專利名稱：用于神經疾病免疫療法的方法和組合物的制作方法
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本發明總體涉及這樣的抗體，所述抗體是BACEl拮抗劑，其例如抑制或降低BACEl活性，并且涉及包含所述抗體的組合物。另外的實施方案包括用于治療和診斷多種神經疾病或病癥的方法，以及減少患者中APP和/或Αβ多肽的方法。背景淀粉狀變性不是單一的疾病實體，而是多樣化組的進行性疾病過程，其表征為被稱為淀粉狀蛋白的蠟狀、淀粉樣蛋白質的胞外組織沉積，淀粉狀蛋白累積于一種或多種器官或身體系統中。當淀粉狀沉淀物累積時，它們開始干擾器官或身體系統的正常功能。存在至少15種不同類型的淀粉狀變性。主要形式為沒有已知前例的原發性淀粉狀變性，跟隨一些其他狀況的繼發性淀粉狀變性，和遺傳性淀粉狀變性。

許多老化的疾病是基于或相關于淀粉狀蛋白樣蛋白，并且被部分表征為促進致病的淀粉狀蛋白或淀粉樣物質的胞外沉積的形成，以及疾病的進展。這些疾病包括但不限于，神經病癥如阿爾茨海默病(Alzheimer, s Disease, AD),雷維小體癡呆(Lewy bodydementia),唐氏綜合征(Down, s syndrome),遺傳性腦出血伴淀粉狀變性(hereditarycerebral hemorrhage with amyloidosis) (Dutch 型)；Guam Parkinson-癡呆綜合癥狀(Guam Parkinson-Dementia complex)。基于或相關于淀粉狀蛋白樣蛋白的其他疾病有進行性核上性麻痹(progressive supranuclear palsy),多發性硬化(multiplesclerosis)，克一雅病(Creutzfeld Jacob disease)，帕金森病(Parkinson' s disease),HIV相關癡呆(HIV-related dementia), ALS(肌萎縮性脊髓側索硬化癥(amyotropiclateral sclerosis)),成年型糖尿病(Adult Onset Diabetes),老年性心臟淀粉狀變性(senile cardiac amyloidosis),內分泌腫瘤,等等,包括黃斑變性在內。多肽β-淀粉狀蛋白(Αβ)可能在阿爾茨海默病(AD)的發病中起中心作用。Vassar 等，J.Neurosc1.29:12787-12794(2009)。Αβ 多肽在 CNS 中累積導致突觸功能障礙，軸突變性和神經元死亡。AD患者的腦顯示顯著神經病理病變的特征性病理學，如神經原纖維紊亂(NFTs)，和富含淀粉狀蛋白的老年斑。淀粉狀蛋白斑的主要成分是Αβ。這些病變與中樞神經系統(CNS)神經元群體的大量損失相關，并且其進展伴隨與AD相關的臨床癡呆。Αβ是前體蛋白(β淀粉狀蛋白前體蛋白(β-APP或APP))的蛋白水解產物。APP是I型跨膜蛋白，其相繼被兩個蛋白酶，β-和Y-分泌酶切割。β-分泌酶，被稱為β-位淀粉狀蛋白前體蛋白裂解酶I (BACEl)，首先將APP裂解以暴露Αβ的N末端，由此產生被稱為 C99 的膜結合片段。Vassar 等，J.Neurosc1.,29:12787-12794(2009)和 UniProtKB/Swiss-Prot Entry P56817 (BACE1_HUMAN)。然后，Y -分泌酶能夠將C99裂解以產生成熟的Αβ多肽。產生的Αβ具有異源C末端，其長度范圍為38個氨基酸至43個氨基酸。42個氨基酸形式的Αβ (Αβ42)是纖維蛋白原形式的Αβ，并且在患有唐氏綜合征的患者中過量產生，并且提示在AD的早期發病中起作用。Vassar等，J.Neurosc1.29:12787-12794 (2009)。BACEl因此變為治療靶標，因為其抑制將可能抑制APP和Αβ產生。實際上，BACEl敲除小鼠(BACE1+)不產生腦Αβ，這證實了 BACEl是主要的(如果不是唯一的)負責在腦中產生Αβ的酶。Roberds等，Human Mol.GeneticslO:1317-1324(2001)。此外，AD模型中的BACEl敲除小鼠不形成淀粉狀蛋白斑；認知缺陷和膽堿能功能障礙也得到拯救。McConlogue 等，J.Biol.Chem.282:26326-26334 (2007) ；0hno等，Neuron41:27-33(2004);和 Laird 等，J.Neurosc1.25:11693-11709 (2005)。此外，BACEl雜合敲除小鼠具有減少的斑塊形成，這表明BACEl活性的完全抑制對于斑塊減少不是必要的。McConlogue 等，J.Biol.Chem.282:26326-26334(2007)。最近，APP已經被證實是死亡受體6 (DR6)的配體，其觸發依賴于胱天蛋白酶的神經兀細胞體死亡和軸突消減(axon pruning)。Nikolaev 等，Nature457:981-989 (2009)。此外，BACEl化合物抑制劑破壞軸突和細胞體的變性。同上。這些結果指向這樣的模型，在所述模型中APP通過結合DR6可以促進AD。有利的是具有一種有效的BACEl的治療性抑制劑以減少患有神經疾病和病癥(如AD)的患者中的APP和Αβ產生。本文中提供的發明涉及這樣的抑制劑，包括其在多種方法中的用途。本文中引用的所有參考資料，包括專利申請和出版物，通過引用完整地結合。概述 本發明提供BACEl拮抗劑抗體及其使用方法。具體地，所述抗體抑制或降低BACEl的活性。在一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性。特別地，所述抗體結合BACEl的活性位點或BACEl的外結合位點(exosite)。在另一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含至少一個選自由以下各項組成的組的高變區(HVR)序列:SEQID NO:7-19,22-26，28-30，35-47，56-79 和 118-122。在另一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含至少一個選自由以下各項組成的組的序列:HVR-H1，HVR-H2和HVR-H3，其中 HVR-Hl 包含氨基酸序列 GFX3tlFX31X32X33X34IH(SEQ ID NO:45)，其中 X3tl = N或T ;X31 = S, L 或 Y ；X32 = G 或 Y ；X33 = Y 或 S ;并且 X34 = A, G 或 S ；HVR-H2 包含氨基酸序列 X35X36ISPX37X38GX39TX40YADSVKG (SEQ ID NO:46)，其中 X35 = A或G ;X36 = W或 S ;X37 = A或 Y ；X38 = G或 S ;X39 = S或Y ;并且X4tl = D或S ;并且HVR-H3 包含氨基酸序列 X41PX42X43X44X45X46X47MDY (SEQID NO:47)，其中 X41 = Q 或 G ；X42 = T 或 F ；X43 = H 或 S ;X44 = Y 或 P ;X45 = Y 或 W ;X46 = Y或V和其中X47任選包括序列YAKGYKA (SEQ ID NO:48)。備選地，所述抗體包含HVR-Hl序列，所述HVR-Hl序列包含氨基酸序列GftfX13GYX14IH(SEQ ID NO:26)，其中X13 = S或L和X14 = A或G ;或選自由以下各項組成的組的氨基酸序列:SEQ ID NO:22 ；SEQ ID NO:23 ;以及 SEQ ID NO:28o在另一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含至少一個選自由以下各項組成的組的序列:HVR-H1，HVR-H2和HVR-H3，其中 HVR-Hl 包含氨基酸序列 GX71X72X73X74X75X76X77IH(SEQ ID NO:120)，其中 X71 =F 或 Y -,X72 = F，N 或 T ；X73 = F 或 Y ；X74 = L，Q，I，S 或 Y ；X75 = G 或 Y ；X76 = Y 或 S ;并且X77 = A，G 或 S ；HVR-H2 包含氨基酸序列 X78X79ISPX8(IX81GX82X83X84YADSVKG (SEQ ID NO:121)，其中 X78 = A 或 G ；X79 = W 或 S ；X80 = A, S, Q 或 Y ；X81 = G 或 S ；X82 = S, K, L 或 Y ；X83 = T或 Y ;并且 X84 = D 或 S ;并且 HVR-H3 包含氨基酸序列 X85PX86X87X88X89X9tlX91MDY (SEQ ID NO:122),其中 X85 = Q 或 G ；X86 = T 或 F ；X87 = H, Y 或 S ；X88 = Y 或 P ；X89 = Y 或 W ；X90 = Y 或V，并且其中X91任選包括序列YAKGYKA (SEQ ID NO:48)。備選地，所述抗體包含HVR-Hl序列，所述HVR-Hl序列包含氨基酸序列GX53X54X55X56GYGIH(SEQ ID NO:68)，其中X53 = F或Y ；X54 = T或F ；X55 = F或Y ；X56 = L, Q或I ;或選自由以下各項組成的組的氨基酸序列:SEQ ID N0:71-73。備選地，所述抗體包含HVR-H2序列，所述HVR-H2序列包含氨基酸序列GffISPX57X58GX59X60DYADSVKG (SEQ ID NO:69)，其中 X57 = A，S 或 Q ；X58 = G 或 S ；X59 = S，K 或L ；X60 = T或Y ;或選自由以下各項組成的組的氨基酸序列:SEQ ID NO:74_78。備選地，所述抗體包含HVR-H3序列，所述HVR-H3序列包含氨基酸序列GPFX61PWVMDY (SEQ ID NO:70)，其中X61=S或Y ;或SEQ ID NO:79的氨基酸序列。在一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-Hl序列，所述HVR-Hl序列包含選自以下的氨基酸序列:SEQID NO:22, SEQ ID NO:23，SEQ ID NO:28 和 SEQ ID NO:71_73。在一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-H2序列，所述HVR-H2序列包含選自以下的氨基酸序列:SEQID NO:24, SEQ ID NO:29 和 SEQ ID NO:74-78。在另一個實施方案 中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-H3序列，所述HVR-H3序列包含選自以下的氨基酸序列:SEQID NO:25, SEQ ID NO:30 和 SEQ ID NO:79。在一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-Hl、HVR-H2和HVR-H3序列，所述HVR-Hl、HVR-H2和HVR-H3 序列對應于對于

圖1 (B)中的克隆 YW412.8，YW412.8.31，YW412.8.30，YW412.8.2，YW412.8.29和YW412.8.51所述的那些或對于圖2(B)中的克隆Fabl2，LC6，LC9和LClO所述的那些或圖24A-C中所述的那些克隆。在一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含SEQ ID NO:22或23的HVR-Hl序列，SEQ ID NO:24的HVR-H2序列和SEQ ID N0:25的HVR-H3序列。在另一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含SEQ ID NO:23的HVR-Hl序列，SEQ ID NO:24的HVR-H2序列和SEQ ID NO:25的HVR-H3序列。在另一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含SEQ IDNO:28 的 HVR-Hl 序列，SEQ ID NO:29 的 HVR-H2 序列，和 SEQ ID NO:30 的 HVR-H3 序列。
在一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含選自SEQ ID NO:71-73的HVR-Hl序列，選自SEQ ID NO:74-78的HVR-H2序列和選自SEQ ID NO:79的HVR-H3序列。在一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含可變重(VH)鏈，所述可變重(VH)鏈具有選自由以下各項組成的組的氨基酸序列:SEQ ID NO:20，21，27和80-98。在一方面中，所述抗體包含SEQ ID NO:21的VH鏈氨基酸序列。在另一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含至少一個選自下組的序列:HVR-L1、HVR-L2和HVR-L3，其中HVR-Ll 包含氨基酸序列 RASQX17VX18X19X20X21A(SEQ ID NO:42)，其中 X17 = S，D 或 V ；X18 =S 或 A ；X19 = S，T 或 N ；X20 = A 或 S ；X21 = V 或 L，HVR-L2 包含氨基酸序列 X22ASX23LyS (SEQID NO:43)，其中X22 = S，W，Y或L ；X23 = F，S或W，并且HVR-L3包含氨基酸序列QQX24X25X26X27X28X29T (SEQ ID NO:44)，其中 X24 = S，F，G，D 或 Y ；X25 = Y，P，S 或 A ；X26 = Y，T 或 N ；X27 = T，Y，D 或 S ；X28 = P 或 L ;并且 X29 = F，P 或 T。在另一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含至少一個選自下組的序列:HVR-L1、HVR-L2和HVR-L3，其中HVR-Ll 包含氨基酸序列 RASQX17VX18X19X20X21A (SEQ ID NO:42)，其中 X17 = S，D 或 V ；X18 = S或 A ；X19 = S，T 或 N ；X20 = A 或 S ；X21 = V 或 L，HVR-L2 包含氨基酸序列 X62ASX63X64YX65 (SEQID NO:118)，其中 X62 = S，W, Y，F 或 L ;X63 = F，S，Y 或 W ;X64 = L 或 R ;X65 = S，P，R，K 或W，并且 HVR-L3 包含氨基酸序列 QQX66X67X68X69X70X71T (SEQ ID NO:119)，其中 X66 = S，F，G，D或 Y ；X67 = Y，P，S 或 A ；X68 = Y，T 或 N ；X69 = T，Y，D 或 S ；X70 = P，Q，S，K 或 L ;并且 X71=F,P或T。在某些實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-Ll序列，所述HVR-Ll序列包含氨基酸序列RASQX1VX2X3X4X5A (SEQ ID NO: 17)，其中 X1 = D 或 V ;X2 = S 或 A ;X3 = T 或 N ;X4 = S 或 A ;X5 = V或L，或選自由以下各項組成的組的氨基酸序列:SEQ ID NO:7，SEQ ID NO:8或SEQID NO:35o在一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-L2序列，所述HVR-L2序列包含氨基酸序列X6ASFLYS (SEQID NO: 18)，其中 X6 = S 或 L 或 X15ASX16LYS (SEQ ID NO:41)，其中 X15 = S，W 或 Y，并且 X16=S或W，或選自由以下各項組成的組的氨基酸序列:SEQ ID NO:9, SEQ ID N0:10，和SEQID NO:36-39.
