專利名稱：一種富集純化桂竹糖芥中強心甙的方法
技術領域：
本發明屬于天然有機化學領域，涉及一種強心甙的純化方法，特別是涉及一種利
用大孔吸附樹脂富集純化桂竹糖芥中強心甙的方法。
背景技術：
桂竹糖芥異名打水水花、金盞盞花(《內蒙古中草藥》)，希和日_赫其(蒙 名)。年或二年生草本，高30 150厘米，全株有二或三叉狀毛。莖直立，上部有分枝。單 葉互生；線形或披針形，先端稍尖，邊緣波狀或有淺而長的缺刻，基部漸狹；近無柄。總狀花 序頂生成腋生；花小；花瓣4，黃色，匙形，十字形排列；雄蕊6， 4長2短。長角果柱形，長約 1 2厘米，有棱，成熟時開裂，果柄短，假隔膜薄紙狀，每室有種子一列。種子細小，扁卵圓 形，黃褐色。花期4 6月。果期5 7月。野生于草原、田邊，山坡及路旁。除華南外，分 布幾遍全國。全草含葡萄糖糖芥甙、黃麻屬甙A、木糖糖芥甙、木糖糖芥醇甙、糖芥卡諾醇甙 等強心甙。 強心甙是一種對人類健康有顯著保健作用的天然活性物質，已引起國際社會的普 遍關注。經科學研究及臨床應用證明，強心甙具有保護及增強心臟機能；中樞性降壓作用。 人體測試結果顯示，強心甙主治功能強心利尿，健脾和胃，消食；治心悸，浮腫，消化不良。 近年來，人們發現天然植物桂竹糖芥中含有大量的強心甙，從中提取強心甙并且取得了可 喜進展，由于其原料桂竹糖芥為中藥，原料來源較廣。名稱為"超聲輔助萃取桂竹糖芥的 方法"的專利中請中便公開了將桂竹糖芥經超聲輻射方法優化提取強心甙工藝流程。上述 專利文獻中的強心甙提取工藝主要是經過用超聲波輔助萃取，75%乙醇提取等步驟提取而 成，其分離效果遠遠不如大孔吸附樹脂處理后在進行硅膠柱層析分離的效果。

發明內容
本發明的目的在于克服常規技術提取率相對較低、提取純度低等缺點，提供一種
利用大孔吸附樹脂富集純化桂竹糖芥中強心甙的方法。 為實現上述目的，本發明采用的技術方案是 —種利用大孔吸附樹脂富集純化桂竹糖芥中強心甙的方法，其步驟如下
(1)將干桂竹糖芥粉碎后用有機劑提取； (2)將經步驟(1)處理的五味子提取液抽濾，得提取液并減壓回收溶劑的初提物；(3)將所獲初提物用水加熱溶解，加入乙酸乙醇萃取，用堿調其ra值為7.0
11. 00，靜置、抽濾、減壓濃縮得強心甙粗提物； (4)將所得強心甙粗提物用大孔吸附樹脂進行吸附； (5)用不同濃度的乙醇對大孔吸附樹脂進行洗脫，用薄層色譜法跟蹤檢測，收集強 心甙各階段洗脫液； (6)將強心甙各階段洗脫液濃縮回收乙醇，得強心甙半成品，其含量為35%以上；
(7)將所得強心甙半成品上硅膠層析柱，并以乙酸乙酯、氯仿以不同體積比例進行
3洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測，收集強心甙各階段洗脫液； (8)將所收集的強心甙洗脫液，采用活性炭脫色、重結晶方法精制得強心甙，其含 量在98%以上。 所述的步驟(1)中，桂竹糖芥粉碎后過10 80目篩在進行有機溶劑提取。
在所述的步驟(1)中，有機溶劑為丙酮、乙酸乙酯、10 100%乙醇中的一種或一 種以上，提取時間為4 48小時。 所述的步驟(1)中，有機溶劑提取的方法為浸泡法、回流提取法、滲漉法、煎煮法、 連續提取法中的一種或一種以上。 所述的步驟(1)中，加入有機溶劑的體積為桂竹糖芥粉碎體積的5 20倍。
在所述的步驟(3)中，加入乙酸乙酯的量按體積計算為提取物水溶液的5 20
倍，調節ra值所用的堿為氫氧化納或氨水。 所述的步驟(4)中所用的大孔吸附樹脂為天津南開大學所產生的X-5、 NKA-9、 S-8、 D3520、 D4006、 H103、 D4020、 AB-8H和NKA-II型樹脂中的一種，吸附為靜態吸附或動態 吸附。 所述的步驟(5)中所述的洗脫為用10 90%的乙醇進行洗脫。 在所述的步驟(5)和(7)中，所采取的檢測方法均為薄層色譜法跟蹤檢測。 所述的步驟(7)中所采取的乙酸乙酯與氯仿的體積為1 7 : 1。 本發明應用大孔吸附技術分離純化強心甙，對強心甙的吸附選擇性良好，吸附快
解析也快，吸附容量較大；提取方便快捷，原料來源豐富，生產成本低廉，分離效果明顯，提
