專利名稱：：長春新堿-逆轉劑復合納米粒及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
：本發明涉及長春新堿-逆轉劑復合納米粒及其制備方法和用途，屬醫藥領域。
背景技術：
：腫瘤多藥耐藥(multidrugresistance,MDR)是指一種藥物作用于腫瘤使之產生耐藥性后，該腫瘤對未接觸過的、結構無關、機制各異的多種抗腫瘤藥物也具有交叉耐藥性。它涉及臨床常用的多種抗腫瘤藥物，是腫瘤成功化療最嚴重的障礙之一。過去二十余年，致力于通過恢復耐藥腫瘤對化療藥物敏感性以克服多藥耐藥的研究，雖在體外實驗中取得了一定逆轉效果，但體內、特別是臨床試驗的結果則不甚理想。主要原因有(1)多數高效逆轉劑如維拉帕米除逆轉活性外，還有其他藥理作用，如抗高血壓作用，普通制劑給藥，對腫瘤組織缺乏選擇性，因而其抗高血壓作用就成為伴隨逆轉作用的副作用，導致較為嚴重的心血管系統毒性；(2)抗癌藥物與逆轉劑聯用，多數需同時到達腫瘤部位，才能發揮較好療效，普通制劑給藥，不能保證兩藥同時到達腫瘤部位，因而不如體外實驗結果理想。因此，采用耙向給藥系統遞呈抗癌藥物與MDR逆轉劑，成為抗癌藥物與MDR逆轉劑聯合治療耐藥腫瘤研究的新趨勢。硫酸長春新堿(vincristinesulfate,VCR)的母體長春新堿是1962年由長春花中提取的二聚吲哚類化合物，其游離形式極不穩定，因此常用其硫酸鹽形式。VCR為細胞周期特異性抗癌藥物，作用于M期，對G1期也有作用。VCR抗腫瘤作用靶點是微管，主要抑制微管蛋白的聚合而影響紡錘體微管的形成，從而使有絲分裂停止于中期；還可干擾蛋白質代謝及抑制RNA多聚酶的活力；并抑制細胞膜類脂質的合成和氨基酸在細胞膜上的轉運。臨床上主要用于治療急性淋巴細胞白血病、惡性淋巴瘤，絨毛膜上皮癌，對乳腺癌、小細胞肺癌、腎母細胞瘤、神經母細胞瘤、尤文氏瘤、腦瘤、平滑肌瘤及宮頸癌等也有一定療效。近年來，發現胃癌、肝癌、肺癌、乳腺癌、白血病、神經膠質瘤、卵巢癌、膀胱癌、結腸癌、人口腔鱗癌等多種腫瘤細胞對VCR存在多藥耐藥現象，嚴重影響其在臨床上的抗癌效果。VCR的MDR主要由Pgp、MRP1、MRP2、MRP3、人核糖體蛋白S13、蛋白激酶C等介導。針對VCR的MDR，目前主要的策略有一、采用聯合用藥的方法來提高其療效，臨床應用效果并不理想；二、提高用藥劑量或給藥次數，但VCR對神經系統毒副作用較大、對注射局部正常組織有較強刺激性且還有骨髓抑制作用，因此這種方法臨床應用受限；三、將VCR與MDR逆轉劑聯合應用，研究報道最多的逆轉劑是維拉帕米，其次是槲皮素，紅霉素和牛精子PKC抑制劑^及其他天然產物或中藥逆轉劑也有研究報道。乳酸-羥基乙酸共聚物((poly(D，L-lactide-co-gly-colide)，PLGA)又名乳酸-羥乙醇酸共聚物、丙交酯乙交酯共聚物、聚乙丙交酯等，它是由羥乙酸(或稱乙醇酸)和乳酸聚合而成。近年來，聚乳酸及其共聚物已成為一類重要的可生物降解的高分子材料，由于其水解作用后能完全分解為二氧化碳和水，通過新陳代謝途徑排出體外，具有無毒安全可靠、良好的生物相容性及降解性能可控等優點，因而廣泛用作生物醫用材料，如手術縫合線、藥物控制釋放體系、骨科固定及組織修復材料。PLGA降解速率一般會隨著分子量的增大而減小，但分子量不是共聚物降解速率唯一的決定因素。PLGA可以通過調節共聚物的組成來控制降解速度，隨著GA含量的增加，共聚物PLGA的降解速率逐漸加快，GA含量為30%40。/。的PLGA—個月內降解可達60%80%。加上其易于合成、質量穩定、生物惰性、生物可降解性、降解速度可調節性和良好的可塑性等優點，它成為了近些年來常采用的控釋給藥系統的載體材料之一，已被美國FDA認可。尚未見將長春新堿與逆轉劑共同包載于同一個納米粒的復方納米粒，應用于抗耐藥腫瘤活性。
發明內容本發明所解決的第一個技術問題是克服多種腫瘤細胞對長春新堿存在的多藥耐藥現象為解決上述技術問題所采用的技術方案如下將長春新堿及逆轉劑復合包載于PLGA中制備納米粒。其中，長春新堿采用其硫酸鹽——硫酸長春新堿(VCR)，逆轉劑采用維拉帕米(verapamil,VRP)或槲皮素(quercetin，QC)。PLGA、長春新堿、逆轉劑三者的配比如下PLGA:20-80mg、長春新堿501000yg、逆轉劑lmg20mg;其中，PLGA采用有機溶劑溶解使其濃度為20-80mg/ml。PLGA的濃度在制劑時是一個很重要的參數，因為若其濃度大于80mg/ml制得納米粒的粒徑過大，若其濃度小于20mg/ml，則載藥量和包封率過低，均無法應用，因此需控制其濃度在合理范圍。