一種雞胚肽及其制備方法與在制備消炎、祛痘、黑發再生的產品中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明設及生物技術領域，尤其設及一種雞胚膚及其制備方法與在制備消炎、桂 痘、黑發再生的產品中的應用。
【背景技術】
[0002] 氨基酸是含有氨基和簇基的一類有機化合物的通稱。其中，甘氨酸(GLY)具有提高 肌肉活力，對人體有補益等營養作用；亮氨酸化EU)有促進皮膚、傷口愈合的作用；蛋氨酸 (met)具有去脂的功能，能促進皮膚蛋白質的合成;酪氨酸(TYR)有治療神經性炎癥效果，參 與修復皮膚的炎癥。與色素形成有關系，缺乏時會利白化癥;組氨酸化IS)對過敏性皮膚有 修復效果;蘇氨酸(T皿)人體必需，缺乏時會使人消瘦;丙氨酸(ALA)能促進血液中酒精的代 謝(分解)作用增強肝功能;異亮氨酸（ILE)能維持機體平衡，有促進食欲的增加的作用;色 氨酸(TRY)促進血紅蛋白的合成，防治皮膚病，促進細胞生長;脫氨酸(CYS)有修復皮膚的損 傷，對脫發有療效;賴氨酸化YB)參與結締組織、微血管上皮細胞間質的形成，并保持正常的 滲透性;天口冬氨酸(ASP)對肌肉和皮膚有保護作用;鄉氨酸(VAL)促使神經系統功能正常， 如果缺乏時，會造成觸覺敏感度特別提高；苯丙氨酸(P皿)在機體內轉變為酪氨酸，促進甲 狀腺素和腎上腺素的合成;脯氨酸(PRO)對高血壓有療效作用;絲氨酸(S邸)能降低血液中 的膽固醇濃度，有抗菌作用;谷氨酸(GLU)有保護皮膚濕潤，如配制的化妝品，對皮膚、粘膜 元及細胞復蘇有很好的作用，適于幼兒及皮膚病患者使用;精氨酸(ARG)可增加肌肉活力， 保持機體的正常功能。
[0003] 膚是a-氨基酸W膚鍵連接在一起而形成的化合物，它也是蛋白質水解的中間產 物。多膚與蛋白質之間并無明顯的界限，通常，根據氨基酸殘基的數量，2~10個氨基酸組成 的膚稱為寡膚(或稱小分子膚）；10~50個氨基酸組成的膚稱為多膚；由50個W上的氨基酸 組成的膚為大膚。
[0004] 雞胚即雞的胚胎，是受精雞蛋解化至一定天數后，還未破殼的可食用雞蛋。研究表 明，雞胚中包含的營養成分包括蛋白質、多膚、氨基酸、碳水化合物(葡萄糖、果糖、半乳糖、 阿拉伯糖、巧喃糖等）、脂類、脂肪酸等。另外，雞胚中還包括抗感染成分和生物活性物質。所 述的抗感染成分有球蛋白、干擾素、胎兒蛋白、溶菌酶和憐酸二醋酶;所述的生物活性物質 有唾液酸、兒苯酪胺、膜島素樣生長因子-1、膜島素、激膚酶、組胺酶、膽堿、紅細胞生成素、 脫氧核糖核酸酶和核糖核酸酶等。相對于未解化的雞蛋，雞胚中營養成分，特別是小分子蛋 白或多膚的含量更加豐富，而對人體不理的脂肪、膽固醇等含量則大幅下降。
[000引雞胚營養豐富，具有潛在的護膚、保健和藥用價值。但目前對雞胚中膚的研究目前 還較少，應對其在化妝品、保健品、藥品的研究中進行進一步的開發和利用。

【發明內容】

[0006]有鑒于此，本發明要解決的技術問題在于提供一種雞胚膚及其制備方法與在制備 消炎、桂痘、黑發再生的產品中的應用。本發明提供的雞胚膚具有良好的抗紫外效果，能夠 保護細胞在紫外照射下正常生長，且對細胞生長有促進作用。
[0007] 本發明提供的雞胚膚，包括雞胚膚和游離氨基酸；其中，雞胚膚的分子量小于 SOkDaO
[0008] 本發明制得的雞胚膚中，共檢測到活性膚404條，分別來自98種不同的蛋白質。根 據PSMs(Peptide-Spectral Match)，運些蛋白質主要為：0valbumin(登錄號P01012)、 Apolipoprotein B(登錄號Q197X2) ,Ovotransferrin(登錄號E1BQC2)、Histone 冊.2 (登錄 號P84229)、Vitellogenin-2(登錄號P02845)、登錄號為E1BTF4的蛋白、Apovitellenin-I (登錄號P02659)、0voglobulinG2 type AB(登錄號I0J174)、0voglobulinG2(登錄號 I0J170)和Al地a-1-acid glycop;rotein(登錄號A7肥BO)。
