專利名稱：一種苦豆子多糖口服制劑及其制備方法
技術領域：
本發明涉及到一種苦豆子多糖口服制劑及其制備方法，尤其作為抗腫瘤藥物和免疫增強劑的應用，屬中藥制劑技術領域。
背景技術：
苦豆子(Sophora alopecuroides L.)系豆科槐屬植物，是一種多年生草本植物。 苦豆子全株味苦性寒，藥用根、莖、全草及種子，具有清熱解毒、祛風燥濕、止痛殺蟲等作用。 隨著現代藥理藥效學研究的不斷深入，苦豆子的藥用價值被醫藥界所公認。苦豆子是重要的藥用植物資源和飼用植物資源，早在1914年國外就從苦豆子籽實中提出“苦參總堿”。世界性研究苦豆子始于20世紀30年代初，前蘇聯學者用提出的“苦參總堿”入藥后，發現具有清熱解毒，抗菌消炎等作用，又分離出槐定堿、槐胺堿。此后，波蘭、美國學者相繼研究報導了苦豆子植物體內的多種化學成份。1930年被正式列入《美國藥典》，在世界上廣泛引起重視并用于醫藥界，隨后美國抗癌研究中心發現苦參堿中槐果堿在臨床上有抗癌效果。國內研究始于1971年，為了開發資源，1975年研制的苦豆子生物堿制劑“苦豆子片”治療腹瀉新藥，被正式載入1977年版《中國藥典》，現改名為“克瀉靈片”。1983年開發出“苦參堿制劑婦炎栓”，用于治療婦科疾病。1984年國內建成了第一條苦豆子生物堿工業生產線，生產苦豆總堿、苦參素、苦參堿、槐定堿等，開始了苦豆子生物堿系列產品的批量生產。苦豆子的化學成分主要是蛋白質、糖類、有機酸、黃酮類、色素和生物堿。苦豆子生物堿屬于喹諾里西啶生物堿，由三價氮原子形成的稠合的二個哌啶環，又稱雙稠哌啶，仍屬于哌啶或吡啶的衍生物。按其結構可分為3個類型即羽扇豆堿，二環型；金雀花堿，三環型；鷹爪豆堿，四環型。目前從苦豆子中提取分離及鑒定的生物堿有苦參堿、槐果堿、槐胺堿、新槐胺堿、 槐定堿、苦參堿-N-氧化物、槐果堿-N-氧化物、槐定堿-N-氧化物、3-d-羥筌槐定堿、13， 14-脫氫槐定堿、N-羥定槐定堿、N-羥筌-13，14-脫氫槐定堿、苦豆堿、N-甲基苦豆堿、烯丙基苦豆堿、金雀花堿、N-甲村金雀花堿、鷹啶葉堿、三巴豆筌基四胺及具有羽扁豆結構特點的兩種新生物堿，共21種生物堿。由于苦豆子的根上結有大量的根瘤，固氮能力很強，因此是一種很好的綠肥植物。 在新疆農村，農民將收割的苦豆子新鮮枝葉埋入瓜和葡萄的根部，結出來的西瓜、甜瓜和葡萄都會又大又甜。苦豆子體內含有沈種以上的生物堿單體，全株味極苦，成為荒漠草原及農田上生長的一種有毒植物。苦豆子主要生物堿為喹里西啶生物堿，一般稱之為羽扇生物堿，具有抗病毒、抗腫瘤、抗心律失常、抗炎、抗變態反應、抗潰瘍、抗升高白細胞、平喘、清熱、止痛、殺蟲、鎮靜、鎮痛和多種保健功效。這就是民間用藥中的“以毒攻毒”的治療方法，民間用其根治療喉痛、咳嗽及濕疹等。根、莖、葉和花可作為提取生物堿的原料，廣泛用于醫藥和生物農藥的制造。在苦豆子所含的許多生物堿中，科學家們提煉出了苦參素，苦參素對改善肝臟生物化學指標及抗乙肝病毒具有良好效果，已經制成了注射制劑和口服制劑。目前，將從苦豆子中提取的多糖制成口服制劑的文獻尚未見報道。

發明內容
本發明的目的在于提供一種苦豆子多糖口服制劑，該多糖所含雜質較少，經藥理篩選實驗證明苦豆子多糖具有有效抗腫瘤活性和免疫增強作用，制得的口服制劑不僅方便患者攜帶使用，且副作用較小，安全性較高。本發明的另一個目的在于提供一種苦豆子多糖口服制劑的制備方法。本發明提供的一種苦豆子多糖口服制劑，其改進之處在于所述口服制劑包括按重量百分比計的苦豆子多糖5% -80%和藥用輔料。本發明提供的第一優選的苦豆子多糖口服制劑，所述口服制劑包括按重量百分比計的苦豆子多糖20% -60%和藥用輔料。本發明提供的第二優選的苦豆子多糖口服制劑，所述口服制劑包括顆粒劑、片劑、 丸劑、膠囊劑或口服液。