專利名稱：：抑制血管生成的噠嗪胺的制作方法
技術領域：
：本發明涉及起血管生成抑制劑作用的3-(3-取代的-1,2,4-噻二唑-5-基)噠嗪胺及其制備方法；還涉及含有它們的組合物及其作為藥物的用途。血管生成(即由內皮細胞形成新的血管)在各種生理和病理過程中起重要的作用。促進血管補充是正常組織生長、成熟和維持所必需的。傷口愈合也需要血管生成。然而血管生成對于固體腫瘤的生長和轉移也是至關重要的，并且涉及各種其它疾病如新血管青光眼、糖尿病性視網膜病、牛皮癬和類風濕性關節炎。這些疾病以增加血管生成為特征，在此期間，正常靜止的內皮細胞變活、使細胞外基體屏障退化、增殖和移行而形成新的血管。為了控制這些與疾病有關的血管生成，具有血管生成抑制劑特性的化合物將是非常有用的。現有技術中公開了一些抑制血管生成的化合物，也稱作血管靜止劑、血管抑制劑或血管生成拮抗劑。例如氫化可的松是公知的血管生成抑制劑(Folkman等，Science230:1375,1985“Anewclassofsteroidsinhibitsangiogenesisinthepresenceofheparinoraheparinfragment”；Folkman等，Science221:719,1983,“Angiogenesisinhibitionandtumorregressioncausedbyheparinoraheparinfragmentinthepresenceofcortisone”)。在EP0435381-A1(公開于1991,7,3)中，描述了具有抗細小核糖核酸病毒活性的噠嗪胺。本發明化合物不同于所引用的噠嗪胺，即它們的取代基總有噻二唑基，尤其令人意想不到的是這些化合物具有抑制血管生成的特性。本發明涉及下式化合物、其N-氧化物形式、可藥用的酸加成鹽，及其立體化學異構體形式其中X為CH或N；m為2或3并且n為1、2或3；部分CH2基團的1或2C原子也可含有一個雙鍵，可被下列基團取代C1-6烷基、氨基、氨基羰基、一或二(C1-6烷基)氯基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基氨基、羥基或C1-6烷基氧基；和/或所述CH2基團的2C原子可與C2-4亞烷基橋接；R1為氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、氨基、一或二(C1-6烷基)氨基、Ar、ArNH、C3-6環烷基、羥基甲基或芐基氧基甲基；R2和R3為氫，或連接在一起形成式-CH=CH-CH=CH-的二價基團；X為CH時，L為基團L1、L2或L3；或X為N時，L為基團L2或L3；L1為Ar-C1-6烷氧基、Ar-氧基、Ar-硫基、Ar-羰基氨基、二-Ar-甲基氧基、N-Ar-哌嗪基、N-Ar-高哌嗪基、2-苯并咪唑啉酮基、Ar-NR4、Ar-Alk-NR4-、Ar-NR4-Alk-NR5-或Het-NR4-；L2為Ar、Ar-羰基、Ar-CH=CH-CH2-、萘基或Het；L3為由一個或兩個選自Ar、Ar-氧基或Ar-硫基的基團取代的C1-6烷基，還可以進一步由氰基或羥基取代或不取代；2,2-二甲基-1,2,3,4-四氫-萘基；2,2-二甲基-1H-2,3-二氫茚基；Ar-哌啶基或Ar-NR4-Alk-；R4和R5分別獨立地選自氫或C1-6烷基；各個Ar獨立地選自苯基；被1,2或3個獨立地選自鹵素、氨基、硝基、C1-6烷基、三鹵代甲基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基羰基或羥基的取代基取代的苯基；被由C1-6烷基取代的噁二唑取代的苯基；Het為單環或二環雜環；單雜環為吡咯基、吡唑基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、異噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基和噠嗪基；二環雜環為吲哚基、喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、苯并噁唑基、苯并異噁唑基、苯并噻唑基、苯并異噻唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并吡喃基、苯并噻喃基和二氫苯并噻喃基；各單環和二環雜環可在碳原子上由1或2個獨立地選自鹵素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、或三鹵代甲基的取代基取代或不取代；并且Alk為C1-6亞烷基。定義Het的雜環優選通過碳原子與分子的其余部分連接。2-苯并咪唑啉酮基優選通過氮原子與分子的其余部分連接。在N-Ar-哌嗪基和N-Ar-高哌嗪基中，Ar基團位于哌嗪基或高哌嗪基部分的氮原子上。