[0009] 本發明的雞胚膚中，雞胚膚的濃度為0.1 g/iiL。
[0010] 本發明提取得到的雞胚膚中包括18種游離氨基酸，其中包括巧中必需氨基酸，分別 為蘇氨酸、鄉氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸和色氨酸。另外還包括11種非必需 氨基酸，分別為天冬氨酸、絲氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、蛋氨酸、酪氨酸、組氨酸、精氨 酸、脫氨酸和脯氨酸。
[00川本發明的雞胚膚中，游離氨基酸的濃度為14.3mg/mL。
[0012] 本發明提供的雞胚膚的制備方法包括:將雞胚去殼、勻漿后，破碎細胞;經木瓜蛋 白酶酶解后，離屯、收集上清液，截留分子量小于SOkDa的組分。
[0013] 本發明所采用的雞胚為解化至14~19天的雞胚。
[0014] 具體的，雞胚的獲取方式為，取SPF級受精雞蛋，放入解化箱內進行解化，解化溫度 控制在37.5°C，相對濕度60 %，每2小時自動翻蛋一次，待解化至14~19天，作為優選，采用 解化至16~17天的雞胚。
[0015] 受精雞胚解化至14天~19天的雞胚的胚胎處于干細胞高度增長期，各種組織器官 基本形成。在雞胚的解化過程中，蛋白質的代謝十分劇烈，解化期間，蛋白質和多膚的含量 呈持續上升狀態。研究表明，在解化的第14天~19天，雞胚中蛋白質和多膚的增加幅度最 大，細胞因子類多膚最多，游離氨基酸的含量也在此期間達到最高。
[0016] 制備雞胚多膚前，解化雞胚停止解化。具體為，將解化雞胚放置于-20°C停止解化。
[0017] 本發明中，所述勻漿采用組織勻漿機。
[0018] 具體為:將解化至Hd~19d的雞蛋表面消毒，去除蛋殼后W組織勻漿機勻漿。作為 優選，勻漿的溫度為4°C，時間為20min轉速為2500轉/分。
[0019] 經組織勻漿，雞胚組織粉碎，細胞在勻漿機的機械作用下初步破碎。為了進一步破 碎細胞，進行凍融和超聲破碎。
[0020] 在本發明實施例中，破碎細胞包括凍融和超聲破碎的步驟；
[0021 ] 凍融的冷凍溫度為-20°C~-40°C，時間為60h~80h;溶解溫度為4°C~8°C;
[0022] 超聲破碎的溫度為4°C~8°C，功率為800W~1200W，時間為15min~25min。
[0023] 在一些實施例中，破碎細胞包括凍融和超聲破碎的步驟；
[0024] 凍融的冷凍溫度為-30°C，時間為72h;溶解溫度為4°C;
[00巧]超聲破碎的溫度為4°C，功率為1000W，時間為20min。
[0026]凍融使細胞在冷凍-融化的過程中，由于細胞內形成冰粒而使剩余胞液的鹽濃度 增高而引起細胞破碎。本發明中，溶解的溫度為4°C，溶解至細胞勻漿融化。經凍融后，細胞 膜進一步的破裂，再進行超聲波破碎，從而使細胞膜的破碎程度更加完全，提高了活性膚的 提取效率。
[0027] 在本發明中，經過超聲破碎的組織勻漿與等體積的水混合后，進行酶解。
[0028] 所述酶解指在組織勻漿與膜酶共同解育，使蛋白質發生分解的過程。
[0029] 本發明中，酶解時膜酶的質量分數為2.5%。即將膜酶加入組織勻漿至質量分數為 2.5%。
[0030] 在本發明中，膜酶的酶活力為37000u/g。
[0031 ] 在本發明中，酶解的溫度為45°C~55°C，pH值為7.3~7.7，酶解時間為40min~ 80min。
[0032] 在一些實施例中，酶解的溫度為50°C，pH值為7.5,酶解時間為化。
[0033] 離屯、