預防、治療創傷性腦損傷的藥物組合物的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種預防、治療的腦部疾病的藥物組合物，尤其涉及用于預防、治療創 傷性腦損傷的藥物組合物。
【背景技術】
[0002] 腦血管疾病是當今世界嚴重危害人類生命健康的主要疾病之一，是我國的常見 病、多發病。創傷性腦損傷（traumaitcbraininjury，TBI)是神經外科領域常見的急癥之 一，尤其是重型TBI，死亡率達到30%-50%;即便存活下來，其中輕度損傷患者中的10% 會遺留永久殘疾，中度和重度患者可達到66%和100%。據統計，TBI目前已成為全世界 35歲以下青壯年人群第一位死亡和致殘原因。在我國，隨著經濟的快速發展，交通運輸業、 建筑業、體育事業發展十分迅速，交通事故、建筑工傷、運動意外事故等意外傷害大大增加， 由此造成腦外傷的發病率逐年增高，對社會和病人家庭造成極大的經濟和心理負擔。近20 年來，有興奮性氨基酸學說、Ca2+超載學說、血管損傷學說等，但依據這些理論設計和制 造的許多神經保護劑，療效不佳。深入研究TBI具體的病理機制及保護機制，開拓有效治 療TBI的藥物已成為不容忽視的社會性問題，研發理想的TBI保護劑和治療策略顯得十分 緊迫和必要。
[0003] 基因重組人表皮生長因子（recombinanthumanEpidermalGrowth Factor,rhEGF)在醫學上有顯著的創傷修復、愈合傷口等功效。近年來發現，rhEGF在美容 產品領域也有廣闊的應用前景，具有促進皮膚細胞更新、防止皮膚衰老等功能。組蛋白脫 乙酰酶（HDAC)抑制劑斯克瑞泰（Scriptaid)用于治療創傷性腦損傷在現有技術中已經 有記載，但是藥理作用顯示，低劑量使用時效果不十分顯著。本發明研究發現，rhEGF對創 傷性腦損傷大鼠有治療作用，與Scriptaid組成的復方制劑在治療創傷性腦損傷時具有協 同作用，從而為創傷性腦損傷的治療提供了新思路，其作用機理有待于進一步研究。

【發明內容】

[0004] 本發明的目的在于提供一種用于預防、治療創傷性腦損傷的藥物組合物，其中包 括活性成分rhEGF，斯克瑞泰和藥學可接受載體。
[0005] 本發明還進一步提供一種用于預防、治療創傷性腦損傷的注射劑，包括rhEGF，斯 克瑞泰，抗氧劑，助溶劑，pH調節劑。
[0006] 作為優選，斯克瑞泰的含量為l_20g/L，rhEGF含量為5_15g/L，助溶劑含量為 5-20g/L，抗氧化劑含量為10-15g/L，pH調節劑濃度為0. 05-0. 5mol/L。
[0007] 作為優選，抗氧劑包括但不限于亞硫酸氫鈉，維生素C，谷胱甘肽中的一種或多種； 助溶劑優選鹽酸半胱氨酸；PH調節劑優選磷酸緩沖液。
[0008] 本發明還提供一種用于預防、治療創傷性腦損傷的注射劑的制備方法，包括如下 步驟： 1).向斯克瑞泰中加入注射用水，加熱至斯克瑞泰完全溶解，得到斯克瑞泰溶液； 2) .向斯克瑞泰溶液中加入助溶劑，抗氧化劑和pH調節劑，攪拌溶解； 3) .向所述混合溶液中加入醫用活性炭，過濾得到濾液； 4) .向濾液中加入rhEGF，補加注射用水，灌裝，滅菌得成品。
[0009] 本發明的藥物組合物在使用時根據病人的情況確定用法用量，如一日1-3次。