在一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-L3序列，所述HVR-L3序列包含氨基酸序列QQX7X8X9X10X11X12T (SEQ ID NO:19)，其中 X7 = S，F，G，D 或 Y ;X8 = Y，P，S，或 A ;X9 = T 或 N ;Xio = T,Y,D或S ；Xn = P或L ；X12 = P或T,或選自由以下各項組成的組的氨基酸序列:SEQID NO:11-16 和 SEQ ID NO:40。在某些實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-Ll序列，所述HVR-Ll序列包含氨基酸序列RASQX1VX2X3X4X5A (SEQ ID NO: 17)，其中 X1 = D 或 V ;X2 = S 或 A ;X3 = T 或 N ;X4 = S 或 A ;X5 = V或L，或選自由SEQ ID NO:7組成的組的氨基酸序列。在一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-L2序列，所述HVR-L2序列包含氨基酸序列X48ASX49X50YX51 (SEQ ID NO:56)，其中 X48 = S 或 F ;X49 = F 或 Y ;X50 = L 或 R ；X51 = S，P，R，K或W，或選自由以下各項組成的組的氨基酸序列:SEQ ID N0:58-64。在一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-L3序列，所述HVR-L3序列包含氨基酸序列QQFPTYX52PT (SEQID NO:57)，其中X52 = L，Q，S或K，或選自由以下各項組成的組的氨基酸序列:SEQ ID NO:65-67。在一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-Ll、HVR-L2和HVR-L3序列，所述HVR-Ll、HVR-L2和HVR-L3 序列對應于對于圖1 (A)中的克隆 YW412.8，YW412.8.31，YW412.8.30，YW412.8.2，YW412.8.29和YW412.8.51所述的那些或對于圖2(A)中的克隆Fabl2，LC6，LC9和LClO所述的那些或對于圖23A-C中的克隆所述的那些。在一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的HVR-Ll序列；選自由以下各項組成的組的 HVR-L2 序列:SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:10 或 SEQ ID NO:58-64 ;和選自由以下各項組成的組的HVR-L3序列:SEQ ID NO:11-16和65-67。在另一方面中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含SEQ ID NO:7的HVR-Ll 序列，SEQ ID NO:9 的 HVR-L2 序列和 SEQ ID NO:12 的 HVR-L3 序列。

在另一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl 多肽的活性并且包含 SEQ ID NO -J, SEQ ID NO:8 或 SEQ ID NO:35 的 HVR-Ll 序列。在另一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含SEQ ID NO =9-10,36-39或58-64的HVR-L2序列。在另一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含SEQ ID NO =11-16,40或65-67的HVR-L3序列。在另一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含可變輕(VL)鏈序列，所述可變輕(VL)鏈序列具有選自由以下各項組成的組的氨基酸序列:SEQ ID NO:1-6,31-34和99-117。在一方面中，所述VL鏈氨基酸序列是SEQ ID NO:2o在另一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含SEQ ID NO:23的HVR-Hl序列，SEQ ID NO:24的HVR-H2序列，SEQ ID NO:25 的 HVR-H3 序列，SEQ ID NO:7 的 HVR-Ll，SEQ ID NO:9 的 HVR-L2 和 SEQ IDNO: 12 的 HVR-L3。在一個實施方案中，提供結合BACEl的分離的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的VL鏈和含有SEQ ID NO:21的氨基酸序列的VH鏈。在另一個實施方案中，提供分離的抗體，所述分離的抗體結合一個表位，所述表位包含至少一個選自由以下各項組成的組的BACEl的氨基酸殘基:SEQ ID NO:49的314SER ；316GLU ；317LYS ；327GLN ；330CYS ；33ITRP ；332GLN ；335THR ;和 378ASP。在某些實施方案中，所述抗體結合BACEl的一個表位，所述表位包含氨基酸:SEQ ID NO:49的314SER ；316GLU ；317LYS ；327GLN ；330CYS ；33ITRP ；332GLN ；335THR ;和 378ASP。在其他實施方案中，所述抗體結合BACEl的一個表位,所述表位包含至少一個選自由以下各項組成的組的BACEl的氨基酸區域:SEQ ID NO:49的氨基酸315-318 ；SEQ IDNO:49的氨基酸331-335 ；SEQ ID NO:49的氨基酸370-381 ;及其任意組合。在一個實施方案中，所述抗體結合BACEl的一個表位，所述表位包含SEQ ID NO:49的氨基酸315-318，331-335 和 370-381 ο在另一個實施方案中，所述抗體結合BACEl的一個表位，其經結合導致BACEl的P6和P7位點的結構的構象變化。在另一個實施方案中，所述抗體結合包括SEQ ID N0:49的氨基酸218-231的BACEl的表位從而采取隨機環結構。本發明的抗體可以以任何數目的形式。例如，本發明的抗體可以是人抗體，人源化抗體或嵌合抗體。在其他方面中，本發明的抗體是全長抗體或其片段(例如，包含抗原結合組件的片段)。在本發明的其他方面中，所述抗體是單克隆抗體。在另一方面中，本發明的抗體可以連接到或綴合到試劑或部分，例如細胞毒性劑，以產生免疫綴合物。在一個實施方案中 ，提供藥物制劑，其包含本發明的抗體和藥用載體。在另外的實施方案中，提供編碼編碼本發明的抗體的分離的核酸，以及包含編碼本發明的抗體的核酸的載體。在另一方面中，提供包含編碼本發明的抗體的核酸的宿主細胞，以及產生本發明的抗體的方法，所述方法包括在適于產生所述抗體的條件下培養包含編碼本發明的抗體的核酸的宿主細胞。在另一個實施方案中，提供治療患有神經疾病或病癥的個體的方法，所述方法包括向所述個體給藥有效量的本發明的抗體。在另一個實施方案中，提供在患有神經疾病或病癥或處于感染神經疾病或病癥的風險的患者中減少淀粉狀蛋白斑，或抑制淀粉狀蛋白斑形成的方法，所述方法包括向所述個體給藥有效量的本發明的抗體。在一個實施方案中，減少患者的Αβ蛋白的方法，所述方法包括向所述患者給藥有效量的本發明的抗體。在一方面中，患者患有神經疾病或病癥，或處于感染神經疾病或病癥的風險。在另一個實施方案中，提供抑制患者的軸突變性的方法，所述方法包括向所述患者給藥有效量的本發明的抗體。在另一個實施方案中，診斷患者的神經疾病或病癥的方法，所述方法包括將分離自所述患者的生物樣品與本發明的抗體在適于所述抗體與BACEl多肽結合的條件下接觸，并且檢測在所述抗體和所述BACEl多肽之間是否形成復合物。在一個實施方案中，確定患者是否適合利用抗-BACEl抗體治療的方法，所述方法包括將分離自所述患者的生物樣品與本發明的抗體在適于所述抗體與BACEl多肽結合的條件下接觸，并且檢測在所述抗體和所述BACEl多肽之間是否形成復合物，其中在所述抗體和BACEl之間存在復合物表明患者適合利用抗-BACEl抗體治療。在一方面中，所述患者患有神經疾病或病癥，或處于感染神經疾病或病癥的風險。
在一方面中，可以用于診斷神經疾病或病癥；或用于預測應答性，確定患者對利用BACEl抗體的治療的適當性的生物樣品包括但不限于流體如血清，血漿，唾液，胃分泌物，粘液，腦脊液，淋巴液等，或獲得自生物體的組織或細胞樣品如神經組織，腦組織，心臟組織或血管組織。在本發明的方法的一方面中，所述患者是哺乳動物。在另一方面中，所述患者是人。在另一方面中，所述神經疾病或病癥選自由以下各項組成的組:阿爾茨海默病(AD),外傷性腦損傷(traumatic brain injury),卒中，青光眼，癡呆，肌營養不良(muscular dystrophy) (MD),多發性硬化(multiple sclerosis) (MS)，肌萎縮性側索硬化(ALS),囊性纖維化(cystic fibrosis),安吉爾曼綜合征(Angelman’ ssyndrome),利德爾綜合征(Liddle syndrome)，佩吉特病(Paget’ s disease),外傷性腦損傷，雷維小體病(Lewy body disease),脊髓灰質炎后綜合征(postpoliomyelitissyndrome),夏伊-德雷格綜合征(Shy-Draeger syndrome),橄欖體腦橋小腦萎縮(olivopontocerebellar atrophy),帕金森病(Parkinson, s disease),多系統萎縮(multiple system atrophy),紋狀體黑質變性(striatonigral degeneration),核上性麻痹(supranuclear palsy),牛海綿狀腦病(bovine spongiform encephalopathy),癢病(scrapie)，克-雅綜合征(Creutzfeldt-Jakob syndrome)，庫魯病(kuru)，格-施-沙病(Gerstmann-Straussler-Scheinker disease),慢性消耗性疾病(chronic wasting disease),致命性家族性失眠癥(fatal familial insomnia),延髓性麻痹(bulbar palsy),運動神經元病(motor neuron disease),卡納范病(Canavan disease),亨廷頓病(Huntington ' s disease),神經元臘樣脂褐素沉積癥(neuronal ceroid-lipofuscinosis)，亞歷山大病(Alexander ' s disease)，圖雷特綜合征(Tourette1 s syndrome),門克斯扭結發綜合征(Menkes kinky hair syndrome),科凱恩綜合征(Cockayne syndrome),哈勒沃登-施帕茨綜合征(Halervorden-Spatzsyndrome),拉福拉病(lafora disease),雷特綜合征(Rett syndrome),肝豆狀核變性(hepatolenticular degeneration),萊施-奈恩綜合征(Lesch-Nyhan syndrome),和翁-隆綜合征(Unverricht-Lundborg syndrome),癡呆(包括但不限于,皮克病(Pick, sdisease),和脊髓小腦 性共濟失調(spinocerebellar ataxia))。在一方面中,所述神經疾病或病癥是阿爾茨海默病。在一個實施方案中，提供由抗體或其片段特異性識別的BACEl表位，所述表位包含至少一個對應于選自有以下各項組成的組的氨基酸的BACEl的氨基酸殘基:SEQ ID NO:49 的 314SER ；316GLU ；317LYS ；327GLN ；330CYS ；331TRY ；332GLN ；335THR ；和 378ASP。在一方面中，所述 BACEl 表位包含對應于 SEQ ID NO:49 的 314SER ；316GLU ；317LYS ；327GLN ；330CYS ；33ITRY ；332GLN ；335THR ;和 378ASP 的氨基酸。在一個實施方案中，由抗體或其片段特異性識別的BACEl表位，所述表位包含至少一個選自有以下各項組成的組的BACEl的氨基酸區域:SEQ ID NO:49的氨基酸315-318 ;SEQ ID NO:49的氨基酸331-335 ；SEQ ID NO:49的氨基酸370-381 ;及其任意組合。在一方面中，所述BACEl表位包含SEQ ID NO:49的氨基酸315-318，331-335和370-381。附圖簡述圖1A-1B顯示獲得自首次用于實驗(naive)類型的天然多樣性噬菌體展示文庫的克隆YW412.8和親和力成熟形式的YW412.8的輕和重鏈氨基酸序列，如在實施例1 (A)中所述。圖1A顯示輕鏈序列比對。圖1B顯示重鏈序列比對。在圖1A和IB中，每個克隆的HVR序列由加框的區域指示，其中第一框指示HVR-Ll (SEQ ID NO:7和8-圖1A)或HVR-Hl (SEQID NO:22 和 23-圖 1B)，第二框指示 HVR-L2 (SEQ ID NO:9 和 10-圖 1A)或 HVR-H2 (SEQ IDNO:24-圖 1B)，而第三框指示 HVR-L3 (SEQ ID NO:11-16-圖 1A)或 HVR-H3 (SEQ ID NO:25-圖 1B)。圖2A-2B顯示獲得自首次用于實驗類型的合成多樣性噬菌體展示文庫的克隆Fab12和親和力成熟形式的Fabl2的輕和重鏈氨基酸序列，如在實施例1 (B)中所述。圖2A顯示輕鏈序列比對。圖2B顯示重鏈序列比對。在圖2A和2B中，每個克隆的HVR序列由加框的區域指示，其中第一框指示HVR-Ll (SEQ ID NO:35-圖2A)或HVR-Hl (SEQ ID N0:28_圖2B)，第二框指示 HVR-L2 (SEQ ID NO:36-39-圖 2A)或 HVR-H2 (SEQ ID NO:29~ 圖 2B)，而第三框指示 HVR-L3 (SEQ ID NO:40_ 圖 2A)或 HVR-H3 (SEQ ID NO:30_ 圖 2B)。圖3A和3B顯示來自分離自合成的多樣性噬菌體展示文庫的輕和重鏈Fab的HVR或CDR序列，如在實施例1(B)中所述。編號是根據Kabat等的命名法。圖3A公開了如SEQID NO:133 的〃 CDRLl "序列，如 SEQ ID NO:134 的〃 CDRL2"序列，如 SEQ ID N0135-144、141和 145-152 的"CDRL3"序列，以及如 SEQ ID N0153-159，158，160-161，159，158，162，161，和163-167的〃CDRHl "序·列，都分別以出現的次序列出。圖3B公開了如SEQID N0168-177,174，171，178-182，177，和 183 的"CDRH2"序列，以及如 SEQ ID N0184-202 的"CDRH3"序列，都分別以出現的次序列出。圖4提供顯示鑒定自天然多樣性和合成的多樣性噬菌體展示文庫的不同克隆對BACEl的抑制的圖。在均相時間分辨熒光(HTRF)測定中測試所述克隆對BACEl的抑制，如實施例I㈧中所述的。所有YW系列抗體都以500nM的濃度，除了 YW434.6抗體，其以320nM的濃度被測試。抗體 12.1gG, 14.1gG LC6.1gG, LC9.1gG, LC10.1gG 和 LC11.1gG 以 I μ M 的濃度測試。圖5是這樣的圖，其顯示在HTRF測定中在鑒定自合成的多樣性噬菌體展示文庫的抗-BACElFab存在下的BACEl的活性，如在實施例1(B)中所述。線對應于在BACEl和底物(PBS對照)存在下的100%活性(0%抑制)，和在不存在BACEl情況下的100%抑制。圖6顯示親和力成熟的抗-BACElFab的⑶R或HVR序列，如在實施例1 (B)中所述。編號是根據Kabat等的命名法。競爭ELISA比率是在單點(one-point)競爭ELISA測定中在溶液中不存在20nM BACEl或存在20nM BACEl作為競爭者的情況下ELISA信號的比率，如在實施例1(B)中所述。圖6公開了〃 CDRLl "序列，如SEQ ID N0133，133，133，133，133 和 203; " CDRL2"序列，如 SEQ ID N0134，134 和 204-207 ; " CDRL3"序列，如 SEQID N0208-209，145，145 和 145-146 ; " CDRHl "序列，如 SEQ ID N0157，157，158，158，158和 162，" CDRH2〃 序列，如 SEQ ID N0172，172，171，171，171 和 178 ;以及〃 CDRH3"序列，如SEQ ID N0188，188，195，195和195-196，都分別以出現的次序列出。圖7A-7C包括這樣的圖，所述圖顯示來自利用親和力成熟的抗-BACE克隆進行的競爭性ELISA測定的數據，如在實施例1(B)中所述。Fab展示噬菌體和固定在平板上的BACEl之間的結合與在溶液中的BACEl的連續稀釋進行競爭。圖7A、7B和7C顯示親本和相應的親和力成熟的抗體的競爭曲線。
圖8A-8C顯示這樣的圖，其顯示在HTRF酶測定中抗-BACElFab對BACEl的抑制，如在實施例1⑶中所述。純化的Fab對個體抗-BACEl克隆的抑制活性在HTRF酶測定中被測量。0M99-2(CalBiochem ，目錄號496000)，是BACEl的合成的肽抑制劑，并被用作陽性對照。圖8A、8B和8C是親本和相應的親和力成熟的衍生物的抑制曲線。在該測定中，0M99-2 的 IC5tl 是 llnM。圖9A提供這樣的圖，該圖顯示親和力成熟的YW412.8.31抗-BACEl抗體對人重組BACEl的體外酶活性的影響，使用在HTRF測定中具有增強的對BACEl的敏感性的長肽底物(左圖)，或在FRET測定中具有增強的對BACEl的敏感性的短肽底物(右圖)，如在實施例2⑶中所述。()\W9-2(CalBiochem ，目錄號496000)，BACEl的合成的肽抑制劑，β-分泌酶抑制劑iv( CalBiochem ，I I泌'} 565788)，BACEl的小分子抑制劑(BACE1SMI)和不結合BACEl的IgG抗體被用作對照。圖9B-1和9B-2還提供這樣的圖，該圖顯示在YW412.8.31或對照IgG抗體存在下，人重組BACEl胞外結構域，人重組BACE2胞外結構域，或組織蛋白酶D胞外結構域對具有增強的對BACEl的敏感性的短肽底物的體外酶活性，如在實施例2⑶中所述。圖10顯示在重組淀粉狀蛋白前體蛋白(APP)在293-HEK細胞中的加工過程中利用不同抗-BACEl 抗體(LC6，LC9, YW412.8，YW412.8.30，YW412.8.31 和 YW412.8.51)進行的實驗的結果，如在實施例2(C)中所述。不結合BACEl (Xolair )的IgG抗體用作對照。圖11A-11D提供這樣的圖，該圖顯示YW412.8.31抗-BACEl抗體對重組或內源淀粉狀蛋白前體蛋白(APP)的加工的作用，如在實施例2(C)中所述。圖1lA顯示來自使用穩定表達野生型人APP的293-HEK細胞的實驗的結果。BACE1SMI是小分子BACEl抑制劑，其被用作對照(化合物 8e-Charrier 等，J.Med.Chem.51:3313-3317 (2008)。圖1lB 顯示來自使用培養自野生型CDl小鼠的E13.5背根神經節神經元的實驗的結果。另外的實驗使用來自野生型⑶I小鼠的E16.5皮層神經元(圖11C)和E16.5培養的海馬神經元(圖11D)的培養物進行。圖12A-12C提供吸收到原發性`小鼠神經元中的YW412.8.31抗-BACEl抗體的圖像，如在實施例2(D)中所述。圖12A顯示YW412.8.31抗-BACEl抗體向神經元中的胞內小泡中的內化。將胚胎皮層神經元在37°C溫育達指定的時間。利用α -人-Alexa568在表面(非透化的)或內部(透化的)細胞部分上檢測結合的YW412.8.31。大部分的信號被內化。通過利用指定的用于脈管部分的標記物進行共染色，內化的YW412.8.31被定位于以下亞細胞部分:早期核內體(TfR);反式高爾基網絡(VAMP4)和溶酶體(LAMPl)。比例尺條=65 4 111(頂部)和20 μ m(底部)。圖12B顯示:在兩個不同溫度和三個不同時間點，抗-BACEl抗體攝入E13.5背根神經節(DRG)神經元中，如圖中所示。細胞被透化以允許標記胞內BACEl抗體。在非透化的細胞中，僅外部結合的YW412.8.31抗-BACEl抗體被標記。圖12 (C)顯示YW412.8.31抗-BACEl抗體攝入到來自表達BACEl的小鼠或BACEl敲除小鼠的E16.5皮層神經元中。圖13提供來自實施例3(A)的ELISA結果的圖示，其將YW412.8抗-BACEl抗體與其自身、另一種抗-BACEl抗體(LC6)，活性位點BACEl結合肽(0M99-2 ( CalBiochem ，目錄號 496000))和外結合位點 BACEl 結合妝(BMSl) (Kornacker 等，Biochemistry44:11567-11572(2005)中的肽I)的競爭性結合相比較。
