脫氧核糖核酸酶在制備用于治療男性低生育力的藥物中的應用
【專利說明】脫氧核糖核酸酶在制備用于治療男性低生育力的藥物中的 應用
[0001 ] 本申請是申請日為2007年10月18日的PCT國際申請PCT/IL2007/001250的分案申 請，原申請為發明專利申請，進入國家階段的申請號為200780043824.5,名稱為"用于診斷 和治療男性低生育力的方法和藥物組合物"。
技術領域
[0002] 本發明設及方法和藥物組合物，更具體而言，本發明設及用于診斷和治療男性低 生育力的方法和藥物組合物。
【背景技術】
[0003] 下面是認為與理解本發明有關的現有技術參考文獻的列表。本文中有時會通過在 括號中指出來自如下列表的運些參考文獻的編號來確認它們。
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[0018] 今天，在西方世界大約五對夫妻中有一對具有低生育力。低生育力被定義為在I年 無保護性交后受孕失敗。在所有低生育力夫妻中，大約由一半觀察到了男性低生育力，并且 在運些夫妻中幾乎有40%的低生育力完全出于男性因素。
[0019] 男性生育力狀況通過精液分析來評價。最普通的分析，稱作"常規精液分析"，提供 了所射出的精液中的精子數、活動的（和/或前向活動的）精細胞的比例和形態學正常的細 胞百分比。男性低生育力通常與精子生成量低（少精子癥）、精子活力弱（弱精子癥)和異常 精子形態（崎形精子癥）中的一個或多個有關。所有運=個缺陷的組合（"精子品質不良癥 (oligoasthenoteratoZoospermia)"，0TA)是男性低生育力的最常見因素。受孕的概率隨著 精子濃度、活動性和正常形態的提高而增加。世界衛生組織(WHO)已提出指定運些參數的用 于將精液樣本分為正常或異常的闊值的指南。
[0020] 然而，常規精液分析有許多限制，從而造成很大比例的患者表現出原因不明的低 生育力。為改進診斷，已開發了提供與人類精液的授精潛力有關的更多信息的額外測試。運 些測試包括各種精細胞功能性測試(11 )、作為"活動精子細胞器形態學測定"的功能性形態 學測試(MS0ME，12)和測試精細胞中DNA損傷程度的測試，例如，精子染色質結構分析(SCSA， 11)。
[0021] 在某些情形中，男性低生育力的成因是已知的。它們包括精索靜脈曲張、激素素 亂、感染、免疫性不育、男性生殖道梗阻和隱睪癥。目前的醫藥治療和外科手術治療可用于 運些情況（1)。然而，在大量的男性低生育力情形中，其成因是未知的。在運些情形中，可W 對低生育力的男性施加各種治療(通常在特定基礎上）。運些治療包括抗雌激素、芳香化酶 抑制劑、雄激素、F甜(促卵泡激素）、己酬可可堿(pentoxyphylline)、精氨酸、肉毒堿、谷脫 甘膚、維生素(A、C和E)和寡聚礦物質(鋒、砸）（1)。
[0022] 當男性不育的治療在合理的一段時間后沒有導致懷孕，或如果診斷指標顯示在生 育力狀況上沒有改善可能，則可W考慮輔助生育技術(ART)。各種輔助生育方法通過避開女 性生殖道下游或上游的某些或全部遷移屏障W及卵子投入來增強精子授精潛力。目前常見 的ART方法包括宮腔內人工授精（1111，2,3)、經典體外受精（1￥尸，4,5)和1￥尸-卵胞質內單精 子注射（IVF-ICSI，6)。ICSI的改進是稱作"卵胞質內形態學選擇注射"（IMSI，7~9)的技術， 在該技術中，通過高倍顯微鏡測定活動精子的精細形態學并選擇展示出最好核形態的精子 用于ICSI。
[0023] 已顯示來自各種物種精細胞在體外結合和吸收外源性DNA(13KDNA結合至少部分 由存在于精細胞表面上的CD4和MHCII分子介導，并且被存在于精液中的糖蛋白IF-I所括 抗。精子與細胞外的無細胞DNA(cell free DNA)的相互作用激活了切割精子基因組DNA的 細胞內核酸酶(如DNA酶），最終導致類似于細胞調亡的細胞死亡過程。
[0024] 從1965年起，牛DNA酶1(1型脫氧核糖核酸酶）已經在臨床中使用。在前蘇聯國家 中，它被用來治療由DNA病毒(如瘤疹病毒和腺病毒)造成的感染。據信DNA酶將病毒DNA降解 為單個核巧酸和寡聚核巧酸。該藥物通常用于治療II型單純瘤疹病毒(生殖器瘤疹)感染、 由單純瘤疹病毒造成的瘤疹眼部感染、帶狀瘤疹感染、呼吸道炎癥(如支氣管炎癥和肺炎W 及肺結核）。對于運些應用，或通過肌內注射、吸入或W滴眼來施用所述藥物。重組人類DNA 酶I是另一種臨床使用的DNA酶I。它是通過吸入施用抑A認證藥物來治療囊性纖維化(CF)患 者。在運些患者中，粘脈性分泌物在氣道中的滯留既造成肺功能降低又造成感染加重。粘脈 性分泌物含有非常高濃度的由變性白細胞釋放的細胞外DNA，該變性白細胞響應感染而積 累。DNA酶I水解CF患者的疲中的DNA并降低疲的粘彈性（14)。

【發明內容】

[0025] 本發明基于W下新的意外發現，即存在于男性血液循環中的無細胞脫氧寡核巧酸 的高水平與低生育力有關，并且外源性無細胞DNA的施用降低了精子質量并導致低生育力。 本發明人因此發現，對低生育力的男性提供DNA酶可W改善精液質量和生育潛力。
[0026] 根據本發明的第一方面，提供了用于治療男性低生育力的藥物組合物。本