本發明提供的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，包括以下步驟1)粉碎取苦豆子原藥材，粉碎，過10-60目篩；2)醇提取步驟(1)過篩后的苦豆子，將其裝入滲漉柱內，用濃度為30% -100% 的乙醇浸泡18-24小時；再以濃度為30% -100%的乙醇為溶劑，以流速10-15ml/min，滲漉提取，得到苦豆子中所含生物堿成分；至滲漉提取液與碘化鉍鉀反應無顏色變化時停止滲漉，取苦豆子藥渣，晾干備用；3)水提向步驟(2)晾干后的固體產物中加入體積為該固體產物6-15倍量的水， 于60-110°C，回流l_5h得水提物；4)醇沉將步驟C3)得到的水提物于35-90°C減壓濃縮成密度為1. 02-1. 1的液體，加入乙醇至乙醇終濃度為40% -90%醇沉，4°C冰箱放置10-48h，以2000-5000r/min速率離心，取沉淀，得粗糖提取物，粗糖提取物經水復溶后，再加入乙醇至濃度為70% -90% 放置10-48h，以2000-5000r/min速率離心，取沉淀，冷凍干燥得棕褐色粗糖粉末；5)酶解、脫色及除蛋白取上述粗糖粉末按比例添加淀粉酶，于85-95 °C保溫20-40分鐘；加質量百分數為1 % -3 %的活性炭于40-70 °C回流30-50min脫色、以 2000-5000r/min速率離心；取上清液采用Sevage法脫蛋白，重復3_5次，取水層濃縮、醇沉、離心、冷凍干燥，得到灰白色粉末；6)柱層脫色分離將上述灰白色粉末和選自納米大孔氧化鋁、纖維素DEAE-52以及 NKA、NKA-II、AB-8、S_8、X_5、H103、D301R、D201、001 X 7 型樹脂中的一種載體按重量比為1 10-100的比例上樣，采用濃度為0.01%-2%的醋酸銨溶液或氯化鈉溶液洗脫液梯度洗脫，將洗脫液濃縮，透析M-4 !，醇沉，過夜，以2000-5000r/min速率離心，取沉淀冷凍
干燥，得到白色苦豆子多糖粉末；7)柱層純化分離將上述白色苦豆子多糖粉末和載體按重量比為1 10-100的比例上樣，采用濃度為0. 01% -2%的醋酸銨溶液或氯化鈉溶液洗脫液梯度洗脫，將洗脫液濃縮，透析M-4 !，醇沉，過夜，以2000-5000r/min速率離心，取沉淀冷凍干燥，得到苦豆子多糖。8)制劑按照苦豆子多糖重量5% _80%，其他藥用輔料余量的比例，制成顆粒劑、 片劑、小丸劑、膠囊劑或口服液。本發明提供的第一優選的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，所述洗脫液為濃度 0. 02% -2%的醋酸銨溶液或氯化鈉溶液。本發明提供的第二優選的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，所述藥用輔料為選自交聯聚維酮、糊精、淀粉、糖粉、微晶纖維素、糖粉、硬脂酸鎂中的一種或幾種的混合物。本發明提供的第三優選的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，所述顆粒劑制備包括如下步驟將5% -80%苦豆子多糖、-5%交聯聚維酮和糊精、淀粉、糖粉一種或幾種余量混合均勻制成軟材，用制粒機制顆粒，干燥、整粒即得顆粒劑。本發明提供的第四優選的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，所述片劑制備包括如下步驟將重量百分比計的5% -80%苦豆子多糖、3%交聯聚維酮、糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉、硬脂酸鎂其中一種或幾種余量制成軟材，用制粒機制顆粒，干燥后壓片。本發明提供的第五優選的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，所述丸劑制備包括如下步驟將按重量百分比計的5% -80%苦豆子多糖、-5%交聯聚維酮和糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉其中一種或幾種余量；以空白微晶纖維素為母核，以粉末沉積的方式，利用離心造粒機制備小丸。