米糠多糖口服液、注射液和可溶性粉末及相應的制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種米糠多糖口服液、注射液和可溶性粉末及相應的制備方法，采用Ca（OH）2溶液超聲輔助提取的提取方法、乙醇沉淀法與葡聚糖凝膠柱層析法相結合的純化法等，所制得的米糠多糖口服液用作飼料添加劑，用于提高健康畜禽機體免疫力；所制得的米糠多糖注射液用作免疫佐劑，與疫苗同用，提高疫苗免疫能力；所制得的米糠多糖可溶性粉用作飼料添加劑，用于提高健康畜禽機體免疫力。本發明適用于米糠多糖口服液、注射液和可溶性粉的制備，還可以適用作提高免疫力的免疫佐劑和飼料添加劑。
【專利說明】米糠多糖口服液、注射液和可溶性粉末及相應的制備方法

【技術領域】
[0001] 本發明屬于藥物制劑領域，涉及一種米糠多糖制劑及其制備方法，具體涉及一種 米糠多糖口服液、注射液和可溶性粉末及相應的制備方法。

【背景技術】
[0002] 多糖是一類廣泛存在于動物、植物和微生物細胞中的重要生物大分子物質。現代 藥理學研究表明多糖具有增強機體免疫力、抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、抗自由基、抗衰老、降 血糖、降血脂等多種生物活性，廣泛應用于人及動物的疾病防治。目前黃芪多糖用于提高畜 禽免疫力已得到廣泛應用。但是，在畜禽養殖上應用黃芪多糖成本較高，而且動物與人爭 藥，給越來越匱乏的藥物資源帶來更大壓力。
[0003] 李淑芳等，《米糠多糖對環磷酰胺誘導免疫抑制雞外周血T淋巴細胞增殖活性及 疫苗免疫效果的影響》，中國獸醫科學，2007, 37 (07) : 588-592,研究表明雛雞口服一定劑 量的米糠多糖對環磷酰胺引起的細胞免疫和體液免疫抑制具有一定的拮抗作用；《米糠多 糖對人工感染傳染性法氏囊病毒雛雞體液免疫狀態的影響》，中獸醫醫藥雜志，2008年第3 期，研究表明高劑量米糠多糖對雞傳染性法氏囊病毒造成的體液免疫抑制具有一定的改善 和緩解作用。
[0004] 但是現在尚無米糖多糖制劑上市，因此研究米糖多糖制劑是市場所需。


【發明內容】

[0005] 本發明要解決的技術問題，是提供一種米糠多糖口服液、注射液和可溶性粉末及 相應的制備方法，所制得的米糠多糖口服液用作飼料添加劑，用于提高健康畜禽機體免疫 力；所制得的米糠多糖注射液用作免疫佐劑，與疫苗同用，提高疫苗免疫能力；所制得的米 糠多糖可溶性粉可用作飼料添加劑，用于提高健康畜禽機體免疫力；本發明的另外一個目 的，是提供上述三種制劑的制備方法。
[0006] 為解決上述技術問題，本發明所采取的技術方案是： 一種米糠多糖口服液，由以下重量份數的原料組成： 米糠 1?5份、Ca (OH)2 0.6?54份、抑菌劑0.02?0.5份、水 12?300份。
[0007] 作為本發明的一種限定，所述的抑菌劑為苯甲酸鈉、尼泊金或山梨酸酯中的一種； 其相應用量分別為苯甲酸鈉〇. 25?0. 5份、尼泊金0. 02?0. 05份、山梨酸酯0. 02?0. 03 份。
[0008] 本發明還提供了上述米糠多糖口服液的制備方法，它按照以下步驟順序進行 ： 1)米糠溶液的制備 將米糠進行超聲輔助提取，將Ca(OH)2溶于水中制成7. 5-18%的Ca(OH)2溶液作為提 取溶劑，其中6-15重量份加入米糠于80?KKTC超聲提取15?30min，過濾，濾渣中再加 6-15重量份Ca(OH) 2溶液，于80?KKTC超聲提取5?25min，反復提取1?3次，合并濾 液，濃縮，提取出米糠中的米糠多糖a ; 然后采用絮凝澄清技術的純化方法進行純化，將米糠多糖a置于水浴鍋中加熱至 80°C，并于80°C加入體積份數為米糠多糖a體積份數1?5%的ZTC1+1 III型中的B組分， 保溫IOmin并不斷攪拌，再加入體積份數為米糠多糖a體積份數為0. 5?2. 5%的ZTC1+1 III型中的A組分，保溫IOmin并不斷攪拌，過濾，即得濃度為1. 2?2. 9%的米糠多糖溶液b; 2)米糠多糖口服液的制備 將米糠多糖溶液b濃縮至濃度為7. 6%-42. 5%，靜置18?24h，過濾，加入配方量的抑菌 齊U，用飲用水定容濃度至7. 6%-42. 5%，分裝、滅菌，即得每Iml 口服液中所含的米糠多糖相 當于1?5g米糠中所含的米糠多糖。