[0010] 所述的TBI疾病包括：由作用于腦底或脊柱的物理力，局部缺血，中風，呼吸停止， 心跳停止，腦血檢形成或檢塞，AIDS所致神經障礙，和大腦出血，腦脊髓炎，腦積水，術后事 件，腦感染，震蕩或顱內壓升高所引起的創傷性腦損傷，和/或上述病癥的后遺癥。
[0011] 本發明的藥物組合物在使用時根據病人的情況確定用法用量，如一日2-3次。
【具體實施方式】
[0012] 實施例1 取斯克瑞泰9g，加入600ml注射用水，加熱至60°C溶解，得到斯克瑞泰溶液；冷卻至室 溫，加入鹽酸半胱氨酸5g，亞硫酸氫鈉10g，磷酸緩沖液0.Imol;攪拌溶解；向溶液中加入總 體積0. 01%的活性炭，攪拌吸附14min，過濾脫炭；向濾液中加入rhEGF6g，加注射用水至 1000ml，灌封，滅菌得成品。
[0013] 實施例2 取斯克瑞泰15g，加入600ml注射用水，加熱至60°C溶解，得到斯克瑞泰溶液；冷卻至 室溫，加入鹽酸半胱氨酸5g，維生素C10g，磷酸緩沖液0.Imol;攪拌溶解；向溶液中加入總 體積0. 01%的活性炭，攪拌吸附14min，過濾脫炭；向濾液中加入rhEGFIOg,加注射用水至 1000ml，灌封，滅菌得成品。
[0014] 實施例3 取斯克瑞泰12g，加入600ml注射用水，加熱至60°C溶解，得到斯克瑞泰溶液；冷卻至 室溫，加入鹽酸半胱氨酸5g，谷胱甘肽10g，磷酸緩沖液0.Imol;攪拌溶解；向溶液中加入總 體積0. 01%的活性炭，攪拌吸附14min，過濾脫炭；向濾液中加入rhEGF8g，加注射用水至 1000ml，灌封，滅菌得成品。
[0015] 創傷性腦損傷藥理實驗 1動物分組和模型的建立 140只SPF級健康雄性Wistar大鼠，體重250-280g，由中國人民解放軍軍事醫學科學 院提供。隨機分成正常組、模型組、藥物組和溶劑組。每組又分為術后l、4、7d和14d亞組， 每亞組8只（實驗共140只大鼠，模型制作死亡12只，剔除)。參考Feeney's落體法，用1% 戊巴比妥鈉（40mg/kg)腹腔麻醉，將大鼠俯臥位并固定。頭頂部剪毛、消毒、鋪巾。沿頭皮 正中切開頭皮，在右側頂骨開骨窗，直徑〇. 5cm，暴露硬腦膜。以25g重錘自32cm處自由落 下(在圓形套管內），擊中骨窗下硬腦膜，造成右頂葉腦挫傷。rhEGF組在制模后立即經靜脈 注入藥物100Um/kg;斯克瑞泰組在制模后立即經靜脈注入藥物1500iim/kg;藥物組在制 模后立即經靜脈注入藥物50iim/kg(rhEGF20iim/kg+斯克瑞泰30iim/kg);溶劑組在靜 脈注入與藥物組等量的溶劑，排除溶劑的影響；模型組用等量生理鹽水建立模型；正常組 僅麻醉與手術。 2標本的收集與處理實驗動物在TBI后各個時間點經觀察神經系統癥狀后，1%戊巴 比妥鈉（40mg/kg)腹腔麻醉、迅速開胸暴露心臟，經升主動脈插管后，先用100mL生理鹽水 快速沖洗，隨后用40g/L多聚甲醛磷酸緩沖液心臟灌注約30min，灌畢立即取腦浸入上述緩 沖液中固定ld，常規脫水、浸蠟、包埋。予正中隆起水平行4ym連續冠狀切片，備免疫組化 使用。另外4只1%戊巴比妥鈉（40mg/kg)腹腔麻醉，迅速斷頭后取新鮮腦組織，液氮冷存， 備Westernblot和realtimeRT-PCR使用。 3神經行為評分 采用Menzies等大鼠走橫木試驗方法評價大鼠精細運動功能恢復