在上下文定義和使用的術語中，鹵素通常為氟、氯、溴和碘；C1-4烷基為具有1-4個碳原子的直鏈和支鏈飽和的烴基，如甲基、乙基、丙基、丁基、1-甲基乙基、2-甲基丙基等；C1-6烷基意指C1-6烷基和具有5-6個碳原子的更高同系物，如戊基、2-甲基丁基、己基、2-甲基戊基等；C2-4亞烷基為具有2-4個碳原子的二價直鏈和支鏈飽和的烴基，如1,2-亞乙基、1,3-亞丙基、1,4亞丁基等；C1-6亞烷基為具有1-6個碳原子的二價直鏈和支鏈的飽和烴基，如亞甲基、1,2-亞乙基、1,3-亞丙基、1,4-亞丁基、1,5-亞戊基、1,6-亞己基等。C3-6環烷基包括環丙基、環丁基、環戊基和環己基。部分的實例為本文所述的可藥用酸加成鹽意指式(Ⅰ)化合物可形成的無毒酸加成治療活性鹽。可通過用合適的酸處理式(Ⅰ)化合物的堿性形式方便地獲得所述的鹽，所述的合適的酸例如無機酸，如氫鹵酸，如鹽酸或氫溴酸；硫酸；硝酸；鱗酸等；或有機酸如乙酸、丙酸、羥基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、馬來酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、環己烷氨基磺酸、水楊酸、對氨基水楊酸、雙羥萘酸(pamoicacid)等。反過來，所述鹽的形式可通過用合適的堿處理而轉化為游離堿的形式。上文所使用的術語“酸加成鹽”也包括式(Ⅰ)化合物及其鹽可能形成的溶劑化物。此溶劑化物例如水合物、醇化物等。上文所使用的術語“立體化學異構體形式”為式(Ⅰ)化合物可擁有的所有可能的異構體以及構象。除非有指示或說明，化合物的化學名稱均表示所有可能的立體化學異構體形式的混合物，特別是外消旋混合物，所述混合物包括基本分子結構的所有非對映異構體和/或對映異構體。更具體地說，立體中心可具有R-或S-構型；二價環狀飽和基團上的取代基可具有順式-或反式-構型、對于具有兩個立本中心的化合物來說，按theChemicalAbstract規則(ChemicalSubstanceNameSelectionManual(CA),1982版，第Ⅲ卷，第20章)使用相關的立體描述符號R*和S*。打算將單一形式或其混合形式的式(Ⅰ)化合物的所有立體化學異構體形式都包含在本發明的范圍之內。式(Ⅰ)化合物的N-氧化物形式意指一個或多個氮原子被氧化而成所謂N-氧化物的式(Ⅰ)化合物，尤其是那些一個或多個哌啶一、哌秦或噠嗪基-氮原子被氧化的N-氧化物。不管什么時候，下文所使用的術語“式(Ⅰ)化合物”意味著也包括其N-氧化物形式，其可藥用酸加成鹽及其立體化學異構體形式。一組感興趣的化合物，由X為CH或N且部分的CH2基團未被取代的那些式(Ⅰ)化合物組成。另一組感興趣的化合物由R1為C1-6烷基、X為CH、且m為2和n為2的那些式(Ⅰ)化合物組成。再一組感興趣的化合物由R1為C1-6烷基、X為N、且m為2和n為2的那些式(Ⅰ)化合物組成。一組特定的化合物是R1為氫或二(C1-6烷基)氨基的式(Ⅰ)化合物。優選的化合物是那些R1為甲基、R2和R3為氫、X為CH或N、且L為Ar-哌啶基或被分別獨立地選自鹵素或三氟甲基的1、2或3個取代基取代的苯基的式(Ⅰ)化合物。更特定的化合物是那些R1為氫或二(C1-6烷基)氨基、R2和R3為氫、X為CH或N、m為2、n為2的式(Ⅰ)化合物。最優選的是3-〔4-(3-氯苯基)-1-哌嗪基〕-6-(3-甲基-1、2、4-噻二唑-5-基)噠嗪，或3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕噠嗪，3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌啶基〕噠嗪，3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕-1-哌啶基〕噠嗪，3-(1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕噠嗪，1-〔6-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-噠嗪基〕-N-〔3-(三氟甲基)苯基〕-4-哌啶胺，和N,N-二甲基-5-〔6-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕-3-噠嗪基〕-1,2,4-噻二唑-3-胺，及其可藥用酸加成鹽、立體異構體形式，或其N-氧化物。一般來說，本發明的化合物可按照本領域已知的N-烷基化方法，通過式(Ⅱ)的噠嗪與式(Ⅲ)胺反應來制備。在前面和后面的反應方案中，W表示合適的反應性離去基團例如鹵素，如氟、氯、溴、碘或者在某些情況下，W也可為磺酰氧基基團，如甲磺酰氧基、苯磺酰氧基、三氟甲磺酰氧基等反應性離去基團。可根據本領域已知的方法進行所述反應，例如在反應惰性溶劑(如，二甲基甲酰胺)中一起攪拌和加熱反應物，優選在堿(如碳酸鈉)存在下進行。