3，5-二叔丁基水楊酸銅在制備用于治療高轉移性乳腺癌藥物中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明設及醫藥技術領域，具體地指一種3,5-二叔下基水楊酸銅在制備用于治療 高轉移性乳腺癌藥物中的應用。
【背景技術】
[0002] 乳腺癌是目前全世界婦女中最常見的癌癥。全球每年大約有50萬人死于乳腺癌， 對婦女的生命和生活質量已經構成了嚴重的威脅。乳腺癌也成為了中國女性最常見的癌 癥;每年中國乳腺癌新發數量和死亡數量分別占全世界的12.2%和9.6 %。隨著生活節奏加 快和工作壓力的加重，乳腺癌患者呈現低齡化和高發的態勢。目前對于乳腺癌的治療主要 采用手術切除、化療等方式，但對于高轉移性的乳腺癌，現有的治療手段均無法獲得良好的 治療效果。
[0003]抑制乳腺癌細胞的轉移和侵襲是治療轉移性乳腺癌的關鍵，因此有效抑制乳腺癌 細胞轉移和侵襲的藥物是治療轉移性乳腺癌的希望。一種有效治療轉移性乳腺癌的新藥將 會給轉移性乳腺癌患者和家人帶來希望，并減輕患者的痛苦，提高生活質量，另一方面還可 W減輕社會的經濟負擔。
[0004]申請號為201410280227.6的中國專利中公開了金屬絡合-(3,5-二叔下基水楊酸） (金屬為化、Fe、Al、化、化、Mg、化)作為一種常用的抗靜電劑和荷電控制劑，廣泛應用于除靜 電領域和墨粉制造行業。現有技術中報道，微量元素Cu的某些馨合物包括3,5-二異丙基水 楊酸銅化2(3,5-dips)2對腫瘤的促進和形成過程具有抑制作用，但未披露該馨合物的具體 應用，因此應用于臨床需要進一步研究。

【發明內容】

[000引本發明的目的就是要解決上述【背景技術】的不足，提供一種3,5-二叔下基水楊酸銅 在制備用于治療高轉移性乳腺癌藥物中的應用，有效抑制癌細胞的轉移。
[0006]本發明的技術方案為：
[0007]3,5-二叔下基水楊酸銅在制備用于治療高轉移性乳腺癌藥物中的應用。
[000引3,5-二叔下基水楊酸銅的分子結構式如下式(I)所示。
[0009]
[0010] 優選的，所述3,5-二叔下基水楊酸銅的給藥劑量為離體時10-25μΜ。
[0011] 優選的，3,5-二叔下基水楊酸銅制成的藥物類型為注射劑、粉針劑、口服劑、口含 片、噴霧劑、膠囊、栓劑中的一種。
[0012] 所述的3,5-二異丙基水楊酸銅可W制成治療高轉移性乳腺癌復方藥物，也可W單 獨制成治療高轉移性乳腺癌藥物。
[0013] 本發明中高轉移性乳腺癌細胞是指MDA-MB-231和ΒΤ-20細胞。本發明中，通過"劃 痕愈合"法檢測了3，5-二叔下基水楊酸銅對MDA-MB-231和ΒΤ-20細胞遷移能力的影響，結果 顯示3,5-二叔下基水楊酸銅對104-18-231和81'-20細胞的遷移能力顯示濃度依賴性的抑 審IJ。然后，在高濃度血清誘導下，檢測高轉移性乳腺癌MDAMB-231細胞透過"Chamber小室"能 力的改變并給W藥物處理2地后，結果顯示藥物在10~25M濃度內，濃度依賴性抑制MDA-MB-231 細胞侵襲能力 。綜合實驗結果分析 ，確定藥物 3 ， 5-二叔下基水楊酸銅可W用于特異性預 防和治療高轉移性乳腺癌。
[0014] 本發明的有益效果為：
[0015] 1.對3,5-二叔下基水楊酸銅發掘了新的醫療用途，開拓了一個新的應用領域。
[0016]2.制備3，5-二叔下基水楊酸銅的原料3，5-二叔下基水楊酸、銅鹽來源廣泛，制得 的3，5-二叔下基水楊酸銅純度高，能夠保證工業化生產。
[0017] 3.3,5-二叔下基水楊酸銅配置成的藥物可為多種劑型，如:注射劑、粉針劑、口服 劑、口含片、噴霧劑、膠囊、栓劑等。
【附圖說明】
[0018]圖1為3，5-二叔下基水楊酸銅對MDA-MB-231和BT-20細胞的轉移能力的影響
[0019] 圖2為3,5-二叔下基水楊酸銅對MDA-MB-231細胞的侵襲能力的影響。
【具體實施方式】
[0020] 下面結合附圖和具體實施例對本發明作進一步的詳細說明。
[0021 ] 3,5-二叔下基水楊酸銅對MDA-MB-231和BT-20細胞的轉移能力的影響
[002引 1.實驗材料
[0023] 1.1細胞株
[0024] 人乳腺癌細胞株MDA-MB-231和BT-20購自中國典型培養物保藏中屯、（China CenterforTypeCultureCollection,CCTCC)〇
[002引1.2藥品及試劑 3, 5-二叔下基水楊酸銅 由鼎巧化學合成 DMSO 類NSigma公I|:1廣|試
