停滯，而其中僅有靛玉紅可以 調控增生細胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA)以及套膜蛋白 (involucrin)的表現。因此，Y.K.Lin等人認為：該青黛的經DMSO萃取的產物主要是以靛玉 紅作為活性成分來調控角質細胞的增生(proliferation)以及分化(differentiation)，借 此達到抗干癬的效用。
[0017]雖然青黛的經有機溶劑萃取的產物具有抗干癬的效用，但是在臨床使用上需要進 一步將有機溶劑去除后才能被制成一可供人類個體使用的藥物。因此，申請人嘗試利用各 種不同的植物油來進行青黛的萃取，而由此所得到的青黛的經油萃取的產物（oil-extracted product of indigo naturalis) 在經由臨床試驗后被證實可以有效地治療干 癬(特別是皮膚干癬以及指甲干癬）。
[0018] 由此可見，上述現有的青黛的經油萃取的產物及其制備方法與用途在產品結構、 方法與使用上，顯然仍存在有不便與缺陷，而亟待加以進一步改進。為了解決上述存在的問 題，相關廠商莫不費盡心思來謀求解決之道，但長久以來一直未見適用的設計被發展完成， 而一般產品及方法又沒