本發明屬于藥物
技術領域：
，主要涉及一種含有姜黃素藥物的納米膠束口服混懸液及凝膠，以及這二者的用途。
背景技術：
：高血脂癥是一種常見的疾病，系人體脂代謝失常所致，主要指血清中總膽固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白水平過高或高密度脂蛋白水平過低。高血脂癥早期沒有明顯的臨床癥狀，它對身體的損害是隱匿性、漸行性的，而且是全身性的。因為高血脂可加速動脈粥樣硬化，一旦動脈堵塞，就會引起很多疾病，如心腦血管疾病、腎臟病、肝臟疾病等。心腦血管疾病是中老年人致死的主要原因，是威脅人類健康的頭號殺手。據世界衛生組織統計，每年大約有1700萬人死于這種慢性疾病，占全球總死亡人數的30％左右。換言之，平均每3個死者中，就有1個是由心血管疾病引起的(蔡如鵬.心血管病危機來臨[N].中國新聞周刊，2007，(05)：54～55.)。現代醫藥學研究表明，影響人體血脂水平的因素主要有遺傳因素和環境因素。但遺傳因素的影響是有限的，主要受環境因素的影響。影響人體血脂水平的環境因素主要有：(1)高膽固醇、高飽和脂肪酸飲食：研究表明，當人體進食大量的飽和脂肪酸及高膽固醇，會使血液中膽固醇和甘油三酯的含量過高，形成高血脂癥。(2)高糖飲食：有研究結果提示，進食食糖量的比例過高，會引起血糖升高，刺激胰島素分泌增加，出現高胰島素血癥。后者可增加甘油三酯和極低密度前β-脂蛋白合成，引起高血脂癥。(3)肥胖：肥胖促進肝臟輸出含載脂蛋白B的脂蛋白，使低密度脂蛋白生成增加，更易引起高血脂癥。(4)缺乏運動：習慣靜坐的人血漿甘油三酯濃度比堅持體育鍛煉者要高。大量實驗研究表明，降低血脂主要可通過抑制脂類的吸收、合成或促進脂類的分解和排泄，來達到降低血脂的目的(林肖惠，王玉麗，徐為人.治療高血脂癥藥物的研究進展[J].心血管病學進展，2008,29(Suppl1):91-96.)。姜黃素(curcumin)是從姜黃屬中藥姜黃、郁金、莪術等提取的酚性色素有效成分，是姜黃屬中藥最重要的活性成分之一。傳統醫學認為，姜黃其根莖具有破淤、行氣、消積通經止痛之功效。現代藥理學研究表明，姜黃具有降脂、抗炎、抗微生物等多方面的藥理作用(于冬青，鄧華聰.姜黃素對糖尿病大鼠糖脂代謝及氧化應激的影響[J].重慶醫學，2005,34(1):37-39.)，且與經典的降脂藥物相比較毒副反應小。現代醫學研究表明，姜黃素可下調環氧合酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)、腫瘤壞死因子(tumornecrosisfactor，TNF)和其它炎癥細胞因子，具有抗風濕和抗關節炎的作用(鄭玉強，鄧立普.姜黃素藥理作用研究進展[J].遼寧中醫藥大學學報，2011,13(2):212-214.)。姜黃素通過抑制前列腺素合成、抑制溶酶體酶和琥珀酸脫氫酶活性而產生抗炎活性(SrivastavaAK,KumarV,RoyBK.InsightsfromthemoleculardockingofcurcumintothevirulentfactorsofHelicobacterpylori[J].Bioinformation,2015,11(10):447-457.)。姜黃凝膠對風濕性關節炎所引起的腫脹、疼痛有較顯著的藥效活性，且呈現一定的劑量依賴性。這一實驗結果將為進一步的臨床研究提供實驗依據(陳志龍，柳萌萌，張蕓等.