一種生物活性透明質酸凝膠制劑的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及皮膚護理及皮炎藥物領域，具體地，涉及一種生物活性透明質酸凝膠 制劑。
【背景技術】
[0002] 皮膚炎癥性疾病即皮膚炎癥引起的皮膚疾病，包括簡單的皮膚紅斑、皮膚過敏等 肉眼可見的皮膚紅腫癢痛。皮膚炎癥性疾病（皮炎）和濕瘆常作為同義詞用來指一種皮膚 炎癥，代表皮膚對于化學制劑、蛋白、細菌與真菌等種種物質的變應性反應。例如，陰囊皮炎 的發病原因非常復雜，簡單的分為內在因素和外在因素，外因如化學制劑、化妝品、動物毒 素、魚蝦、花粉、塵埃、日曬、搔抓等，內因包括遺傳因素、精神因素、機體的免疫因素、代謝因 素，以及越來越受到重視的心理因素。在目前治療皮膚炎癥的藥物中，含皮質激素的藥物對 多種皮炎的療效是肯定的，但如果長期頻繁或大量使用含皮質類激素藥物，將產生一些不 良的副作用。
[0003] 最近國外的研宄表明，細胞外基質大分子透明質酸被透明質酸酶活化成生物活性 透明質酸，生物活性透明質酸與細胞外CD44和TLR4受體結合，可以促進皮膚粘膜分泌防衛 素2,進而抑制炎癥和拮抗內毒素的炎癥刺激作用，因此，發展一種安全有效的生物活性透 明質酸，并將其制成皮膚外用制劑，可望提供一種促進皮膚保健、緩解或治療皮膚炎癥性疾 病的途徑。

【發明內容】

[0004] 本發明的目的是提供一種生物活性透明質酸凝膠制劑，具有高效的抗炎活性，可 有效促進皮膚健康、防治皮膚炎癥。
[0005] 為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：
[0006] 一種生物活性透明質酸凝膠制劑，包括具有抗炎活性的生物活性透明質酸，以及 與所述生物活性透明質酸有增效協同作用的卡波姆。
[0007] 進一步地，所述具有抗炎活性的生物活性透明質酸是分子量為0. 7KD-100KD的生 物活性透明質酸片段。
[0008] 進一步地，所述生物活性透明質酸片段是使用CHO細胞生產的有糖化的重組人透 明質酸酶PH20切割大分子透明質酸獲得，且所述透明質酸片段至少有一端是使用能識別 透明質酸正常結構的重組人透明質酸酶切割的末端。
[0009] 進一步地，所述生物活性透明質酸的重量百分含量為0. 6-3%、所述卡波姆的重量 百分含量為1. 5-3%。
[0010] 進一步地，所述生物活性透明質酸的重量百分含量為3%、所述卡波姆的重量百分 含量為2%。
[0011] 進一步地，所述凝膠制劑還包括：水、甘油、氯化鈉、香精、苯氧乙醇、羥苯甲酯、羥 苯乙酯、乙基己基甘油。
[0012] 由于采用上述技術方案，本發明至少具有以下優點：
[0013] 本發明的凝膠制劑可有效促進皮膚健康和防治皮膚炎癥，是安全有效的皮膚炎癥 控制手段。
[0014] 本發明的凝膠輔料卡波姆與生物活性透明質酸具有協同增效作用，能夠增加生物 活性透明質酸的的生物活性和人體治療效果。
【具體實施方式】
[0015] 凝膠劑指藥物與能形成凝膠的輔料制成的混懸或乳狀液型的稠厚液體或半固體 制劑，凝膠劑主要用于皮膚及體腔如鼻腔、陰道，凝膠輔料包括羥丙甲纖維素、甲基纖維素、 羧甲基纖維素鈉、殼聚糖、聚乙二醇、海藻酸鈉等。發明人通過大量的實驗研宄發現，有些輔 料不僅不會增加生物活性透明質酸的人體生物活性，甚至會降低生物活性透明質酸的人體 生物活性，抑制治療療效。而凝膠輔料卡波姆不但沒有降低生物活性透明質酸的人體治療 活性，反而促進了生物活性透明質酸的抗炎活性，具有與生物活性透明質酸的協同作用。這 種協同作用增強了生物活性透明質酸的抗炎效果，因此，卡波姆作為凝膠輔料的同時也是 一種協同增效劑。