取純度高，可以得到含量35%以上的強心甙半成品和含量98%以上的強心甙終產品，克服
了常規提取率相對較低、提取純度低的缺點。 本發明選用理化性質穩定、表面積較大、交換速度較快、機械強度高、抗污染能力 強、熱穩定性好的大孔吸附樹脂，不容于酸、堿及有機媒，對有機物選擇性較好，不受無機鹽 類及強離子低分子化合物存在的影響，可以通過物理吸附從溶液中有選擇地吸附強心甙， 吸附快、解析也快，吸附容量較大。
具體實施例方式
實施例1 :一種利用大孔吸附樹脂富集純化桂竹糖芥中強心甙的方法，其步驟如 下 (1)將干桂竹糖芥粉碎后過60目篩，用桂竹糖芥粉體積IO倍的乙酸乙酯浸漬提取 48小時; (2)將經步驟(1)處理的桂竹糖芥提取液抽濾，得提取液并減壓回收溶劑的初提 物； (3)將所獲初提物用水加熱溶解，加入體積為提取物水溶液體積20倍的乙酸乙醇 進行萃取，然后用堿調其PH值為9. 0，靜置、抽濾、減壓回收溶劑得強心甙粗提物；
(4)將所得強心甙提物用大孔吸附樹脂層析柱上進行吸附，所用的大孔樹脂為天 津南開大學所生產的NKA-II型樹脂； (5)用10%、20| %、30%、40%、50% | 、60%、70%、80% | 、90%的乙醇在大孔吸附 樹脂層柱中依次進行梯度洗脫，用薄層色譜法跟蹤檢測，收集強心甙各階段洗脫液；
(6)將強心甙各階段洗脫液濃縮回收乙醇，得到含量為35%以上五味子醇甲半成
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(7)將所得強心甙半成品上硅膠層析柱，并用乙酸乙酯、氯仿依次以1 : 1、2 : i、
3 : i、4 : i、5 : i、6 : i、7 : i的體積比進行梯度洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測，收集強心
甙各階段洗脫液； (8)將所收集的強心甙洗脫液，采用活性炭脫色、重結晶方法精制得到含量98% 以上五味子醇甲。 實施案例2 :—種利用大孔吸附樹脂富集純化桂竹糖芥中強心甙的方法，其步驟 如下 (1)將干桂竹糖芥粉碎后過10目篩，用桂竹糖芥粉體積20倍的丙酮浸漬提取12 小時，然后回流提取4小時； (2)將經步驟(1)處理的桂竹糖芥提取液抽濾，得提取液并減壓回收溶劑的初提 物； (3)將所獲初提物用水加熱溶解，加入體積為提取物水溶液體積10倍的乙酸乙醇 進行萃取，然后用氨水調其K1值為7.0，靜置、抽濾、減壓濃縮得強心甙粗提物；
(4)將所得強心甙粗提物用大孔吸附樹脂進行吸附，所用的大孔樹脂為天津南開 大學所生產的D4006型樹脂； (5)用10%、30%、50% | 、70% 、90%的乙醇在大孔吸附樹脂進行洗脫，用薄層色 譜法跟蹤檢測，收集強心甙各階段洗脫液； (6)將強心甙各階段洗脫液濃縮回收乙醇，得到含量35%以上強心甙半成品；
(7)將所得強心甙半成品上硅膠層析柱，并用乙酸乙酯、氯仿依次以1 : 1、2 : 1、
3 : 1、4 : 1、5 : 1、6 : i、7 : i的體積比進行梯度洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測，收集強心
甙各階段洗脫液； (8)將所收集的強心甙洗脫液，采用活性炭脫色、重結晶方法精制得到含量98% 以上五味子醇甲。 實施案例3 :—種利用大孔吸附樹脂富集純化桂竹糖芥中強心甙的方法，其步驟 如下 (1)將干桂竹糖芥粉碎后過80目篩，用桂竹糖芥粉體積15倍的75%乙醇回提取 6小時； (2)將經步驟(1)處理的桂竹糖芥提取液抽濾，得提取液并減壓回收溶劑的初提 物； (3)將所獲初提物用水加熱溶解，加入體積為提取物水溶液體積10倍的乙酸乙醇 進行萃取，然后用氫氧化鈉水溶液調其ra值為11. 0，靜置、抽濾、減壓濃縮得強心甙粗提 物； (4)將所得五強心甙粗提物用大孔吸附樹脂層析柱子、上進行吸附，所用的大孔樹 脂為天津南開大學所生產的NKA-9型樹脂； (5)用20% 、40% 、60% | 、80 %的乙醇在大孔吸附樹脂層析柱子中依次進行梯度 洗脫，用薄層色譜法跟蹤檢測，收集強心甙各階段洗脫液； (6)強心甙各階段洗脫液濃縮回收乙醇，得到含量35%以上強心甙半成品；