姜黃凝膠抗炎鎮痛藥效學研究[J].華南國防醫學雜志，2016,30(8):492-495.)。姜黃素的主鏈為不飽和脂肪族及芳香族基團，水溶性差，性質不穩定，體內代謝迅速，生物利用度低，嚴重制約了其開發與應用。如何改善姜黃素各方面缺點，制備生物利用度高、用藥量低的姜黃素制劑，已經成為近年來藥學工作者亟待解決的課題。技術實現要素：本發明的目的在于針對以上要解決的技術問題，提供一種藥物穩定性好、生物利用度高、用藥量低、安全性高的姜黃素制劑。本發明的另一目的是提供該姜黃素制劑的制備方法。本發明的又一目的是提供該姜黃素制劑的用途。本發明的又一目的是提供一種含有該姜黃素制劑的姜黃素納米膠束凝膠。本發明的又一目的是提供該凝膠的制備方法。本發明的又一目的是提供該凝膠的用途。為了實現以上目的，本發明提供了以下技術方案。一種姜黃素納米膠束口服混懸液，其包括活性成分姜黃素、殼聚糖納米膠束藥物載體、表面活性劑、助表面活性劑和純凈水。所述姜黃素是中藥姜黃的提取物，高純度姜黃素，含量≥95％(HPLC)，它是姜黃素、去甲氧基姜黃素及雙去甲氧基姜黃素三種成分組成的混合物；所述表面活性劑優選為非離子表面活性劑，包括但不限于吐溫、司盤、泊洛沙姆、蔗糖脂肪酸酯；所述助表面活性劑優選為短鏈醇(具有1至5個碳原子)，包括但不限于乙醇、丙二醇、聚乙二醇等；所述藥用純凈水應符合《中國藥典》2010版(二部)注射用水項下標準。本發明中，殼聚糖納米膠束藥物載體包裹姜黃素，制成水溶性納米膠束的口服混懸液。優選地，所述姜黃素納米膠束口服混懸液由以下質量百分比的組分組成：姜黃素0.1-0.5％、殼聚糖納米膠束藥物載體0.5-1％、表面活性劑0.5-1％、助表面活性劑0.5-1％、藥用純凈水余量。優選地，所述姜黃素納米膠束口服混懸液pH值為6.9-7.2；優選pH值為7.0。本發明還提供了所述姜黃素納米膠束口服混懸液的制備方法，其包括以下步驟：將高純度姜黃素、殼聚糖納米膠束藥物載體放入研磨罐中，混合后關閉，緊鎖在研磨機上，在500rpm條件下研磨1h；打開研磨罐，加入表面活性劑，關閉，相同條件下研磨1h；打開研磨罐，加入助表面活性劑，關閉，相同條件下研磨1h，加入藥用純凈水洗滌、微孔濾膜過濾、裝瓶，即得。所述姜黃素納米膠束口服混懸液的理化指標如下：1)納米膠束粒徑及其分布20±7.33nm，分布寬度20-70nm；2)納米膠束Zeta電位-42±7.613)納米膠束載藥量9.45％4)納米膠束包封率81.86％本發明還提供了一種姜黃素納米膠束凝膠，其包括姜黃素納米膠束口服混懸液、殼聚糖納米冰片及凝膠劑。所述姜黃素納米膠束口服混懸液包括姜黃素、殼聚糖納米膠束藥物載體、表面活性劑及助表面活性劑。所述殼聚糖納米冰片包括殼聚糖納米膠束藥物載體及冰片；所述凝膠劑優選為卡波姆、聚乙烯醇、羧甲基纖維素鈉中的一種或多種。優選地，所述姜黃素納米膠束凝膠由以下質量百分比的組分組成：殼聚糖納米膠束藥物載體0.4-0.5％、冰片2.6-3.5％、凝膠劑0.6-1％、姜黃素納米膠束口服混懸液余量。優選地，所述姜黃素納米膠束凝膠pH值為6.9-7.2；優選pH值為7.0。本發明還提供了所述姜黃素納米膠束凝膠的制備方法，其包括以下步驟：將冰片用少量乙醇溶解，加入殼聚糖納米膠束藥物載體，攪拌混勻，過濾，回收乙醇，70℃真空干燥得殼聚糖納米冰片。將姜黃素納米膠束口服混懸液、所述殼聚糖納米冰片、凝膠劑以800-1500rpm速度攪拌30min，灌裝，即得。