專利名稱：一種復方遠志酸體外殺精子藥物的制作方法
技術領域：
本發明涉及藥品，是一種復方遠志酸體外殺精子藥物。
背景技術：
申請人:近幾年致力于采用中藥提取體外殺滅精子的藥物研究，以解決現有宮內節 能器、輸卵管結扎、輸精管結扎、避孕套、口服避孕藥等避孕措施及用西藥避孕產生的副作 用。申請人2006年研究的成果之一是采用遠志中含有的萜類皂甙對于體外殺精子的藥物 作用。在進一步的研究中發現，遠志提取物雖然有較好的體外殺精子的作用，但是這種提取 物是一種復合物質，在使用時要達到較好效果時，則需要使用較大的劑量，對于用緩釋膠囊 置入節育器內攜帶時，帶來較多不便。另外，進一步的研究表明，體外殺精子的同時配以抗 菌藥物時，對人體健康具有較大益處，雖然，現有的體外殺精子藥物中有抗菌組份，但是，這 些藥物均為西藥，對陰道粘膜具有較強的刺激作用，同時經人體吸收后將對肝臟產生較大 的損害，長期使用，嚴重影響人體健康。

發明內容
本發明的目的是，提供一種復方遠志酸體外殺精子藥物，它全部采用中藥原料制 成，在具有體外殺滅精子效果好、速度快的前提下，抗菌效果顯著，沒有任何毒副作用。本發明為實現上述目的，通過以下技術方案實現一種復方遠志酸體外殺精子藥 物，包括下述重量比的原料遠志酸3-7毫克，補骨脂提取物2-4毫克，覆盆子提取物3-5毫 克，防風提取物2-4毫克和0. 9%的生理鹽水130-170毫升。所述的一種復方遠志酸體外殺精子藥物，由下述重量比的原料組成遠志酸5毫 克，補骨脂提取物3毫克，覆盆子提取物4毫克，防風提取物3毫克和0. 9%的生理鹽水150毫升。所述的一種復方遠志酸體外殺精子藥物劑型是乳劑、栓劑或緩釋膠囊。所述的一種復方遠志酸體外殺精子藥物的制備方法，按重量比取遠志酸3-7毫克 備用，用0. 9 %的生理鹽水提取補骨脂，得到補骨脂提取物2-4毫克備用，用0. 9 %的生理鹽 水提取覆盆子，得到覆盆子提取物3-5毫克備用，用0. 9%的生理鹽水提取防風，得到防風 提取物2-4毫克備用，然后將遠志酸、補骨脂提取物、覆盆子提取物及防風提取物置入容器 內混合均勻，再加入130-170毫升0. 9%的生理鹽水，搖勻，制成藥劑。本發明組份中的遠志酸是中藥原料遠志的提取物，遠志中的其它提取物遠志皂 甙A、B、E、F、G、遠志堿、遠志糖醇、N-乙酰-D-氨基葡萄糖、氧雜蒽酮和桂皮酸的衍生物等對 殺滅精子的作用均甚微，并且殺滅精子速度較慢。研究表明，遠志酸殺滅精子的速度比遠志 的其它提取物速度快3倍以上，效果極好，對人體無任何刺激，對肝臟無損害，無毒副作用。本發明藥物中的遠志酸用于殺滅精子，防風提取物用于抗菌、抗炎及抗病原微生 物，覆盆子提取物用于防止陽痿早泄、遺精滑精，補骨脂提取物用于抗炎、抗菌，上述各組份 組合后的功效為能夠快速實現體外殺滅精子的目的，并具有較好的抑菌殺菌作用，可使本發明藥物制成乳劑、栓劑等劑型，用于陰道外用避孕的目的，也可制成緩釋膠囊，放置在節 育器內被攜帶進入人體，增加節育器的避孕效果。本發明藥物的動物試驗表明，對常見致病菌有非常明顯的抑制作用。本發明藥物的抗菌試驗菌液的制備取形態相同的菌落(標準菌株為金黃色葡萄球菌，大腸埃希菌，銅 綠假單胞菌，肺炎克雷伯菌)5 10個接種于培養管內，36°C，4 6小時后糾正濃度，使其 混濁度相當于0.5麥氏比濁管，約為1.5X108菌落形成單位(CFU)/ml，立即用于實驗。最低抑菌濃度(MIC)測定方法參照《全國臨床檢驗操作規程》關于最低抑菌濃度 的檢測方法用胨水或瓊脂將藥物配成所需濃度。瓊脂平皿稀釋法選用直徑為IOcm的玻璃平皿，將本發明的藥物按比例添加到培 養基。用微量加樣器接種，每個平皿接種7種菌，每個接種點接種20微升(μ 1)稀釋好的 菌液，形成一個直徑為8 10微米的小液滴，最終接種菌量約每個接種點含IO7個菌。