另外，所述N-烷基化反應可通過使用本領域已知的相轉移催化反應條件來進行。所述條件包括攪拌反應物、具有合適的堿并且可以在(或不在)惰性氣體，如不含氧的氬氣或氮氣下、存在有合適的相轉移催化劑，如三烷基苯基甲基銨、四烷基銨、四烷基鱗、四芳基鱗鹵化物、氫氧化物等催化劑。有時升高溫度對于增加反應速度是合適的。X為N且L為L3的式(Ⅰ)化合物(由式(Ⅰ-a)來表示所述化合物)也可通過用式(Ⅴ)中間體使式(Ⅳ)的取代哌嗪進行N-烷基化反應，遵循類似于上文式(Ⅱ)和(Ⅲ)起始制備式(Ⅰ)所述的方法。式(Ⅰ-a)化合物也可按照本領域已知的還原性N-烷基化方法，通過用式(Ⅵ)的酮或醛還原性地N-烷基化式(Ⅳ)取代的哌嗪來制備，其中0=L3’表示式H-L3衍生物，其中兩成雙氫原子被氧代替。所述還原性N-烷基化可在反應惰性的溶劑，如二氯甲烷、乙醇、甲苯或其混合物中，并在還原劑如氫硼化物如氫硼化鈉、氰基氫硼化鈉或三乙酰氧基氫硼化鈉存在下進行。與合適的催化劑如披鈀碳或披鉑碳組合使用氫作為還原劑也是方便的。在氫用作還原劑的情況下，將脫水劑例如叔丁醇鋁加入到反應混合物中是有利的。為了防止反應物和反應產物中某些功能基的進一步氫化，將合適的催化毒物如噻吩或喹啉-硫加到反應混合物中也是有利的。攪拌，在升高或不升高溫度和/或壓力可增加反應速度。L為Ar-O-C1-6烷基的式(Ⅰ)化合物(所述化合物由式(Ⅰ-b)來表示)也可通過式(Ⅷ)酚和式(Ⅶ)中間體縮合，如使用Mitsunobu反應(Synthesis,1,1981)來制備。而且，式(Ⅰ-b)化合物也可按照本領域已知的O-烷基化反應，用式(Ⅸ)噠嗪胺衍生物使式(Ⅷ)酚烷基化來制備。所述O-烷基化反應可方便地通過混合反應物來進行，可以存在有反應惰性溶劑如水；芳香族溶劑如苯、甲苯等；C1-6鏈烷醇如甲醇、乙醇等；酮如2-丙酮、4-甲基-2-丙酮等；酯如乙酸乙酯、γ-丁內酯等；醚如乙醚、四氫呋喃、1,4-二噁烷等；偶極非質子傳遞溶劑如N,N二甲基甲酰胺、N,N二甲基乙酰胺、二甲基亞砜等；或這些溶劑的混合物。加入適宜的堿如碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉等，或有機堿，例如叔胺如N,N-二乙基乙胺、N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺等，可用于吸收反應過程中形成的酸。而且，首先通過(Ⅷ)與上文定義的合適的堿反應而將式(Ⅷ)酚轉化為合適的鹽的形式，如堿金屬或堿土金屬的鹽，然后在與式(Ⅸ)烷基化試劑的反應中使用所述鹽形式是有利的。攪拌且有時升高溫度可增加反應速度；尤其是，該反應可在反應混合物的回流溫度下進行。另外，在惰性氣體如不含氧的氬氣或氮氣下進行所述烷基化反應是有利的。另外，所述O-烷基化反應可通過采用上文所述的本領域已知的相轉移催化反應條件來進行。X為CH且L為L3的式(Ⅰ)化合物(所述化合物由式(Ⅰ-c)來表示)也可按照本領域已知的Witting反應法(R6和R7為芳基或C1-6烷基)或Horner-Emmons反應法(R6為烷氧基且R7為O-)，通過酮(X)與式(Ⅺ)的內鎓鹽在反應惰性溶劑中反應來制備。式(Ⅺ)，(R6)2R7P=L3’，表示式H-L3的衍生物，其中兩成雙氫原子被(R6)2R7P=取代。合適的溶劑例如烴，如，己烷、庚烷、環己烷等；醚，如，乙醚、四氫呋喃、1,2-二甲氧乙烷等；偶極非質子傳遞溶劑，如，二甲基亞砜、六甲基鱗三酰胺等。然后將不飽和的中間體(Ⅻ)可按合適的還原反應來還原，例如，通過在還原劑(例如，氫硼化物，如氫硼化鈉、氰基氫硼化鈉或三乙酰氧基氫硼化物)存在下，在合適的反應惰性溶劑中攪拌，和如果需要，加熱不飽和的中間體。合適的溶劑是鏈烷醇，如，甲醇、乙醇等，和羧酸，如，乙酸等。式(Ⅺ)的中間體內鎓鹽，可通過用合適的堿如叔丁醇鉀、甲基鋰、丁基鋰、氨基鈉、氫化鈉、鏈烷醇鈉等堿在惰性氣體下和反應惰性溶劑如醚，如四氫呋喃、1,4-二噁烷等中處理鱗鹽或磷酸鹽獲得。式(Ⅰ)化合物還可按本領域已知的基團轉化反應將式(Ⅰ)化合物相互轉化來制備。例如，帶有苯基部分的式(Ⅰ)化合物，可用N-溴化琥珀酰亞胺在反應惰性溶劑中進行溴化反應而在苯基部分引入溴原子。而且，式(Ⅰ)化合物可在酸性條件下水解。式(Ⅰ)化合物也可按已知的將三價氮轉化為N-氧化物形式的方法，來使其轉化為相應的N-氧化物形式。所述的N-氧化反應一般可通過式(Ⅰ)的原料與合適的有機或無機過氧化物反應來進行。合適的無機過氧化物包括如，過氧化氫、堿金屬或堿土金屬的過氧化物，如，過氧化鈉、過氧化鉀；合適的有機過氧化物可包括過氧酸，如，苯甲過氧酸或鹵素取代的過氧酸，如，3-氯苯甲過氧酸，過氧鏈烷酸，如，過氧乙酸，烷基氫過氧化物，如，叔丁基氫過氧化物。合適的溶劑為例如，水，低級鏈烷醇，如，乙醇等，烴，如，甲苯，酮，如，2-丁酮，鹵代烴，如，二氯甲烷，和這些溶劑的混合物。