所述姜黃素納米膠束凝膠的外觀特點及抑菌特性如下：1)納米膠束凝膠為金黃色半固體狀凝膠；2)大腸桿菌5min抑菌率：55.56％3)金黃色葡萄球菌5min抑菌率：92.10％4)白色念珠菌5min抑菌率：53.75％本發明還提供了所述姜黃素納米膠束口服混懸液在制備用于預防和治療高血脂癥的藥物中的用途。本發明還提供了所述姜黃素納米膠束凝膠在制備抑菌抗炎抗氧化藥物中的用途。該藥物為外用涂抹，應用于人體表面各種炎癥的治療，如鼻竇炎、牙齦炎、宮頸炎等疾病。本發明的姜黃素納米膠束口服混懸液和姜黃素納米膠束凝膠分別具有治療高血脂癥和抑菌抗炎抗氧化作用，藥物穩定性好，生物利用度高，用藥量少，吸收快，安全性高。本發明的方法摒棄了傳統的采用有機合成或酶合成殼聚糖嵌段化合物制備納米載藥材料的方法，以殼聚糖為材料，通過靜電吸附、離子交聯及聚電解質復合物-表面活性劑自組裝方法制備水溶性殼聚糖納米膠束包裹姜黃素，制成無毒副作用的納米膠束水溶液，進而在此基礎上加入采用殼聚糖納米膠束藥物載體包裹的冰片及卡波姆等輔助材料，制成姜黃素納米膠束凝膠，合成效率高，產物質量好。具體實施方式下面結合具體實施例對本發明的技術方案作進一步的詳述，但本發明并不限于以下實施例。本發明使用的殼聚糖納米膠束藥物載體優選為中國專利ZL201310034967.7所記載的殼聚糖納米膠束包裹物溶液，或由其所記載的方法制備獲得。實施例1：1.制備0.1％姜黃素納米膠束口服混懸液制備方法：稱取姜黃素0.1g、殼聚糖納米膠束藥物載體0.5g，放入研磨罐中，混合后關閉，緊鎖在研磨機上，在500rpm條件下研磨1h；打開研磨罐，加入吐溫800.5g，關閉，相同條件下研磨1h；打開研磨罐，加入丙二醇0.5g，關閉，相同條件下研磨1h，加入少量藥用純凈水洗滌后加至100mL，微孔濾膜過濾、裝瓶，即得。2.制備姜黃素納米膠束凝膠制備方法：1)稱取10g冰片，加入20mL95％乙醇，攪拌溶解，加入1.5g殼聚糖納米膠束藥物載體，攪拌混勻，過濾，回收乙醇，70℃真空干燥，制得8g殼聚糖納米冰片；2)量取100mL姜黃素納米膠束口服混懸液，加入3.0g殼聚糖納米冰片，攪拌均勻，加入1.0g卡波姆941，800rpm速度攪拌30min，灌裝，即得。實施例2：1.制備0.5％姜黃素納米膠束口服液制備方法：稱取姜黃素0.5g、殼聚糖納米膠束藥物載體1.0g，放入研磨罐中，混合后關閉，緊鎖在研磨機上，在500rpm條件下研磨1h；打開研磨罐，加入泊洛沙姆1.0g，關閉，相同條件下研磨1h；打開研磨罐，加入乙醇1.0g，關閉，相同條件下研磨1h，加入少量藥用純凈水洗滌后加至100mL，微孔濾膜過濾、裝瓶，即得。2.制備姜黃素納米膠束凝膠制備方法：1)稱取10g冰片，加入20mL95％乙醇，攪拌溶解，加入1.5g殼聚糖納米膠束藥物載體，攪拌混勻，過濾，回收乙醇，70℃真空干燥，制得8g殼聚糖納米冰片；2)量取100mL姜黃素納米膠束口服混懸液，加入3.0g殼聚糖納米冰片，攪拌均勻，加入0.8g用8mL純凈水加熱溶解的聚乙烯醇溶液，1000rpm速度攪拌30min，灌裝，即得。實施例3：1.制備0.25％姜黃素納米膠束口服液制備方法：稱取姜黃素0.25g、殼聚糖納米膠束藥物載體0.75g，放入研磨罐中，混合后關閉，緊鎖在研磨機上，在500rpm條件下研磨1h；打開研磨罐，加入蔗糖脂肪酸酯0.75g，關閉，相同條件下研磨1h；打開研磨罐，加入聚乙二醇0.75g，關閉，相同條件下研磨1h，加入少量藥用純凈水洗滌后加至100mL，微孔濾膜過濾、裝瓶，即得。