[0009] 本發明還提供了一種米糠多糖注射液，由以下重量份數的原料組成： 米糠1份、注射用水12?60份、95%乙醇32?53. 3份、Ca (OH) 2 0. 6?10. 8份。
[0010] 本發明還提供了上述米糠多糖注射液的制備方法，它按照以下步驟順序進行： 1) 米糠溶液的制備 將米糠進行超聲輔助提取，將Ca (OH) 2溶于注射用水中制成濃度為7. 5-18%的Ca (OH) 2 溶液作為提取溶劑，其中6-15重量份加入米糠于80?KKTC超聲提取15?30min，過濾， 濾渣中再加6-15重量份Ca (OH)2溶液，于80?KKTC超聲提取5?25min，反復提取1? 3次，合并濾液，濃縮，提取出米糠中的米糠多糖a ; 然后采用乙醇沉淀法與葡聚糖凝膠柱層析法相結合的方法進行純化，將米糠多糖a 中加入6. 5-10. 8重量份的95%乙醇，攪拌，使含醇量達65%，靜置12-24h，取上清液加入 25. 5-42. 5重量份的95%乙醇，攪拌，使含醇量達85%，取沉淀，將沉淀加于葡聚糖凝膠柱上， 以3?5柱體積注射液用水洗脫，控制流速為0. 5?lml/min，收集洗脫液，得濃度為1. 4? 2. 9%的米糠多糖溶液b ; 2) 米糠多糖注射液的制備 將米糠多糖溶液b中加注射用水0?1. 9重量份至米糠多糖含量為1?2%，加入0. 5% 活性炭，加熱并保持微沸l〇min，過濾，用注射用水定容至多糖含量為1?2%，分裝、滅菌，即 得米糠多糖注射液，每Iml注射液中所含的米糠多糖相當于0. 125?0. 25g米糠中所含的 米糠多糖。
[0011] 本發明還提供了一種米糠多糖可溶性粉末，由以下重量份數的原料組成： 米糠1份、Ca(OH)2 0? 6?3. 6份、飲用水 12?60份、95%乙醇 6. 5?10. 8份。 [0012] 本發明還提供了上述米糠多糖可溶性粉末的制備方法，它按照以下步驟順序進 行： 1) 米糠溶液的制備 將米糠進行超聲輔助提取，將Ca (OH) 2溶于水中制成濃度為7. 5-18%的Ca (OH) 2溶液作 為提取溶劑，將其中的6-15重量份加入米糠于80?100°C超聲提取15?30min，過濾，濾 渣中再加6-15重量份Ca (OH)2溶液，于80?KKTC超聲提取5min?25min，反復提取1? 3次，合并濾液，濃縮，提取出米糠中的米糠多糖a ; 然后采用乙醇沉淀法的純化方法進行純化，將米糠多糖a中緩慢加入95%乙醇，邊加邊 攪拌，使含醇量達65%，靜置24h，過濾，濾液回收乙醇，得濃度為1. 2-2. 9%的米糠多糖溶液 b ； 2) 米糠多糖可溶性粉末的制備 將米糠多糖溶液b濃縮至相對密度為I. 05?I. 15,控制噴霧干燥過程中的進風溫度為 160?200°C，排風溫度為65?80°C，噴霧干燥，即得米糠多糖可溶性粉，即得每Ig可溶性 粉末中所含的米糠多糖相當于8?9g米糠中所含的米糠多糖。
[0013] 在這一步試驗中需要控制藥液的密度。因為密度過低，霧滴在干燥室內不能干燥 完全，不能噴出粉；密度過高，不能形成霧滴，噴霧無法進行。
[0014] 由于采用了上述的技術方案，本發明與現有技術相比，所取得的技術進步在于： 本發明將米糠多糖制備成口服液、注射液和免疫佐劑，更利于動物體的吸收，提高動物 的免疫力。米糠多糖注射液用作免疫佐劑，與疫苗同用，提高疫苗免疫能力；米糠多糖口服 液用作飼料添加劑，用于提高健康畜禽機體免疫力；米糠多糖可溶性粉用作飼料添加劑，用 于提高健康畜禽機體免疫力。