圖14顯示與人BACEl胞外結構域共結晶的Fab YW412.8.31的2.8 A結構的不同視圖，如在實施例3 (B)中所述。Fab結合在分泌酶活性位點遠側的BACEl外結合位點，該外結合位點與已知與具有BACEl抑制性質的某些肽相互作用的另一個外結合位點部分重疊。圖15提供Fab YW412.8.31與人BACEl胞外結構域的相互作用的局部放大圖。BACEl以表面表示顯示,而Fab被顯示為帶狀物。加點的表面指示BACEl表位。圖16A和16B顯示檢測在野生型小鼠中BACEl對A β L水平的貢獻的實驗的結果。檢測BACEl+/+小鼠中的A β !_40水平對比BACEl-/-小鼠中的A β ^40水平。以單劑量的對照IgG抗體或抗-BACE YW412.8.31抗體給小鼠用藥，如在實施例4中所述。圖16Α顯示檢測在小鼠中BACEI對A β ^產生的貢獻的遺傳研究的結果。在BACEI敲除小鼠(BACE1-/-)中觀察到的A β H。水平為BACEl的特異性抑制劑如何改變野生型小鼠中的A β H。產生提供了對照。圖16Β顯示用藥對照IgG或抗-BACE1YW412.8.31 (50mg/kg)在用藥后24或48小時對血漿和CNS(皮層)中Αβ ^產生的影響。通過向C57B1/6小鼠進行IV注射遞送單劑量的對照IgG或抗-BACEl抗體(50mg/kg)。24或48小時后，收集血漿和腦樣品以分析A β η。。血漿A β !_40減少35% (在24小時)，皮層A β ^40減少 20%。繪制的值是平均值(土SEM)*p < 0.01 ;**p < 0.001。圖17A-17B提供實施例4中所述的體內YW412.8.31抗-BACEl抗體實驗的結果。圖17A顯示在用YW412.8.31抗-BACEl抗體以兩個不同濃度處理(與賦形劑對照處理相比)的小鼠的血漿和海馬 中觀察到的Aii1,水平的圖。圖17B是個體藥物動力學對比藥效學讀數的圖，指示對于YW412.8.31抗-BACEl抗體，PK/PD關系存在于該小鼠模型中。圖18A和18B顯示來自實驗的比較，其中hAPP-轉基因小鼠被全身(圖A，與在為比較而重新繪制的圖17A中描述的相同的實驗)或通過連續ICV輸注(圖B)用藥以YW412.8.31抗-BACEl抗體。在圖18A中，動物通過IP注射(3劑量0Q4D)接收賦形劑或抗-BACEl抗體(30或100mg/kg)。在最后的劑量后2小時，收集血漿和腦樣品以分析A β H0和A β卜42。以30和100mg/kg的抗-BACEl抗體，血漿A β卜40和A β ^42減少至 30 %對照水平。海馬Αβ H。和Αβ卜42被高劑量的抗-BACEl (100mg/kg)減少(13-22% )，皮層Αβ 卜42顯示減少的趨勢(12-18% )。在圖18Β中，通過單側ICV輸注遞送對照IgG或抗-BACEl抗體7天。以兩種劑量都觀察到Aβ ^和Αβ卜42的一致減少:在皮層中(15-23%)，在海馬中(15-20%)。圖C顯示在全身對比ICV遞送后抗-BACEl抗體在腦中的水平。繪制的值是平均值(土 SEM)*p < 0.05 ;**p < 0.001圖19A和19B顯示經由IV注射遞送到BALB/C小鼠的單劑量的YW412.8.31抗-BACEl (I或10mg/kg)的PK分析(圖19A)。分析血清PK直至用藥后21天。使用兩個分開的PK測定:一個測定檢測血清中的所有抗-BACEl (總mAb)，而一個測定僅檢測血清中未結合的抗-BACEl (游離mAb)。BACE1+/+，BACEl+/-和BACEl-/-小鼠中的單劑量PK分析確認了在初始研究中觀察到的非線性，并且表明提高的清除率確實是靶標介導的(圖19B)。圖20A和20B顯示通過IV遞送用藥以對照IgG或YW412.8.31抗-BACEl抗體(30mg/kg)的食蟹猴的PK分析。使用猴吸附的山羊抗-人IgG多克隆抗體(Bethyl,Montgomery, TX)測量在猴血清(圖20A)和CSF樣品(圖20B)中的總抗-BACEl或對照抗體濃度，如在實施例5中所述。圖21A-21D是如在實施例5中所述的實驗的結果，在所述實驗中通過IV遞送給食蟹猴用藥以對照IgG或抗-BACEl抗體YW412.8.31。陰影線顯示個體動物的數據，實線顯示組平均。在7天、2天以及在用藥前采樣血漿和CSF以設置每個個體猴中Aii1,基線水平的平均值。在不同時間測量血漿A β 圖21A)和CSF Αβ 圖21B)。在基線血漿(圖21C)和CSF (圖21 )Αβ H。動物間的可變性也被顯示。圖22Α和22Β顯示在野生型小鼠中在全身用藥YW412.8.31后的A β產生。圖22Α是這樣的圖，其顯示在通過IP注射向C57B1/6J小鼠給藥單劑量的對照IgG或YW412.8.31(100mg/kg)后的A β卜4(|產生。4小時后，收集血漿和腦樣品以分析A β 血漿A 減少了 48 %，但是在該范例中前腦A β U未減少。圖22Β是這樣的圖，其顯示在通過3次IP注射(每次相隔4天)給藥對照IgG或YW412.8.31 (30或100mg/kg)后的A β ^40產生。在最后劑量4小時后，收集血漿和腦樣品以分析Ai^4tlt5血漿Ai^4tl減少了 50-53%，而前腦Αβ卜#當以30mg/kg用藥時未減少，而當以100mg/kg用藥時減少了 42%。繪制的值是平均值(土 SEM)*p < 0.0001圖23A-23C顯示克隆YW412.8.31和親和力成熟形式的YW412.8.31的輕鏈氨基酸序列。圖23A-23C顯示完全輕鏈序列比對。每個克隆的HVR序列由加框的區域指示，其中第一框指示 HVR-Ll (SEQ ID NO -J-圖 23A)，第二框指示 HVR-L2 (SEQ ID NO:9 和 58-64-圖23B)，而第三框指示 HVR-L3 (SEQ ID NO:12 和 66-67-圖 23C)。圖24A-24C顯示克隆YW412.8.31和親和力成熟形式的YW412.8.31的重鏈氨基酸序列。圖24A-24C顯示完全重鏈序列比對。每個克隆的HVR序列由加框的區域指示，其中第一框指示 HVR-Hl (SEQ ID NO:24 和 71-73-圖 24A)，第二框指示 HVR-H2 (SEQ ID NO:24和 74-78-圖 24B)，而第三框指示 HVR-H3 (SEQ ID NO:25 和 79-圖 24C)。圖25A和B顯示這樣 的圖，所述圖顯示在如在實施例6中所述的HTRF測定中YW412.8.31和親和力成熟的克隆對BACEl的抑制。測試克隆YW412.8.31.3S ；YW412.8.31.9S ；YW412.8.31.25S ；YW412.8.31.58S ；YW412.8.31.53 ；YW412.8.31.69 ；YW412.8.31.77 ；YW412.8.31.81S 和 YW412.8.31.89S 抑制 BACEl 的蛋白酶活性的能力。發明實施方案詳述定義用于本文目的的“接納體人構架”是包含衍生自人免疫球蛋白構架或如下所定義的人共有構架的輕鏈可變結構域(VL)構架或重鏈可變結構域(VH)構架的氨基酸序列的構架。“衍生自”人免疫球蛋白構架或人共有構架的接納體人構架可以包含其相同的氨基酸序列，或其可以包含氨基酸序列的變化。在一些實施方案中，氨基酸變化的數目為10以下，9以下，8以下，7以下，6以下，5以下，4以下，3以下，或2以下。在一些實施方案中，VL接納體人構架的序列與VL人免疫球蛋白構架序列或人共有構架序列相同。“親和力”是指分子(例如抗體)的單一結合位點與其結合配偶體(例如抗原)之間全部非共價相互作用總和的強度。除非另有說明，在用于本文時，“結合親和力”指反映結合對的成員(例如抗體與抗原)之間1:1相互作用的內在結合親和力。分子X對其配偶體Y的親和力通常可用解離常數(Kd)來表述。親和力可通過本領域知道的常用方法來測量，包括本文中所描述的那些。用于測量結合親合力的具體說明性和示例性實施方案描述于以下。

“親和力成熟的”抗體指這樣的抗體，在該抗體的一個或多個高變區(HVR)中具有一處或多處改變，導致該抗體對抗原的親和力與沒有這些改變的親本抗體相比有提高。術語“抗-β -分泌酶抗體”、“抗-BACEl抗體”、“結合β -分泌酶的抗體”和“結合BACEl的抗體”是指這樣的抗體，所述抗體能夠以足夠的親合力結合BACEl抗體以致所述抗體可以用作靶向BACEl中的診斷劑和/或治療劑。在一個實施方案中，抗-BACEl抗體與不相關的、非BACEl蛋白結合的程度低于所述抗體與BACEl結合的約10%，如例如通過放射性免疫測定(RIA)測量的。在某些實施方案中，結合BACEl的抗體的解離常數(Kd)彡I μ Μ，(IOOnM, ( IOnM, ( InM, ( 0.1nM, ( 0.0lnM,或彡 0.00InM(例如 KT8M 以下，例如 KT8M至10_13Μ，例如10_9Μ至I(T13M)。在某些實施方案中，抗-BACEl抗體結合在來自不同物種和同種型的BACEl中保守的BACEl表位。術語"抗體"在本文中以最廣義使用，并且包括不同抗體結構，包括但不限于單克隆抗體，多克隆抗體，多特異性抗體(例如，雙特異性抗體)，和抗體片段，只要它們顯示所需的抗原結合活性。"抗體片段"是指 不同于完整抗體的分子，其包含完整抗體的部分，所述部分結合完整抗體結合的抗原。抗體片段的實例包括但不限于Fv，Fab，Fab'，Fab’_SH，F(ab' )2 ；雙抗體；線性抗體；單鏈抗體分子(例如scFv);和由抗體片段形成的多特異性抗體。與參照抗體“結合相同表位的抗體”是指這樣的抗體，其在競爭測定中阻斷50%以上的所述參照抗體與其抗原的結合，反之，參照抗體在競爭測定中阻斷50%以上的該抗體與其抗原的結合。本文中提供一個示例性競爭測定。術語“嵌合”抗體是指這樣的抗體，其中一部分重鏈和/或輕鏈來源于特定來源或物種，而剩余的重鏈和/或輕鏈來源于不同來源或物種。抗體的“類別”是指其重鏈具有的恒定結構域或恒定區的類型。有五個主要類別的抗體:IgA，IgD，IgE，IgG和IgM，并且這些中的數個可以進一步被劃分為亞類(同種型)，例如，IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1和IgA2。對應于不同類別的免疫球蛋白的重鏈恒定結構域分別被稱為α，δ，ε，γ和μ。術語“細胞毒性劑”用在本發明中指抑制或防止細胞功能和/或引起細胞死亡或破壞的物質。細胞毒性劑包括但不限于:放射性同位素(例如，At211，I131，I125，Y90，Re186, Re188, Sm153, Bi212，P32，pb212和Lu的放射性同位素)；化療劑或藥物(例如，甲氨蝶呤(methotrexate),阿霉素(adriamicin),長春花生物喊(vinca alkaloids)(長春新堿(vincristine)，長春堿(vinblastine),依托泊苷(etoposide)),多柔比星(doxorubicin),美法侖(melphalan),絲裂霉素(mitomycin) C,苯丁酸氮芥(chlorambucil),柔紅霉素(daunorubicin)或其它嵌入劑)；生長抑制劑；酶及其片段如核酸水解酶；抗生素；毒素如小分子毒素或細菌、真菌、植物或動物起源的酶促活性毒素，包括其片段和/或變體；和下面公開的各種抗腫瘤或抗癌劑。“效應子功能”指那些可歸于抗體Fe區且隨抗體同種型而變化的生物學活性。抗體效應子功能的實例包括=Clq結合和補體依賴性細胞毒性(CDC) ；Fc受體結合；抗體依賴性細胞介導的細胞毒性(ADCC);吞噬作用；細胞表面受體(例如B細胞受體)下調jPB細胞活化。試劑例如藥物制劑的"有效量"是指在需要的劑量和時間階段有效獲得所需的治療或預防結果的量。
術語“Fe區”在本文中用于定義免疫球蛋白重鏈的C端區域，所述區域包含至少一部分的恒定區。該術語包括天然序列Fe區和變體Fe區。在一個實施方案中，人IgG重鏈Fe區從Cys226或Pr0230延伸至重鏈的羰基端。然而，Fe區的C端賴氨酸(Lys447)可以存在或者可以不存在。除非另外說明，Fe區或恒定區中的氨基酸殘基的編號是根據EU編號系統，其也被稱為 EU 索引，如在 Kabat 等，Sequences ofProteins of ImmunologicalInterest (免疫學感興趣的蛋白質的序列)，5th Ed.Public Health Service, NationalInstitutes of Health, Bethesda, MD, 1991 中所述。"構架"或"FR"是指除高變區(HVR)殘基之外的可變結構域殘基。可變結構域的FR通常由四個FR結構域組成:FR1，FR2，FR3和FR4。因此，HVR和FR序列通常出現在VH(或 VL)的以下序列中:FR1-H1(L1)-FR2-H2(L2)-FR3-H3(L3)-FR4。術語“全長抗體”、“完整的抗體”和“完整抗體”在本文被可交換地用于指結構與天然抗體結構基本相似或具有包含如本文所定義的Fe區的重鏈的抗體。術語"宿主細胞"、"宿主細胞系"和"宿主細胞培養物"被可交換地使用并且是指其中引入外源核酸的細胞，包括這種細胞的后代。宿主細胞包括"轉化體"和"轉化的細胞"，其包括初級轉化的細胞和來源于其的后代，而不考慮傳代的數目。后代在核酸含量上可能與親本細胞不完全相同，而是可以包含突變。本文中包括與在最初轉化的細胞中篩選或選擇的具有相同功能或生物學活性的突變體后代。“人抗體”指具有這樣的氨基酸序列的抗體，所述氨基酸序列對應于這樣抗體的氨基酸序列，所述抗體由人或人細胞生成或來源于非人來源，其利用人抗體庫或其它人抗體編碼序列。人抗體的這種定義明確排除包含非人抗原結合殘基的人源化抗體。“人共有構架”是指這樣的構架，即在選擇人免疫球蛋白VL或VH構架序列中，其代表最常出現的氨基酸殘基。一般而言，對人免疫球蛋白VL或VH序列的選擇是從可變結構域序列的亞型中選擇。 一般而言，該序列的亞型是如Kabat等，Sequences ofProteins of Immunological Interest (免疫學感興趣的蛋白質的序列)，第五版，NIHPublication91-3242, Bethesda MD (1991)，1-3 卷中的亞型。在一個實施方案中，對于 VL，該亞型是如Kabat等(見上文)中的亞型K I。在一個實施方案中，對于VH，該亞型是如Kabat等(見上文)中的亞型III。“人源化”抗體是指包含來自非人HVR的氨基酸殘基和來自人FR的氨基酸殘基的嵌合抗體。在某些實施方案中，人源化抗體將包含基本上所有的至少一個、通常兩個可變結構域，其中所有或基本上所有的HVR(例如，CDR)對應于非人抗體的那些，并且所有或基本上所有的FR對應于人抗體的那些。人源化抗體任選可以包含至少一部分的來源于人抗體的抗體恒定區。抗體(例如非人抗體)的“人源化形式”是指已經進行了人源化的抗體。術語“高變區”或“HVR”當在本文中使用時，是指抗體可變結構域的每個區域，其序列高可變和/或形成結構上限定的環(“高變環”)。通常，天然四鏈抗體包含六個HVR;三個在VH(H1，H2，H3)中，三個在VL(L1，L2，L3)中。HVR通常包含來自高變環和/或“互補決定區”(CDR)的氨基酸殘基，后者具有最高序列可變性和/或涉及抗原識別。示例性高變環發生在氨基酸殘基 26-32 (LI)，50-52 (L2) ,91-96 (L3)，26-32 (Hl)，53-55 (H2)，和96-101 (H3) ο (Chothia 和 Lesk，J.Mol.Biol.196:901-917 (1987))。示例性 CDR(CDR_L1，CDR-L2，CDR-L3，CDR-Hl，CDR-H2，和 CDR-H3)發生在氨基酸殘基 LI 的 24-34，L2 的 50-56，L3的 89-97，Hl 的 31_35B，H2 的 50-65，和 H3 的 95-102。(Kabat 等，Sequences of Proteinsof Immunological Interest (免疫學感興趣的蛋白質的序列)，5th Ed.Public HealthService,National Institutes of Health,Bethesda,MD(1991))。除了 VH 中的 CDR1,CDR通常包含形成高變環的氨基酸殘基。⑶R還包含“特異性決定殘基”或“SDR”，其是與抗原接觸的殘基。SDR包含在被稱為縮短的(abbreviated)-⑶R或a_⑶R的⑶R區域中。示例性 a-CDR(a-CDR-Ll，a_CDR_L2，a_CDR_L3，a-CDR-Hl，a_CDR-H2，和 a_CDR-H3)發生在氨基酸殘基 LI 的 31-34，L2 的 50-55，L3 的 89-96，Hl 的 31_35B，H2 的 50-58，和 H3 的 95-102。(見 Almagro 和 Fransson, Front.Biosc1.13:1619-1633 (2008))。除非另外說明，可變結構域中的HVR殘基和其他殘基(例如，FR殘基)在本文中根據Kabat等(見上文)編號。“免疫綴合物”是與一個或多個異源分子(包括但不限于細胞毒性劑)綴合的抗體。“個體”或“受試者”是哺乳動物。哺乳動物包括但不限于，家養動物(例如，牛，羊，貓，狗和馬)，靈長類動物(例如，人和非人靈長類動物如猴)，兔，以及嚙齒類動物(例如，小鼠和大鼠)。在某些實施方案中，個體或受試者是人。"分離的"抗體是這樣的抗體，其已經與其天然環境的組分分離。在一些實施方案中，將抗體純化至超過95%或99%純度，如通過例如電泳(例如，SDS-PAGE，等電聚焦(IEF)，毛細管電泳)或層析(例如，離子交換或反相HPLC)確定的。對于用于評估抗體純度的方法的綜述，參見，例如，Flatman 等，J.Chromatogr.B848:79-87 (2007)。"分離的"核酸是指這樣的核酸分子，其已經與其天然環境的組分分離。分離的核酸包括包含在通常包含該核酸分子的細胞中的核酸分子，但是該核酸分子存在于染色體外或在不同于其天然染色體位置的染色體位置處。“分離的編碼抗-BACEl抗體的核酸”是指一個或多個核酸分子，其編碼抗體重和輕鏈(或其片段)，包括在單一載 體或分開的載體中的這樣的核酸分子，以及存在于宿主細胞中的一個或多個位置處的這樣的核酸分子。術語“單克隆抗體”在用于本文時指從一群基本上同質的抗體中獲得的抗體，即除了可能的變體抗體(該變體抗體例如含有天然存在的突變或在產生單克隆抗體制劑的過程中出現，此類變體通常少量存在)外，構成群體的個體抗體是相同的和/或結合相同的表位。相比于通常包括針對不同決定簇(表位)的不同抗體的多克隆抗體制劑，單克隆抗體制劑中的每個單克隆抗體針對抗原上的單一決定簇。因此，修飾語“單克隆”表明抗體從基本上同質的抗體群獲得的特征，不應解釋為要求通過任何特定方法來產生抗體。例如，將根據本發明使用的單克隆抗體可通過多種技術來生成，包括但不限于雜交瘤法，重組DNA法，噬菌體展示法，和利用包含所有或部分的人免疫球蛋白基因座的轉基因動物的方法，這樣的方法和用于制備單克隆抗體的其他示例性方法描述于本文中。“裸抗體”是指沒有綴合異源部分(如細胞毒性部分)或放射性標記的抗體。裸抗體可以存在于藥物制劑中。"天然抗體"是指天然存在的具有變化的結構的免疫球蛋白分子。例如，天然IgG抗體是約150,000道爾頓的異源四聚體糖蛋白，其由兩個相同的輕鏈和兩個相同的重鏈組成，所述鏈通過二硫鍵結合。從N末端至C末端，每個重鏈具有可變區(VH)，其也被稱為可變重結構域或重鏈可變結構域，其后是三個恒定結構域(CH1，CH2和CH3)。類似地，從N末端到C末端，每個輕鏈具有可變區(VL)，其也被稱為可變輕結構域或輕鏈可變結構域，其后是恒定輕(CL)結構域。基于其恒定結構域的氨基酸序列，抗體的輕鏈可以被分配給被稱為kappa (K)和Iambda(A)的兩個類型中的一個。術語“包裝說明書”用于指通常包括在治療產品的商品包裝中的使用說明，其包含關于適應征、用法、劑量、給藥、組合療法、禁忌癥的信息和/或關于使用這樣的治療產品的
敬生
目口 O相對于參比多肽序列的“百分比)氨基酸序列同一性”定義為在將所述序列進行比對(并在必要時導入空位)以獲取最大百分比序列同一性，且不將任何保守置換視為序列同一性的部分之后，候選序列中的氨基酸殘基與參比多肽序列中的氨基酸殘基相同的百分數。可使用本領域各種方法進行序列比對以便測定百分比氨基酸序列同一性，例如，使用公眾可得到的計算機軟件如BLAST、BLAST-2、ALIGN或MEGALIGN(DNASTAR)軟件。本領域技術人員可以決定測量比對的適宜參數，包括對所比較的序列全長獲得最大比對所需的任何算法。然而，為此目的，％氨基酸序列同一性值使用序列比較計算機程序ALIGN-2產生。ALIGN-2序列比較計算機程序的作者是Genentech，lnc，并且源代碼已經隨用戶文檔提交至美國版權局(Washington D.C.，20559)，其美國版權注冊登記號為TXU510087。公眾可通過Genentech, Inc.(South San Francisco, California)得到 ALIGN-2 程序，或者可以從源代碼編譯。ALIGN-2程序應當為在UNIX操作系統、包括數字UNIXV4.0D上使用而進行編譯。ALIGN-2程序設定了所有序列比對參數并且不變。在ALIGN-2應用于氨基酸序列比較的情況中，給定氨基酸序列A相對于(to)、與(with)、或針對(against)給定氨基酸序列B的％氨基酸序列同一'丨生(或者這樣說:給定氨基酸序列A具有或含有相對于、與或針對給定氨基酸序列B的某一 ％氨基酸序列同一性)如下計算: 100乘以X/Y比值其中X是用序列比對程序ALIGN-2在該程序的A和B比對中評分為相同匹配的氨基酸殘基數，且其中Y是B中的氨基酸殘基總數。可以理解，當氨基酸序列A與氨基酸序列B的長度不相等時，A相對于B的％氨基酸序列同一性將不等于B相對于A的％氨基酸序列同一性。除非另外具體說明，在本文用的所有％氨基酸序列同一性的值都是用ALIGN-2計算機程序如前段所描述的那樣得到的。術語“藥物制劑”指這樣的制劑，其以允許包含在其中的活性成分的生物學活性有效的形式存在，并且不包含對施用所述制劑的受試者具有不可接受的毒性的另外的成分。“藥用載體”是指藥物制劑中不同于活性成分的成分，其對受試者是無毒的。藥用載體包括但不限于緩沖劑、賦形劑、穩定劑或防腐劑。除非另外說明，術語“BACE1”當在本文中使用時是指來自任何脊椎動物來源(包括哺乳動物如靈長類動物(例如人)和嚙齒類動物(例如，小鼠和大鼠))的任何天然β-分泌酶I (也被稱為β-位淀粉狀蛋白前體蛋白裂解酶1，膜相關天冬氨酸蛋白酶2，memapsin2,天冬氨酰蛋白酶2或Asp2)。該術語包括“全長”未加工的BACEl以及由細胞內加工產生的任何形式的BACEl。該術語還包括天然存在的BACEl的變體，例如，剪接變體或等位變體。示例性BACEl多肽的氨基酸序列顯示在以下SEQ ID NO:49中，并且有人BACEl、同種型A的序列，如在Vassar等，Science286:735-741 (1999)中報道的，該文獻通過引用完整地結合于本文中。 MAQALPWLLLWMGAGVLPAHGTQHGIRLPLRSGLGGAPLGLRLPRETDEEPEEPGRRGSFVEMVDNLRGKSGQGYYVEMTVGSPPQTLNILVDTGSSNFAVGAAPHPFLHRYYQRQLSSTYRDLRKGVYVPYTQGKWEGELGTDLVSIPHGPNVTVRANIAAITESDKFFINGSNWEGILGLAYAEIARPDDSLEPFFDSLVKQTHVPNLFSLQLCGAGFPLNQSEVLASVGGSMIIGGIDHSLYTGSLWYTPIRREWYYEVIffRVEINGQDLKMDCKEYNYDKSffDSGTTNLRLPKKVFEAAVKSIKAASSTEKFPDGFWLGEQLVCWQAGTTPWNIFPVISLYLMGEVTNQSFRITILPQQYLRPVEDVATSQDDCYKFAISQSSTGTVMGAVIMEGFYVVFDRARKRIGFAVSACHVHDEFRTAAVEGPFVTLDMEDCGYNIPQTDESTLMTIAYVMAAICALFMLPLCLMVCQWCCLRCLRQQHDDFADDISLLK(SEQ ID NO:49)存在數種其他同種型的人BACEl，包括同種型B、C和D。