2.制備姜黃素納米膠束凝膠制備方法：1)稱取10g冰片，加入20mL95％乙醇，攪拌溶解，加入1.5g殼聚糖納米膠束藥物載體，攪拌混勻，過濾，回收乙醇，70℃真空干燥，制得8g殼聚糖納米冰片；2)量取100mL姜黃素納米膠束口服混懸液，加入4.0g殼聚糖納米冰片，攪拌均勻，加入0.6g用12mL純凈水溶解的羧甲基纖維素鈉溶液，1500rpm速度攪拌30min，灌裝，即得。實施例4：1.制備0.1％姜黃素納米膠束口服液制備方法：稱取姜黃素0.1g、殼聚糖納米膠束藥物載體0.5g，放入研磨罐中，混合后關閉，緊鎖在研磨機上，在500rpm條件下研磨1h；打開研磨罐，加入泊洛沙姆0.5g，關閉，相同條件下研磨1h；打開研磨罐，加入聚乙二醇0.5g，關閉，相同條件下研磨1h，加入少量藥用純凈水洗滌后加至100mL，微孔濾膜過濾、裝瓶，即得。2.制備姜黃素納米膠束凝膠制備方法：1)稱取10g冰片，加入20mL95％乙醇，攪拌溶解，加入1.5g殼聚糖納米膠束藥物載體，攪拌混勻，過濾，回收乙醇，70℃真空干燥，制得8g殼聚糖納米冰片；2)量取100mL姜黃素納米膠束口服混懸液，加入3.0g殼聚糖納米冰片，攪拌均勻，加入1.0g卡波姆941，800rpm速度攪拌30min，灌裝，即得。姜黃素納米膠束口服混懸液穩定性試驗方法：1、姜黃素納米膠束口服混懸液穩定性影響因素實驗取上述各實施例配制好的姜黃素納米膠束口服混懸液，置于無色透明密封安瓿中，按中國藥典2010版的要求進行影響因素實驗考察穩定性，分別于溫度40℃、光照(4500Lx±500Lx)條件下放置5天、10天后用高效液相色譜法測定樣品中姜黃素的含量，結果見表1、表2。表1.姜黃素納米膠束口服混懸液影響因素40℃試驗結果表2.姜黃素納米膠束口服混懸液影響因素光照試驗結果姜黃素納米膠束凝膠穩定性影響因素實驗取上述各實施例配制好的姜黃素納米膠束凝膠，置于無色透明密封安瓿中，按中國藥典2010版的要求進行影響因素實驗考察穩定性，分別于溫度40℃、光照(4500Lx±500Lx)條件下放置5天、10天后用高效液相色譜法測定樣品中姜黃素的含量，結果見表3、表4。表3.姜黃素納米膠束凝膠影響因素40℃試驗結果表4.姜黃素納米膠束凝膠影響因素光照試驗結果姜黃素納米膠束口服混懸液穩定性對比實驗取上述各實施例配制好的姜黃素納米膠束口服混懸液，置于棕色、密封安瓿中，根據姜黃素特殊性質，設計于溫度10℃、無光照條件下放置5天、10天后用高效液相色譜法測定樣品中姜黃素的含量，結果見表5，以此作為穩定性對照實驗。表5.姜黃素納米膠束口服混懸液特殊條件下試驗結果姜黃素納米膠束凝膠穩定性對比實驗取上述各實施例配制好的姜黃素納米膠束凝膠，置于棕色、密封安瓿中，根據姜黃素特殊性質，設計于溫度10℃、無光照條件下放置5天、10天后用高效液相色譜法測定樣品中姜黃素的含量，結果見表6，以此作為穩定性對照實驗。表6.姜黃素納米膠束凝膠特殊條件下試驗結果姜黃素納米膠束口服混懸液穩定性加速試驗取上述各實施例配制好的姜黃素納米膠束口服混懸液，置于棕色、密封安瓿中，于溫度10℃±2℃、RH75％±5％的條件下放置6個月，于第1、2、3、6個月分別取樣檢查，結果與0天樣品比較，試驗結果見表7：表7.