另外，苦豆子多糖口服液制備，包括如下步驟將按重量百分比計的苦豆子多糖 5% -80%和藥用輔料余量，用常規方法制成口服液。其次，本發明采用洗脫液梯度洗脫，使得苦豆子多糖的純度明顯提高，產率增加； 純化的技術除了以上提供的幾種樹脂材料外，采用由天津神能科技有限公司提供的納米氧化鋁大孔樹脂，目前，該種樹脂為新研發產品，其應用尚處于試驗階段，該樹脂通過將硫酸和偏鋁酸鈉混合加熱后經干燥得到，該樹脂比普通的氧化鋁樹脂孔徑較大，吸附能力較強， 該公司將此樹脂運用于石油化工領域，但沒有應用到醫藥領域，本發明將此樹脂用于對苦豆子多糖進行純化；通過去比表面積大吸附力強的特點、使得苦豆子多糖的純度明顯提高， 處理所得上清液最后經減壓濃縮、醇沉、離心、冷凍干燥等過程可得苦豆子多糖精品；得到的苦豆子多糖精品通過藥劑學方法，可制成醫藥學上的各種劑型。一般豆類中的淀粉含量較高，本發明采用在常溫下采用濃度為30% -100%的乙醇浸泡，避免了淀粉在溫度較高情況下糊化影響有效成分的提取。另外，苦豆子中的生物堿成分含量較高，通常情況下，含量較高的生物堿多采用稀酸或乙醇提取，但鑒于本發明要提取的為苦豆子多糖，采用稀酸可能會影響多糖的結構，且可能引入雜質。采用30% -100% 的乙醇浸泡，及流速6-lOml/min條件下，可以最大程度提取生物堿，當流速大于lOml/min 時，由于流速過快，苦豆子中的生物堿不能及時釋放，當流速小于6ml/min時，由于流速過慢，生物堿已被溶解導致釋放時間過長，不能最大程度提取生物堿。采用濃度40% -100%的乙醇醇沉，使得上清液中有效成分最大限度的得到保留，且存在的生物堿得到有效去除。醇沉后靜置10-4 ，使絕大部分沉淀析出，若靜置時間小于 10h，則將導致部分苦豆子淀粉雜質不能有效去除。由于苦豆子本身屬豆科類，淀粉含量較高，獲得的浸膏的粘稠性較大，將浸膏濃縮在密度為1.02-1. 10范圍，避免了發生有效成分絮凝現象，且濃度越大，生產成本越低；另外加入淀粉酶，使得淀粉通過酶的進一步催化水解獲取多糖；采用柱層脫色分離進一步情制獲取多糖。本發明從提取過苦參素和苦參堿的苦豆子藥渣中進行多糖提取。純化的技術除了之前提供的幾種樹脂材料外，加入納米大孔氧化鋁樹脂，這種樹脂現今在多糖純化領域未曾應用，其主要特點為吸附力強、比表面積大。洗脫液濃度先后為0. 01% NaCUO. 02% NaCl、飽和氯化鈉溶液；2%醋酸銨溶液， 純化后多糖含量大于90%。與現有技術相比，本發明提供的一種苦豆子多糖口服制劑及其制備方法具有以下優點1、采用滲漉提取苦豆子總堿后剩余的藥渣方法提取多糖，提取工藝簡單，提取的多糖純度高；2、制備的多糖口服劑的劑型多種，可以方便患者攜帶、使用；3、成本低，適合藥物的工業化生產條件；4、抗腫瘤活性很好，可以有效的用于腫瘤患者的治療，同時可以從提高患者機體的免疫力；5、中藥成分較多，對患者的身體產生的副作用較小，因此患者用藥相對安全，可以使得患者的病情得到有效治療；6、苦豆子多糖的成分在制備過程中得到充分的發揮。


圖1是本發明提供的一種從苦豆子中提取多糖的方法-試驗2混合四種單糖對照品衍生物色譜圖；圖2是本發明提供的一種從苦豆子中提取多糖的方法-試驗3苦豆子多糖水解衍生物色譜圖；圖3是本發明提供的一種從苦豆子中提取多糖的方法-苦豆子多糖分子量測定色譜圖；圖中1 =D-甘露糖、2 =D-鼠李糖、3 =D-葡萄糖、4 =D-半乳糖。
具體實施例方式以下通過具體實施方式