[0026]DMEM、1640及胎牛血清 美國訪bco產品 青霉素-鏈霉素溶液 安特捷生物技術有限公司 MTT 類NSigma公lij產品 膜蛋白酶 碧云天生物技術研究所 超凈實驗臺SZX型 上海浦東躍欣科儀廠
[0027] (:化培養箱HH，CP型 上海博迅實業有眼公司 微量移液槍 P2.5等 大龍醫療設備有限公司
[0028] 2.實驗方法：
[0029] 2.1細胞培養
[0030] 人高轉移性乳腺癌細胞株MDA-MB-231用含有10%FBS、青霉素100yg/ml、鏈霉素 100μg/ml的1640培養液于37°C，C〇2體積分數為5 %的細胞培養箱內培養。
[0031 ] 2.2"劃痕愈合"法檢測不同濃度藥物對MDA-MB-231細胞遷移能力的影響
[0032] 取對數生長期MDA-MB-231和BT-20細胞W2X105個/孔的細胞密度接種于6孔培養 板中，置于細胞C〇2培養箱內培養6-化待細胞貼壁后，用白色槍頭劃痕，分別加入不同濃度 的3，5-二叔下基水楊酸銅，終濃度為ΙΟμΜ，25μΜ，對照組加同樣體積（1ml)的1640培養液，繼 續培養7化或96h，觀察處理后遷移速率的改變，并對獨立重復試驗結果進行統計分析，
[0033] 如圖1所示，其中圖A和B均為MDA-MB-231細胞，C和D均為BT-20細胞，[Cu(salH)2化20)2]指3,5-二叔下基水楊酸銅溶解后形成的銅鹽，圖中control表示對照組，lOiiM和25μΜ 表示加入3,5-二叔下基水楊酸銅后溶液終濃度為lOiiM和25μΜ，結果顯示3,5-二叔下基水楊 酸銅抑制了MDA-MB-231和ΒΤ-20細胞遷移。
[0034] 3,5-二叔下基水楊酸銅對MDA-MB-231細胞的侵襲能力的影響 [003引 2.實驗材料
[0036] 1.1細胞株(上述轉移能力實驗）
[0037] 1.2藥品及試劑 3, 5-二叔了基水楊酸銅 由鼎龍化學合成 Transwellchamber 尖間Comi口g公Iij DMSO 類NSigma公！I'j產品 DMEM、1640及撇牛血請 美國G化co產品
[0038] 膜蛋白晦 碧云天生物技術研究所 PBS 博古德生物有限公司 壓力蒸汽滅菌鍋YX-400B 上海Η申醫療器械有限公司 焚光顯微鏡1X71 掃本餅ympus公司 倒置顯微鏡永新XD-2胞 南京江南永新光學有限公司
[0039] 2.1Transwell法檢測細胞侵襲能力的改變
[0040]取對數生長期MDA-MB-231細胞W2X105個/孔的細胞密度接種于6孔培養板中，置 于細胞C〇2培養箱內培養6-化待細胞貼壁后，分別加入不同濃度的3，5-二叔下基水楊酸銅， 終濃度為1〇μΜ，25μΜ，對照組加同樣體積對應的培養液，繼續培養24h，將細胞收集制成細 胞懸液并轉1XΙΟ5個細胞到Transwe11chamber上室中（上室為無血清培養基），下室中加 200μ1含10%FBS(胎牛血清）的培養基，繼續培養2化后，棄去上室中的培養基并用棉簽擦拭 確保培養基清除完全，再每孔加入1〇化1甲醇，解育2min后，用5%的結晶紫溶液染色5min， 最后用PBS(憐酸緩沖液)漂洗兩次。拍照計數，如圖2所示，結果顯示3,5-二叔下基水楊酸銅 可W濃度依賴性的抑制MDA-MB-231細胞侵襲能力。
【主權項】
1.3,5_二叔丁基水楊酸銅在制備用于治療高轉移性乳腺癌藥物中的應用，所述3,5_二 叔丁基水楊酸銅的分子結構式如下式(I)所示。2. 如權利要求1所述的3，5-二叔丁基水楊酸銅在制備用于治療高轉移性乳腺癌藥物中 的應用，其特征在于，所述3，5-二叔丁基水楊酸銅的給藥劑量為離體時10-25μΜ。3. 如權利要求1所述的3，5-二叔丁基水楊酸銅在制備用于治療高轉移性乳腺癌藥物中 的應用，其特征在于，所述3,5_二叔丁基水楊酸銅制成的藥物類型為注射劑、粉針劑、口服 劑、口含片、噴霧劑、膠囊、栓劑中的一種。
【專利摘要】本發明公開了3，5-二叔丁基水楊酸銅在制備用于治療高轉移性乳腺癌藥物中的應用及3，5-二叔丁基水楊酸銅的給藥劑量，本發明通過實驗證明了3，5-二叔丁基水楊酸銅可抑制乳腺癌細胞的轉移，濃度依賴性的抑制乳腺癌細胞侵襲。本發明對3，5-二叔丁基水楊酸銅發掘了新的醫療用途，開拓了一個新的應用領域。
【IPC分類】A61K31/60, A61P35/00
【公開號】CN105412125
【申請號】CN201510780189
【發明人】徐金華, 柳昀熠, 范麗梅, 童玉華
【申請人】江漢大學
【公開日】2016年3月23日
【申請日】2015年11月13日