益智葉提取物在制備預防、治療肝損傷保健品或藥物上的應用
【技術領域】[0001] 本發明屬于中藥技術領域，具體涉及一種益智葉提取物在制備預防、治療肝損傷保健 品或藥物上的應用。
【背景技術】
[0002] 肝臟疾病是影響人類健康的最為常見的疾病之一，從各種途徑進入人體的外源性 化學物質和人體代謝產生的有毒有害物質最終都在肝內轉化或貯留，這些均可引起急性、 慢性肝損傷，從而導致肝細胞不同程度凋亡、炎癥、纖維化、甚至壞死等病理改變。肝損傷是 多種因素如毒物（cci4、ap、1C)的中間產物與大分子物質共價結合、缺氧、脂質過氧化、細胞 內鈣穩態失調和內毒素相互作用的結果，而非單一的作用。
[0003] 對于肝臟疾病的治療應包括：去除致病因素、保護肝臟正常結構和功能、糾正各種 病理生理的狀態，以及改善和緩解臨床癥狀等。目前，對肝臟疾病的防治已為全世界所關 注，如何進行有效地預防，不斷地開發和尋找療效肯定、價格低廉的保肝護肝藥成為許多醫 藥工作者的普遍共識。從天然植物中篩選出具有保肝護肝的藥物現已成為研究熱點。
[0004]四氯化碳（CC14)肝損傷模型是化學性肝損傷的經典模型，能準確反映肝細胞的功 能、代謝及形態學變化，具有重復性好等特點，是研究化學性急性肝損傷動物模型中的常用 模型。公認的其誘導肝損傷的機制為：四氯化碳（CC14)在肝細胞內質網上細胞色素P450 的作用下轉化為自由基，該自由基可以與細胞內的生物大分子如核酸、蛋白、脂質發 生共價結合，影響細胞重要的生理過程(如影響脂質代謝，與DNA的結合等)。在有氧環境 下，?CC13與氧結合生成活性更強的CC1 302 ?，后者可引發脂質的過氧化鏈式反應，破壞多 不飽和脂肪酸，尤其在含豐富磷脂的細胞膜和膜樣結構如線粒體和內質網上，導致膜通透 性的改變，引起細胞內鈣環境穩態的紊亂，從而加重細胞損傷。
[0005] 肝細胞損傷后，主要分布在肝細胞內的谷草轉氨酶（GOT)和谷丙轉氨酶（GPT)就 會流入血液，出現血清中的GOT和GPT活性升高的現象，且只要有1%肝細胞壞死，就可使血 清中GPT活性升高1倍。因此，血清GOT和GPT常作為急性或活動性肝病中最敏感的檢測指 標，兩者含量可用于肝病的篩查，也可用于判斷、評價肝病的臨床療效。MDA是脂質過氧化終 產物，可嚴重破壞細胞膜結構，導致細胞腫脹、凋亡、甚至壞死，其含量高低可反應氧化的損 傷程度。S0D是細胞內主要清除自由基的抗氧化酶，其可抑制自由基啟動脂質過氧化反應， 從而保護細胞膜。因此，MDA含量與S0D活性可作為衡量脂質過氧化程度的指標，間接反映 機體組織、細胞損傷的程度。通過檢測小鼠肝組織勻漿中的S0D活性及MDA含量可反映出 藥物對肝細胞的保護作用。因此，以血清GPT、G0T、肝組織S0D活性及MDA含量作為指標來 探討藥物對肝臟的保護作用是非常有意義的。
[0006]益智（WjOiWaMiq.)，系姜科（Zingiberaceae)山姜屬（WjOiWa Roxb.)植物，主要分布于我國海南、廣東、廣西等地。其干燥成熟果實益智（Fructus AlpiniaeOxyphyllae)，被譽為四大南藥之一，具有十分重要的藥用價值，且屬于藥食同源 品種，因此具有十分廣闊的開發前景。益智果實作為一門傳統中藥，被歷版《中國人民共和 國藥典》收載，其味辛、性溫，歸脾、腎經。有溫脾止瀉，攝唾涎，暖腎，固精縮尿的功能。主治 脾寒泄瀉，腹中冷痛，口多唾涎，腎虛遺尿，小便頻數，遺精白濁。
