一種減輕流感病毒感染引起機體損傷的藥物的制作方法
【技術領域】
[0001 ]本發明涉及免疫學及流行病學領域，具體地說，涉及一種減輕流感病毒感染引起機體損傷的藥物。
【背景技術】
[0002]流感是人類最常見的傳染病之一，流感病毒隨著在禽類、家畜和人類之間的循環而不斷變異，出現跨物種屏障的新重組病毒的威脅永遠存在。
[0003]為了進一步研究流感病毒的致病機制，通常需要構建流感病毒感染BALB/c動物模型，直接從感染人體中分離出的流感病毒，最初并不有效地感染小鼠，需要不斷在小鼠體內傳代，使毒株的毒力和致病力改變，制成鼠肺適應株，從而建立流感病毒的小鼠感染模型。有些強毒株不需要進行受試動物的體內連續傳代，即可直接感染受試動物，建立感染模型。如孫惠惠(A/California/7/2009與A/California/4/2009病毒感染力比較，鮑琳琳等；中國比較醫學雜志，2010.01)建立的BALB/c小鼠H1N1流感病毒(A/California/7/2009)的動物模型，未經過BALB/c小鼠體內的連續傳代即建立了感染模型。
[0004]目前，關于流感以及流感病毒的臨床研究通常不按照性別進行數據分析，或者實驗動物根本不報道性別。本發明提供流感病毒感染動物后兩性間病原發生情況的不同，以及這種差異是由于性激素對于炎癥免疫反應的效應差異引起的。本發明擬通過小鼠染毒試驗，研究雄性激素與流感病毒和宿主免疫系統的關系，力圖在雄性激素和流感病毒和宿主的致病的分子機理研究上有新的突破，為防治流感的新藥篩選和臨床治療提供理論依據和靶標。

【發明內容】

[0005]本發明的目的是提供一種減輕流感病毒感染引起機體損傷的藥物。
[0006]為了實現本發明目的，本發明的一種減輕流感病毒感染引起機體損傷的藥物，其有效成分為雄性激素。
[0007]優選地，本發明的一種減輕流感病毒感染引起機體損傷的藥物，其有效成分為二氫睪酮(DHT)。
[0008]所述藥物中還含有維生素C(VC)，DHT和VC的質量比為1:2-10，優選1:4。
[0009]本發明所述的藥物為溶液劑、乳劑、混懸劑、針劑等劑型。
[0010]更優選地，所述藥物是將二氫睪酮和維生素C溶解于玉米胚芽油中制成的針劑。所述針劑的單次劑量單元為:二氫睪酮0.5-1.5mg/kg體重；維生素C 2_10mg/kg體重，優選4mg/kg體重。采用皮下注射的方式給藥。
[0011]本發明還提供上述針劑的制備方法:按比例稱取DHT、VC，加入玉米胚芽油中，攪拌1小時左右，待DHT和VC完全溶解，即得。
[0012]本發明還提供雄性激素在制備用于減輕流感病毒感染引起機體損傷的藥物中的應用。
[0013]本發明還提供二氫睪酮在制備用于減輕流感病毒感染引起機體損傷的藥物中的應用。
[0014]本發明通過將流感病毒感染雄性小鼠，并使用雄性激素處理小鼠，發現處理組比對照組發病率及死亡率低，隨后進行病理學檢測及肺泡灌注液(BALF)中炎細胞總數和各種炎癥細胞比例的分析，并通過細胞水平實驗驗證組織病理的實驗結果。
[0015]本發明首次揭示了流感病毒感染后雄激素對雄性小鼠的保護作用，該機制的發現具有較強的臨床意義，可以為雄性流感的預防措施和治療方法優化提供堅實的基礎。
【附圖說明】
[0016]圖1為本發明實施例1中各實驗組小鼠感染WSN病毒后體重、體溫、存活率的變化情況。
[0017]圖2為本發明實施例1中各實驗組的小鼠肺泡灌注液中總細胞數量和中性粒細胞、巨噬細胞及淋巴細胞比例的變化圖。
[0018]圖3為本發明實施例1中感染WSN病毒9天后解剖小鼠所得肺部組織切片。
[0019]圖4為本發明實施例1中感染WSN病毒9天后肺泡巨噬細胞中Ml和M2相關Marker的表達情況。
【具體實施方式】
[0020]以下實施例用于說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。若未特別指明，實施例中所用的技術手段為本領域技術人員所熟知的常規手段，所用原料均為市售商品。
[0021 ] 本發明中使用的維生素C，化學名稱L-抗壞血酸，簡寫VC，CAS N0.50-81-7，分子式ΟθΗβΟθ，分子量 176.12。