[0015] 本發明采用Ca (OH)2溶液超聲輔助提取的方法對米糠中的米糠多糖進行提取，Ca (OH) 2溶液能夠阻止米糠中的米糠多糖與其它成分結合，提高米糠多糖的純度，且以超聲輔 助提取，將溫度控制在80?KKTC，在堿性條件下能將結合米糠多糖分解，提高米糠多糖的 收率，同時超聲提取縮短了提取時間；乙醇沉淀法與葡聚糖凝膠柱層析法相結合的純化法 可進一步除去提取物中的雜質，使米糠多糖的含量達到90%以上。
[0016] 本發明適用于米糠多糖口服液、注射液和可溶性淀粉的制備，還可以用作提高免 疫力的免疫佐劑和飼料添加劑。
[0017] 本發明下面將結合具體實施例作進一步詳細說明。

【具體實施方式】
[0018] 實施例1 一種米糠多糖口服液及其制備方法 一種米糠多糖口服液，它由以下原料組成： 米糠 lg、Ca(0H)2 2.8g、苯甲酸鈉 0.3g、水 20g。
[0019] 上述米糠多糖口服液的制備方法，按照以下步驟順序進行： 1)米糠溶液的制備 將米糠進行超聲輔助提取，將Ca (OH) 2溶于水中制成17. 5%的Ca (OH) 2溶液作為提取溶 齊U，其中8g加入米糠于80°C超聲提取20min，過濾，濾渣中再加8g Ca (OH) 2溶液，于80°C超 聲提取25min，過濾，濾渣中再加Ca (OH) 2溶液，于80°C超聲提取15min，合并濾液，濃縮，提 取出米糠中的米糠多糖a; 然后采用絮凝澄清技術的純化方法進行純化，將米糠多糖a置于水浴鍋中加熱至 80°C，并于80°C加入米糠多糖a體積量1%的ZTC1+1 III型中的B組分，保溫IOmin并不斷 攪拌，再加入〇. 5%ZTC1+1 III型中的A組分（A組分的用量是B組分用量的一半)，保溫IOmin 并不斷攪拌，過濾，即得濃度為1.5%的米糠多糖溶液b;其中，ZTC 1+1 III型的兩種組分為 生產廠家為天津正天成澄清技術有限公司的，批號為2010年5月28日的澄清劑。
[0020] 2)米糠多糖口服液的制備 將米糠多糖溶液b濃縮至17%，靜置18h，過濾，加入配方量的抑菌劑，用飲用水定容至 17%，分裝、滅菌，米糠多糖口服液，即得每Iml口服液中含原料藥2g。
[0021] 將所制備的米糠多糖口服液進行米糠多糖活性試驗，具體實驗方法如下： 將30只昆明系小鼠(體重為18g?22g)隨機分為3組，每組10只，分別標記為空白組、 黃芪多糖組、米糠多糖，將黃芪多糖、米糠多糖分別制成1%的口服液，空白組每日給0.5ml 生理鹽水，黃芪多糖組每日給0. 5ml黃芪多糖口服液，米糠多糖組每日給0. 5ml米糠多糖口 服液；口服，連續給藥7天，開始給藥后的第8天，將小鼠處死，取脾臟，稱重。
[0022] 空白組實驗結果如下：

【權利要求】
1. 一種米糠多糖口服液，其特征在于它由以下重量份數的原料組成： 米糠 1?5份、Ca (OH)2 0.6?54份、抑菌劑0.02?0.5份、水 12?300份。
2. 根據權利要求1所述的米糠多糖口服液，其特征在于：所述的抑菌劑為苯甲酸鈉、尼 泊金或山梨酸酯中的一種；其相應用量分別為苯甲酸鈉0.25?0.5份、尼泊金0.02?0.05 份、山梨酸酯0.02?0.03份。
3. -種如權利要求1或2所述的米糠多糖口服液的制備方法，其特征在于它按照以下 步驟順序進行： 1) 米糠溶液的制備 將米糠進行超聲輔助提取，將Ca(OH)2溶于水中制成7. 5-18%的Ca(OH)2溶液作為提 取溶劑，其中6-15重量份加入米糠于80?KKTC超聲提取15?30min，過濾，濾渣中再加 6-15重量份Ca(OH)2溶液，于80?KKTC超聲提取5?25min，反復提取1?3次，合并濾 液，濃縮，提取出米糠中的米糠多糖a ; 然后采用絮凝澄清技術的純化方法進行純化，將米糠多糖a置于水浴鍋中加熱至 80°C，并于80°C加入體積份數為米糠多糖a體積份數1?5%的ZTC1+1 III型中的B組分， 保溫IOmin并不斷攪拌，再加入體積份數為米糠多糖a體積份數的0. 