放置 10分鐘(min)，待菌液稍干后倒置放入37°C恒溫培養箱培養24h，觀察結果。以培養皿上菌 落生長完全被抑制的最低藥物濃度為本發明藥物對該菌的MIC。試管法每組排列無菌試管13只，于第2 12號管內放相應培養基2ml，取制備 好的藥液分別加入2mll號2號管，第2管混勻后取2ml加入第3號管，如此依次對倍稀釋 至第10號管，吸出2ml棄去。這樣第1 10號管內含藥液濃度倍量稀釋，濃度分別為每毫 升含藥64，32，16,8,6,4,2,1,0. 5,0. 25mg，第11和第12號管內為無菌培養基，第13號管內 加入1 25的84消毒液2ml，作為陽性對照。除第11號管外，每管內接種菌液100微升， 37°C恒溫搖床震蕩24h觀察結果。肉眼未見細菌生長的最低藥物濃度為本發明藥物對該菌 的 MIC。本發明藥物對常見致病菌的最低抑制濃度如下表所示。表中可看出對金黃色葡萄 球菌，大腸埃希菌，銅綠假單胞菌，肺炎克雷伯菌有很好的抑制作用。本發明藥物對常見致病菌的最低抑制濃度
菌種_瓊脂平板(mg.mr1) 試管法(mg.mr1)
標準菌株
金黃色葡萄球菌2. 11.0
大腸埃希菌2. 11.2
銅綠假單胞菌1.01.0
肺炎克雷伯菌2. 11.5
臨床分離菌株
金黃色葡萄球菌2. 11.0
大腸埃希菌4. 12.2
銅綠假單胞菌_LO_1.0 試驗小鼠為8 10周齡性成熟昆明小鼠(購自北京試驗動物中心)。雌鼠體重 29.32g。60只清潔級小鼠腹腔注射標準菌株2X107CFU/ml 2ml，7天(d)后感染發生，試驗 組30只開始注射本發明藥物20mg/kg，每天1次，連續3d，另30只注射生理鹽水(無藥物) 作為對照。治療后第7d,實驗組30只小鼠均存活，其精神狀態佳、活撥、毛發光澤、能自主進食、無畏光流淚等現象。本發明藥物解脲脲原體抑制實驗解脲脲原體液體培養基按照Roberson等(Roberson JA, Stcmke Gff. Expandedserotyping scheme for Ureaplasma urealytleum strains i solated from humansf. JClin Mierobiol，1982 ;15 :812.)方法進行，方法配制1 1 牛心消化液、10% 新鮮酵母液、20%新生小牛血清、0. 002%酚紅、青霉素20000單位/升。解脲脲原體培養基 加0.1%尿素，？!1調至6.0。人型支原體培養基加0. 精氨酸，pH調至6. 5。支原體株30 株。解脲脲原體(UU)和30株人型支原體(MH)臨床株為泌尿生殖道感染患者 標本中分離 獲得，經菌落形態、底物分解、PH值、生長速度初步鑒定為，液體傳代3次后，-70°C短期保存 備用。實驗菌液保存的備用菌液，室溫下融化，用解脲脲原體液體培養基或人型支原體液 體培養基按1 100稀釋，37°C培養24 48h后達IO6顏色變化單位/0.1ml作為接種物。 實驗方法采用液體培養基稀釋法。加培養基在96孔(8X12)聚苯乙烯板上，用微量加樣器 向每一孔內均加入100微升培養基。往第一孔內加入配制好的本發明藥物100微升，充分混 勻后取100微升加入第二孔，再吹打混勻吸出100微升加入第三孔，依次類推，直至第十一 孔，充分混勻后，棄去100微升。由此將藥液倍比稀釋至10 20微克/ml。第十二孔不加 藥物作為對照。加菌液用支原體培養基按1 100稀釋UU與MH培養物，混勻取100微升 加入每一個孔內。將加好的96孔板蓋上板蓋，輕搖混勻，置于濕盒內，37°C培養箱孵育。根 據培養基顏色變化判斷結果培養基由黃色變為紅色表明有支原體生長。24h內觀察UU生 長變化，如加藥孔出現與對照孔相同的顏色變化，表示所加藥物的對應濃度對UU無抑制作 用，24h仍不出現顏色變化為有效抑制UU生長的藥物濃度；24 48h內觀察MH生長變化， 如加藥孔出現與對照孔相同的顏色變化，表示所加藥物的對應濃度對MH無抑制作用，48h 仍不出現顏色變化為有效抑制MH生長的藥物濃度。