專利名稱：茶色素在制備治療腎病綜合征的藥物中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及茶色素的藥物新用途，具體涉及茶色素在制備治療腎病綜合癥的藥物中的應用，屬于中藥領域。
茶色素是從茶葉中提取的植物天然色素，是茶多酚中兒茶素經過氧化而成的一種活性色素復合物。茶色素由茶黃素、茶紅素和茶褐素組成。對于茶色素的研究已有文獻報道。CN1074618A公開了茶色素及其生產方法。該生產過程為，茶葉以煎煮取汁，堿化，濃縮，酸化，加入乙醇回流，乙醇回流液再堿化得到茶色素結晶品，經真空干燥，即得到該茶色素。用該方法制得的茶色素中茶黃素、茶紅案和茶褐素三者有恒定的比例，可作為藥用。對于茶色紊的藥用價值報道可以概括為降低血液粘滯度、降血脂、降膽固醇、預防和治療心血管疾病。但到目前為止，尚未見有關茶色素用于治療腎病綜合癥的報道。
本發明的目的是提供茶色素的一種新的制藥用途，即茶色素在制備治療腎病綜合癥的藥物中的應用。
腎癥綜合癥(NS)是一組病因不明，病情變化各異的臨床癥候群。表現為蛋白尿、腎功能降低、水腫等。目前對腎病綜合癥的治療一般是對癥處理，療效不確定，更缺乏有效的治療藥物。臨床觀察證實茶色素可有效地治療腎病綜合癥，緩解癥狀，提高免疫功能，改善腎功能。
本發明茶色素的提取方法可以按照已知的提取工藝進行提取，優選是按照下述方法提取的茶色素(1)、將茶葉按1∶15-30倍比例加水后，經一次或一次以上的煎煮取汁，煎出液用在水溶液中能產生OH-離子的化合物進行堿化，調節PH8-10，然后在小于70℃下加熱濃縮該堿化液至原體積量的1/4-1/10，得濃縮液；(2)濃縮液用酸調至PH3-6，酸化液加入乙醇1-10體積倍量，回流0.5-2小時，得醇回流液；(3)醇回流液用在水溶液能產生OH-離子的化合物調節PH7-10，沉淀后過濾，得茶色素結晶，茶色素結晶真空干燥，即得茶色素產品。
本發明的茶色素是一種藥物活性成分，按照常規的制劑工藝，可以以茶色素為主活性組份，加入常規的賦性劑、調味劑、崩解劑、防腐劑、潤滑劑、濕潤劑、粘合劑、溶劑、增稠劑、增溶劑等藥物輔料，制成任何一種適合于臨床上使用的劑型，如片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液體制劑、注射劑等。
由于本發明首次公開了茶色素治療腎病綜合癥的藥用作用，因此，將茶色素單獨或與其他活性組份或輔料配合制成藥劑，只要是該藥劑用于治療腎病綜合癥，均屬于本發明的保護范圍。
本發明的茶色素在制成任何一種劑型時，均具有治療腎病綜合癥的作用。任何藥劑，如果其組份中含有茶色素或僅以茶色素單一成分制備成藥，在其包裝或說明書等標識上或者在其他任何宣傳品上只要注明或提示具有治療腎病綜合癥的作用，則落入本發明的保護范圍之內。
本發明的茶色素是來源于藥食兩用的天然植物茶葉。因此，也可以將茶色素制成保健食品或保健藥品。將茶色素制成的保健食品或保健藥品，如果在其包裝或說明書等標識上注明或提示有治療腎病綜合癥的作用，也落入本發明的保護范圍之內。
實施例1配方茶色素125克藥用淀粉 875克將上述組份入攪拌機，充分攪拌混勻，用膠囊機裝膠囊，每粒裝填1克，制得茶色素膠囊1000粒，每粒膠囊含茶色素125毫克。
實施例2茶色素250克蒸餾水2000毫升甜菊甙1克將茶色素溶于蒸餾水中，充分混勻，加入甜菊甙，再次攪拌混勻，用罐裝機裝入玻璃瓶中，每瓶裝10毫升，滅菌，制得茶色素口服液。