姜黃素納米膠束口服混懸液加速試驗結果姜黃素納米膠束凝膠穩定性加速試驗取上述各實施例配制好的姜黃素納米膠束凝膠，置于棕色、密封安瓿中，于溫度10℃±2℃、RH75％±5％的條件下放置6個月，于第1、2、3、6個月分別取樣檢查，結果與0天樣品比較，試驗結果見表8：表8.姜黃素納米膠束凝膠加速試驗結果姜黃素納米膠束口服混懸液穩定性長期試驗取上述各實施例配制好的姜黃素納米膠束口服混懸液，置于棕色、密封安瓿中，于溫度10℃±2℃，RH60％±10％條件下貯存，于第3、6、9、12個月分別取樣檢查，結果與0天樣品比較，試驗結果見表9：表9.姜黃素納米膠束口服混懸液長期試驗結果姜黃素納米膠束凝膠穩定性長期試驗取上述各實施例配制好的姜黃素納米膠束凝膠，置于棕色、密封安瓿中，于溫度10℃±2℃，RH60％±10％條件下貯存，于第3、6、9、12個月分別取樣檢查，結果與0天樣品比較，試驗結果見表10：表10.姜黃素納米膠束凝膠長期試驗結果結論：由于姜黃素理化性質對溫度及光線敏感，實施例樣品在溫度40℃±2℃、光照(4500Lx±500Lx)條件下，穩定性受到影響，特別是光線對穩定性影響因素更大；在溫度10℃±2℃、RH75％±5％和溫度10℃±2℃、RH60％±10％條件下放置12個月，姜黃素納米膠束口服混懸液及姜黃素納米膠束凝膠穩定性高。試驗結果表明，姜黃素納米膠束口服混懸液及姜黃素納米膠束凝膠在低溫下冷藏及使用，藥品的穩定性得到大幅提升，減小了藥物的用藥風險，增強了藥物的安全性。應用實施例1：姜黃素納米膠束口服混懸液治療高血脂癥的臨床療效觀察。觀察病例40例，其中女18例，男22例，年齡46-75歲，平均年齡60歲；合并糖尿病7例，高血壓病17例，冠心病5例，缺血性腦血管病3例。診斷標準，按1997年中華心血管學會擬定的血脂異常防治建議所定正常范圍。血清膽固醇(TC)≥5.72mmol/L，或血清甘油三酯(TG)≥1.70mmol/L，或血清低密度脂蛋白(LDL-C)≥3.64mmol/L為觀察對象。3項中有2項超出正常范圍者列入觀察對象。觀察病例口服姜黃素納米膠束口服混懸液，每次10mL，每天2次。觀察期間停用其它降脂藥，治療其它疾病的藥物服用保持不變，二個月為一療程。服藥前后測定總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、空腹血糖(FBG)、谷丙轉氨酶(GPT)。各指標的療效判定標準參照2002年《中藥新藥臨床研究指導原則(試行)》中“中藥新藥治療高脂血癥的臨床研究指導原則”的實驗室檢查療效判斷標準。測定結果：顯效30例(75％)，有效7例(17.5％)，總有效率92.5％。各指標治療前后的變化(見表11)。表11.各指標治療前后的變化NTCLDL-CHDL-CTG治療前406.62±1.154.37±0.831.48±0.382.32±1.57治療后406.08±1.21*3.58±0.31*1.69±0.69*1.83±1.28**與治療前比較，P＜0.01全部觀察病例治療前后測定血清谷丙轉氨酶(GPT)，結果比較無統計學差異，提示口服姜黃素納米膠束口服混懸液確有較好的護肝作用。應用實施例2：姜黃素納米膠束凝膠治療鼻竇炎的臨床療效觀察。觀察病例30例，其中女16例，男14例；年齡40±11歲；病程最短4個月，最長3年；其中慢性鼻竇炎18例，急性鼻竇炎2例，伴鼻息肉者15例；參照中華耳鼻咽喉科學會推薦的變應性鼻炎診斷及分型標準，Ⅰ型4例，Ⅱ型20例，Ⅲ型6例。