參見UniProtKB/Swiss-Prot Entry P56817，其通過引用完整地結合于本文中。同種型B顯示在SEQ ID NO:50中并且與同種型A(SEQ ID NO:49)不同在于它缺失氨基酸190-214(即缺失SEQ ID NO:49的氨基酸190-214)。同種型C顯示在SEQ ID NO:51中并且與同種型A(SEQ ID NO:49)不同在于它缺少氨基酸146-189 (即缺失SEQ ID NO:49的氨基酸146-189)。同種型D顯示在SEQ ID NO:52中并且與同種型A (SEQ ID NO:49)不同在于它缺少氨基酸146-189和190-214(即缺失 SEQ ID NO:49 的氨基酸 146-189 和 190-214)。用于本文時，“治療(t·reatment)”(及其語法變化如“治療(treat)”或“治療(treating) ”)指在嘗試改變待治療的個體的天然進程中的臨床干預，并且可以為了預防或在臨床病理學的進程中進行。治療的理想效果包括但不限于防止疾病發生或復發，緩和癥狀，消除疾病的任何直接或間接病理學后果，預防轉移，減少疾病進展速率，改善或減輕疾病狀態，和癥狀緩解或改善的預后。在一些實施方案中，將本發明的抗體用于延緩疾病的發生或減緩疾病的進展。術語“可變區”或“可變結構域”是指參與抗體與抗原結合的抗體重或輕鏈的結構域。天然抗體的重鏈和輕鏈(VH和VL，分別地)的可變結構域通常具有相似的結構，其中每個結構域包含四個保守的構架區(FR)和三個高變區(HVR)。(參見，例如，Kindt等KubyImmunology, 6thed., W.H.Freeman 和 C0.91 頁(2007))。單個 VH 或 VL 結構域可以足以給予抗原結合特異性。此外，可以使用來自與特定抗原結合的抗體的VH或VL結構域來分離結合所述抗原的抗體，以分別篩選互補VL或VH結構域的文庫。參見，例如，Portolano等，J.1mmunol.150:880-887(1993) ；Clarkson 等，Nature352:624-628(1991)。術語"載體"當在本文中使用時是指能夠增殖與其相連的另一個核酸的核酸分子。該術語包括作為自我復制核酸結構的載體以及結合到已經引入其的宿主細胞的基因組中的載體。一些載體能夠指導與其可操作相連的核酸的表達。這樣的載體在本文中被稱為"表達載體"。術語"神經病癥"或"神經疾病"指的是或描述了哺乳動物的中樞和/或周圍神經系統中的疾病或病癥。神經疾病的實例包括但不限于以下列表的疾病和病癥。神經病病癥是神經系統的疾病或異常，其表征為不適當或不受控的神經信號傳導或對其的缺乏，并且包括但不限于，慢性疼痛(包括感受傷害的疼痛(由對身體組織的損傷引起的疼痛，包括癌相關的疼痛)，神經性疼痛(由神經、脊髓或腦中的異常引起的疼痛)，和精神性疼痛(完全或大部分相關于心理障礙)，頭痛，偏頭痛，神經病，以及常常伴隨這樣的神經病病癥的癥狀和綜合征如眩暈或惡心。淀粉狀變性是一組疾病和病癥，其與在CNS中的胞外蛋白質沉積物相關，其包括但不限于，繼發性淀粉狀變性，年齡相關性淀粉狀變性，阿爾茨海默病(AD),輕度認知損傷(mild cognitive impairment,MCI),雷維小體癡呆,唐氏綜合征,遺傳性腦出血伴淀粉狀變性(Dutch型)；Guam Parkinson-癡呆綜合癥狀，腦淀粉狀血管病，亨廷頓病，進行性核上性麻痹，多發性硬化；克-雅病，帕金森病，傳遞性海綿狀腦病，HIV相關癡呆，肌萎縮性脊髓側索硬化癥(ALS),包涵體肌炎(inclusion-body myositis, IBM),和涉及β -淀粉狀蛋白沉積的眼病(即，黃斑變性，玻璃疣相關視神經病變和白內障)。CNS的癌癥表征為一個或多個CNS細胞(即，神經細胞)的異常增殖，并且包括但不限于，膠質瘤(glioma),多形性膠質母細胞瘤(glioblastoma multiforme),腦膜瘤(meningioma),星細胞瘤(astrocytoma),聽神經瘤(acoustic neuroma),軟骨瘤(chondroma),少突神經膠質瘤(oligodendroglioma),成神經管細胞瘤(medul1blastomas),神經節神經膠質瘤(ganglioglioma),神經鞘瘤(Schwannoma),神經纖維瘤(neurofibroma),成神經細胞瘤(neuroblastoma)，和硬膜外、髓內或硬膜內腫瘤。眼疾病或病癥是眼睛的疾病或病癥，為本文的目的，眼睛被視為受制于BBB的CNS器官。眼病或病癥包括但不限于，鞏膜、角膜、虹膜和睫狀體的病癥(即，鞏膜炎(scleritis)、角膜炎(keratitis)、角膜潰瘍(cornealulcer),角膜擦傷(corneal abrasion),雪盲(snow blindness),電光性眼炎(arc eye),Thygeson 淺層點狀角膜病變(Thygeson，s superficial punctate keratopathy)，角膜新生血管化(corneal neovascularisation),富克斯營養不良(Fuchs’ dystrophy),圓錐形角膜(keratoconus),干燥性角膜結膜炎(keratoconjunctivitis sicca),虹膜炎(iritis)和葡萄膜炎(uveitis)),晶狀體的病癥(即，白內障(cataract)),脈絡膜和視網膜的病癥(B卩，視網膜脫離(retinal detachment),視網膜劈裂癥(retinoschisis),高血壓性視網膜病變(hypertensive retinopathy),糖尿病視網膜病變(diabeticretinopathy),視網膜病(retinopathy),早產兒視網膜病，老年性黃斑變性(age-relatedmacular degeneration),黃斑變性(macular degeneration)(濕性或干性)，視網膜外膜(epiretinal membrane),色素性視網膜炎(retinitis pigmentosa)和黃斑水腫(macular edema))，青光眼(glaucoma),懸浮物(floaters),視神經和視覺通路的病癥(即，萊伯遺傳性視神經病(Leber’ s hereditary optic neuropathy)和視覺盤玻璃疣(optic disc drusen))，眼肌/雙眼移動調節/折射的病癥(S卩，斜視，眼肌癱瘓(ophthalmoparesis),進行性外部眼肌麻痹(opthalmoplegia),內斜視，外斜視，遠視，近視，散光，屈光不正，老花眼和眼肌麻痹)，視覺障礙和失明(即，弱視，萊伯先天性黑朦(Lever，s congenital amaurosis),暗點，色盲(color blindness)，全色盲(achromatopsia),夜盲癥(nyctalopia),失明(blindness),河盲(river blindness)和微眼炎 / 缺損(micro-opthalmia/coloboma)),紅眼，阿蓋耳羅伯遜瞳孔(Argyll Robertsonpupil),角膜真菌病(keratomycosis),干眼病和無虹膜(aniridia)。CNS的病毒或微生物感染包括但不限于由以下引起的感染，病毒(即，流感，HIV，脊髓灰質炎病毒，風疹，)，細菌(B卩，奈瑟氏球菌 屬(Neisseria sp.),鏈球菌屬(Streptococcus sp.),假單胞菌屬(Pseudomonas sp.),變形菌屬(Proteus sp.)，大腸桿菌(E.coli),金黃色葡萄球菌(S.aureus),肺炎球菌屬(Pneumococcus sp.),腦膜炎球菌屬(Meningococcus sp.),嗜血桿菌屬(Haemophilus sp.),和結核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis))和其他微生物如真菌(即，酵母，新型隱球菌(Cryptococcus neoformans)),寄生蟲(即，弓形蟲(toxoplasma gondii))或變形蟲(amoebas)，導致CNS病理生理學，包括但不限于，腦膜炎，腦炎，脊髓炎，血管炎和膿腫(abscess)，其可以是急性的或慢性的。CNS的炎癥是這樣的炎癥，其由對CNS的損傷導致，所述損傷可以是物理損傷(即，由于事故，手術，腦創傷，脊髓損傷，腦震蕩(concussion)所致的)或由于或相關于一種或多種CNS的其他疾病或病癥(即，膿腫，癌癥，病毒或微生物感染)的損傷。當用于本文中時，CNS的缺血是指一組病癥，其相關于腦部的異常血流或血管行為或其病因，并且包括但不限于，局部腦缺血(focal brain ischemia)，全局腦缺血(global brain ischemia)，卒中(即，蛛網膜下出血和腦內出血(intracerebral hemorrhage))，和動脈瘤。神經退行性疾病是一組疾病和病癥，其相關于CNS中神經細胞喪失功能或死亡，并且包括但不限于，腎上腺腦白質營養不良(adrenoleukodystrophy)，亞歷山大病，阿爾 白斯病(Alper’ s disease)，肌萎縮性側索硬化，運動失調性毛細血管擴張癥(ataxia telangiectasia)，Batten病(Batten disease)，科凱恩綜合征，基層皮質變性(corticobasal degeneration),由淀粉狀變性引起或與其相關的變性，弗里德賴希共濟失調癥(Friedreich’ s ataxia)，額顳葉變性(emporal lobar degeneration), Kennedy 病(Kennedy’ s disease)，多系統萎縮，多發性硬化，原發性側索硬化，進行性核上性麻痹，脊髓性肌萎縮，橫貫性脊髓炎，雷夫敘姆病(Refsrnn’ s disease)，和脊髓小腦性共濟失調。CNS的發作疾病和病癥涉及CNS中的不適當和/或異常電導，并且包括但不限于，癲癇(即，失神發作(absence seizures)，失張力發作(atonic seizures)，良性運動性癲癇(benign Rolandic epilepsy)，兒童期失神(childhood absence)，陣攣發作(clonic seizures)，復雜部分發作(complex partialseizures)，額葉性癲癇(frontal lobe epilepsy)，發熱性癲癇發作(febrile seizures)，嬰兒疫攣(infantile spasms)，少年肌陣攣性痛癇(juvenile myoclonic epilepsy),青少年期失神痛癇(juvenile absence epilepsy)，倫-格綜合征(Lennox-Gastautsyndrome)，蘭-克綜合征(Landau-Kleffner Syndrome)，Dravet 綜合征(Dravet’ ssyndrome)，Otahara 綜合征(Otahara syndrome)，West 綜合征(West syndrome)，肌肉陣攣性發作(myoclonic seizures)，線粒體病(mitochondrial disorders)，進行性肌陣攣性痛癇(progressive myoclonic epilepsies)，精神性發作(psychogenic seizures)，反射性痛癇(reflex epilepsy) ，Rasmussen 綜合征(Rasmussen, s Syndrome)，簡單部分發作(simple partial seizures)，繼發性全身性痛癇發作(secondarily generalizedseizures)，顳葉痛癇(temporal lobe epilepsy)，陣攣性發作(toniclonic seizures),強直發作(tonic seizures)，精神運動發作(psychomotor seizures)，邊緣葉癲癇(limbic epilepsy)，部分性癲癇發作(partial-onset seizures)，全身發作性癲癇發作(generalized-onset seizures)，痛癇持續狀態(status epilepticus)，腹型痛癇(abdominal epilepsy)，失神型發作(akinetic seizures)，植物神經性發作(autonomicseizures)，大量雙側肌陣攣(massive bilateral myoclonus)，月經性痛癇(catamenialepilepsy)，跌倒發作(drop seizures)，情緒性發作(emotional seizures)，病灶性發作(focal seizures)，發笑發作(gelastic seizures)，賈克森擴布(Jacksonian March)，拉福拉病(Lafora Disease)，運動性發作(motor seizures)，多病灶性發作(multifocalseizures)，夜發作(nocturnal seizures)，光敏性發作(photosensitive seizure)，假性發作(pseudo seizures)，感覺性發作(sensory seizures)，微小發作(subtle seizures),sylvan 發作(sylvan seizures),戒斷發作(withdrawal seizures),和視反射發作(visual reflex seizures))。行為障礙是CNS的病癥，其表征為就受折磨的受試者而言的異常行為，并且包括但不限于，睡眠障礙(sleep disorders)(即，失眠(insomnia),深眠狀態(parasomnias),夜驚(night terrors),晝夜節律睡眠障礙(circadian rhythmsleep disorders),和發作性睡病(narcolepsy)),心境障礙(mood disorders)(即，抑郁(depression),自殺性抑郁(suicidal depression),焦慮(anxiety),慢性情感障礙(chronic affective disorders),恐怖病(phobias),驚恐發作(panic attacks),強迫性障礙(obsessive-compulsive disorder),注意力缺陷伴多動障礙(attention deficithyperactivity disorder) (ADHD),注意缺陷障礙(attention deficit disorder) (ADD),慢性疲勞綜合征(chronic fatigue syndrome),廣場恐怖癥(agoraphobia),創傷后應激障礙(post-traumatic stress disorder),雙相性精神障礙(bipolar disorder)),進食障礙(即，厭食癥(anorexia)或貪食癥(bulimia)),精神病(psychoses),發育行為障礙(developmental behavioral disorder)(即，自閉癥(autism),雷特綜合征(Rett，ssyndrome), Aspberger 綜合征(Aspberger’ s syndrome)),人格障礙和精神障礙(即，精神分裂癥(schizophrenia),妄想障礙(delusional disorder),等)。溶酶體忙積癥(Lysosomal storage disorder)是代謝病癥,在一些情況中其與CNS相關或具有CNS特異性癥狀；這樣的病癥包括但不限于泰-薩克斯病(Tay-Sachs disease),戈謝病(Gaucher’sdisease)，法布里病(Fabry disease)，粘多糖貯積癥(I，II，III，IV，V, VI 和 VII 型)，糖原忙積病(glycogen storage disease), GMl 神經節苷脂忙積癥(GMl-gangliosidosis),異染性腦白質病變(metachromatic leukodystrophy), Farber 病(Farber’s disease),卡納范腦白質營養不良(Canavan’sleukodystrophy),和神經元臘樣脂褐素沉積癥(neuronalceroid lipofuscinoses) I 型和 2 型，尼曼-皮克病(Niemann-Pick disease), Pompe 病(Pompe disease),和克拉伯病(Krabbe，s disease)。組合物和方法在一方面中，本發明部分基于結合BACEl并且降低和/或抑制BACEl活性的抗體。在某些實施方案中，提供結合到BACEl的活性位點或外結合位點的抗體。示例性抗-BACEl抗體在一方面中，本發明提供抗-BACEl抗體，所述抗-BACEl抗體包含至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個選自以下的HVR: (a)包含氨基酸序列SEQ ID NO:22，23，26，28，45，68，71，72，73 或 120 的 HVR-Hl ； (b)包含氨基酸序列 SEQ ID NO:24，29，46，69，74，75，76，77，78 或 121 的 HVR-H2 ； (c)包含氨基酸序列 SEQ ID NO:25，30，47，70，79 或 122 的 HVR-H3 ；(d)包含氨基酸序列SEQ ID NO:7,8,17，35或42的HVR-Ll ； (e)包含氨基酸序列SEQ IDNO:9，10，18，36-39，41，43，56，58，59，60，61，62，63，64 或 118 的 HVR-L2 ;和(f)包含氨基酸序列 SEQ ID NO19，40，44，57，65，66，67 或 119 的 HVR-L3。在一方面中，本發明提供抗體，所述抗體包含至少一個，至少兩個，或所有三個選自以下的 VH HVR 序列:(a)包含氨基酸序列 SEQ ID NO:22，23，26，28，45，68，71-73 或 120的 HVR-Hl ； (b)包含氨基酸序列 SEQ ID NO:24，29，46，69，74-78 或 121 的 HVR-H2 ;和(c)包含氨基酸序列 SEQ ID NO: 25，30，47，70，79 或 122 的 HVR-H3。

在一個實施方案中，所述抗體包含HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ IDNO:22 或 SEQ ID NO:23 或 SEQ ID NO:28 或 SEQ ID NO:71 或 SEQ ID NO:72 或 SEQ ID NO:73。在另一個實施方案中，所述抗體包含HVR-H2，所述HVR-H2包含氨基酸序列SEQ ID NO:24 或 SEQ ID N0:29 或 SEQ ID N0:74 或 SEQ ID N0:75 或 SEQ ID NO:76 或 SEQ ID NO:77或SEQ ID NO:780在另一個實施方案中，所述抗體包含HVR-H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID N0:25或SEQ ID NO:30或SEQ ID NO:79。在一個實施方案中，所述抗體包含HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ ID NO:28。在另一個實施方案中，所述抗體包含HVR-H2，所述HVR-H2包含氨基酸序列SEQ ID NO:29。在另一個實施方案中，所述抗體包含HVR-H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO:30。在另一個實施方案中，所述抗體包含(a) HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQID NO:22 ； (b)HVR-H2,所述 HVR-H2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:24 ;和(c)HVR_H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO: 25，或者所述抗體包含(a) HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ ID NO:23 ； (b)HVR_H2，所述HVR-H2包含氨基酸序列SEQ ID NO:24 ;和(c)HVR-H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO:25。在另一個實施方案中，所述抗體包含(a) HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ ID NO:28 ； (b) HVR-H2，所述HVR-H2包含氨基酸序列SEQ ID NO:29 ;和(c) HVR-H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO:30。在另一個實施方案中，所述抗體包含(a) HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ ID NO:23 ；(b)HVR-H2，所述HVR-H2包含氨基酸序列SEQ ID NO:74 ;和(c)HVR_H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO: 25，或者所述抗體包含(a) HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ IDNO:23 ； (b)HVR-H2，所述HVR-H2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:75 ;和(c) HVR-H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO:25或者所述抗體包含(a) HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列 SEQ ID NO:71 ； (b) HVR-H2，所述 HVR-H2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:24 ;和(c)HVR-H3,所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO: 25，或者所述抗體包含(a) HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ ID NO:72 ； (b)HVR_H2，所述HVR-H2包含氨基酸序列SEQ ID NO:24 ;和(c)HVR-H3，所述HVR-H 3包含氨基酸序列SEQ ID NO: 25，或者所述抗體包含(a) HVR-HlJjf述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ ID NO:23 ; (b) HVR-H2，所述HVR-H2包含氨基酸序列SEQ IDN0:76;和(c)HVR-H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO:25，或者所述抗體包含(a)HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ ID NO:23 ； (b) HVR-H2，所述HVR-H2包含氨基酸序列SEQ ID NO:77 -M (c) HVR-H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID N0:79，或者所述抗體包含(a) HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ ID NO:73 ; (b)HVR_H2，所述HVR-H2包含氨基酸序列SEQ ID NO:78 ;和(c) HVR-H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO:25。