起始材料和某些中間體是已知的化合物，并且可從市場購得或可按照本領域通常已知的常規反應過程來制備。在EP-0435381-A1中描述了式(Ⅲ)的某些中間體。式(Ⅱ)中間體可通過式(ⅩⅢ)化合物與式(ⅩⅣ)(可以其酸加成鹽的形式加入)反應來制備，其中W為上文定義的合適的離去基團。而且，式(Ⅶ)中間體按照與式(Ⅰ)化合物類似的方式，通過式(Ⅱ)中間體(其中W是上面定義的合適離去基團)與式(ⅩⅤ)中間體在反應惰性溶劑如二甲基亞砜，優選在堿如碳酸鈉存在下來制備。式(Ⅰ)化合物和某些中間體在其結構中可有一個或多個立體中心，存在R或S構型。按上文所述的制備方法制備的式(Ⅰ)化合物可合成得到對映體的外消旋混合物的形式，該對映體可按照本領域已知的拆分方法相互分離。通過與合適的手性酸反應，將式(Ⅰ)的外消旋化合物轉化為相應的非對映異構體的形式。然后通過例如選擇性或分級結晶分出所述非對映異構體鹽的形式并用堿釋出對映體。另一種分離式(Ⅰ)化合物對映體形式的方法包括使用手性固定相的液相色譜層析。所述純的立體化學異構體形式也可由合適起始材料的相應的純的立體化學異構體形式來衍生，條件是反應以立體特異性的方式來進行。如果需要特定的立體異構體，優選所述化合物通過立體特異的制備方法合成。采用對映純起始原料有利于所述方式。式(Ⅰ)化合物具有有價值的藥理特性，它們在體內和體外均抑制血管生成。就其藥理活性而言，式(Ⅰ)化合物、其可藥用酸加成鹽、立體化學異構體形式或其N-氧化物形式都是血管生成抑制劑。所以，血管生成抑制劑對于控制或治療與血管生成有關的疾病，如眼的新血管疾病、新血管青光眼、糖尿病性視網膜病、晶狀體后的纖維組織形成、血管瘤、血管纖維瘤、牛皮癬和類風濕性關節炎是有用的。而且，血管生成抑制劑可用于控制固體腫瘤的生長，如，乳腺腫瘤、前列腺腫瘤、黑素瘤、腎腫瘤、結腸腫瘤、子宮癌等；和控制轉移瘤。因此，本發明也涉及上文定義的式(Ⅰ)化合物作為藥物的用途。由于本發明化合物對于與血管生長有關的疾病的治療或預防是有用的，因此本發明提供一種對患有此疾病的溫血動物進行治療的方法，所述方法包括系統性地給予治療有效量的式(Ⅰ)化合物、其N-氧化物或可藥用酸加成鹽。鑒于本發明化合物的藥理特性，可將其配制成各種給藥目的的藥物形式。為了制備本發明的藥物組合物，將作為活性成分的有效量的堿或與酸加成鹽形式的特定化合物與可藥用載體進行緊密混合，載體可根據給藥所需的制劑形式而采用各種各樣的形式。這些藥物組合物是優選適于口服、直腸給藥、經皮給藥或通過非胃腸道注射給藥的單位劑量形式。例如，制備口服劑量形式的組合物時，可采用任何常用的藥用介質，例如，制備口服液體制劑如懸浮劑、糖漿、酏劑和溶液時，使用水、乙二醇、油、醇等；或者制備粉劑、丸劑、膠囊和片劑時，使用固體載體如淀粉、糖、高嶺土、潤滑劑、粘合劑、崩解劑等。由于其易于服用，片劑和膠囊是最有利的口服劑量單位形式，在這種情況下，顯然使用固體藥物載體。對于非胃腸道組合物來說，盡管可包括其它組分以有助于例如溶解性的改善，但載體通常會包括至少絕大部分無菌水。可注射溶液，例如在包括鹽水溶液、葡萄糖溶液或鹽水和葡萄糖溶液的混合物的載體中配制。可注射的懸浮液，可使用合適的液體載體、懸浮劑等配制。在適于經皮給藥的組合物中，載體可包含也可不包含滲透促進劑和/或合適的濕潤劑，可以最小比例組合任何天然的合適的添加劑，該添加劑不會對皮膚有顯著的有害作用。所述添加劑可促進對皮膚給藥和/或可有助于制備所需組合物。這些組合物可以各種方式來給藥，例如，作為透皮膏貼、作為局部點滴液(spot-on)、作為油膏。特別有利的是配制成易于給藥和劑量均勻的上文所述的單位劑量形式藥物組合物。在本文說明書和權利要求書中使用的劑量單位形式指適于作為單個劑量的物理分離單位，每個單位含有經計算能產生所需治療作用的預定量的活性成分和所需藥物載體。此劑量單位形式的例子是片劑(包括刻痕或包衣的片劑)、膠囊、丸劑、袋裝粉劑、糯米紙囊劑、注射溶液或懸浮劑、茶勺量劑(teaspoonful)、湯勺量劑(tablespoonful)等，及其分開的多個劑量。本領域技術人員可由下文所述的試驗結果容易地決定有效劑量。一般來說，有效量為1×10-5mg/kg-10mg/kg體重，特別是0.001mg/kg-1mg/kg體重。在一整天中，以合適的間隔按兩次、三次、四次或更多的分劑量來給予所需劑量是合適的。所述分劑量可被配制成單位劑量形式，例如每單位劑量形式中含有0.001-500mg，特別是0.0lmg-200mg的活性組分。下列實施例的目的是說明性的，不起限定作用。實驗部分下文“DMF”指N,N-二甲基甲酰胺，“DCM”指二氯甲烷，“DIPE”指二異丙基醚，而“THF”指四氫呋喃。A、中間體的制備實施例A.1在回流溫度下，將3-氯-6-甲基噠嗪(12.9g)和亞硫酰氯(119g)攪拌一夜。蒸發混合物，加入200mlDCM并將混合物冷卻到-5℃。