[0007]近年來，對益智（J力Miq.)的研究報道較多，也更系統，其中主要 是對益智果實的研究。益智果實的傳統功效被我國歷代中醫藥學家熟練地運用于臨床，而 近年來對其又有了新的進展。現代藥理學研究表明，益智果實還具有舒張血管、強心、抗癌、 抗過敏、抗氧化、抗衰老、抗潰瘍、鎮靜、鎮痛、提高免疫力以及神經保護等多方面藥理活性。 益智果實中主要成分為倍半萜類、其次為黃酮類、二芳基庚烷類、留醇及其苷類化合物。
[0008] 查閱大量文獻可發現，對益智的葉子研究報道較少。易美華等研究發現，經提取揮 發油后的益智果實及其莖、葉的提取物對豬油脂質均有較強的抗氧化作用；且均對超氧陰 離子自由基有清除作用，清除能力依次為：益智的葉、益智的莖、提取揮發油后的益智果實。 但目前關于益智葉提取物用于治療肝損傷方面的研究并未見報道。

【發明內容】

[0009] 本發明目的在于提供一種益智葉提取物在制備預防、治療肝損傷保健品或藥物上 的應用。
[0010] 基于以上目的，本發明采用以下技術方案： 益智葉提取物在制備預防、治療肝損傷保健品或藥物上的應用。
[0011] 具體的，所述益智葉提取物為益智葉的乙酸乙酯部位萃取物和/或正丁醇部位萃 取物。
[0012] 具體的，所述益智葉提取物是由如下方法制得：取干燥益智葉，剪碎，然后加入到 乙醇中（使益智葉完全浸沒于乙醇中），加熱提取，提取液經濃縮干燥得乙醇總浸膏；將乙醇 總浸膏分散于水中，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，萃取液揮干溶劑，分別得到乙酸乙酯部 位萃取物、正丁醇部位萃取物。
[0013] 上述制備乙醇總浸膏時，加入的乙醇濃度為75V%，加熱溫度不超過55°C(以55°C 為宜)，加熱提取3次，每次3h。
[0014] 為證實上述益智葉萃取物的保肝作用，本發明采用了四氯化碳誘導小鼠急性肝損 傷模型，考查其對肝損傷的預防和/或治療作用。試驗結果表明：益智葉乙酸乙酯部位萃取 物及正丁醇部位萃取物均具有一定保肝活性。
【附圖說明】
[0015] 圖1為益智葉不同部位萃取物不同劑量對小鼠血清GPT與GOT活力的影響； 圖2為益智葉不同部位萃取物不同劑量對小鼠肝組織中MDA含量的影響； 圖3為益智葉不同部位萃取物不同劑量對小鼠肝組織中S0D活力的影響。
【具體實施方式】
[0016] 以下結合實施例對本發明的技術方案作進一步地詳細介紹，但本發明的保護范圍 并不局限于此。
[0017] 實施例1 益智葉的乙酸乙酯部位萃取物是由以下方法獲得：取3400 g干燥益智葉，剪碎后，加 入75V%乙醇(每次加入的乙醇體積均以完全浸沒益智葉為準)，55°C提取3次，每次3 h，過 濾，合并濾液，濃縮干燥即得益智葉乙醇總浸膏，得率見表1。將乙醇總浸膏分散于少量水 中，用等體積的乙酸乙酯溶劑進行萃取，收集萃取液，揮干溶劑乙酸乙酯，即得乙酸乙酯部 位萃取物，得率見表1。
[0018] 實施例2 益智葉的正丁醇部位萃取物由以下方法獲得：取實施例1中乙酸乙酯萃取過后的剩余 溶液，再用正丁醇進行萃取，收集萃取液，揮干溶劑正丁醇，即得正丁醇部位萃取物，得率見 表1。
[0019] 表1益智葉不同部位萃取物的得率情況
效果實驗：益智葉提取物的保肝護肝試驗 1.1實驗動物：成年昆明小鼠，雌雄各半，體重20 ± 2g。
[0020] 1. 2主要試劑：谷草轉氨酶（GOT，批號20150709)、谷丙轉氨酶（GPT，批號 20150709)、超氧化物歧化酶（S0D，批號20150717)、丙二醛（MDA，批號20150718);以上試 劑均為南京建成生物工程