觀察病例用藥前3天停用抗生素、抗過敏藥物及滴鼻劑，停用激素類藥物，將姜黃素納米膠束凝膠直接涂抹于鼻腔粘膜上面，每天2-3次，每次2-3mg；連續涂抹用藥15天。觀察指標(見表12)。表12.治療前后觀察的指標以治療前積分之和減去治療后積分之和，除以觀察項目數，＞2為優；1-2為良；0-1為中；＜0為差。用優與良之和計算總有效率。在30例被觀察的患者中，優：13例，占43.3％；良：12例，占40％；中：3例，占10％；差：2例，占6.7％。結論：經臨床試驗，姜黃素納米膠束凝膠對鼻竇炎治療的有效率83.3％，對鼻竇炎的鼻塞、流膿涕等癥狀控制較好。在單純性鼻竇炎的治療中，姜黃素納米膠束凝膠顯示出優良的治療效果。應用實施例3：姜黃素納米膠束凝膠治療牙齦炎的臨床療效觀察。觀察病例80例，其中女33例，男47例；年齡16-58歲(平均35.4歲)；病程最短6天，最長12年(平均2.6年)。觀察病例選擇參照《口腔內科學》第四版中有關牙齦炎的診斷標準。觀察病例將姜黃素納米膠束凝膠直接涂抹于口腔牙齦腫脹粘膜上面，每天2-3次，每次2-3mg；3天為一療程。用藥前后采用視覺模擬評分法(visualanaloguescale，VAS)和牙齦指數(GI)檢測記錄患者消炎鎮痛情況。疼痛3度記分法：0為無疼痛；1為輕微疼痛，不影響生活；2為中度疼痛，影響生活，尚可忍受，服止痛藥緩解；3為重度疼痛，不能忍受，需服鎮痛劑治療。牙齦指數(GI)：0為牙齦正常；1為輕度炎癥，牙齦鮮紅或暗紅，輕度水腫，探診無出血；2為中度炎癥，牙齦充血，表面光亮水腫，探診出血；3為重度炎癥，牙齦紅腫明顯，有潰爛或有膿液、瘺道，自發性出血傾向。治療效果綜合評價標準：1為顯效，自發性疼痛消失，齦袋滲出、溢膿消失，探診無出血，牙齦指數減少1.0以上；2為有效，自發性疼痛消失，輕微觸痛，齦袋少量滲出，溢膿消失，探診少量出血，牙齦指數減少0.5以上；3為無效，自發性疼痛與觸痛均未消失，甚至有加重傾向，齦袋滲出、溢膿未減輕，探診出血，牙齦指數無變化。總有效為顯效與有效之和，觀察患者治療效果綜合評價見表13.表13.觀察患者治療效果綜合評價n(％)結論：治療效果綜合評價表明，治療后第三天有效率47.5％，治療后第七天顯效率97.5％。臨床試驗證明，姜黃素納米膠束凝膠具有明顯的抑菌、抗炎、鎮痛效果，治療牙齦炎療效確切，值得臨床上推廣和使用。應用實施例4：姜黃素納米膠束凝膠治療宮頸炎的臨床療效觀察。觀察病例80例，年齡20-46歲(平均32.2±4.6歲)。其中，宮頸糜爛Ⅰ度49例，宮頸糜爛Ⅱ度23例，宮頸糜爛Ⅲ度8例。治療前均對患者進行陰道分泌物檢查及宮頸細胞學檢查，排除宮頸惡性病變，給予姜黃素納米膠束凝膠于月經干凈后2-3天應用，每晚睡前對外陰清洗后，取下給藥器前端的前蓋，將給藥器緩慢插入陰道深處，1支/天，10天一療程。治療效果評價標準：1為治愈，臨床癥狀明顯消失，宮頸無糜爛，表面光滑；2為顯效，臨床癥狀顯著改善，糜爛面積呈＞50％縮小；3為有效，臨床癥狀明顯減輕，糜爛面積呈＜50％縮小，或顆粒型轉變成單純型，乳突型轉變成顆粒型；4為無效，臨床癥狀無明顯改善，宮頸糜爛無明顯改善。結果：本試驗觀察80例患者中，治愈69例(86.25％)；顯效7例(8.75％)；有效3例(3.75％)；無效1例(1.25％)。總有效率：98.75％。結論：宮頸糜爛采用姜黃素納米膠束凝膠治療，具有較高的安全性和有效性，操作簡便，且無明顯的不良反應，可顯著改善患者生活質量，具有重要的臨床意義，值得廣泛推廣。當前第1頁1 2 3