加藥組以不出現顏色變化的最小濃度 為最小有效抑制支原體生長的藥物濃度(MIC)。實驗采用UUl，UU2，UU3，UU4和MH標準株 作參照。抗支原體效位實驗結果表明，本發明藥物對解脲脲原體的MIC50分別為1.024mg/ ml，0. 512mg/ml,0. 512mg/ml 和 0. 256mg/ml ；對人型支原體的 MIC50 分別為 1. 024mg/ml, 0. 512mg/ml,0. 512mg/ml 及 0. 256mg/ml。本發明藥物急性毒性和致突變實驗實驗方法采用霍恩氏法研究灌胃給予小鼠本發明藥物的半數致死量(LD50)。選 用健康昆明種小鼠40只，雌雄各半，體重17 22g，隨機分為4個受試藥物劑量組1. 00， 2. 15,4. 64，10. 00克/公斤體重，灌胃給藥，觀察7天，記錄中毒和死亡情況，計算得出 LD50。采用鼠傷寒沙門菌回復突變試驗(Ames試驗)研究其致突變性，小鼠精子畸變試驗 和小鼠骨髓細胞微核試驗研究其致畸變性。結果小鼠口服本發明藥物的LD50大于10. 0 克/公斤體重；各劑量組小鼠灌胃后未見明顯中毒癥狀，亦無死亡。Ames試驗陰性、未發現 對小鼠精子產生畸變作用、對小鼠骨髓細胞染色體未見損傷。在急性毒性、小鼠精子畸變和 小鼠骨髓細胞微核試驗中，從試驗開始到結束，小鼠體重增重情況良好，說明本發明藥物無 明顯急性毒性作用和致突變作用。本發明藥物比西藥壬苯醇醚殺精子速度快。試驗如下實驗用精液標本選自25-35歲健康男性38例，禁欲3_5d，手法取精液于干凈滅菌 的25ml小燒杯內，精液量2-4ml, pH 7. 0-8. 0，液化時間< 30min，精子活動率70-92%，活動力a+b級50% -80%，精子密度> 60 X 106/ml，畸形精子率< 20%。 取對照品壬苯醇醚(0.9%生理鹽水稀釋，壬苯醇醚濃度為分別配制成0. 1%、 0. 01 %及0. 001 %三種不同濃度)及生理鹽水各0. 5ml，加入同樣0. 5毫升精液(同一份精 液)，即刻混勻，迅速取1小滴于載玻片上，倒置顯微鏡(37°C恒溫)下觀察精子活動情況， 連續觀察10個高倍視野，以精子全部失去活動能力為終點。從精子接觸藥物時起至全部失 活的時間為殺精子時間。每次實驗反復進行2-3次。配制0. 1 %濃度的本發明藥物為稀釋液1，配制0. 01 %濃度的本發明藥物為稀釋 液2，配制0. 001%濃度的本發明藥物稀釋液3，實驗方法同上。實驗結果表明，稀釋液1對 人精子體外殺滅使用最短時間為3秒鐘，最長時間為5秒鐘；稀釋液2對人精子體外殺滅作 用最短時間為3秒鐘，最長時間為7秒鐘；稀釋液3對人精子體外殺滅作用最短時間為42 秒鐘，最長時間為90秒鐘。壬苯醇醚1毫克/毫升對人精子體外殺滅作用最短時間為5秒 鐘，最長時間為12秒鐘；0. 1毫克/毫升對人精子體外殺滅作用最短時間為38秒鐘，最長 時間為426秒鐘；0. 01毫克/毫升對人精子體外殺滅作用最短時間為19分鐘，最長時間為 35分鐘。上述稀釋液1是指1毫升本發明藥物，加0. 9%生理鹽水1毫升，混合均勻后配制 成0. 濃度的本發明藥物，稀釋液2是指1毫升本發明藥物，加0. 9%生理鹽水10毫升， 混合均勻后配制成0. 01%濃度的本發明藥物，稀釋液3是指1毫升本發明藥物，加0. 9%生 理鹽水100毫升，混合均勻后配制成0. 001%濃度的本發明藥物。