，對本發明提供的一種從苦豆子中提取多糖的方法做進一步更詳細的說明。相關試驗試驗1苦豆子多糖相對分子質量測定1. 1餼譜條件的確定流動相的選擇根據OHpak SB-804色譜柱條件，可采用三次蒸餾水、磷酸鹽緩沖溶液或醋酸鹽緩沖溶液做流動相，但緩沖液濃度控制在0. 1 0. 3mol/L之間，pH值控制在 3. 0 8. 0之間；選用三次蒸餾水和0. 2mol/LpH5. 0磷酸鹽緩沖液和醋酸鹽緩沖液為流動相，以右旋糖酐作為分離試樣在柱中進行分離檢測；3種流動相對苦豆子多糖的分離效果都很好，出于保護色譜柱的考慮，選用三次蒸餾水作流動相；流速的選擇根據色譜柱條件，流速應當不超過1.5ml/min，采用0.6、0.8、1.0、 1. 2ml/min的流速進行樣品分離實驗；實驗結果表明，出峰時間隨著流速的加大而減少，其峰形也有所改變，隨之柱壓也明顯升高，對多糖的分離效果也有所下降；采用0. 8ml/min的流速，進樣量20 μ 1 ；柱溫的選擇根據色譜柱條件，柱溫選擇30°C。1. 2多糖分子量標準曲線的制作分別精密稱取右旋糖酐標準品Mw2000000、133800、84400、41100、21400、7100、 4600,2500,180各50. Omg，用三次蒸餾水定容于5ml容量瓶中，配成10. Omg/mL的標準品溶液，按照1. 3. 1節中確定的色譜條件下分別進樣，測得各色譜峰保留時間。應用島津GPC 軟件以不同分子量標準右旋糖酐的保留時間(RT)為橫坐標，相應的相對分子質量對數值 (IgMw)為縱坐標，繪制標準曲線。1. 3苦豆子多糖樣品測定 稱取苦豆子多糖50. Omg,用三次蒸餾水定容于5ml容量瓶中，配成10. Omg/mL的樣品溶液。按制作標準曲線的色譜條件進樣，得到苦豆子多糖的保留時間和相對分子質量如下表1。表1苦豆子多糖的保留時間和相對分子質量
多1唐樣品保留時間(min)Μ M\MpMzD17. 34750235495799250.032i式駘2梓前衍Φ化HPLC法分析苦百.子多糖中單糖鉬成2. 1方法以三氟乙酸水解苦豆子多糖，加入衍生化試劑1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)生成衍生化產物，采用RP-HPLC法，色譜柱C18色譜柱Q50mmX 4. 6mm, 5 μ m)， 流動相乙腈-0. Imol · L-1磷酸鹽緩沖液ρΗ6· 7(17 83)，流速1. OmL · mirT1，檢測器二極管陣列檢測器，檢測波長2Mnm，柱溫35°C ；結果苦豆子多糖由D-甘露糖、D-鼠李糖、 D-葡萄糖、D-半乳糖等主要4種單糖組成；D-甘露糖、D-鼠李糖、D-葡萄糖、D-半乳糖的比例約450. 76 1 4.45 193. 97 ；結論該方法可以準確的測定出苦豆子多糖中含有的各種單糖。表2苦豆子多糖水解衍生物色譜測定對應參數1 254nm，8nm
_保留時間_Area
13.66213649463
19.30230281
28.626134951
32.5015873544
8
試驗2苦豆子多糖抗腫瘤篩選實驗動物昆明小鼠動物腫瘤:3180(骨肉瘤)、!1印4(肝癌膠水)、肌4(宮頸癌)34((艾氏膠水)測試樣品苦豆子多糖(除蛋白后)；腫瘤接種取接種腫瘤7-10天狀態良好的荷瘤(膠水型)動物，常規消毒后抽取少量膠水，推片瑞氏染色細胞分類證實腫瘤細胞數不少于75%后將膠水抽出，以膠水與生理鹽水之比為1 4比例稀釋，制備成接種用的腫瘤細胞懸液；腫瘤細胞懸液的制備均在無菌條件下完成。吸取上述制備的腫瘤細胞混懸液0.2ml接種于小鼠右側腋窩皮下，從取出腫瘤膠水至腫瘤接種完成在60min內完成。分組與給藥腫瘤細胞接種后M小時動物分組并給藥，所有動物按體重均勻分組，依實驗要求不同分為6組，每組動物數量14只，雌雄各半；分組情況正常對照組、荷瘤對照組、環磷酰胺組(陽性對照組)、苦豆子多糖低劑量(100mg/kg)、苦豆子多糖中劑量組 (200mg/kg)、苦豆子多糖高劑量組G00mg/kg)。給藥方式除環磷酰胺組為接種腫瘤M小時后腹腔一次性給藥(50mg/kg)外，其余各組均為灌胃給藥，每天一次，連續七天。抗腫瘤活性評價末次給藥后Mh，稱取小鼠體重，處死后取其腫瘤組織，并稱重，以腫瘤生長抑制率來評價藥物的體內抗癌效果。計算公式腫瘤生長抑制率=(1-T/C) X100%式中，T為給藥組平均瘤重，C為荷瘤對照組平均瘤重。實驗結果S180 環磷酰胺組抑瘤率77. 11% ；苦豆子多糖低劑量組抑瘤率23. 