在另一方面中，本發明提供抗體，所述抗體包含至少一個，至少兩個，或全部三個選自以下的VL HVR序列:(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7，8，17，35和42 ； (b)HVR-L2，所述 HVR-L2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:9，10，18，36-39，41，43，56，58-64或 118;和(c)HVR-L3，所述 HVR-L3 包含氨基酸序列 SEQ ID NO: 11-16，19，40，44，57，65-67或 119。在一個實施方案中，所述抗體包含HVR-L1，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ IDNO:7或SEQ ID N0:8。在另一個實施方案中，所述抗體包含HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列 SEQ ID NO:9 或 SEQ ID NO: 10 或 SEQ ID N0:58 或 SEQ ID N0:59 或 SEQ ID NO:60或 SEQ ID N0:61 或 SEQ ID NO:62 或 SEQ ID NO:63 或 SEQ ID NO:64。在另一個實施方案中，所述抗體包含HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID N0:11或SEQ ID NO:12或 SEQ ID NO: 13 或 SEQ ID NO: 14 或 SEQ ID NO: 15 或 SEQ ID NO: 16 或 SEQ ID NO:65 或SEQ ID N0:66或SEQ ID NO:67。在另一個實施方案中，所述抗體包含HVR-L1，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:350在另一個實施方案中，所述抗體包含HVR-L2，所述包含選自由以下各項組成的組的氨基酸序列:SEQ ID N0:36-39。在另一個實施方案中，所述抗體包含HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:40。在另一個實施方案中，所述抗體包含(a)HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ； (b)HVR-L2，所述 HVR-L2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:9 ;和(c)HVR_L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO: 11，或者所述抗體包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ;(b)HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:9 ;和(c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO: 12，或者所述抗體包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ； (b)HVR_L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ IDNO:9 ;和(c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:13，或者所述抗體包含(a)HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ; (b) HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:9 -M (c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO: 14，或者所述抗體包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ； (b)HVR_L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:9 -M (c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:16,或者所述抗體包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:8 ; (b) HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:10 ;和(c) HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQID N0:15。在另一個實施方案中，所述抗體包含(a)HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:35 ;(b)HVR-L2，所述 HVR-L2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:36 ;和(c)HVR_L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO -A0,或者所述抗體包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:35 ； (b) HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:37 ;和(c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:40，或者所述抗體包含(a)HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:35 ; (b) HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ IDN0:38;和(c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:40，或者所述抗體包含(a)HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO`:35 ； (b)HVR_L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列 SEQ ID NO:39 ;和(c) HVR-L3，所述 HVR-L3 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:40。在另一個實施方案中，所述抗體包含(a)HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ;(b)HVR-L2，所述 HVR-L2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:58 ;和(c)HVR_L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:12，或者所述抗體包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ； (b)HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:9 ;和(c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:65，或者所述抗體包含(a)HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ； (b)HVR_L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ IDN0:59;和(c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO: 12，或者所述抗體包含(a)HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ； (b) HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:9 -M (c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID N0:66，或者所述抗體包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ； (b)HVR_L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:9 -M (c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:67，或者所述抗體包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ; (b) HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:60 ;和(c) HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQID NO:67，或者所述抗體包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ； (b)HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:61 ;和(c) HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:65，或者所述抗體包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ IDNO:7 ； (b)HVR-L2，所述 HVR-L2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:59 ;和(c)HVR_L3，所述 HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:66，或者所述抗體包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列 SEQ ID NO:7 ； (b)HVR-L2，所述 HVR-L2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:62 ;和(c)HVR_L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:67，或者所述抗體包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ； (b)HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:63 ;和(c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO: 12，或者所述抗體包含(a)HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸 序列SEQ ID NO:7 ； (b)HVR_L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ IDNO:64 -M (c)HVR-L3，所述 HVR-L3 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:12。在另一方面中，本發明的抗體包含(a) VH結構域，所述VH結構域包含至少一個，至少兩個，或全部三個選自以下的VH HVR序列:(i) HVR-Hl，所述HVR-Hl包含選自以下的氨基酸序歹Ij:SEQ ID NO:22，23，26，28，45，68，71-73或 120(ii)HVR-H2，所述HVR-H2包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO:24，29，46，69，74-78 或 121 和(iii)HVR_H3，所述HVR-H3 包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO:25，30，47，70，79或122 ;和(b) VL結構域，所述VL結構域包含至少一個，至少兩個，或全部三個選自以下的VL HVR序列:(i) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO:7，8，17，35或42，(ii)HVR-L2，所述HVR-L2包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO:9，10，18，36-39，41，43，56，58-64 或 118，和(c)HVR-L3,所述HVR-L3包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 11-16，19，40，44，57，65-67或119。在另一方面中，本發明提供抗體，所述抗體包含(a)HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列 SEQ ID NO:23 ;(b)HVR-H2，所述 HVR-H2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:24 ；(c)HVR-H3,所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO:25 ； (d)HVR-Ll,所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ;(e)HVR-L2，所述 HVR-L2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:9 ;和(f)HVR_L3，所述HVR-L3包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO:12。在某些實施方案中，所述抗體包含至少一個選自以下的序列:HVR_H1，HVR-H2，HVR-H3，其中 HVR-Hl 包含氨基酸序列 GFX3tlFX31X32X33X34IH(SEQ ID NO:45)，其中 X3tl = N或 T ；X31 = S，L 或 Y ；X32 = G 或 Y ；X33 = Y 或 S ;并且 X34 = A，G 或 S ;其中 HVR-H2 包含氨基酸序列 X35X361SPX37X38GX39TX40YADSVKG(SEQ ID NO:46)，其中 X35 = A 或 G ；X36 = W 或S ;X37 = A或Y ；X38 = G或S ；X39 = S或Y ;并且X4tl = D或S ;并且其中HVR-H3包含序列X41PX42X43X44X45X46X47MDY (SEQ ID NO:47)，其中 X41 = Q 或 G ;X42 = T 或 F ；X43 = H 或 S ；X44 =
Y或 P ;X45 = Y 或 W ;X46 = Y 或 V，并且其中 X47 任選包括序列 YAKGYKA (SEQ ID NO:48)。在某些實施方案中，所述抗體包含至少一個選自以下的序列:HVR_H1，HVR-H2和HVR-H3，其中 HVR-Hl 包含氨基酸序列 GX71X72X73X74X75X76X77IH(SEQ ID NO:120)，其中 X71 = F或 Y ；X72 = F, N 或 T ；X73 = F 或 Y ；X74 = L, Q, I, S 或 Y ；X75 = G 或 Y ；X76 = Y 或 S ;并且 X77=A，G 或 S ；HVR-H2 包含氨基酸序列 X78X791SPX80X81GX82X83X84YADSVKG (SEQ ID NO: 121)，其中X78 = A 或 G ；X79 = W 或 S ；X80 = A, S, Q 或 Y ；X81 = G 或 S ；X82 = S, K, L 或 Y ；Χ83 = T 或 Y ;并且 X84 = D 或 S ;并且 HVR-H3 包含氨基酸序列 X85PX86X87X88X89X9tlX91MDY (SEQ ID NO: 122)，其中 X85 = Q 或 G ；X86 = T 或 F ；X87 = H, Y 或 S ；X88 = Y 或 P ；X89 = Y 或 W ；X90 = Y 或 V,并且其中X91任選包括序列YAKGYKA (SEQ ID NO:48)。在某些實施方案中，所述抗體包含至少一個選自以下的序列:HVR_L1，HVR-L2，HVR-L3，其中 HVR-Ll 包含氨基酸序列 RASQX17VX18X19X2ciX21A, (SEQ ID NO:42)其中 X17 = S，D或V ；X18 = S或A ；X19 = S, T或N ；X20 = A或S ；X21 = V或L,其中HVR-L2包含氨基酸序列X22ASX23LYS (SEQ ID NO:43)，其中 X22 = S，W，Y 或 L ；X23 = F，S 或 W，并且其中 HVR-L3 包含氨基酸序列 QQX24X25X26X27X28X29T (SEQ ID NO:44)，其中 X24 = S，F，G，D 或 Y ；X25 = Y，P，S 或A ；X26 = Y，T 或 N ；X27 = T，Y，D 或 S ；X28 = P 或 L ;并且 X29 = F，P 或 T。在某些實施方案中，所述抗體包含至少一個選自下組的序列:HVR-L1、HVR-L2和HVR-L3，其中 HVR-Ll 包含氨基酸序列 RASQX17VX18X19X2ciX21A(SEQ ID NO:42)，其中 X17 = S，D或V ；X18 = S或A ；X19 = S, T或N ；X20 = A或S ；X21 = V或L,其中HVR-L2包含氨基酸序列X62ASX63X64YX65 (SEQ ID NO:118)，其中 X62 = S，W，Y，F 或 L ；X63 = F，S，Y 或 W ；X64 = L 或 R ;X65 = S，P，R，K 或 W，并且 HVR-L3 包含氨基酸序列 QQX66X67X68X69X7tlX71T (SEQ ID NO: 119)，其中 X66 = S，F，G，D 或 Y ；X67 = Y，P，S 或 A ；X68 = Y，T 或 N ；X69 = T，Y，D 或 S ；X70 = P，Q，S，K或L ;并且X71=F, P或T。在某些實施方案中，所述抗體包含至少一個選自以下的序列:HVR_L1，HVR-L2，HVR-L3，其中 HVR-Ll 包含氨基酸序列 RASQX1VX2X3X4X5A (SEQ ID NO:17)，其中 X1 = D 或 V ;X2=S 或 A ;X3 = T 或 N ;X4 = S 或 A ;X5 = V 或 L，其中 HVR-L2 包含氨基酸序列 X6ASFLYS (SEQID NO:18)，其中 X6 = S 或 L，并且其中 HVR-L3 包含氨基酸序列 QQX7X8X9X10X11X12T (SEQ IDNO: 19)，其中 X7 = S，F，G，D 或 Y ；X8 = Y，P，S，或 A ;X9 = T 或 N ；X10 = T，Y，D 或 S ；Xn = P或 L ；X12 = P 或 T。在某些實施方案中，所述抗體包含至少一個選自以下的序列:HVR_L1，HVR-L2，HVR-L3，其中 HVR-Ll 包含氨基酸序列 RASQX1VX2X3X4X5A (SEQ ID NO:17)，其中 X1 = D 或 V ;X2=S 或 A5X3 = T 或 N; X4 = S 或 A; X5 = V 或 L，其中 HVR-L2 包含氨基酸序列 X48ASX49X5tlYX51 (SEQID NO:56)，其中 X48 = S 或 F ;X49 = F 或 Y ；X50 = L 或 R ；X51 = S，P，R，K 或 W，其中 HVR-L3包含氨基酸序列 QQFPTYX52PT (SEQ ID NO:57)，其中 X52 = L，Q，S 或 K。在某些實施方案中，所述抗體包含至少一個選自以下的序列:HVR_H1，HVR-H2，HVR-H3，其中 HVR-Hl 包含氨基酸序列 GFTFX13GYX14IH(SEQ ID NO:26)，其中 X13 = S 或 L 和X14 = A 或 G，其中 HVR-H2 包含氨基酸序列 GWISPAGGSTDYADSVKG(SEQ ID NO:24)，并且其中HVR-H3 包含氨基酸序列 GPFSPWVMDY (SEQ ID NO:25).