分批加入鹽酸1-亞氨基-乙胺(9.5g)，并將整個混合物攪拌15分鐘。然后，滴加氫氧化鈉(50％)(25ml)(溫度低于5℃)。攪拌混合物直到室溫。攪拌30分鐘后，分層。干燥有機層、過濾并蒸發。殘渣經柱色譜層析純化，產生8.2g(38.6％)的3-氯-6-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)噠嗪；mp.180.3℃(中間體1-a)。實施例A.2a)將3-氯-6-甲基噠嗪(19.3g)和亞硫酰氯(160ml)的混合物攪拌并回流過夜。將混合物蒸發、加入甲苯(100ml)并再次蒸發，產生40g(100％)的α,α,3-三氯-6-噠嗪甲磺酰氯(中間體2-a)。b)將中間體(2-a)(79.2g)的DCM(600ml)混合物在0℃下攪拌。加入2-(苯基甲氧基)-ethanimidamide(40.1g)。在0℃下滴加NaOH(50％,60ml)。冷卻混合物并在0℃下攪拌1小時。加入水(300ml)和DCM(400ml)并使混合物分層。干燥有機層、過濾并蒸發溶劑。經硅膠在玻璃濾器上純化殘渣并從2-丙醇中結晶出來。濾出沉淀物并干燥，產生28g(45％)的3-氯-6-〔3-〔(苯基甲氧基)甲基〕-1,2,4-噻二唑-5-基〕噠嗪(中間體2-b,mp:109-110℃)。表1中列出了按類似方法制備的中間體。表1*R2和R3連接形成二價基團B、制備最終化合物實施例B.1將中間體(1-a)(6.4g)、1-〔3-(三氟甲基)苯基〕哌嗪(5.3g)和碳酸鈉(8.5g)的DMF(200ml)混合物在60℃攪拌過夜。將混合物傾入冰水中并過濾。沉淀物溶解在DCM中并用水洗滌。干燥有機層、過濾并蒸發。殘渣經硅膠柱層析純化(洗脫劑CHCl3/CH3OH99.5/0.5)。收集純化部分并蒸發。將殘余物從2-丙醇中結晶出來，產生2.3g(24.6％)的3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕噠嗪；熔點173.2℃(化合物1)。實施例B.2室溫下，將4-氟苯酚(1.2g)加到三苯基膦(2.9g)的THF(200ml)溶液中，并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。室溫下滴加少量THF中的氮雜二甲酸二乙酯(1.9g)并將混合物攪拌5分鐘。室溫下滴加少量THF中的1-〔6-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-噠嗪基〕-4-哌啶-甲醇(3g)，并將混合物在室溫下攪拌2小時。蒸發溶劑并從2-丙醇中結晶殘余物。濾出沉淀并干燥，產生1.66g(43％)的3-〔4-〔(4-氟苯氧基)甲基〕-1-哌啶基〕-6-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)噠嗪(化合物55)。實施例B.3攪拌3,5-二(三氟甲基)-苯甲酰氯(1.1g)和三乙胺(0.4g)的DCM(40ml)混合物。分批加入3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(1-哌嗪基)噠嗪(1.1g)。室溫下攪拌混合物3小時。加入三乙胺。將混合物在室溫下攪拌1小時。加入水并用DCM提取混合物3次。將合并的有機層干燥、過濾并將溶劑蒸發。用甲醇結晶殘余物。濾出沉淀物并干燥，產生0.91g(45％)的1-〔3,5-二(三氟甲基)苯甲酰基〕-4-〔6-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-噠嗪基〕哌嗪(化合物131)。實施例B.4將化合物1(3g)、N-溴琥珀酰亞胺(1.3g)和3-氯過氧苯甲酸(催化有效量)的四氯化碳(100ml)混合物攪拌過夜。濾出沉淀物、干燥并溶解在N-溴琥珀酰亞胺(1.3g)和3-氯過氧苯甲酸(催化有效量)的四氯化碳(100ml)混合物中。攪拌混合物并回流48小時。濾出沉淀物。干燥并經柱色譜層析純化(洗脫劑NH4OAc(0.5％的水溶液)/CH3OH30/70)。收集純餾分并蒸發溶劑。用CH3OH/CH2Cl2結晶殘余物，濾出沉淀物并干燥，產生0.77g(21.5％)的3-〔4-〔4-溴-3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕-6-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)噠嗪(化合物88)。以類似方法，也可制備1-〔1-〔4,4-二(4-氟苯基)丁基〕-4-哌啶基〕-4-(苯基甲基)哌嗪三鹽酸鹽(化合物90)。實施例B.5將一份3-氯過氧苯甲酸(0.9g)加到化合物53(1.9g)的DCM(50ml)溶液中，室溫下攪拌。所得反應混合物在室溫下攪拌1小時。