5?2. 5%的ZTC1+1 III型中的A組分，保溫IOmin并不斷攪拌，過濾，即得濃度為1. 2?2. 9%的米糠多糖溶液b ; 2) 米糠多糖口服液的制備 將米糠多糖溶液b濃縮至濃度為7. 6-42. 5%，靜置18?24h，過濾，加入配方量的抑菌 齊U，用飲用水定容濃度至7. 6-42. 5%，分裝、滅菌，即得每Iml 口服液中所含的米糠多糖相當 于1?5g米糠中所含的米糠多糖。
4. 一種米糠多糖注射液，其特征在于它由以下重量份數的原料組成： 米糠1份、注射用水12?60份、95%乙醇32?53. 3份、Ca (OH) 2 〇. 6?10. 8份。
5. -種如權利要求4所述的米糠多糖注射液的制備方法，其特征在于它按照以下步驟 順序進行： 1) 米糠溶液的制備 將米糠進行超聲輔助提取，將Ca (OH) 2溶于注射用水中制成濃度為7. 5-18%的Ca (OH) 2溶液作為提取溶劑，其中6-15重量份加入米糠于80?KKTC超聲提取15?30min，過濾， 濾渣中再加6-15重量份Ca (OH)2溶液，于80?KKTC超聲提取5?25min，反復提取1? 3次，合并濾液，濃縮，提取出米糠中的米糠多糖a ; 然后采用乙醇沉淀法與葡聚糖凝膠柱層析法相結合的方法進行純化，將米糠多糖a 中加入6. 5-10. 8重量份的95%乙醇，攪拌，使含醇量達65%，靜置12-24h，取上清液加入 25. 5-42. 5重量份的95%乙醇，攪拌，使含醇量達85%，取沉淀，將沉淀加于葡聚糖凝膠柱上， 以3?5柱體積注射液用水洗脫，控制流速為0. 5?lml/min，收集洗脫液，得濃度為1. 4? 2. 9%的米糠多糖溶液b ; 2) 米糠多糖注射液的制備 將米糠多糖溶液b中加注射用水0?1. 9重量份至米糠多糖含量為1?2%，加入0. 5% 活性炭，加熱并保持微沸l〇min，過濾，用注射用水定容至多糖含量為1?2%，分裝、滅菌，即 得米糠多糖注射液，每Iml注射液中所含的米糠多糖相當于0. 125?0. 25g米糠中所含的 米糠多糖。
6. -種米糠多糖可溶性粉末，其特征在于它由以下重量份數的原料組成： 米糠1份、Ca(OH)2 0? 6?3. 6份、飲用水 12?60份、95%乙醇 6. 5?10. 8份。
7. -種如權利要求6所述的米糠多糖可溶性粉末的制備方法，其特征在于它按照以下 步驟順序進行： 1) 米糠溶液的制備 將米糠進行超聲輔助提取，將Ca (OH) 2溶于水中制成濃度為7. 5-18%的Ca (OH) 2溶液作 為提取溶劑，將其中的6-15重量份加入米糠于80?100°C超聲提取15?30min，過濾，濾 渣中再加6-15重量份Ca(OH)2溶液，于80?KKTC超聲提取5?25min，反復提取1?3 次，合并濾液，濃縮，提取出米糠中的米糠多糖a ; 然后采用乙醇沉淀法的純化方法進行純化，將米糠多糖a中緩慢加入95%乙醇，邊加邊 攪拌，使含醇量達65%，靜置24h，過濾，濾液回收乙醇，得濃度為1. 2-2. 9%的米糠多糖溶液 b ； 2) 米糠多糖可溶性粉末的制備 將米糠多糖溶液b濃縮至相對密度為1. 05?1. 15,控制噴霧干燥過程中的進風溫度為 160?200°C，排風溫度為65?80°C，噴霧干燥，即得米糠多糖可溶性粉，即得每Ig可溶性 粉末中所含的米糠多糖相當于8?9g米糠中所含的米糠多糖。
【文檔編號】A61K9/14GK104306391SQ201410477190
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年9月18日 優先權日:2014年9月18日
【發明者】牛志勇, 王新, 史杏芬, 魏昆鵬, 朱秀君, 王志香, 高彩虹, 丘成楨 申請人:河北科星藥業有限公司