實驗例1茶色素治療腎病綜合癥的近期療效觀察腎病綜合癥(NS)是一組病因不明，病情變化各異的臨床癥候群。我們于1996年8月至1997年3月運用茶色素治療12例NS取得良好的近期療效，現將報道如下1、臨床資料1.1一般資料12例NS患者均按1985年全國第二屆腎臟病會議修訂的腎小球疾病臨床分型標準進行診斷，并經血流變、血脂檢測為依據，部分病人查甲襞微循環。按就診日期作為觀察對象，12例中男性7例，女性5例，年齡14歲至62歲，平均年齡30.4歲。其中I型NS10例。Ⅱ型NS2例(妊高癥NS、糖尿病NS)。病程4年2例，3年2例，2年5例，1年1例，2個月1例。
12側患者治療前后均查24h尿蛋白定量、腎功能、血清總蛋白、膽固醇、血流變。同時均是經按常規四聯(強的松、潘生丁、消炎痛、環磷酰胺)療法失敗者或復發者。
1.2治療方法
12例患者均仍在常規治療(消炎痛、強的松、潘生丁、硫糖鋁)的基礎上，以茶色素膠囊(中外合資江西綠色制藥有限公司提供、批號贛衛藥準(1994)139-1號)治療、125mgTid 4周為一療程，一般1-2個療程)。
1.3療效評定標準顯效療效結束后24h尿蛋白定量＜0.15g，水腫消失、漿膜腔內積液消失，腎功能正常、血清總蛋白上升正常、血脂下降、血流變改善。有效24h尿蛋白定量下降≥60％，水腫等癥狀消失或明顯減輕，腎功能基本正常，血清總蛋白上升基本正常。血脂、血流變有改善。無效24h尿蛋白定量下降≤60％，臨床癥狀有好轉，血清總蛋白稍上升。血流變、血脂無明顯改善。(療效評定標準同文獻報導)2、治療結果2.1觀察項目12例患者治療前后24h尿蛋白定量、腎功能、膽固醇見表Ⅰ。血流變改變見表2。
2.2 12例NS經茶色素治療效果顯效5例占41.7％，有效6例占50％。無效1例占8.3％，其總有效率為91.7％。12例患者主要觀察尿蛋白、血流變、血脂的變化。由于病者均按原四聯治療無效。經茶色素治療后尿蛋白前后比較，有顯著的差異(P＜0.01)。表Ⅰ 12例NS治療前后尿蛋白、腎功能、膽固醇、血白蛋白、球蛋白變化(X±S)尿蛋白定量BUNSCr TG 白蛋白球蛋白(g/24h) (mmol/L)(umol/L) (mmol/L) (g/L) (g/L)治療前5.62±2.53 14.36±4.58 150±86.29.35±3.24 19.2±5.2 28±6.7治療后1.86±0.83 5.67±4.31 109.6±54.42 4.16±1.47 31±6.2 32±1.7P值 ＜0.001＜0.001 ＜0.05 ＜0.001＜0.001 ＜0.05表2 12例NS治療前后血流變學指標比較(X±S)血球壓積 全血比粘度 全血還原粘度 血漿比粘度 紅細胞電泳 血沉纖維蛋白原％(秒)(mm/h) (g/L)治療前42.12±6.51 5.10±0.74 7.55±0.631.83±0.13 18.43±2.82 44.30±18.20 23.68±12.18治療后40.90±4.88 4.33±0.38 6.79±0.711.66±0.11 17.04±1.56 4.98±0.642.28±0.26P值 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01＜0.01 ＜0.01＜0.01＜0.01
3、討論茶色素是從綠茶中提取的一種兒茶素為主的多酚類物質。經研究表明，茶色素具有降血脂、抗疑和改善微循環作用。而本組研究發現茶色素除降血脂，抗疑外對NS治療促進纖溶、抗血小板粘附，聚集作用，降低NS尿蛋白排出、改善腎功能、提高血漿蛋白、緩解NS的臨床癥狀。并經12例NS運用茶色素治療1～2個療程24小時尿蛋白定量顯著下降，其有效率為91.7％。