蒸發溶劑并將殘余物溶解在2-丙醇中，并用HCl/2-丙醇轉化為鹽酸鹽(1∶2)。濾出沉淀物并干燥，產生1.9g(90.3％)的3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕-1-哌啶基〕噠嗪，哌嗪-N1-氧化物二鹽酸鹽(化合物162)。實施例B.6a)在0℃和氮氣流下，將過氧化氫(1.22g,30％)加到二氯馬來酐(2.17g)的DCM(30ml)混合物中。在0℃下，將混合物攪拌2小時。在0℃下加入3-氯-6-甲基噠嗪(1.4g)。將混合物攪拌并回流過夜，然后用碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次、Na2SO3水溶液和水各洗滌一次。將合并的有機層干燥、過濾并蒸發溶劑。殘余物不用進一步純化可用于下一步中(中間體3)。b)在60℃溫度下，將中間體3(3.6g)、1-(4-哌啶基)-4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-哌嗪(5g)和Na2CO3(3.4g)的DMF(80ml)混合物攪拌過夜。冷卻混合物、傾入冰水(400ml)中并攪拌1小時。濾出沉淀物、干燥并經玻璃濾器上的硅膠純化(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH100/0,97.5/2.5和95/5)。收集兩個純餾份并將其溶劑蒸發。第一餾分用CH3OH結晶，產生1.7g(21％)的3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基-6-(4-(4-(3-(三氟甲基)苯基)-1-哌嗪基)-1-哌啶基)噠嗪，2-氧化物(化合物165)。將另一餾分刮下、濾出并干燥，產生0.75g(9％)的3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(4-(4-(3-(三氟甲基)苯基)-1-哌嗪基)-1-哌啶基)噠嗪，1-氧化物(化合物166)。表2-11列出按上述實施例之一制備的化合物，而表12列出上文實驗部分制備的化合物的碳、氫和氮的實驗(表的頭欄寫明“exp”)和理論(表的頭欄寫明“theor”)元素分析值。表2(*)c.C6H11指環己基表3表4表5表6表7表8表9(*)通過在酸性條件下水解化合物167來制備。表10表11*R2和R3連接形成二價基團表12C、藥理實施例實施例C.1體外使用由Nicosia,R.F.和Ottinetti在“LaboratoryInvestigation”，第63卷，第115頁，(1990)中描述的大鼠主動脈環血管生成模型來測量血管生成抑制活性。化合物抑制微血管形成的能力與用載體治療的對照環相比較。培養8天后使用由Nissanov,J.,Tuman,R.W.,Gruver,L.M.和Fortunato,J.M.在“LaboratoryInvestigation”，第73(#5)卷，第734頁(1995)中描述的成像分析系統進行定量測定(微血管的面積)，所述成像分析系統由光學顯微鏡、CCD照相機和自動的為用戶設計的成像分析程序組成。以幾種濃度試驗化合物來測定其抑制能力(IC50)。表13所列的一些化合物的IC50值低于1nM。表13實施例C.2使用US5382514中描述的Matrigel模型測量體內血管生成抑制活性。簡要地來說，將含有鼠基底膜的提取液和血管生長因子(如VEGF、bFGF、aFGF)注射到溫血動物體內，形成凝膠基質。一段時間后，從動物體中回收凝膠并定量測定血管的生成。試驗化合物以0.1mg/kg的劑量口服給藥。發現化合物2、30、31、47、53、54、74、75、82、88、134、138和177對血管生成的抑制作用大于70％。D、組合物實施例下列制劑例舉了劑量單位形式的本發明典型的藥物組合物，該組合物適于系統或局部給予溫血動物。實施例中使用的“活性組分”(A.I.)涉及式(Ⅰ)化合物、其N-氧化物形式、可藥用酸加成鹽或立體化學異構體。實施例D.1口服溶液將9g的4-羥基苯甲酸甲酯和1g的4-羥基苯甲酸丙酯溶于4L沸騰的純水中。先后將10g的2,3-二羥基丁二酸和20g的A.I.溶于3L前一步所獲得的溶液中。所得溶液與前面所剩溶液合并并加入12L的1,2,3-丙三醇和3L山梨醇70％的溶液。將40g的糖精鈉溶于0.5L的水中并加入2ml紅莓和2ml鵝莓香料。所得溶液與前面溶液合并，加入適量的水使體積到20L而獲得每茶勺(5ml)含有5mgA.I.的口服溶液。將所得溶液置于合適的容器中。實施例D.2膠囊將20gA.I.、6g十二烷基硫酸鈉、56g淀粉、56g乳糖、0.8g膠體二氧化硅和1.2g硬脂酸鎂一起劇烈攪拌。然后，將所得混合物填充在1000個合適的硬明膠膠囊中，每粒膠囊含有20mgA.I.。實施例D.3膜包衣片制備片芯將100gA.I.