[0016] 因此，利用安全有效的生物活性透明質酸，結合具有協同增效作用的凝膠輔料，可 生產有效促進皮膚健康和防治皮膚炎癥的護膚品凝膠、化妝品凝膠、醫療藥物凝膠產品。
[0017] 本發明利用上述發現提供了具有高效的抗炎活性的生物活性透明質酸凝膠制劑， 包括具有抗炎活性的生物活性透明質酸，以及與所述生物活性透明質酸有增效協同作用的 卡波姆。
[0018] 優選地，所述具有抗炎活性的生物活性透明質酸是分子量為0. 7KD-100KD的生物 活性透明質酸片段。所述生物活性透明質酸片段可采用CHO細胞生產的有糖化的重組人透 明質酸酶PH20切割大分子透明質酸的方式獲得，且所述透明質酸片段至少有一端是使用 能識別透明質酸正常結構的重組人透明質酸酶切割的末端。采用該方式獲得的生物活性透 明質酸具有安全性高、生物活性高的特點。
[0019] 優選地，所述生物活性透明質酸片段在凝膠制劑中的重量百分含量為0. 6-3%，所 述卡波姆的重量百分含量為1. 5-3%。
[0020] 上述僅是本發明技術方案的概述，為了能夠更清楚了解本發明的技術手段，以下 結合具體實施例對本發明作進一步的詳細說明。
[0021] 實施例1
[0022] 目的：生物活性透明質酸片段的生產方法。
[0023] 方法：原料為純度90. 0% -99. 9%的200-600KD的大分子透明質酸，使用CHO細胞 生產的重組人透明質酸酶PH20切割，每克透明質酸使用透明質酸酶1000-2000單位，37度 消化4-6小時，ρΗ5· 0-5. 5,130-160mM NaCl，0. 5-1. OmMMgSO4,1. 5-2. 5mM CaCl2，最終制成的 分子量為〇. 7KD-100KD透明質酸片段。
[0024] 所述的分子量為0. 7KD-100KD透明質酸片段至少有一端是使用CHO細胞生產的不 引起人類過敏反應的有糖化的能識別透明質酸正常結構的重組人透明質酸酶PH20切割的 末端，具有促進細胞分泌防衛素2、殺滅微生物和和抑制皮膚粘膜炎癥的生物活性，所述的 生物活性既取決于透明質酸酶切割的透明質酸片段末端，也取決于透明質酸片段的分子量 大小，透明質酸片段的分子量越小，所含重組人透明質酸酶PH20切割的末端越多，生物活 性越好。
[0025] 實施例2
[0026] 目的：研宄不同凝膠劑輔料對生物活性透明質酸的人體生物活性的影響。
[0027] 方法：本實驗采用人體實驗的方法檢測生物活性透明質酸的人體生物活性，即不 同凝膠劑輔料對生物活性透明質酸治療皮膚炎癥性疾病效果的影響。本實驗的小動物預 實驗已發現凝膠劑輔料羥丙甲纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、殼聚糖、聚乙二醇、海 藻酸鈉均降低或不增加生物活性透明質酸的人體生物活性。本實驗所有病例均為皮膚炎 癥性疾病患者，實驗組1 (卡波姆）采用2%卡波姆+3%生物活性透明質酸凝膠每天涂抹6 次，觀察治療后皮膚炎癥體癥紅、破損和瘙癢癥狀的情況；實驗組2(羧甲基纖維素鈉）采用 2%羧甲基纖維素鈉+3%生物活性透明質酸膠（膏）每天涂抹6次，觀察治療后皮膚炎癥體 癥紅、破損和瘙癢癥狀的情況；實驗組3 (海藻酸鈉）采用2%海藻酸鈉+3%生物活性透明 質酸膠（膏）每天涂抹6次，觀察治療后皮膚炎癥體癥紅、破損和瘙癢癥狀的情況；實驗組 4 (酵母蛋白水解物）采用2 %酵母蛋白水解物+3 %生物活性透明質酸膠（膏）每天涂抹6 次，觀察治療后皮膚炎癥體癥紅、破損和瘙癢癥狀的情況；陽性對照采用已知有效的3%生 物活性透明質酸噴劑每天涂抹6次，觀察治療后皮膚炎癥體癥紅、破損和瘙癢癥狀的情況； 陰性對照采用2%卡波姆凝膠每天涂抹6次，觀察治療后皮膚炎癥體癥紅、破損和瘙癢癥狀 的情況；比較五組治療5天后癥狀和體征改善情況。