NS患者由于紅細胞表面負電荷密度降低，同種電荷的排斥作用減弱導致紅細胞聚集力增強，血清膽固醇含量，血漿纖維蛋白原含量增高，血小板聚集功能增強等可使血粘度增高。而茶色素具有降血脂、改善血流變具有顯著的差異性P值＜0.01。文獻報道臨床用肝素治療后增加或恢復了基底膜負電荷，減少蛋白質的漏出。本組經茶色素治療后其24小時尿蛋白定量明顯下降。其治療前后有顯著差異性P＜0.001。
茶色素治療NS可提高其免疫功能作用。據研究報道，茶色素對細胞免疫和體液免疫均有明顯的增強作用。由于NS患者常從尿中丟失免疫球蛋白和補體成份以及體內分解代謝增加，削弱了患者的免疫功能，加之常規用激素治療，經抗炎作用減輕NS患者急性炎癥的滲出，穩定溶酶體，減少纖維蛋白的沉著，降低腎臟毛細血管的通透性而減少尿蛋白的滲出。茶色素與激素同用還可抑制慢性炎癥中的增生反應，降低纖維細胞活性，減輕組織修復所致的纖維化。對常規大劑量運用激素治療腎病患者，其免疫功能降低，本組觀察茶色素治療腎病可提高其免疫功能。
NS患者常因大量蛋白尿而導致低蛋白血癥。嚴重的低蛋白血癥影響腎功能。目前對NS的治療必須做到以減少尿蛋白的漏出，來提高血漿蛋白。而本組經茶色素治療前后比較，白蛋白、腎功能改善明顯P＜0.001。
綜上所述，茶色素治療腎病綜合癥的特點1、抗疑、促纖溶、改善血流變。2、降血脂。3、提高免疫功能。4、減少尿蛋白漏出，提高血漿蛋白，改善腎功能。5、改善微循環，促進腎微血管循環。是目前治療NS值得進一步探討的有效藥物。
實驗例2茶色素治療腎病綜合癥伴高粘血癥近期療效觀察1材料和方法1.1診斷標準和一般資料52例NS患者均按1985年全國第二屆腎臟病會議修訂的“腎小球疾病臨床與分型標準”進行診斷，并經血液流變學檢測確診伴有高粘血癥。按就診日期以“順序分組法”將病人隨機分為茶色素組(A組)26例(男18例、女8例)，平均年齡28.4±6.5歲，平均病程6.4±5.8年，Ⅰ型9例、Ⅱ型17例；對照組(B組)26例(男17例、女9例)，平均年齡28.2±6.5歲，平均病程6.1±5.7年，Ⅰ型11例、Ⅱ型15例。
全部病例治療前后采用山東電訊七廠生產的自動血粘度分析儀測定血漿比粘度、全血比粘度、纖維蛋白原、紅細胞壓積和血沉五項血液流變學指標，并另選26例健康人(男17例、女9例，年齡27.3±6.5歲)，測定血液流變學正常值(X±s)做對照，作為甄別高粘血癥之依據。其正常值如下全血比粘度4.57±0.50，血漿比粘度1.70±0.05，纖維蛋白原3.15±0.104g/L，紅細胞壓積46.25±0.50；血沉8.1±5.13mm/h。
1.2治療方法與近期療效評定標準1.2.1治療方法A組在常規治療(強的松或加環磷酰胺、消炎痛、潘生丁、對癥治療)基礎上，以茶色素膠囊(中外合資江西綠色制藥有限公司提供，批號贛衛藥準(1994)139-1號)375mg/d，口服，8周1個療程。B組除不用茶色素外，其余同A組。
1.2.2近期療效評定標準顯效療程結束后，尿蛋白定量＜0.4g/24h，水腫等臨床癥狀消失。腎功能正常，血液流變學4項以上指標明顯改善；有效；尿蛋白定量減少＞50％，水腫等臨床癥狀明顯減輕，腎功能好轉，血液流變學三項指標改善；無效；尿蛋白定量減少不足50％，臨床癥狀，腎功能無明顯好轉，血液流變學各項無改善。
2結果1.1近期療效見表1。
表1兩組近期療效對比
表1顯示，A、B兩組的總有效率分別是92.31％和61.54％，A組明顯高于B組，經統計學處理有顯著性差異(P＜0.01)。
2.2尿蛋白、腎功能、血清總膽固醇變化見表2。