17% ；苦豆子多糖中劑量組抑瘤率23. 94% ；苦豆子多糖高劑量組抑瘤率43. 11%。肝癌環磷酰胺組抑瘤率66. 14% ；苦豆子多糖低劑量組抑瘤率28. 75% ；苦豆子多糖中劑量組抑瘤率16. 26% ；苦豆子多糖高劑量組抑瘤率19%。U14 :t檢驗結果顯示無統計學意義EAC 環磷酰胺組抑瘤率44. 14% ；苦豆子多糖低劑量組抑瘤率34. 22% ；苦豆子多糖中劑量組抑瘤率22. 99%;苦豆子多糖高劑量組抑瘤率19. 46%;實驗證明，苦豆子多糖具有一定的細胞免疫活性。實施例1以下實施例中，采用的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，包括以下步驟1)粉碎取苦豆子原藥材，粉碎，過篩；2)醇提取已粉碎的苦豆子，裝入滲漉柱內，用70%乙醇浸泡Mh ；以70%乙醇為溶劑，流速6ml/min，滲漉提取苦豆子中所含生物堿成分，直至滲漉提取液與碘化鉍鉀反應無顏色變化時停止滲漉；回收乙醇，得苦豆子藥渣，風干備用；3)水提向上述風干的固體產物中加入其固體產物2倍體積的水，于60°C回流反應Ih得水提物；4)醇沉將上述水提物于35°C減壓濃縮成密度為1. 02的液體，用40%的乙醇醇沉，室溫放置10h，離心，取沉淀，得粗糖提取物，粗糖提取物經水溶后，再加入80 %的乙醇醇沉放置10h，離心，取沉淀冷凍干燥，得棕褐色粗糖粉末；5)酶解、脫色及除蛋白取上述精制糖提取物按比例添加淀粉酶，置于85°C保溫 20min ；加活性炭90°C回流30min、脫色、離心；取上清液kvage法脫蛋白，重復3次，取水層濃縮、離心、冷凍干燥，得到灰白色粉末粉末；6)柱層純化分離將上述白色苦豆子多糖粉末和載體按重量比為1 10的比例上樣，采用濃度為0.01 %的醋酸銨溶液洗脫液梯度洗脫，將洗脫液濃縮，透析Mh，醇沉，過夜，以2000r/min速率離心，取沉淀冷凍干燥，得到苦豆子多糖；7)制劑將苦豆子多糖重量5%、淀粉50%、糊精40%、5%交聯聚維酮和淀粉漿混合均勻制成軟材，用制粒機制顆粒，干燥、整粒即得顆粒劑。實施例2本實施例的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，包括以下步驟1)粉碎取苦豆子原藥材，粉碎，過篩；2)醇提取已粉碎的苦豆子，裝入滲漉柱內，用90%乙醇浸泡Mh ；以85%乙醇為溶劑，流速lOml/min，滲漉提取苦豆子中所含生物堿成分，直至滲漉提取液與碘化鉍鉀反應無顏色變化時停止滲漉；回收乙醇，得苦豆子藥渣，風干備用；3)水提向上述風干的固體產物中加入其固體產物8倍體積的水，于110°C回流反應5小時得水提物；4)醇沉將上述水提物于90°C減壓濃縮成密度為1. 1的液體，用100%的乙醇醇沉，室溫放置48h，離心，取沉淀，得粗糖提取物，粗糖提取物經水溶后，再加入100 %的乙醇醇沉放置48h，離心，取沉淀；5)酶解、脫色及除蛋白取上述粗糖粉末按比例添加淀粉酶，于95°C保溫40min ； 加質量百分數為3%的活性炭于70°C回流50min脫色、以5000r/min速率離心；取上清液采用kvage法脫蛋白，重復5次，取水層濃縮、醇沉、離心、冷凍干燥，得到灰白色粉末；6)柱層脫色分離將上述灰白色粉末和纖維素DEAE-52樹脂載體按重量比為 1 100的比例上樣，采用濃度為2%的醋酸銨溶液洗脫液梯度洗脫，將洗脫液濃縮，透析 48h，醇沉，過夜，以5000r/min速率離心，取沉淀冷凍干燥，得到白色苦豆子多糖粉末；7)制劑按照苦豆子多糖重量80%，交聯聚維酮和糊精、淀粉、糖粉余量混合均勻制成軟材，用制粒機制顆粒，干燥、整粒即得顆粒劑。實施例3苦豆子多糖口服制劑的制備方法，包括以下步驟1)粉碎取苦豆子原藥材，粉碎，過50目篩；2)醇提取步驟(1)過篩后的苦豆子，將其裝入滲漉柱內，用濃度為80%的乙醇浸泡20h ；再以濃度為60%的乙醇為溶劑，以流速12ml/min，滲漉提取，得到苦豆子中所含生物堿成分；至滲漉提取液與碘化鉍鉀反應無顏色變化時停止滲漉，取苦豆子藥渣，晾干備用；3)水提向步驟O)晾干后的固體產物中加入體積為該固體產物6倍量的水，于 80°C，回流池得水提物；4)醇沉將步驟C3)得到的水提物于70°C減壓濃縮成密度為1. 