在某些實施方案中，所述抗體包含至少一個選自以下的序列:HVR_H1，HVR-H2，HVR-H3,其中 HVR-Hl 包含氨基酸序列 GX53X54X55X56GYGIH(SEQ ID NO:68)，其中 X53=F或Y ；X54 = T或F ；X55 = F或Y ；X56 = L, Q或I,其中HVR-H2包含氨基酸序列GffISPX57X58GX59X60DYADSVKG (SEQ ID NO:69)，其中 X57 = A，S 或 Q ；X58 = G 或 S ；X59 = S，K 或L ；X60 = T或Y，并且其中HVR-H3序列包含氨基酸序列GPFX61PWVMDY (SEQ ID NO:70)，其中X61 = S 或 Y。在某些實施方案中，所述抗體包含至少一個選自以下的序列:HVR_L1，HVR-L2，HVR-L3，其中HVR-Ll包含氨基 酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:35)，其中HVR-L2包含氨基酸序列 X15ASX16LYS (SEQ ID NO:41)，其中 X15 = S，W 或 Y 和 X16 = S 或 W，并且其中 HVR-L3包含氨基酸序列 QQYSYSPFT (SEQ ID NO:40)。在某些實施方案中，如以上所提供的抗-BACEl抗體的任意一個或多個氨基酸在以下HVR位置被置換:在HVR-Hl (SEQ ID NO:26)中:位置 5 和 8 ;在HVR-Ll (SEQ ID NO:17)中:位置 5，7，8，9 和 10 ;在HVR-L2(SEQ ID NO:18)中:位置 1，或者在 HVR-L2 (SEQ ID NO:41)中，位置 I和4 ;以及在HVR-L3(SEQ ID NO:19)中:位置 3，4，5，6，7 和 8。在某些實施方案中，置換是保守置換，如本文中提供的。在某些實施方案中，任意一個或多個以下置換可以以任意組合進行:在HVR-Hl (SEQ ID NO:26)中:位置5處的絲氨酸或亮氨酸和位置8處的丙氨酸或甘氨酸；在HVR-Ll (SEQ ID NO:17)中:位置5處的天冬氨酸或纈氨酸；位置7處的絲氨酸或丙氨酸；位置8處的蘇氨酸或天冬酰胺；位置9處的絲氨酸或丙氨酸和位置10處的纈氨酸或亮氨酸；在HVR-L2(SEQ ID NO:18)中:位置I處的絲氨酸或亮氨酸，或HVR-L2(SEQ ID NO:41)位置I處的絲氨酸、酪氨酸或色氨酸或位置4處的酪氨酸、絲氨酸或色氨酸；和在HVR_L3(S EQ ID NO:19)中:位置3處的絲氨酸，苯丙氨酸，甘氨酸，天冬氨酸或酪氨酸；位置4處的酪氨酸或脯氨酸，位置5處的絲氨酸，丙氨酸，蘇氨酸或天冬酰胺；位置6處的酪氨酸，蘇氨酸，天冬氨酸或絲氨酸，位置7處的天冬氨酸，絲氨酸，脯氨酸或亮氨酸和位置8處的脯氨酸或蘇氨酸。在某些實施方案中，置換是保守置換，如本文中所提供的。在某些實施方案中，任意一個或多個以下置換可以以任意組合進行:在HVR-Hl (SEQ ID NO:26)中:S5L 和 A8G ；在HVR-Ll (SEQ ID NO:17)中:D5V ；S7A ；T8N ；S9A 和 VIOL ；在HVR-L2(SEQ ID NO:18)中:S1L，或者在 HVR-L2 (SEQ ID NO:41)中，位置 SlW 或Y和S4W ；以及在HVR-L3 (SEQ ID NO: 19)中:位置 S3F、G、D 或 Yl ;Y4P、S 或 A ；T5N ;T6Y、D 或 S ;P7L 和 Ρ8Τ。在某些實施方案中，如以上所提供的抗-BACEl抗體的任意一個或多個氨基酸在以下HVR位置被置換:在HVR-Hl (SEQ ID NO:120)中:位置 2，3，5，6，7 和 8 ;在HVR-H2(SEQ ID NO: 121)中:位置 1，2，6，7，9，10，和 11 ;在HVR-H3(SEQ ID NO:122)中:位置 I，3，4，5，6，7，和 8在HVR-Ll (SEQ ID NO:42)中:位置 5，7，8，9 和 10 ;在HVR-L2(SEQ ID NO:118)中:位置 I，4，5 和 7 ;以及在HVR-L3(SEQ ID NO:119)中:位置 3，4，5，6，7 和 8。在某些實施方案中，置換是保守置換，如本文中所提供的。
以上置換的可能的組合被如上所述的SEQ ID NO:42_47和118-122的共有序列所涵蓋。在任何以上實施方案中，抗-BACEl抗體被人源化。在一個實施方案中，抗-BACEl抗體包含如在任何以上實施方案中的HVR，和還包含接納體人構架，例如人免疫球蛋白構架或人共有構架。在另一個實施方案中，抗-BACEl抗體包含如在任何以上實施方案中的HVR，和還包含 VH 或 VL，其包含 SEQ ID NO: 1—6，20，21，27，31—34，80—98 和 99-117 的 FRl, FR2,FR3，或FR4序列。在另一方面中，抗-BACEl抗體包含重鏈可變結構域(VH)序列，該序列與選自以下的氨基酸序列具有至少 90 %，91 %，92 %，93 %，94 %，95 %，96 %，97 %，98 %，99 %，或100%序列同一性:SEQ ID NO:20，21，27和80-98。在某些實施方案中，相對于參比序列，具有至少 90 %，91 %，92 %，93 %，94 %，95 %，96 %，97 %，98 %，或 99 % 同一性的 VH 序列包含置換(例如，保守置換)，插入，或缺失，而包含該序列的抗-BACEl抗體保持結合BACEl和/或抑制或減弱BACEl活性的能力。在某些實施方案中，總計I至10個氨基酸被置換，插入和/或缺失在SEQ ID NO:20，21，27和80-98中。在某些實施方案中，置換，插入，或缺失發生在HVR外的區域中(S卩，在FR中)。任選地，抗-BACEl抗體包含SEQ ID NO =20,21,27或80-98中的VH序列，包括所述序列的翻譯后修飾。在一個特別的實施方案中，VH包含一個、兩個或三個選自以下的HVR: (a)HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ ID NO:22,23，26，28，45，68，71，72，73 或 120，(b)HVR_H2，所述HVR-H2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:24，29，46，69，74，75，76，77，78 或 121，和(c) HVR-H3，所述 HVR-H3 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:25,30,47,70,79 或 122。在一方面中，本發明提供抗-BACEl抗體，所述抗體包含至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個選自以下的HVR: (a) HVR-H1，所述HVR-Hl包含圖1 (B)，2 (B)和24(A)中的氨基酸序列;(b) HVR-H2，所述HVR-H2包含圖1 (B)，2 (B)和24 (B)中的氨基酸序列；(c)HVR-H3，所述 HVR-H3 包含圖1 (B)，2 (B)和 24 (C)中的氨基酸序列 A(I)HVR-LUy^iHVR-Ll包含圖1 (A)，2 (A)和23 (A )中的氨基酸序列；(e) HVR-L2，所述HVR-L2包含圖1 (A)，2 (A)和23(B)中的氨基酸序列；和(f)HVR-L3，所述HVR-L3包含圖1(A)和2 (A)和23 (C)中的氨基酸序列。在另一方面中，提供抗-BACEl抗體，其中所述抗體包含輕鏈可變結構域(VL)，所述結構域與選自以下的氨基酸序列具有至少90%，91%，92%，93%，94%，95%，96%，97%，98%，99%，或 100% 的序列同一性:SEQ ID NO:1_6，31-34 和 99-117。在某些實施方案中，相對于參比序列，具有至少90 %，91 %，92 %，93 %，94 %，95 %，96 %，97 %，98 %，或99%同一性的VL序列包含置換(例如，保守置換)，插入，或缺失，但是包含所述序列的抗-BACEl抗體保持結合BACEl和/或抑制或降低BACEl活性的能力。在某些實施方案中，在SEQ ID NO:1-6，31-34和99-117中總計I至10個氨基酸被置換，插入和/或缺失。在某些實施方案中，置換，插入，或缺失發生在HVR外的區域中(S卩，在FR中)。任選地，抗-BACEl抗體包含SEQ ID NO:1-6，31-34或99-117中的VL序列，包括所述序列的翻譯后修飾。在一個特別的實施方案，VL包含一個、兩個或三個選自以下的HVR: (a) HVR-Ll，所述HVR-LI包含氨基酸序列SEQ ID NO:7，8，17，35或42 ; (b)HVR_L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQID NO:9，10，18，36-39，41，43 和 56，58-64 或 118 ;和(c) HVR-L3，所述 HVR-L3 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:11-16,19，40，44，57，65，66，67 或 119。在另一方面中，提供抗-BACEl抗體，其中所述抗體包含如在任何以上提供的實施方案中的VH，和如在任何以上提供的實施方案中的VL。在一個實施方案中，所述抗體包含分別包含SEQ ID N0:21和SEQ ID NO:2中的VH和VL序列，包括所述序列的翻譯后修飾。在另一個方面中，本發明提供抗體，所述抗體結合與本文中提供的抗-BACEl抗體相同的表位。例如，在某些實施方案中，提供這樣的抗體，其結合與包含選自SEQ ID NO:20,21，27 和 80-98 的 VH 序列和選自 SEQ ID NO:1-6,31-34 和 99-117 的 VL 序列的抗-BACEl抗體相同的表位。在某些實施方案中，提供這樣的抗體，其結合與包含分別在SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:2中的VH和VL序列的抗-BACEl抗體相同的表位。在某些實施方案中，提供這樣的抗體，其結合BACEl內的表位，所述表位包含至少一個,至少兩個,至少三個,至少四個,至少五個,至少六個,至少七個,至少八個,至少九個氨基酸，所述氨基酸對應于SEQ ID N0:49的氨基酸314SER，316GLU，317LYS，318PHE，319PR0,327GLN,328LEU,329VAL,330CYS,331TRP,332GLN,333ALA,335THR,337PR0,340ILE,375THR,378ASP,380CYS,426PHE。在某些實施方案中，提供這樣的抗體，其結合BACEl內的表位，所述表位包含至少一個,至少兩個,至少三個,至少四個,至少五個,至少六個,至少七個,至少八個,至少九個氨基酸，所述氨基酸對應于SEQ ID NO:49的氨基酸314SER ；316GLU ；317LYS ；327GLN ；330CYS ；33ITRP ；332GLN ；335THR ;和378ASP。在其他實施方案中，構象表位包含對應于以下的氨基酸:SEQ ID NO:49 的 314SER ；316GLU ；317LYS ；327GLN ；330CYS ；331TRP ；332GLN ；335THR ;和378ASP。要理解，在BACEl表位中鑒定的氨基酸對應于人BACEl同種型A的序列。然而，所述BACEl構象表位含包括在BACEl的其他變體和同種型中的相應氨基酸，并且所述表位可以包括除指定殘基以外的氨基酸。 在某些實施方案中，提供這樣的抗體，其結合BACEl內的表位，所述表位包含至少一個，至少兩個或 至少三個BACEl的氨基酸區域，所述氨基酸區域對應于SEQ ID NO:49的氨基酸 315-318 ；SEQ ID NO:49 的氨基酸 331-335 ；SEQ ID NO:49 的氨基酸 370-381 ;或其任意組合。在一個實施方案中，抗體結合BACEl的一個表位，所述表位包含SEQ ID NO:49的氨基酸 315-318,331-335 和 370-381。在另一個實施方案中，提供這樣的抗體，其結合BACEl內的表位，這導致:在結合后相對于未結合抗體的BACEl，BACEl的P6和/或P7位點的構象變化(Turner等，Biochemistry44:105-112 (2005))。在另一個實施方案中，提供這樣的抗體，其結合BACEl的表位，這誘使BACEl的SEQ ID NO:49的氨基酸218-231采取隨機環結構。BACEl的SEQID NO:49的氨基酸218-231以α -螺旋結構存在于結合底物的復合物中。在另一個實施方案中，提供這樣的抗體，其結合BACEl內的位點，如在圖14和15中所示的以及在BACEl和抗-BACEl抗體、YW412.8.31的晶體結構中所示(實施例3(B))。在其他實施方案中，提供這樣的抗體，其結合BACEl內的外結合位點。在一個實施方案中，BACEl內的外結合位點與Kornacker等，Biochem.44:11567-11573(2005)鑒別的外結合位點是相同的外結合位點。在一個實施方案中，提供這樣的抗體，其與在Kornacker等，Biochem.44:11567-11573(2005)(該參考文獻通過引用完整地結合于本文中)中鑒別的肽(即，肽 1，2，3，1-11，1-10，1-9，1-8，1-7，1-6，2-12，3-12，4-12，5-12，6-12，7-12，8-12,9-12,10-12，4，5，6，5-10，5-9，￥5六，卩6六，￥7六，卩8六，19六，卩1(^和1^1八)競爭結合BACE1。在另一個實施方案中，提供這樣的抗體，其如本文所述的任何抗-BACEl抗體那樣競爭結合(例如，結合相同的表位)。在本發明的另一個方面中，根據任何以上實施方案的抗-BACEl抗體是單克隆抗體，包括嵌合抗體，人源化抗體或人抗體。在一個實施方案中，抗-BACEl抗體是抗體片段，例如，Fv，Fab，Fab’，scFv，雙抗體，或F(ab’)2片段。在另一個實施方案中，抗體是全長抗體，例如，完整的IgGl抗體或如本文所定義的其他抗體類別或同種型。在另一個方面中，根據任何以上實施方案的抗-BACEl抗體可以單獨地或組合地結合任何如在以下部分1-7中所述的特征:1.抗體親合力在某些實施方案中，本文提供的抗體具有的解離常數(Kd)≤ΙμΜ，≤IOOnM,≤IOnM, ≤ InM, ≤ 0.1nM, ≤ 0.0lnM,或≤ 0.00InM(例如 KT8M 以下，例如 KT8M 至 I(T13M,例如，10_9Μ 至 I(T13M)。在一個實施方案中，Kd通過用目的抗體的Fab形式及其抗原進行的放射性標記的抗原結合測定法(RIA)測量，如由以下測定所述的。Fab對抗原的溶液結合親合力通過在存在未標記抗原的滴定系列的情況下，用最小濃度的(125I)-標記的抗原平衡Fab，接著用抗-Fab抗體-包被的板捕獲結合的抗原來測量(參見，例如，Chen等，J.Mol.Biol.293:865-881 (1999)) ο 為了確定測定的條件，將MICROTITER 多孔板(Thermo Scientific)用5yg/ml的在50mM碳酸鈉(ρΗ9.6)中的捕獲抗-Fab抗體(Cappel Labs)包被過夜，并隨后用PBS中的2% (w/v)牛血清白蛋白在室溫(約23°C )封閉2-5小時。在非吸附板(Nunc#269620)中，將IOOpM或26pM[125I]-抗原與目的Fab的系列稀釋物混合(與在Presta 等，癌癥研究(Cancer Res).57:4593-4599(1997)中的抗-VEGF 抗體，Fab-12 的評估一致)。接著，將目的Fab溫育過夜；然而溫育可以持續更長的階段(例如65小時)從而確保達到平衡。隨后，將混合物轉移到捕獲板中以在室溫進行溫育(例如I小時)。接著，去除溶液，并將所述板用在PBS中的0.1%聚山梨醇酯20(TVVEEN-20R)洗滌8次。當所述板已經干燥時，加入150 μ I/孔的閃爍劑(MICR0SCINT-20 ；Packard)，并將所述板在T0PC0UNT Y計數器(Packard)上計數10分鐘。選擇提供少于或等于20%的最大結合的每種Fab的濃度用在競爭性結合測定中。根據另一個實施方案，Kd是通過表面等離子共振測定法使用BIACORE -2000或 B1ACORE'K-3000儀器(BIAcore, Inc.，Piscataway, NJ)在 25 °C 使用固定化抗原CM5芯片在 10個應答單位(RU)測量的。簡而言之，依照供應商的說明書用鹽酸N-乙基-N’-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亞胺(EDC)和N-羥基-琥珀酰亞胺(NHS)活化羧甲基化右旋糖苷生物傳感器芯片(CM5，BIAC0RE Inc.)。用IOmM乙酸鈉pH4.8將抗原稀釋至5 μ g/ml ( 0.2 μ Μ)，然后以5 μ I/分鐘的流速注入至獲得約10個應答單位(RU)的偶聯蛋白質。注入抗原后，注入IM乙醇胺以封閉未反應基團。為了進行動力學測量，在25°C以約25 μ I/分鐘的流速注入在含0.05%聚山梨醇酯20 (TWEEN-20 )表面活性劑的PBS(PBST)中的兩倍連續稀釋的Fab (0.78ηΜ至500ηΜ)。使用簡單一對一朗格繆爾(Langmuir)結合模型(BI ACORE Evaluation Software version3.2)通過同時擬合結合和解離傳感圖計算結合速率(U和解離速率Gw)。平衡解離常數(Kd)以比率k Jkm計算。參見例如Chen等，J.Mol.Biol.(分子生物學雜志)293 =865-881 (1999)。如果根據上文表面等離子共振測定法，結合速率超過IO6M-1S-1,那么結合速率可使用熒光淬滅技術來測定，即根據分光計諸如配備了斷流裝置的分光光度計(Aviv Instruments)或8000系列SLM-AMINCO 分光光度計(ThermoSpectronic)中用攪拌比色杯(stirred cuvette)的測量,在存在濃度漸增的抗原的條件下，測量PBS，pH7.2中的20nM抗-抗原抗體(Fab形式)在25°C的熒光發射強度(激發=295nm ;發射=340nm, 16nm帶通)的升高或降低。