表2兩組治療前后尿蛋白、腎功能和膽固醇變化(X±S)尿蛋白(g/24h) BUN(mmol/L)Cr(mmol/L) TC(mmol/L)A組 治前5.0±2.5212.35±4.56150.2±85.29.33±3.22治后1.96±1.91* 5.67±4.31*108.6±54.43* 4.12±1.45ΔP值 ＜0.001 ＜0.001＜0.05 ＜0.001B組 治前4.75±2.25 12.15±4.24147.6±81.39.29±3.19治后2.70±1.84* 6.65±4.07*107.5±40.50* 5.38±1.36ΔP值 ＜0.001 ＜0.001＜0.05 ＜0.001注A組與B組治療后各指標比較，t檢驗ΔP＜0.005*P＞0.05表2顯示，兩組治療后尿蛋白定量、BUN、Cr和TC均明顯下降，但僅TC下降A組與B組比較有顯著差異(P＜0.005)。
2.3血液流變學檢查結果見表3。
表3兩組治療前后血液流變學指標比較(X±S)全血比粘度血漿比粘度 纖維蛋白原(g/L) 紅細胞壓積血沉(mm/h)A組 治前5.50±1.31 1.98±0.25 5.1786±0.61441.90±6.21 40.52±17.04治后4.53±1.16* 1.72±0.15* 3.1329±1.029Δ 41.34±4.75* 30.68±15.86*P值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＞0.5 ＜0.05B組 治前5.42±1.70 1.84±0.13 5.2415±1.66740.52±6.41 42.90±9.22治后4.80±0.85* 1.78±0.11* 5.3523±1.058Δ 42.03±4.26* 36.40±10.76*P值 ＞0.1 ＞0.05 ＞0.5＞0.5 ＜0.05注A組與B組比較，經t檢驗ΔP＜0.001.*P＞0.05從表3可見，兩組患者治療前均存在不同程度的高粘血癥，血液流變學及各項指標間無顯著性差異。經8周治療后，A組除紅細胞壓積外，其余四項指標均比治療前顯著降低(P＜0.01、P＜0.05和P＜0.001)，其中尤以纖維蛋白原下降最明顯，與B組比較有顯著性差異(P＜0.001)；B組除血沉外，其余四項指標治療前后均無統計學差異(P＞0.1,P＞0.05和P＞0.5)。
3討論最近血液流變學研究提示NS患者由于紅細胞表面負電荷密度降低，同種負電荷的排斥作用減弱，導致紅細胞聚集能力增強，以及血清膽固醇含量、血漿纖維蛋白原等大分子物質含量增高，血小板聚集功能增強等原因，可使血液粘滯度明顯增高。而血栓形成又常以血液粘滯度明顯增高為前奏，NS患者易并發腎靜脈血栓形成，可能與血液粘滯度增高有關。本組患者治療前的全血比粘度、血漿比粘度、血漿纖維蛋白原和血沉四項血液流變學指標均較正常對照組明顯升高(P＜0.001～0.025)，證實體內存在高粘血癥，而紅細胞壓積卻低于正常對照值(P＜0.01)，表明NS患者血液粘度增高，主要與血漿纖維蛋白原明顯增高有關，而與紅細胞壓積無關。此外，本組血清膽固醇水平明顯升高也參與導致血液粘滯度增高。上述結果與文獻報告相符。已經證實，血液高粘與血液高凝狀態關系密切，互為因果，二者是導致NS患者病變持續發展，腎靜脈血栓形成、腎功能進行減退的重要因素。因此，我們認為對NS患者進行降粘治療是十分必要的。
茶色素具有抗凝、促纖溶、抗血小板粘附、聚集和降脂等作用。本組26例NS患者經茶色素治療8周后總有效率92.31％，明顯高于對照組61.54％(P＜0.01)，NSⅠ療效優于NSⅡ，但經統計學處理無顯著性差異(P＞0.05)；尿蛋白定量顯著下降，腎功能和血清膽固醇恢復正常，其中以膽固醇下降尤為顯著，且明顯優于對照組(P＜0.005)，提示茶色素具有明顯的降脂作用，全血比粘度、血漿比粘度、纖維蛋白原和血沉均較治療前明顯降低，尤以纖維蛋白原含量降低為著，與對照組比較差異顯著(P＜0.001)，而對照組以上指標中僅血沉一項明顯下降。表明茶色素對NS高粘血癥患者具有肯定而明顯的降粘作用。這是因為它能顯著地降低作為NS伴發高粘血癥的重要因素的血漿纖維蛋白原和血清膽固醇的含量之故。