[0022]實施例1雄性激素在制備用于減輕流感病毒感染引起機體損傷的藥物中的應用
[0023]用于減輕流感病毒感染引起機體損傷的針劑，針劑配方如下:DHT0.0125g、VC
0.05g、玉米胚芽油50mL。
[0024]按比例稱取DHT、VC，加入玉米胚芽油中，攪拌1小時左右，待DHT和VC完全溶解，SP得。
[0025]①小鼠感染流感病毒:將2-3月齡、體重約25g的雄性C57BL/6鼠隨機分成實驗組1、實驗組2、實驗組3，每組10只。乙醚輕度麻醉后，三個實驗組小鼠滴鼻接種流感病毒WSN病毒液50yl(3000pfu，)。三個實驗組小鼠接種病毒后，實驗組1小鼠皮下注射玉米胚芽油(oil)
0.lmL，實驗組2小鼠皮下注射含lmg DHT的玉米胚芽油0.lmL，實驗組3小鼠皮下注射含lmgDHT和4mg VC的玉米胚芽油0.lmL。然后每天記錄小鼠體溫體重情況，以檢測小鼠染病率及致死率。
[0026]各實驗組小鼠感染WSN病毒后體重、體溫、存活率的變化情況如圖1所示。從圖1可以看出，DHT組和DHT+VC組能夠抑制病毒的感染，能夠提高小鼠的存活率。
[0027]結果表明，DHT+VC組比單藥DHT組效果更好，其中DHT+VC組中，按DHT lmg/kg體重/d，VC 4mg/kg體重/d給藥效果最顯著。
[0028]圖2為各實驗組小鼠肺泡灌注液中總細胞數、中性粒細胞、巨噬細胞及淋巴細胞比例的變化圖。
[0029]③感染WSN病毒9天后解剖小鼠，進行病理切片分析肺部炎癥反應的程度。
[0030]各實驗組小鼠肺部組織切片見圖3。
[0031]④分離感染WSN病毒9天后的小鼠肺泡巨噬細胞，檢測促炎相關的Ml巨噬細胞的Marker和抑制炎癥相關的M2巨噬細胞的Marker.如圖4所示，細胞水平實驗表明，DHT處理和DHT+VC處理可抑制肺泡巨噬細胞中Ml巨噬細胞的Marker表達，而促進M2巨噬細胞的Marker的表達。
[0032]組織和細胞水平的實驗結果均表明，本發明制備的針劑能夠通過抑制肺部的炎癥反應，從而有效地降低雄性小鼠病毒的感染，能夠抑制小鼠感染后的發病率，提高小鼠的存活率。
[0033]雖然，上文中已經用一般性說明及具體實施方案對本發明作了詳盡的描述，但在本發明基礎上，可以對之作一些修改或改進，這對本領域技術人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發明精神的基礎上所做的這些修改或改進，均屬于本發明要求保護的范圍。
【主權項】
1.一種減輕流感病毒感染引起機體損傷的藥物，其特征在于，其有效成分為雄性激素。2.根據權利要求1所述的藥物，其特征在于，其有效成分為二氫睪酮。3.根據權利要求2所述的藥物，其特征在于，所述藥物中還含有維生素C，二氫睪酮和維生素C的質量比為1:2-10，優選1:4。4.根據權利要求1-3任一項所述的藥物，其特征在于，所述藥物為溶液劑、乳劑、混懸劑、針劑。5.根據權利要求4所述的藥物，其特征在于，其是將二氫睪酮和維生素C溶解于玉米胚芽油中制成的針劑。6.根據權利要求5所述的藥物，其特征在于，單次劑量單元為:二氫睪酮0.5-1.5mg/kg體重;維生素C 2-10mg/kg體重，優選4mg/kg體重。7.雄性激素在制備用于減輕流感病毒感染引起機體損傷的藥物中的應用。8.二氫睪酮在制備用于減輕流感病毒感染引起機體損傷的藥物中的應用。
【專利摘要】本發明提供一種減輕流感病毒感染引起機體損傷的藥物，所述藥物的有效成分為雄性激素。優選地，所述藥物的有效成分為二氫睪酮。本發明首次揭示了流感病毒感染后雄激素對雄性小鼠的保護作用，該機制的發現具有較強的臨床意義，可以為雄性流感的預防措施和治療方法優化提供堅實的基礎。
【IPC分類】A61P31/16, A61K31/566, A61K31/375
【公開號】CN105456276
【申請號】CN201510958363
【發明人】李向東, 郭仰東, 姚建飛
【申請人】中國農業大學
【公開日】2016年4月6日
【申請日】2015年12月18日