2.抗體片段在某些實施方案中，本文提供的抗體是抗體片段。抗體片段包括但不限于，Fab,Fab’，Fab’ -SH, F(ab’)2，FvjP scFv片段，以及以下描述的其他片段。對于特定抗體片段的綜述，請參見Hudson等Nat.Med.9:129-134 (2003)。對于scFv片段的綜述，請參見，例如，Pluckthiin, The Pharmacology ofMonoclonal Antibodies (單克隆抗體的藥理學)，卷 Il3, Rosenburg 和 Moore 編輯，(Springer-Verlag, New Yorkh269-3I5K (I994);還請參見W093/16185 ;和美國專利號5，571，894和5，587，458。對于包含拯救受體(salvagereceptor)結合表位殘基和 具有提高的體內半衰期的Fab和F(ab' )2片段的討論，參見美國專利號5,869,046。雙抗體是具有兩個抗原結合位點的抗體片段，其可以是二價或雙特異性的。參見，例如，EP404，097 ；W01993/01161 ;Hudson 等，Nat.Med.9:129-134(2003);和 Hollinger 等，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA90:6444-6448 (1993)。三抗體和四抗體也描述于 Hudson 等，Nat.Med.9:129-134(2003)中。單一結構域抗體是包含抗體的全部或部分重鏈可變結構域或全部或部分輕鏈可變結構域的抗體片段。在某些實施方案中，單一結構域抗體是人單一結構域抗體(Domantis, Inc.，Waltham, MA ;參見，例如，美國專利號 6，248，516B1)。抗體片段可以通過不同技術制備，包括但不限于完整抗體的蛋白水解消化以及通過重組宿主細胞(例如大腸桿菌或噬菌體)產生,如本文所述。3.嵌合和人源化抗體在某些實施方案中，本文中所提供的抗體是嵌合抗體。某些嵌合抗體于例如美國專利第 4，816，567 號；及 Morrison 等人，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA, 81:6851-6855 (1984)中描述。在一個實例中，嵌合抗體包含非人類可變區(例如源自小鼠、大鼠、倉鼠、兔或例如猴的非人類靈長類動物的可變區)及人類恒定區。在另一實例中，嵌合抗體是種類或亞類已經自親本抗體的種類或亞類發生變化的“種類轉變”抗體。嵌合抗體包括其抗原結合片段。在某些實施方案中，嵌合抗體是人源化抗體。通常，非人類抗體經人源化以降低對人類的免疫原性，同時保持親本非人類抗體的特異性及親和力。一般而言，人源化抗體包含一個或多個可變結構域，其中HVRs，例如CDRs (或其部分)源自非人類抗體，且FRs (或其部分)是源自人類抗體序列。人源化抗體任選地也將包含人類恒定區的至少一部分。在一些實施方案中，人源化抗體中的一些FR殘基經來自非人類抗體(例如HVR殘基所源自的抗體)的相應殘基置換，例如以恢復或提高抗體特異性或親和力。人源化抗體及其制備方法于例如Almagro和Fransson, Front.Biosc1.13:1619-1633 (2008)中評述，且進一步于例如Riechmann等人，Nature (自然)332:323-329(1988) ;Queen 等人，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA86: 10029-10033 (1989);美國專利第 5，821，337 號、第 7，527，791 號、第 6，982，321 號和第 7，087，409 號；Kashmiri 等人，Methods (方法)36:25-34(2005)(描述 SDR(a-CDR)移植)Padlan，Mol.1mmunol.(分子免疫學)28:489-498 (1991)(描述“表面重整”)-,Oall1 Acqua 等人，Methods36:43-60 (2005)(描述“FR 重組(shuffling)”)；及 Osbourn 等人，Methods (方法)36:61-68(2005)和Klimka 等人，Br.J.Cancer (英國癌癥雜志)，83 =252-260(2000)(描述FR重組(shuffling)的“導向選擇”方法)中描述。可用于人源化的人類構架區包括，但不限于，使用“最佳擬合”法選擇的構架區(參見例如Sims等人，J.1mmunol.(免疫學雜志)151:2296(1993));源自特定亞群的輕鏈或重鏈可變區的人類抗體共同序列的構架區(參見例如Carter等人，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA, 89:4285 (1992);及 Presta 等人，J.1mmunol.(免疫學雜志),151:2623 (1993))；人類成熟(體細胞突變)構架區或人類生殖系構架區(參見例如Almagro及Fransson,Front.Biosc1.13:1619-1633(2008));及源自篩選FR文庫的構架區(參見例如Baca等人，J.Biol.Chem.(生物化學雜志)272:10678-10684(1997)及 Rosok 等人，J.Biol.Chem.(生物化學雜志)271:22611-22618(1996)) ο4.人抗體在某些實施方案中，本文中所提供的抗體是人抗體。可使用本領域中已知的各種技術來制備人抗體。人抗體一般描述于van Dijk和van de Winkel,Curr.0pin.Pharmacol.(當前藥學觀點)5:368-74 (2001)以及 Lonberg, Curr.0pin.1mmunol.(當前免疫學觀點)20 =450-459(2008)。可通過向已經經過修飾因而對于抗原攻擊刺激產生完整人抗體或具有人類可變區的完整抗體的轉基因動物施用免疫原，來制備人抗體。這些動物通常含有全部或一部分人類免疫球蛋白基因座，其替 代了內源免疫球蛋白基因座，或存在于染色體外或隨機整合于動物染色體內。在這些轉基因小鼠中，內源免疫球蛋白基因座一般已經失活。關于從轉基因動物獲得人抗體的方法的綜述，參見Lonberg, Nat.Biotech.(自然生物技術)23:1117-1125(2005)。也參見例如描述XEN0M0USE 技術的美國專利第6,075, 181號及第6，150，584號；描述HUMAB 技術的美國專利第5，770, 429號；描述K-M MOUSE 技術的美國專利第7，041, 870號，及描述VelociMouse 技術的美國專利申請公開號US2007/0061900。這些動物產生的完整抗體的人類可變區可進一步修飾，例如通過與不同人類恒定區組合。人抗體也可通過基于雜交瘤的方法制得。用于產生人單克隆抗體的人骨髓瘤及小鼠-人融合骨髓瘤細胞系已經描述。(參見例如Kozbor J.1mmunol.(免疫學雜志)，133:3001(1984) ；Brodeur 等人，Monoclonal Antibody Production Techniquesand Applications (單克隆抗體產生技術及應用)，第51-63頁(Marcel Dekker, Inc.,New York, 1987)；并且 Boerner 等人，J.1mmunol.(免疫學雜志)，147:86 (1991)。)通過人類B細胞雜交瘤技術產生的人抗體也在Li等人，Proc.Natl.Acad.Sc1..USA，103:3557-3562(2006)中描述。其他方法包括例如美國專利第7，189，826號(描述由雜交瘤細胞系產生單克隆人類 IgM 抗體)及 Ni，Xiandai Mianyixue, 26 (4) =265-268(2006)(描述人-人雜交瘤)中所述的那些方法。人雜交瘤技術(Trioma技術)也于Vollmers和 Brandlein, Histology and Histopathology (組織學和組織病理學)，20(3):927-937 (2005),及 Vollmers 和 Brandlein,Methods and Findings in Experimental andClinical Pharmacology (實驗和臨床藥學方法和發現)，27 (3):185-91 (2005)中描述。也可通過分離選自源自人噬菌體展示文庫的Fv克隆可變結構域序列產生人抗體。隨后可將這些可變結構域序列與所需人恒定結構域組合。下文描述自抗體文庫選擇人抗體的技術。5.源自文庫的抗體可通過在組合文庫中篩選具有所需活性的抗體來分離本發明抗體。舉例來說，本領域中已知多種用于產生噬菌體展示文庫并且在這些文庫中篩選具有所需結合特征的抗體的方法。這些方法于例如Hoogenboom等人，Methods in Molecular Biology(分子生物學方法)178:1-37 (O' Brien等人編，人Press, Totowa, NJ, 2001)中評述,并且進一步于例如 McCafferty 等人，Nature (自然)348:552-554 ；Clackso 等人，Nature (自然)352:624-628(1991) ;Marks 等人，J.Mol.Biol.(分子生物學雜志)222:581-597 (1992) ；Marks及 Bradbury, Methods in Molecular Biology (分子生物學方法)248:161-175 (Lo 編，人 Press, Totowa, NJ, 2003) ；Sidhu 等人，J.Mol.Biol.(分子生物學雜志)338(2):299-310(2004) ;Lee 等人，J.Mol.Biol.(分子生物學雜志)340 (5):1073-1093(2004)；Fellouse, Proc.Natl.Acad.Sc1.USAlOl (34):12467-12472(2004)；并且 Lee 等人，J.1mmunol.Methods (免疫學方法雜志)284(1-2):119-132(2004)中描述。在某些卩遼菌體展示方法中,VH及VL基因庫(repertoire)是通過聚合酶鏈式反應(PCR)分別克隆并且隨機重組于卩遼菌體文庫中，隨后可如Winter等人，Ann.Rev.1mmunol.(免疫學年度綜述)，12:433-455(1994)中所述在其中篩選抗原結合噬菌體。噬菌體通常呈現單鏈Fv(ScFv)片段或Fab片段形式的抗體片段。來自免疫來源的文庫無需構建雜交瘤即可提供免疫原的高親和力抗 體。或者，天然庫可經克隆(例如自人)以在無任何免疫的情況下提供針對多種非自體抗原以及自體抗原的抗體單一來源，如Griffiths等人,EMBOJ，12:725-734(1993)所述。最后，也可以通過從干細胞克隆未重排的V基因區段，并且使用含有隨機序列的PCR引物來編碼高變性CDR3區，并且實現體外重排來合成制得天然文庫，如 Hoogenboom 及 Winter, J.Mol.Biol.(分子生物學雜志志)，227 =381-388 (1992)所述。描述人抗體噬菌體文庫的專利公開物包括例如:美國專利第5，750，373號，及美國專利公開第 2005/0079574 號、第 2005/0119455 號、第 2005/0266000 號、第 2007/0117126 號、第2007/0160598 號、第 2007/0237764 號、第 2007/0292936 號和第 2009/0002360 號。從人抗體文庫分離的抗體或抗體片段被視為本文的人抗體或人抗體片段。6.多特異性抗體在某些實施方案中，本文中所提供的抗體是多特異性抗體，例如雙特異性抗體。多特異性抗體是對至少兩個不同位點具有結合特異性的單克隆抗體。在某些實施方案中，一種結合特異性是針對BACEl而另一種是針對任何其他抗原。在某些實施方案中，雙特異性抗體可結合至BACEl的兩個不同表位。雙特異性抗體也可用于將細胞毒性劑定位于表達BACEl的細胞。雙特異性抗體可制成全長抗體或抗體片段形式。制造多特異性抗體的技術包括，但不限于，具有不同特異性的兩個免疫球蛋白重鏈-輕鏈對的重組共表達(參見Milstein及Cuello，Nature (自然)305:537(1983)；W093/08829 ；及 Traunecker 等人，EMBO J.10:3655(1991)),及“凸起-入-孔洞(knob-1n-hole) ”工程改造(參見例如美國專利第5，731，168號)。也可通過以下方法制得多特異性抗體:工程改造用于制備抗體Fe-異二聚體的靜電導引作用(W02009/089004A1)；將兩種或兩種以上抗體或片段交聯(參見例如美國專利第4，676，980號，及Brennan等人Science (科學)，229:81(1985));使用亮氨酸拉鏈來產生雙特異性抗體(參見例如Kostelny 等人，J.1mmunol.(免疫學雜志)，148 (5):1547-1553(1992));使用“雙抗體”技術來制得雙特異性抗體片段(參見例如Hollinger等人，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA, 90:6444-6448 (1993));及使用單鏈Fv (sFv) 二聚體(參見例如Gruber等人,J.1mmunol.(免疫學雜志)，152:5368 (1994));及如例如 Tutt 等人，J.1mmunol.(免疫學雜志)147:60 (1991)中所述制備三特異性抗體。本文中也包括具有三個或三個以上功能性抗原結合位點的經工程改造抗體，包括“章魚抗體(Octopus antibodies) ” (參見例如 US2006/0025576A1)。本文中的抗體或片段也包括包含結合至BACEl以及另一不同抗原的抗原結合位點的“雙重作用FAb或“DAF” (例如參見US2008/0069820)。7.抗體變體在某些實施方案中，涵蓋本文中所提供抗體的氨基酸序列變體。舉例來說，可能需要其來提高抗體的結合親和力和/或其他生物特性。可通過在編碼抗體的核苷酸序列中引入適當修飾或通過肽合成來制備抗體的氨基酸序列變體。這些修飾包括例如抗體氨基酸序列內的殘基缺失和/或插入其中和/或對其進行置換。可進行缺失、插入和置換的任何組合以獲得最終構建體，其限制條件是最終構建體具有所需特征，例如抗原結合。a)置換、插入和缺失變體在某些實施方案中，提供具有一個或多個氨基酸置換的抗體變體。用于置換性誘變的相關位點包括HVRs和FRs。保守性置換顯示在表I中在“保守性置換”的標題下。更多實質性變化于表I中的“示例性置換”的標題下提供且如下文關于氨基酸側鏈種類進一步描述。可將氨基酸置換引入相關抗體中并篩選具有所需活性，例如保持/提高的抗原結合、降低的免疫原性、或提高的ADCC或CDC的產物。表I
權利要求
1.結合BACEl的分離的抗體或其片段，其中所述抗體降低或抑制BACEl多肽的活性。
2.權利要求1的抗體，其中所述抗體結合BACEl的活性位點。
3.權利要求1的抗體，其中所述抗體結合BACEl的外結合位點。
4.權利要求1的抗體，所述抗體包含至少一個選自由以下各項組成的組的高變區(HVR)序列:SEQ ID NO:7-19, 22-26，28-30，35-47，56-79 和 118-122。
5.權利要求1的抗體,所述抗體包含至少一個選自由以下各項組成的組的序列:HVR-Hl, HVR-H2 和 HVR-H3，其中 HVR-Hl 包含氨基酸序列 GFX3tlFX31X32X33X34IH(SEQ ID NO:45)，其中X3。= N或T;X31 = S，L或Y ;X32 = G 或 Y ;X33 = Y或 S ;并且X34 = A，G或 S ;HVR_H2包含氨基酸序列 X35X361SPX37X38GX39TX40YADSVKG (SEQ ID NO:46)，其中 X35 = A 或 G ；X36 = W或S ;X37 = A或Y ;X38 = G或S ；X39 = S或Y ;并且X4ci = D或S ;并且HVR-H3包含氨基酸序列 X41PX42X43X44X45X46X47MDY (SEQ ID NO:47)，其中 X41 = Q 或 G ;X42 = T 或 F ；X43 = H 或 S ；X44=Y 或 P ;X45 = Y 或 W ;X46 = Y 或 V 并且其中 X47 任選包含序列 YAKGYKA (SEQ ID NO:48)。
6.權利要求1的抗體,所述抗體包含至少一個選自由以下各項組成的組的序列:HVR-Hl，HVR-H2 和 HVR-H3，其中 HVR-Hl 包含氨基酸序列 GX71X72X73X74X75X76X77IH(SEQ ID NO:120)，其中 X71 = F 或 Y ；X72 = F，N 或 T ；X73 = F 或 Y ；X74 = L，Q，I，S 或 Y ；X75 = G 或 Y ；X76=Y 或 S ;并且 X77 = A，G 或 S ；HVR-H2 包含氨基酸序列 X78X79ISPX80X81GX82X83X84YADSVKG(SEQID NO:121)，其中 X78 = A 或 G ;X79 = W 或 S ;X80 = A，S，Q 或 Y ;X81 = G 或 S ;X82 = S，K，L 或Y；X83 = T 或 Y ;并且 X84 = D 或 S ;并且 HVR-H3 包含氨基酸序列 X85PX86X87X88X89X9tlX91MDY (SEQID NO: 122)，其中 X85 = Q 或 G ；X86 = T 或 F ；X87 = H，Y 或 S ；X88 = Y 或 P ；X89 = Y 或 W ；X90=Y或V和其中X91任選包含序列YAKGYKA (SEQ ID NO:48)。
7.權利要求1的抗體,所述抗體包含至少一個選自由以下各項組成的組的序列:HVR-Hl, HVR-H2 和 HVR-H3，其中 HVR-Hl 包含氨基酸序列 GX53X54X55X56GYGIH(SEQ ID NO:68)，其中 X53 = F 或 Y ；X54 = T 或 F ；X55 = F 或 Y ；X56 = L，Q 或 I，HVR-H2 包含氨基酸序列GffISPX57X58GX59X60DYADSVKG (SEQ ID NO:69)，其中 X57 = A，S 或 Q ；X58 = G 或 S ；X59 = S，K 或L ；X60 = T 或 Y，其中 HVR-H3 序列包含氨基酸序列 GPFX61PWVMDY (SEQ ID NO:70)，其中 X61 =S或Y或SEQ ID NO:79的氨基酸序列。