、570g乳糖和200g淀粉的混合物充分混合，并用5g十二烷基硫酸鈉和10g聚乙烯吡咯烷酮的約200ml水溶液濕潤。將濕潤的粉末混合物過篩、干燥并再一次過篩，然后加入100g微晶纖維素和15g氫化植物油。將整個混合物混合好并壓制成片，獲得10000片，每片含有10mg的活性成分。包衣在10g甲基纖維素的75ml變性乙醇溶液中加入5g乙基纖維素的150ml二氯甲烷溶液。然后加入75ml二氯甲烷和2.5ml1,2,3-丙三醇。將10g聚乙二醇熔化并溶于75ml二氯甲烷中。所得溶液加到前面溶液中，然后加入2.5g硬脂酸鎂、5g聚乙烯吡咯烷酮和30ml濃的色素懸浮液并將整個混合物混合均勻。在包衣裝置中用所得混合物對片芯包衣。實施例D.4注射溶液將1.8g4-羥基苯甲酸甲酯和0.2g4-羥基苯甲酸丙酯溶于約0.5L注射用沸水中。冷卻到約50℃后，攪拌下加入4g乳酸、0.05g丙二醇和4gA.I.。將所得溶液冷卻到室溫并補充適量注射用水使體積達到1L，獲得4mg/mlA.I.的溶液。溶液過濾滅菌并填充到無菌容器中。實施例D.5栓劑將3gA.I.溶于3g2,3-二羥基丁二酸的25ml聚乙二醇400的溶液中。12g表面活性劑和300g甘油三酯熔化在一起。后一混合物與前面溶液混合均勻。在37-38℃溫度下，將所得混合物傾入成型模中形成100粒分別含有30mg/mlA.I.的栓劑。權利要求1．本發明涉及下式化合物、N-氧化物形式、與可藥用酸加成的鹽及其立體化學異構體形式其中X為CH或N；m為2或3并且n為1、2或3；部分CH2基團的1或2C原子也可含有一個雙鍵，可被下列基團取代C1-6烷基、氨基、氨基羰基、一或二(C1-6烷基)氨基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基氨基、羥基或C1-6烷基氧基；和/或所述CH2基團的2C原子可與C2-4亞烷基橋接；R1為氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、氨基、一或二(C1-6烷基)氨基、Ar、ArNH、C3-6環烷基、羥基甲基或芐基氧基甲基；R2和R3為氫，或連接在一起形成式-CH=CH-CH=CH-的二價基團；X為CH時，L為基團L1、L2或L3；或X為N時，L為基團L2或L3；L1為Ar-C1-6烷氧基、Ar-氧基、Ar-硫基、Ar-羰基氨基、二-Ar-甲基氧基、N-Ar-哌嗪基、N-Ar-高哌嗪基、2-苯并咪唑啉酮基、Ar-NR4、Ar-Alk-NR4-、Ar-NR4-Alk-NR5-或Het-NR4-；L2為Ar、Ar-羰基、Ar-CH=CH-CH2-、萘基或Het；L3為由一個或兩個選自Ar、Ar-氧基或Ar-硫基的基團取代的C1-6烷基，還可以進一步由氰基或羥基取代或不取代；2,2-二甲基-1,2,3,4-四氫-萘基；2,2-二甲基-1H-2,3-二氫茚基；Ar-哌啶基或Ar-NR4-Alk-；R4和R5分別獨立地選自氫或C1-6烷基；Ar為苯基；被1,2或3個獨立地選自鹵素、氨基、硝基、C1-6烷基、三鹵代甲基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基羰基或羥基的取代基取代的苯基；被由C1-6烷基取代的噁二唑取代的苯基；Het為單環或二環雜環；單雜環為吡咯基、吡唑基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、異噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基和噠嗪基；二環雜環為吲哚基、喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、苯并噁唑基、苯并異噁唑基、苯并噻唑基、苯并異噻唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并吡喃基、苯并噻喃基和二氫苯并噻喃基；各單環和二環雜環可在碳原子上由1或2個獨立地選自鹵素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、或三鹵代甲基的取代基取代或不取代；并且Alk為C1-6亞烷基。2、權利要求1的化合物，其中X為CH或N，且部分的CH2基團是未取代的。3、權利要求2的化合物，其中R1為C1-6烷基、X為CH，且m為2和n為2。4、權利要求2的化合物，其中R1為C1-6烷基、X為N，且m為2和n為2。5、權利要求2的化合物，其中R1為甲基、R2和R3為氫、X為CH或N，且L為被獨立地選自鹵素或三氟甲基的1、2或3個取代基取代的Ar-哌啶基或苯基。6、權利要求2的化合物，其中R1為氫或二(C1-6烷基)氨基、R2和R3為氫，且m為2和n為2。