02的液體，加入乙醇至乙醇終濃度為50%醇沉，4°C冰箱放置30h，以3000r/min速率離心，取沉淀，得粗糖提取物，粗糖提取物經水復溶后，再加入乙醇至濃度為80%放置30h，以3000r/min速率離心， 取沉淀，冷凍干燥得棕褐色粗糖粉末；5)酶解、脫色及除蛋白取上述粗糖粉末按比例添加淀粉酶，于85°C保溫30min ； 加質量百分數為2. 5%的活性炭于60°C回流40min脫色、以3000r/min速率離心；取上清液采用kvage法脫蛋白，重復4次，取水層濃縮、醇沉、離心、冷凍干燥，得到灰白色粉末；6)柱層脫色分離將上述灰白色粉末和NKA載體按重量比為1 10的比例上樣， 采用濃度為0. 01%的氯化鈉溶液洗脫液梯度洗脫，將洗脫液濃縮，透析30h，醇沉，過夜，以 3000r/min速率離心，取沉淀冷凍干燥，得到白色苦豆子多糖粉末；本實施例的片劑制備將重量百分比計的80%苦豆子多糖、3%交聯聚維酮溶液和17%糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉、硬脂酸鎂余量制成軟材，用制粒機制顆粒，干燥后壓片。實施例4苦豆子多糖口服制劑的制備方法，包括以下步驟1)粉碎取苦豆子原藥材，粉碎，過50目篩；2)醇提取步驟(1)過篩后的苦豆子，將其裝入滲漉柱內，用濃度為60%的乙醇浸泡20h ；再以濃度為70%的乙醇為溶劑，以流速12ml/min，滲漉提取，得到苦豆子中所含生物堿成分；至滲漉提取液與碘化鉍鉀反應無顏色變化時停止滲漉，取苦豆子藥渣，晾干備用；3)水提向步驟O)晾干后的固體產物中加入體積為該固體產物8倍量的水，于 70°C，回流4h得水提物；4)醇沉將步驟(3)得到的水提物于60°C減壓濃縮成密度為1. 1的液體，加入乙醇至乙醇終濃度為70%醇沉，4°C冰箱放置30h，以4000r/min速率離心，取沉淀，得粗糖提取物，粗糖提取物經水復溶后，再加入乙醇至濃度為80%放置38h，以5000r/min速率離心， 取沉淀，冷凍干燥得棕褐色粗糖粉末；5)酶解、脫色及除蛋白取上述粗糖粉末按比例添加淀粉酶，于95°C保溫40min; 加質量百分數為3%的活性炭于70°C回流50min脫色、以3000r/min速率離心；取上清液采用kvage法脫蛋白，重復5次，取水層濃縮、醇沉、離心、冷凍干燥，得到灰白色粉末；6)柱層純化分離將上述白色苦豆子多糖粉末和載體按重量比為1 10的比例上樣，采田濃度為2%的氯化鈉溶液洗脫液梯度洗脫，將洗脫液濃縮，透析Mh，醇沉，過夜， 以5000r/min速率離心，取沉淀冷凍干燥，得到苦豆子多糖。本實施例的片劑制備將重量百分比計的80%苦豆子多糖、3%交聯聚維酮溶液和17%糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉、硬脂酸鎂余量制成軟材，用制粒機制顆粒，干燥后壓片。實施例5顆粒劑本實施例的苦豆子多糖的提取同實施例4步驟1)-步驟7)，本實施例的顆粒劑制備組分重量百分比％苦豆子多糖5乳糖80
交聯聚維酮5具體操作過程將上述比例的苦豆子多糖與乳糖、交聯聚維酮混合均勻，加入5% 聚維酮溶液制成軟材，用制粒機制顆粒，干燥、整粒即得顆粒劑。實施例6小丸劑本實施例的苦豆子多糖的提取同實施例3步驟1)-步驟7)，小丸劑制備組分重量百分比％苦豆子多糖80微晶纖維素20具體操作過程以60-80空白微晶纖維素小丸為母核，以粉末沉積的方式，利用離心造粒機制備小丸。實施例7片劑本實施例的苦豆子多糖的提取同實施例2步驟1)-步驟7)，片劑制備組分重量百分比％苦豆子多糖 60淀粉15微晶纖維素 20硬脂酸鎂5制備將上述比例的苦豆子多糖與其余組分混合均勻，加入淀粉漿制成軟材，用制粒機制顆粒，干燥后壓片。