[0028] 瘙癢不適癥狀療效評價：顯效：癥狀顯著改善或消失，患者滿意；有效：癥狀有改 善或減輕，患者仍有不適，要求繼續治療；無效：癥狀無明顯減輕，患者不滿意。
[0029] 體征療效評價：顯效：紅色明顯變淺，破損明顯減輕；有效：紅色開始變淺，破損減 輕；無效：紅色沒有變淺，破損沒有減輕。
[0030] 統計學方法：采用SPSS12. 0統計學軟件進行統計學處理，計量和計數資料組間比 較采用t檢驗和X2檢驗，以p〈0. 05為有統計學意義差異。
[0031] 結果：
[0032] 如表1所示，第5天癥狀改善情況：實驗組1顯效8例，有效2例，總有效率100%; 實驗組2有效8例，無效2例，總有效率80%，顯效率與實驗組1比較P〈0. 01 ;實驗組3有 效7例，無效3例，總有效率70%，顯效率與實驗組1比較P〈0. 01 ;實驗組4有效6例，無效 4例，總有效率60%，顯效率與實驗組1比較P〈0. 01。
[0033] 表1第5天兩組患者癥狀改善情況比較
【主權項】
1. 一種生物活性透明質酸凝膠制劑，其特征在于，包括具有抗炎活性的生物活性透明 質酸，以及與所述生物活性透明質酸有增效協同作用的卡波姆。
2. 根據權利要求1所述的生物活性透明質酸凝膠制劑，其特征在于，所述具有抗炎活 性的生物活性透明質酸是分子量為0. 7KD-100KD的生物活性透明質酸片段。
3. 根據權利要求2所述的生物活性透明質酸凝膠制劑，其特征在于，所述生物活性透 明質酸片段是使用CHO細胞生產的有糖化的重組人透明質酸酶PH20切割大分子透明質酸 獲得，且所述透明質酸片段至少有一端是使用能識別透明質酸正常結構的重組人透明質酸 酶切割的末端。
4. 根據權利要求1所述的生物活性透明質酸凝膠制劑，其特征在于，所述生物活性透 明質酸的重量百分含量為〇. 6-3%，所述卡波姆的重量百分含量為1. 5-3. 0%。
5. 根據權利要求1所述的生物活性透明質酸凝膠制劑，其特征在于，所述生物活性透 明質酸的重量百分含量為3%，所述卡波姆的重量百分含量為2%。
6. 根據權利要求1所述的生物活性透明質酸凝膠制劑，其特征在于，所述凝膠制劑還 包括：水、甘油、氯化鈉、香精、苯氧乙醇、羥苯甲酯、羥苯乙酯、乙基己基甘油。
【專利摘要】本發明公開了一種生物活性透明質酸凝膠制劑，包括具有抗炎活性的生物活性透明質酸，以及與所述生物活性透明質酸有增效協同作用的卡波姆。發明的凝膠制劑可促進皮膚健康、防治皮膚炎癥。
【IPC分類】A61P17-00, A61Q19-00, A61P29-00, A61K8-73, A61K9-06, A61K8-81, A61K31-728, A61K31-78, A61K47-32
【公開號】CN104546896
【申請號】CN201510065499
【發明人】惠覓宙
【申請人】惠覓宙
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2015年2月9日