具體實施例方式本發明的一種復方遠志酸體外殺精子藥物，包括下述重量比的原料遠志酸3-7 毫克，補骨脂提取物2-4毫克，覆盆子提取物3-5毫克，防風提取物2-4毫克和0. 9%的生理 鹽水130-170毫升，其中遠志酸的分子式為C29H44O6,為白色粉末。本發明藥物中的各原料重量比可有下述多種組合1、遠志酸5毫克，補骨脂提取物3毫克，覆盆子提取物4毫克，防風提取物3毫克 和0. 9%的生理鹽水150毫升。2、遠志酸3毫克，補骨脂提取物2毫克，覆盆子提取物3毫克，防風提取物2毫克 和0. 9%的生理鹽水130毫升。3、遠志酸7毫克，補骨脂提取物4毫克，覆盆子提取物5毫克，防風提取物4毫克 和0. 9%的生理鹽水170毫升。本發明所述的一種復方遠志酸體外殺精子藥物的制備方法，按重量比取遠志酸 3-7毫克備用，用0. 9%的生理鹽水提取補骨脂，得到補骨脂提取物2-4毫克備用，用0. 9% 的生理鹽水提取覆盆子，得到覆盆子提取物3-5毫克備用，用0. 9%的生理鹽水提取防風， 得到防風提取物2-4毫克備用，然后將遠志酸、補骨脂提取物、覆盆子提取物及防風提取物 置入容器內混合均勻，再加入130-170毫升0. 9 %的生理鹽水，搖勻，制成藥劑。本發明所述藥物的劑型是乳劑、栓劑或緩釋膠囊。本發明藥物所述的中藥原料防風、覆盆子及補骨脂的提取方法均采用0. 9%生理 鹽水提取方法，例如防風提取物的提取方法是，取5克防風中藥原料，加0. 9%生理鹽水50 毫升，在100°C加熱60分鐘，過濾紙過濾得到防風提取液，低溫冷凍干燥離心，得防風干燥粉末1.12克，即為防風提取物。補骨脂提取物的提取方法是取5克補骨脂中藥原料，加0. 9%生理鹽水50毫升，在iocrc加熱60分鐘，過濾紙過濾得到補骨脂提取液，低溫冷凍干燥離心，得補骨脂干燥粉 末1.18克，即為補骨脂提取物。覆盆子提取物的提取方法是取5克覆盆子中藥原料，加0. 9%生理鹽水50毫升， 在iocrc加熱60分鐘，過濾紙過濾得到覆盆子提取液，低溫冷凍干燥離心，得覆盆子干燥粉 末1. 20克，即為覆盆子提取物。
權利要求
一種復方遠志酸體外殺精子藥物，其特征在于包括下述重量比的原料遠志酸3-7毫克，補骨脂提取物2-4毫克，覆盆子提取物3-5毫克，防風提取物2-4毫克和0.9％的生理鹽水130-170毫升。
2.根據權利要求1所述的一種復方遠志酸體外殺精子藥物，其特征在于由下述重量 比的原料組成遠志酸5毫克，補骨脂提取物3毫克，覆盆子提取物4毫克，防風提取物3毫 克和0. 9%的生理鹽水150毫升。
3.根據權利要求1所述的一種復方遠志酸體外殺精子藥物，其特征在于所述劑型是 乳劑、栓劑或緩釋膠囊。
4.權利要求1所述的一種復方遠志酸體外殺精子藥物的制備方法，其特征在于按重 量比取遠志酸3-7毫克備用，用0. 9%的生理鹽水提取補骨脂，得到補骨脂提取物2-4毫克 備用，用0. 9 %的生理鹽水提取覆盆子，得到覆盆子提取物3-5毫克備用，用0. 9 %的生理鹽 水提取防風，得到防風提取物2-4毫克備用，然后將遠志酸、補骨脂提取物、覆盆子提取物 及防風提取物置入容器內混合均勻，再加入130-170毫升0.9%的生理鹽水，搖勻，制成藥 劑。
全文摘要
本發明公開了一種復方遠志酸體外殺精子藥物，包括下述重量比的原料遠志酸3-7毫克，補骨脂提取物2-4毫克，覆盆子提取物3-5毫克，防風提取物2-4毫克和0.9％的生理鹽水130-170毫升，將遠志酸、補骨脂提取物、覆盆子提取物及防風提取物混合均勻，再加入130-170毫升0.9％的生理鹽水，搖勻，制成藥劑。本發明全部采用中藥原料制成，能夠快速實現體外殺滅精子的目的，并具有較好的抑菌殺菌作用，可使本發明藥物制成乳劑、栓劑等劑型，用于陰道外用避孕的目的，也可制成緩釋膠囊，放置在節育器內被攜帶進入人體，增加節育器的避孕效果，沒有任何毒副作用。
文檔編號A61K31/58GK101804109SQ20101012792
公開日2010年8月18日 申請日期2010年3月19日 優先權日2010年3月19日
發明者王磊光, 邱毅 申請人:山東省計劃生育科學技術研究所