綜上所述，我們認為茶色素具有肯定而顯著的降粘作用，無毒副作用，安全可靠，是NS伴高粘血患者理想的降粘藥物，在積極常規治療基礎上，加用茶色素治療對改善NS患者的血液流變學紊亂，減輕腎臟病理損害，緩解臨床癥狀，防止腎靜脈血栓形成，改善腎功能，提高臨床療效均大有裨益。
實驗例3茶色素對腎病綜合癥患者免疫功能的影響腎病綜合癥是一組病因不同、病理變化各異的臨床癥候群。有研究認為各種炎癥和免疫介質是腎組織損傷的重要因素。因此調節機體免疫功能是治療腎病綜合癥的一項關鍵性措施。
1研究對象與方法
1.1研究對象 原發性腎病綜合癥30例，均符合1985年全國第二屆腎臟病學會修訂“腎小球疾病臨床與分型標準”的診斷標準。男9例、女21例，年齡26±8歲。其中Ⅰ型24例，Ⅱ型6例。
1.2治療方法 茶色素由中外合資江西省綠色制藥有限公司提供。用法每次125mg，每日3次，口服，療程為15天。服藥前及服藥期間不用腎上腺皮質激紊和其他免疫抑制劑。
1.3取血時間及實驗方法分別在服藥前和服藥后第15天空腹抽血，檢查外周血T3、T4、T8的百分率及免疫球蛋白IgG、IgA、IgM含量和部分患者C3活性，并測24小時尿蛋白定量。檢測方法采用《全國臨床檢驗操作規程》(1991年，第1版)，T3、T4、T8檢測為免疫熒光法，IgG、IgA、IgM的檢測為單向(環狀)免疫擴散法。
統計學處理，數據以X±s表示，組間資料差異性比較用t檢驗。
2結果茶色素前后T細胞亞群百分率變化對比見表1。
表1治療前后T細胞亞群(百分率)的變化(X±S)n 服藥前 服藥后tT33057±3.46 66.6±5.4411.56T43033.38±27.237.9±4.776.375T83029.28±3.9625.15±6.78 4.729* P＜0.001茶色素治療前后免疫球蛋白(g/L)變化對比見表2。
表2治療前后免疫球蛋白(g/L)的變化(X±S)n 服藥前服藥后tIgG307.19±0.928.67±0.839.25IgA301.09±0.081.4±0.3 7.75IgM300.95±0.351.36±0.664.21*P＜0.001
對8例患者觀察了補體C3的變化，發現治療后C3也顯著增高。
3討論茶色素是從綠茶中提取的一種以兒茶素為主的多元酚類物質，經過化學結構轉變而成的一種水溶性色素。有研究表明，該藥不僅具有降脂、抗凝和改善微循環等多種功用。而且還能增強機體非特異性免疫功能，并且毒副作用少。腎病綜合癥為免疫性疾病。用藥前測T3、T4細胞百分率明顯下降，T4/T8比值減少，免疫球蛋白IgG、IgA、IgM均低于正常值；服藥后檢測T3、T4明顯增高，T4/T8比值升高，IgG、IgA、IgM和C3增加。
本實驗表明，茶色素對細胞免疫和體液免疫均有明顯的增加作用。
權利要求
1.茶色素在制備治療腎病綜合癥的藥物中的應用。
2.茶色素在制備治療腎病綜合癥伴高粘血癥的藥物中的應用。
3.茶色素在制備能增加腎病綜合癥患者免疫功能的藥物中的應用。
全文摘要
本發明公開了茶色素的藥物新用途,即茶色素在制備腎病綜合征的藥物中的應用。
文檔編號A61P13/00GK1210001SQ97115268
公開日1999年3月10日 申請日期1997年8月28日 優先權日1997年8月28日
發明者孫劉根, 黃富清, 周時湘, 李樹云, 吳獻華, 曹興琴, 張恩襄, 秦復康, 司福中, 李道斌 申請人:江西省綠色工業集團公司