實施例8顆粒劑制備本實施例的苦豆子多糖的提取同實施例1步驟1)-步驟7)，顆粒劑制備將20%苦豆子多糖、3%交聯聚維酮和77%糊精、淀粉和糖粉混合均勻制成軟材， 用制粒機制得顆粒劑，糊精、淀粉和糖粉的比例為1 1 2。實施例9片劑制備本實施例的苦豆子多糖的提取同實施例4步驟1)-步驟7)，將重量百分比計的 70%苦豆子多糖、5%交聯聚維酮和25%糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉、硬脂酸鎂的混合物制成軟材，用制粒機制顆粒，干燥后壓片，其中，糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉、硬脂酸鎂的比例為 1:1:2:3:4。實施例10丸劑制備本實施例的苦豆子多糖的提取同實施例3步驟1)-步驟7)，將按重量百分比計的 60%苦豆子多糖、2%交聯聚維酮和38%糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉的混合物；以空白微晶纖維素為母核，以粉末沉積的方式，利用離心造粒機制備小丸劑，其中糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉的比例為1:2:3:6。實施例11片劑制備本實施例的苦豆子多糖的提取同實施例1步驟1)-步驟7)，片劑制備將重量百分比計的70%苦豆子多糖、5%交聯聚維酮、和25%糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉、硬脂酸鎂的混合物制成軟材，用制粒機制顆粒，干燥后壓片，其中，糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉、 硬脂酸鎂的比例為1:2:4:3:5。實施例12小丸劑制備
本實施例的苦豆子多糖的提取同實施例2步驟1)-步驟7)，小丸劑制備將按重量百分比計的80%苦豆子多糖、5%交聯聚維酮和15%糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉的混合物；以空白微晶纖維素為母核，以粉末沉積的方式，利用離心造粒機制備小丸劑，其中，糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉的比例為1 2 1 3。最后應當說明的是以上實施例僅用以說明本發明的技術方案而非對其限制，盡管參照上述實施例對本發明進行了詳細的說明，所屬領域的普通技術人員應當理解技術人員閱讀本申請說明書后依然可以對本發明的具體實施方式
進行修改或者等同替換，但這些修改或變更均未脫離本發明申請待批權利要求保護范圍之內。
權利要求
1.一種苦豆子多糖口服制劑，其特征在于所述口服制劑包括按重量百分比計的苦豆子多糖5% -80%和藥用輔料。
2.根據權利要求1所述的苦豆子多糖口服制劑，其特征在于所述口服制劑包括按重量百分比計的苦豆子多糖20% -60%和藥用輔料。
3.根據權利要求1所述的苦豆子多糖口服制劑，其特征在于所述口服制劑包括顆粒劑、片劑、丸劑、膠囊劑或口服液。
4.根據權利要求1所述的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，包括以下步驟1)粉碎取苦豆子原藥材，粉碎，過10-60目篩；2)醇提取步驟(1)過篩后的苦豆子，將其裝入滲漉柱內，用濃度為30%-100%的乙醇浸泡18-24h ；再以濃度為30% -100%的乙醇為溶劑，以流速10-15ml/min，滲漉提取，得到苦豆子中所含生物堿成分；至滲漉提取液與碘化鉍鉀反應無顏色變化時停止滲漉，取苦豆子藥渣，晾干備用；3)水提向步驟O)晾干后的固體產物中加入體積為該固體產物6-15倍量的水，于 60-110°C，回流l-5h得水提物；4)醇沉將步驟C3)得到的水提物于35-90°C減壓濃縮成密度為1.02-1. 