8.權利要求5的抗體，所述抗體包含HVR-Hl序列，所述HVR-Hl序列包含氨基酸序列GftfX13GYX14IH(SEQ ID NO:26)，其中 X13 = S 或 L 和 X14 = A 或 G。
9.權利要求6的抗體，所述抗體包含HVR-Hl序列，所述HVR-Hl序列包含選自由以下各項組成的組的氨基酸序列:SEQ ID NO:22 ；SEQ ID NO:23 ；SEQ ID NO:28 和 SEQ ID NO:71-73。
10.權利要求6的抗體，所述抗體包含HVR-H2序列，所述HVR-H2序列包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:29 和 SEQ ID NO:74_78。
11.權利要求6的抗體，所述抗體包含HVR-H3序列，所述HVR-H3序列包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO:25 ；SEQ ID NO:30 和 SEQ ID NO:79。
12.權利要求6的抗體，所述抗體包含HVR-Hl、HVR-H2和HVR-H3序列，所述HVR-Hl、HVR-H2 和 HVR-H3 序列對應于對于圖1(B)中的克隆 YW412.8，YW412.8.31，YW412.8.30，YW412.8.2，YW412.8.29和YW412.8.51或圖24 (A) -(C)中的克隆所示的那些序列。
13.權利要求6的抗體，所述抗體包含HVR-Hl、HVR-H2和HVR-H3序列，所述HVR-Hl、HVR-H2和HVR-H3序列對應于對于圖2⑶中的克隆Fabl2，LC6，LC9和LClO所示的那些序列。
14.權利要求6的抗體，所述抗體包含SEQID NO: 22或23的HVR-Hl序列，SEQ ID NO:24 的 HVR-H2 序列和 SEQ ID NO:25 的 HVR-H3 序列。
15.權利要求14的抗體，其中所述HVR-Hl序列是SEQID NO:23。
16.權利要求6的抗體，所述抗體包含SEQID NO:28的HVR-Hl序列，SEQ ID NO:29的HVR-H2 序列，和 SEQ ID NO:30 的 HVR-H3 序列。
17.權利要求6的抗體，所述抗體包含VH鏈，所述VH鏈具有選自由以下各項組成的組的氨基酸序列:SEQ ID NO:20，21，27 和 80-98。
18.權利要求16的抗體，其中所述VH鏈氨基酸序列是SEQID NO:21。
19.權利要求1的抗體，所述抗體包含至少一個選自下組的序列:HVR-L1、HVR-L2和HVR-L3，其中 HVR-Ll 包含氨基酸序列 RASQX17VX18X19X20X21A(SEQ ID NO:42)，其中 X17 = S，D 或 V ；X18 = S 或 A ；X19 = S, T 或 N ；X20 = A 或 S ；X21 = V 或 L, HVR-L2 包含氨基酸序列X22ASX23LYS (SEQ ID NO:43)，其中 X22 = S，W，Y 或 L ；X23 = F，S 或 W，并且 HVR-L3 包含氨基酸序列 QQX24X25X26X27X28X29T (SEQ ID NO:44)，其中 X24 = S，F，G，D 或 Y ；X25 = Y，P，S 或 A ；X26=Y, T 或 N ；X27 = T, Y, D 或 S ；X28 = P 或 L ;并且 X29 = F, P 或 T。
20.權利要求1的抗體，所述抗體包含至少一個選自下組的序列:HVR-L1、HVR-L2和HVR-L3，其中 HVR-Ll 包含氨基酸序列 RASQX17VX18X19X20X21A(SEQ ID NO:42)，其中 X17 = S，D 或 V ；X18 = S 或 A ；X19 = S, T 或 N ；X20 = A 或 S ；X21 = V 或 L, HVR-L2 包含氨基酸序列X62ASX63X64YX65 (SEQ ID NO:118)，其中 X62 = S，W，Y，F 或 L ；X63 = F，S，Y 或 W ；X64 = L 或 R ;X65 = S，P，R，K 或 W，并且 HVR-L3 包含氨基酸序列 QQX66X67X68X69X7tlX71T (SEQ ID NO: 119)，其中 X66 = S，F，G，D 或 Y ；X67 = Y，P，S 或 A ；X68 = Y，T 或 N ；X69 = T，Y，D 或 S ；X70 = P，Q，S，K或L ;并且X71 = F，P或T。
21.權利要求1的抗體,所述抗體包含至少一個選自由以下各項組成的組的序列:HVR-LUHVR-L2 和 HVR-L3，其中 HVR-Ll 包含氨基酸序列 RASQX1VX2X3X4X5A(SEQ ID NO:17)，其中X1 = D或V ;X2 = S或A ;X3 = T或N ;X4 = S或A ;X5 = V或L, HVR-L2包含氨基酸序列 X48ASX49X50YX51 (SEQ ID NO:56)，其中 X48 = S 或 F ；X49 = F 或 Y ；X50 = L 或 R ；X51 = S，P，R, K 或 W，并且 HVR-L3 包含氨基酸序列 QQFPTYX52PT (SEQ ID NO:57)，其中 X52 = L，Q，S 或K0
22.權利要求17的抗體，所述抗體包含HVR-Ll序列，所述HVR-Ll序列包含氨基酸序列RASQX1VX2X3X4X5A (SEQ ID NO: 17)，其中 X1 = D 或 V ;X2 = S 或 A ;X3 = T 或 N ;X4 = S 或 A ;X5 = V 或 L。
23.權利要求19的抗體，所述抗體包含HVR-L2序列，所述HVR-L2序列包含氨基酸序列X6ASFLYS (SEQ ID NO: 18)或 X15ASX16LYS (SEQ ID NO:41)，其中 X6 = S 或 L ;X15 = S，W 或 Y ;并且X16 = S或W。
24.權利要求19的抗體，所述抗體包含HVR-L3序列，所述HVR-L3序列包含氨基酸序列QQX7X8X9X10X11X12T (SEQ ID NO:19)，其中 X7 = S，F，G，D 或 Y ;X8 = Y，P，S，或 A ;X9 = T 或 N ;X10 = T, Y, D 或 S ；Xn = P 或 L ；X12 = P 或 T。
25.權利要求19的抗體，所述抗體包含HVR-Ll序列，所述HVR-Ll序列包含選自由以下各項組成的組的氨基酸序列:SEQ ID NO -J, SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:35。
26.權利要求20的抗體，所述抗體包含HVR-L2序列，所述HVR-L2序列包含選自由以下各項組成的組的氨基酸序列:SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:10，SEQ ID NO:36-39和SEQ IDNO: 58-64。
27.權利要求20的抗體，所述抗體包含HVR-L3序列，所述HVR-L3序列包含選自由以下各項組成的組的氨基酸序列:SEQ ID NO:11-16, SEQ ID NO:40和SEQ ID NO:65_67。
28.權利要求20的抗體，所述抗體包含HVR-Ll、HVR-L2和HVR-L3序列，所述HVR-Ll、HVR-L2 和 HVR-L3 序列對應于對于圖1(A)中的克隆 YW412.8，YW412.8.31，YW412.8.30，YW412.8.2，YW412.8.29和YW412.8.51和圖23 (A) - (C)中的克隆所示的那些序列。
29.權利要求20的抗體，所述抗體包含HVR-Ll、HVR-L2和HVR-L3序列，所述HVR-Ll、HVR-L2和HVR-L3序列對應于對于圖2⑷中的克隆Fabl2，LC6，LC9和LClO所示的那些序列。
30.權利要求20的抗體，所述抗體包含SEQID NO:7或SEQ ID NO:8的HVR-Ll序列；SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:10的HVR-L2序列；和選自由SEQ ID NO:11-16組成的組的HVR_L3 序列 ο
31.權利要求30的抗體，其中所述HVR-Ll序列是SEQID NO:7，所述HVR-L2序列是SEQ ID NO:9，并且所述 HVR-L3 序列是 SEQ ID NO:12。
32.權利要求20的抗體，所述抗體包含SEQID NO:35的HVR-Ll序列；選自由SEQ IDNO:36-39組成的組的HVR-L2序列和SEQ ID NO:40的HVR-L3序列。
33.權利要求20的抗體，所述抗體包含VL鏈序列，所述VL鏈序列具有選自由以下各項組成的組的氨基酸序列:SEQ ID NO:1-6,31-34和99-117。
34.權利要求33的抗體，其中所述VL鏈氨基酸序列是SEQID NO:2。
35.權利要求15的抗體，所述抗體還包含含有SEQID NO:7的氨基酸序列的HVR-L1，含有SEQ ID NO:9的氨基酸序列的HVR-L2和含有SEQ ID NO: 12的氨基酸序列的HVR-L3。
36.權利要求34的抗體，所述抗體還包含VH鏈，所述VH鏈包含SEQID NO:21的氨基酸序列。
37.分離的抗體或其片段，所述分離的抗體或其片段結合表位，所述表位包含至少一個選自由以下各項組成的組的BACEl的氨基酸殘基:SEQ ID NO:49的314SER ；316GLU ；317LYS ；327GLN ；330CYS ；33ITRP ；332GLN ；335THR ;和 378ASP。
38.權利要求37的抗體，其中所述表位包含SEQID NO:49的314SER ;316GLU ;317LYS ;327GLN ；330CYS ；331TRP ；332GLN ；335THR ;和 378ASP。
39.分離的抗體或其片段，所述分離的抗體或其片段結合表位，所述表位包含至少一個選自由以下各項組成的組的BACEl的氨基酸區域:SEQ ID NO:49的氨基酸315-318 ;SEQ IDNO:49的氨基酸331-335 ；SEQ ID NO:49的氨基酸370-381 ;及其任意組合。
40.權利要求39的抗體，其中所述表位包含SEQID NO:49的氨基酸315-318，331-335和 370-381 ο
41.分離的抗體或其片段，所述分離的抗體或其片段結合BACEl的表位，并且經結合導致BACEl的P6和P7位點的結構的構象變化。
42.分離的抗體或其片段，所述分離的抗體或其片段結合BACEl的表位，并且經結合誘導SEQ ID NO:49的氨基酸218-231采取隨機環結構。
43.權利要求37-42的抗體，其中所述抗體降低或抑制BACEl的活性。
44.權利要求1-43中任一項的抗體，所述抗體是單克隆抗體。
45.權利要求1-44中任一項的抗體，所述抗體是人抗體、人源化抗體或嵌合抗體。
46.權利要求1-45中任一項的抗體，所述抗體是抗體片段。
47.權利要求1-45中任一項的抗體，所述抗體是全長IgGl抗體。
48.分離的核酸，所述分離的核酸編碼權利要求1-47中任一項所述的抗體。
49.宿主細胞，所述宿主細胞包含權利要求48所述的核酸。
50.產生抗體的方法，所述方法包括培養權利要求49所述的宿主細胞以產生所述抗體。
51.免疫綴合物，所述免疫綴合物包含權利要求1-47中任一項所述的抗體和細胞毒性劑。
52.藥物制劑，所述藥物制劑包含權利要求1-47中任一項所述的抗體和藥用載體。
53.治療患有神經疾病或病癥的個體的方法,所述方法包括向所述個體給藥有效量的權利要求1-47中任一項所述的抗體。
54.減少患有神經疾病或病癥或處于感染神經疾病或病癥的風險的患者中的淀粉狀蛋白斑的方法，所述方法包括向所述個體給藥有效量的權利要求1-47中任一項所述的抗體。
55.抑制患有神經疾病或病癥或處于發生神經疾病或病癥的風險的患者中的淀粉狀蛋白斑形成的方法，所述方法包括向所述個體給藥有效量的權利要求1-47中任一項所述的抗體。
56.權利要求53-55中任一項所述的方法,其中所述神經疾病或病癥選自由以下各項組成的組:阿爾茨海默病(AD)，外傷性腦損傷，卒中，青光眼，癡呆，肌營養不良(MD)，多發性硬化(MS)，肌萎縮性側索硬化(ALS)，囊性纖維化，安吉爾曼綜合征，利德爾綜合征，佩吉特病，外傷性腦損傷，雷維小體病，脊髓灰質炎后綜合征，夏伊-德雷格綜合征，橄欖體腦橋小腦萎縮，帕金森病，多系統萎縮，紋狀體黑質變性，核上性麻痹，牛海綿狀腦病，癢病，克-雅綜合征，庫魯病，格-施-沙病，慢性消耗性疾病，致命性家族性失眠癥，延髓性麻痹，運動神經元病，卡納范病，亨廷頓病，神經元蠟樣脂褐素沉積癥，亞歷山大病，圖雷特綜合征，門克斯扭結發綜合征，科凱恩綜合征，哈勒沃登-施帕茨綜合征，拉福拉病，雷特綜合征，肝豆狀核變性，萊施-奈恩綜合征，以及翁-隆綜合征，皮克病，和脊髓小腦性共濟失調。
57.權利要求56所述的方法，其中所述神經疾病或病癥選自由以下各項組成的組:阿爾茨海默病，卒中，外傷性腦損傷和青光眼。
58.減少患者的淀粉狀蛋白_β(Αβ)蛋白的方法，所述方法包括向所述患者給藥有效量的權利要求1-47中任一項所述的抗體。
59.權利要求58所述的方法，其中所述患者患有神經疾病或病癥，或處于感染神經疾病或病癥的風險。
60.權利要求59所述的方法，其中所述神經疾病或病癥選自由以下各項組成的組:阿爾茨海默病，卒中 ，外傷性腦損傷和青光眼。
61.診斷患者的神經疾病或病癥的方法,所述方法包括將分離自所述患者的生物樣品與權利要求1-47中任一項所述的抗體在適合所述抗體與BACEl多肽結合的條件下接觸，并且檢測在所述抗體和所述BACEl多肽之間是否形成復合物。
62.確定患者是否適合利用抗-BACEl抗體治療的方法，所述方法包括將分離自所述患者的生物樣品與權利要求1-47中任一項所述的抗體在適合所述抗體與BACEl多肽結合的條件下接觸，并且檢測在所述抗體和所述BACEl多肽之間是否形成復合物，其中在所述抗體和BACEl之間存在復合物指示患者適合利用抗-BACEl抗體治療。
63.權利要求61或62所述的方法，其中所述生物樣品選自由以下各項組成的組:血清，血漿，唾液，胃分泌物，粘液，腦脊液，淋巴液，神經組織，腦組織，心臟組織或血管組織。
64.權利要求1-47中任一項的抗體，其用作藥物。
65.權利要求1-47中任一項的抗體，其用于治療神經疾病，所述神經疾病選自由以下各項組成的組:阿爾茨海默病(AD)，外傷性腦損傷，卒中，青光眼，癡呆，肌營養不良(MD)，多發性硬化(MS)，肌萎縮性側索硬化(ALS)，囊性纖維化，安吉爾曼綜合征，利德爾綜合征，佩吉特病，外傷性腦損傷，雷維小體病，脊髓灰質炎后綜合征，夏伊-德雷格綜合征，橄欖體腦橋小腦萎縮，帕金森病，多系統萎縮，紋狀體黑質變性，核上性麻痹，牛海綿狀腦病，癢病，克-雅綜合征，庫魯病，格-施-沙病，慢性消耗性疾病，致命性家族性失眠癥，延髓性麻痹，運動神經元病，卡納范病，亨廷頓病，神經元蠟樣脂褐素沉積癥，亞歷山大病，圖雷特綜合征，門克斯扭結發綜合征，科凱恩綜合征，哈勒沃登-施帕茨綜合征，拉福拉病，雷特綜合征，肝豆狀核變性，萊施-奈恩綜合征，以及翁-隆綜合征，皮克病，和脊髓小腦性共濟失調。
66.權利要求1-47中任一項的抗體，其用于減少和/或抑制淀粉狀蛋白-β(Αβ)蛋白產生。
67.權利要求1-47中任一項所述的抗體在制備藥物中的用途。
68.權利要求67所述的用途，其中所述藥物用于治療神經疾病，所述神經疾病選自由以下各項組成的組:阿爾茨 海默病(AD)，外傷性腦損傷，卒中，青光眼，癡呆，肌營養不良(MD)，多發性硬化(MS)，肌萎縮性側索硬化(ALS)，囊性纖維化，安吉爾曼綜合征，利德爾綜合征，佩吉特病，外傷性腦損傷，雷維小體病，脊髓灰質炎后綜合征，夏伊-德雷格綜合征，橄欖體腦橋小腦萎縮，帕金森病，多系統萎縮，紋狀體黑質變性，核上性麻痹,牛海綿狀腦病，癢病，克-雅綜合征，庫魯病，格-施-沙病，慢性消耗性疾病，致命性家族性失眠癥，延髓性麻痹，運動神經元病，卡納范病，亨廷頓病，神經元蠟樣脂褐素沉積癥，亞歷山大病，圖雷特綜合征，門克斯扭結發綜合征，科凱恩綜合征，哈勒沃登-施帕茨綜合征，拉福拉病，雷特綜合征，肝豆狀核變性，萊施-奈恩綜合征，以及翁-隆綜合征，皮克病，和脊髓小腦性共濟失調。
69.權利要求67所述的用途，其中所述藥物用于減少和/或抑制淀粉狀蛋白-β(Αβ)蛋白產生。
70.被抗體或其片段特異性識別的BACEl表位，所述BACEl表位包含至少一個對應于選自由以下各項組成的組的氨基酸的BACEl的氨基酸殘基:SEQ ID NO:49的314SER ;316GLU ;317LYS ；327GLN ；330CYS ；331TRP ；332GLN ；335THR ;和 378ASP。
71.權利要求70所述的BACEl表位，其中所述表位包含對應于SEQID NO:49的314SER ；316GLU ；317LYS ；327GLN ；330CYS ；33ITRP ；332GLN ；335THR ;和 378ASP 的氨基酸。
72.被抗體或其片段特異性識別的BACEl表位，所述BACEl表位包含至少一個選自由以下各項組成的組的BACEl的氨基酸區域:SEQ ID NO:49的氨基酸315-318 ；SEQ ID NO:40的氨基酸331-335 ；SEQ ID NO:49的氨基酸370-381 ;及其任意組合。
73.權利要求72所述的BACEl表位，其中所述表位包含SEQ ID NO:49的氨基酸315-318,331-3 35 和 370-381。
全文摘要
本發明提供針對特定神經蛋白的抗體及其使用方法。
文檔編號A61K39/395GK103228674SQ201180054386
公開日2013年7月31日 申請日期2011年11月9日 優先權日2010年11月10日
發明者賈斯文德·阿特沃爾, 陳詠梅, 塞西莉亞·培·芝·秋, 羅伯特·A·拉扎勒斯, 王偉茹, 賴安·J·沃茨, 吳巖, 張英楠 申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司