7、權利要求1的化合物，其中化合物為3-〔4-(3-氯苯基)-1-哌嗪基〕06-(3-甲基-1、2、4-噻二唑-5-基)噠嗪3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕噠嗪，3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌啶基〕噠嗪，3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕-1-哌啶基〕噠嗪，3-(1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕噠嗪，1-〔6-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-噠嗪基〕-N-〔3-(三氟甲基)苯基〕-4-哌啶胺，和N,N-二甲基-5-〔6-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕-3-噠嗪基〕-1,2,4-噻二唑-3-胺，及其立體異構體形式、可藥用酸加成鹽或其N-氧化物。8、一種組合物，它含有可藥用載體和作為活性組分的治療有效量的權利要求1-7任一的化合物。9、一種制備權利要求8的藥物組合物的方法，其中緊密混合可藥用載體和權利要求1-7的化合物。10、權利要求1-7的任一化合物用作藥物的用途。11、制備權利要求1的化合物的方法，其特征在于a)在反應惰性溶劑中，優選在合適的堿存在下，用式(Ⅲ)的胺使式(Ⅱ)噠嗪N-烷基化，其中R1、R2和R3、X、L、m和n定義同權利要求1,W為合適的離去基團；b)在反應惰性溶劑中，優選在合適的堿存在下，用式(Ⅴ)的中間體使式(Ⅳ)噠嗪胺N-烷基化，其中R1、R2、R3、m和n、L3定義同權利要求1,W為合適的離去基團；c)在還原劑存在下，且也可存在合適的催化劑，用代表式H-L3衍生物的式(Ⅵ)酮或醛還原性地使式(Ⅳ)中間體N-烷基化，H-L3中兩成雙氫原子被氧原子置換并且L3定義同權利要求1；d)在反應惰性溶劑中，式(Ⅶ)噠嗪胺與式(Ⅷ)酚縮合，其中R1、R2、R3、X、Alk、m和n、Ar定義同權利要求1；e)在反應惰性溶劑中，并優選存在合適的堿，用式(Ⅷ)酚使式(Ⅸ)噠嗪胺衍生物O-烷基化，其中R1、R2、R3、X、Alk、m和n定義同權利要求1，且W為合適的離去基團；f)式(X)的酮其中R1、R2、R3、m和n定義同權利要求1與式(Ⅺ)的內鎓鹽反應其中R6和R7為芳基或C1-6烷基，或R6為烷氧基且R7為O-，且(R6)2R7P=L3’，表示式H-L3的衍生物，其中兩成雙氫原子被(R6)2R7P=取代，然后在合適的還原劑存在下，在反應惰性溶劑中還原所獲得的中間體(Ⅻ)得到下式化合物或者，使式(Ⅰ)化合物進行相互轉化；并且，如果需要，通過用酸處理將式(Ⅰ)化合物轉化為治療活性的無毒的酸加成鹽，或者相反地，通過用堿處理將酸加成鹽的形式轉化為游離堿；并且，如果需要，制備其立體化學異構體形式或其N-氧化物形式。全文摘要本發明涉及下式化合物、其N－氧化物形式、可藥用酸加成鹽及其立體化學異構體形式,其中X為CH或N;m為2或3并且n為1、2或3;式(a)部分CH2基團的1或2C原子也可含有一個雙鍵,可被下列基團取代:C1－6烷基、氨基、氨基羰基、一或二(C1－6烷基)氨基、C1－6烷氧基羰基、C1－6烷基羰基氨基、羥基或C1－6烷基氧基;和/或所述CH2基團的2C原子可與C2－4亞烷基橋接;R1為氫、C1－6烷基、C1－6烷氧基、C1－6烷硫基、氨基、一或二(C1－6烷基)氨基、Ar、ArNH－、C3－6環烷基、羥基甲基或芐基氧基甲基;R2和R3為氫,或連接在一起形成式－CH=CH－CH=CH－的二價基團;X為CH時,L為基團L1、L2或L3;或X為N時,L為基團L2或L3;L1為Ar－C1－6烷氧基、Ar－氧基、Ar－硫基、Ar－羰基氨基、二－Ar－甲基氧基、N－Ar－哌嗪基、N－Ar－高哌嗪基、2－苯并咪唑啉酮基、Ar－NR4、Ar－Alk－NR4－、Ar－NR4－Alk－NR5－或Het－NR4－;L2為Ar、Ar－羰基、Ar－CH=CH－CH2－、萘基或Het;L3為由一個或兩個選自Ar、Ar－氧基或Ar－硫基的基團取代的C1－6烷基,還可以被下列基團取代或不取代:氰基或羥基;2,2－二甲基－1,2,3,4－四氫—萘基;2,2－二甲基－1H－2,3－二氫茚基;Ar－哌啶基或Ar－NR4－Alk－;R4和R5分別獨立地選自氫或C1－6烷基;Alk為C1－6亞烷基。還涉及其制備方法、含有它們的組合物以及作為藥物的用途。文檔編號A61K31/50GK1208415SQ9719170公開日1999年2月17日申請日期1997年1月14日優先權日1996年1月15日發明者R·A·斯托克布羅伊克斯,M·J·M·范德阿,M·維勒姆斯,L·梅波伊爾,M·G·M·盧伊克斯,R·W·圖曼申請人:詹森藥業有限公司