1的液體， 加入乙醇至乙醇終濃度為40-90%醇沉，4°C冰箱放置10-48h，以2000_5000r/min速率離心，取沉淀，得粗糖提取物，粗糖提取物經水復溶后，再加入乙醇至濃度為70-90%放置 10-48h，以2000-5000r/min速率離心，取沉淀，冷凍干燥得棕褐色粗糖粉末；5)酶解、脫色及除蛋白取上述粗糖粉末按比例添加淀粉酶，于85-95°C保溫 20-40min ；加質量百分數為的活性炭于40_70°C回流30_50min脫色、以2000_5000r/ min速率離心；取上清液采用kvage法脫蛋白，重復3_5次，取水層濃縮、醇沉、離心、冷凍干燥，得到灰白色粉末；6)柱層脫色分離將上述灰白色粉末和選自納米大孔氧化鋁、纖維素DEAE-52以及 NKA、NKA-II, AB-8、S_8、X_5、H103、D301R、D201、001 X7 型樹脂中的一種載體按重量比為 1 10-100的比例上樣，采用濃度為0.01%-2%的醋酸銨溶液或氯化鈉溶液洗脫液梯度洗脫，將洗脫液濃縮，透析M-4 !，醇沉，過夜，以2000-5000r/min速率離心，取沉淀冷凍干燥，得到白色苦豆子多糖粉末；7)柱層純化分離將上述白色苦豆子多糖粉末和載體按重量比為1 10-100的比例上樣，采用濃度為0. 01 % -2 %的醋酸銨溶液或氯化鈉溶液洗脫液梯度洗脫，將洗脫液濃縮，透析M-4 !，醇沉，過夜，以2000-5000r/min速率離心，取沉淀冷凍干燥，得到苦豆子多糖。8)制劑按照苦豆子多糖重量5%_80%，其他藥用輔料余量的比例，制成顆粒劑、片劑、小丸劑、膠囊劑或口服液。
5.根據權利要求4所述的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，其特征在于所述洗脫液為濃度0. 01% -2%的醋酸銨溶液或氯化鈉溶液。
6.根據權利要求1所述的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，其特征在于所述藥用輔料為選自交聯聚維酮、糊精、淀粉、糖粉、微晶纖維素、糖粉、硬脂酸鎂中的一種或幾種的混合物。
7.根據權利要求4所述的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，其特征在于所述顆粒劑制備包括如下步驟將5% -80%苦豆子多糖、-5%交聯聚維酮和糊精、淀粉、糖粉一種或幾種余量混合均勻制成軟材，用制粒機制顆粒，干燥、整粒即得顆粒劑。
8.根據權利要求4所述的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，其特征在于所述片劑制備包括如下步驟將重量百分比計的5% -80%苦豆子多糖、3%交聯聚維酮、糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉、硬脂酸鎂其中一種或幾種余量制成軟材，用制粒機制顆粒，干燥后壓片。
9.根據權利要求4所述的苦豆子多糖口服制劑的制備方法，其特征在于所述丸劑制備包括如下步驟將按重量百分比計的5% -80%苦豆子多糖、-5%交聯聚維酮和糊精、淀粉、微晶纖維素、糖粉其中一種或幾種余量；以空白微晶纖維素為母核，以粉末沉積的方式，利用離心造粒機制備小丸。
全文摘要
本發明涉及一種苦豆子多糖口服制劑及其制備方法，其特征在于所述口服制劑包括按重量百分比計的苦豆子多糖5-80％和藥用輔料；制得的口服制劑不僅方便患者攜帶使用，副作用較小，安全性較高；制備方法采用1)粉碎；2)醇提；3)水提；4)醇沉；5)酶解、脫色及除蛋白；6)柱層脫色分離；7)柱層純化分離；8)制劑；該制備方法可以制備多種進口服劑型，方便患者使用。
文檔編號A61P35/00GK102579563SQ20111000788
公開日2012年7月18日 申請日期2011年1月14日 優先權日2011年1月14日
發明者張巖, 王文彤, 鄭奪, 陶遵威, 馬麗娜 申請人:天津市醫藥科學研究所