(7)將所得強心甙半成品上硅膠層析柱，并用乙酸乙酯、氯仿依次以i : i、2 : i、 3 : i、4 : i、5 : i、6 : i、7 : i的體積比進行梯度洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測，收集強心
甙各階段洗脫液； (8)將所收集的強心甙洗脫液，采用活性炭脫色、重結晶方法精制得到含量98% 以上強心甙。
權利要求
一種利用大孔吸附樹脂富集純化桂竹糖芥中強心甙的方法，其特征在于，其步驟如下(1)將干桂竹糖芥粉碎后用純化水加熱提取；(2)將經比周(1)處理的強心甙提取液過濾，得初提物；(3)將所收獲初提物用水加熱溶解，加入乙醇萃取，用堿調其PH值為7.0～11.0，靜置、抽濾、減壓濃縮得強心甙粗提物；(4)將所得強心甙粗提物用大孔吸附樹脂進行吸附；(5)用不同濃度乙醇水溶液對大孔吸附樹脂進行洗脫，收集強心甙各階段洗脫液；(6)將強心甙洗脫液濃縮回收洗脫劑，得強心甙半成品；(7)將所得強心甙半成品上硅膠層析柱，并以乙酸乙酯、氯防以不同體積比進行洗脫，收集強心甙各階段洗脫液；(8)將所收集到得強心甙洗脫液進行精制的強心甙。
2. 根據權利要求1或2所述的利用大孔吸附樹脂富集純化桂竹糖芥中強心甙的方法其 特質是所述的步驟(1)中，桂竹糖芥粉后過10 80目師再進行有機溶劑提取。
3. 根據權利要求1或2所述的利用大孔吸附樹脂富集純桂竹糖芥中強心甙的方法，其 特征是在所屬的步驟(1)中，有機溶劑為丙酮，乙酸乙酯，10 100%乙醇中的一種或一種 以上，提取時間為4 48小時。
4. 根據權利要求3所述的利用大孔吸附樹脂富集純化桂竹糖芥中強心甙的方法，其特 征是所述的步驟(1)中，有機溶劑提取的方法為浸漬法、回流提取法，滲漉法、煎煮法、連 續提取法中的一種或一種以上。
5. 根據權利要求3所述的利用大孔吸附樹脂富集純化桂竹糖芥中強心甙的方法，其特 征是；所屬的步驟(1)中，加入有機溶劑的體積為桂竹糖芥粉體積的5 20倍。
6. 根據權利要求5所述的利用大孔吸附樹脂富集純化桂竹糖芥中強心甙的方法，其特 征是在所述的步驟(3)中，加入乙酸乙酯的量按體積計為提取物水溶液的5 20倍，調節 PH值所用的堿為氫氧化鈉和氨水。
7. 根據權利要求6所述的利用大孔吸附樹脂富集純化桂竹糖芥中強心甙的方法，其特 征是步驟(4)中所述吸附為靜態吸附或動態吸附步驟(5)中所述的洗脫為用10 90% 的乙醇水溶液進行洗脫。
8. 根據權利要求7所述的利用大孔吸附樹脂富集純化桂竹糖芥中強心甙的方法，其特 征是在步驟(5)和(7)中，洗脫過程中采用薄層色譜法跟蹤檢測。
9. 根據權利要求8所述的利用大孔吸附樹脂富集純化桂竹糖芥中強心甙的方法，其特 征是步驟(7)中所采用乙酸乙酯與氯仿得體積比為1 7 : 1。
10. 根據權利要求7所述的利用大孔吸附樹脂富集純化桂竹糖芥中強心甙的方法，其 特征是在步驟(8)中，采用活性炭脫色、重結晶方法進行精制。
全文摘要
本發明屬于天然有機化學領域，涉及一種利用大孔吸附樹脂富集純化桂竹糖芥中強心甙的方法。其特點是應用大孔吸附技術分離純化強心甙，對強心甙的吸附選擇性良好，吸附快解析也快，吸附容量較大；提取方便快捷，原料來源豐富，生產成本低廉，分離效果明顯，提取純度高，可以得到含量35％以上的強心甙半成品和含量98％以上的強心甙終產品，克服了常規提取率相對較低、提取純度低的缺點。本發明選用理化性質穩定、表面積較大、交換速度較快、機械強度高、抗污染能力強、熱穩定性好的大孔吸附樹脂，可以通過物理吸附從溶液中有選擇地吸附強心甙，吸附快、解析也快，吸附容量較大。
文檔編號A61P7/10GK101732391SQ20091021688
公開日2010年6月16日 申請日期2009年12月28日 優先權日2009年12月28日
發明者姚德利, 姚德坤, 姚航, 閆峰 申請人:大興安嶺林格貝有機食品有限責任公司