制備PLGA復合納米粒可采用乳化溶劑揮發法、噴霧干燥法、自乳化/溶劑分散法、沉淀法、界面沉積法、溶劑-非溶劑法等，常用的表面活性劑為聚乙烯醇(PVA)。為了獲得較小粒徑的納米粒，制備工藝中PVA用量通常較大，盡管后期處理中會反復洗滌離心除PVA，但是由于大量PVA分子與納米粒表面的PLGA相互連接形成了網絡，不易除去，故而會有大量PVA殘留。細胞試驗結果顯示，如果PVA殘留較多，即使納米粒粒徑較小，細胞對納米粒的攝取仍會顯著降低。因此本發明所解決的第二個技術問題即是為了獲得較小粒徑的納米粒，同時減少表面活性劑的殘留。為解決該技術問題所采用的技術方案為以F68和TPGS作為表面活性劑。經過實驗比較TPGS、F68、PVA三者作為表面活性劑的效果，TPGS和F68與PVA相比，可顯著增加耐藥乳腺癌細胞的死亡率(P〈0.05);而TPGS的腫瘤抑制率又顯著高于F68。圖l復方納米粒VCR—VRPNP、抗癌藥物單藥納米粒和耐藥逆轉劑單藥納米粒聯用制劑VCRNP+VRPNP、抗癌藥物和耐藥逆轉劑游離藥物聯用制劑(VCR+VRP)治療荷人耐藥乳腺癌裸鼠，HE染色進行腫瘤組織學觀察組織切片圖。其中，A為Saline組，B為VCR組，C為VCR+VRP組，D為VCR-PLGANPs+VRP-PLGANPs組，E為VCR-VRP-PLGANPs組。具體實施例方式本發明長春新堿-逆轉劑復合納米粒，是將長春新堿及逆轉劑復合包載于PLGA中制備而得。其中，長春新堿采用其硫酸鹽——硫酸長春新堿(VCR)，逆轉劑采用維拉帕米(verapamil,VRP)或槲皮素(quercetin，QC)。PLGA、長春新堿、逆轉劑三者的配比如下PLGA:20-80mg、長春新堿501000yg、逆轉劑lmg20mg;其中，PLGA采用有機溶劑溶解使其濃度為20-80mg/ml。制備本發明長春新堿-逆轉劑復合納米粒可采用乳化溶劑揮發法、噴霧干燥法、自乳化/溶劑分散法、沉淀法、界面沉積法、溶劑-非溶劑法等，常用的表面活性劑為聚乙烯醇(PVA)。如1.乳化溶劑揮發法采用單乳法取PLGA適量，溶于CH2Cl2和丙酮組成的混合溶劑中，加入藥物，超聲混勻。加入表面活性劑溶液，探頭超聲，37。C旋轉蒸發揮去有機溶劑，即得。其中，丙酮/CH2Cl2體積比為0.21，0/W體積比為l/21/8。2.乳化溶劑揮發法采用復乳法取PLGA適量，溶于CH2Cl2溶液中，加入藥物，超聲混勻。加入表面活性劑溶液，探頭超聲，形成油包水粗乳(W/0)，再加入大量的表面活性劑溶液中，探頭超聲，形成復乳(W/0/W)，37。C旋轉蒸發揮去有機溶劑，即得。其中，水相/CH2Cl2體積比為1/31/10，夕卜水相體積為530ml。3.沉淀法取PLGA適量，溶于丙酮溶液中，加入藥物，混勻。在攪拌條件下，緩慢滴入一定濃度表面活性劑溶液中，37'C旋轉蒸發或室溫攪拌揮去有機溶劑，即得。其中，丙酮/水相體積比為1/31/10。在上述方法中，所采用的PLGA載體材料可以購買商品化的PLGA載體材料，也可以自行合成。其分子量500030000，L:G比例:25/7575/25。由于表面活性劑的選擇對藥效有顯著差別，故發明人對比了如下三種表面活性劑的藥效:PVA(分子量20，00070，000，濃度0.5%6%)，F68(濃度0.5%6%)，TPGS(濃度0.5%6%)。對比PVA、F68和TPGS為表面活性劑指標的納米粒粒徑和包封率，試驗結果見下表l。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>可見，F68與PVA比較，制備的納米粒在粒徑、粒徑分布、VCR/VRP/QC三種藥物的包封率方面沒有顯著差異，而TPGS作為表面活性劑制備的納米粒粒徑較PVA制備的粒徑小，分布均勻。另通過體外細胞毒實驗考察三種表面活性劑的性能。于-15(TC冰箱取出MCF-7/Adr細胞，37。C水浴迅速解凍，轉入離心管中，加RPMI-1640培養液IOml，1500rpm離心洗滌兩次。然后轉入培養瓶中，加入含青鏈霉素和10%胎牛血清的RPMI-1640培養液，在37。C，5%(]02的孵箱中培養，待細胞貼壁后，更換成含lug/mlAdr、青鏈霉素和10X胎牛血清的RPMI-1640培養液培養，細胞密度達7080%時，用O.25%胰蛋白酶-O.02。/。EDTA消化液消化，傳代，同前述操作，先用無Adr的培養液培養，待細胞貼壁后，再更換為含lug/mlAdr培養液培養。傳代3次以后，再用無的培養液脫藥培養2周以后，收集對數生長期的細胞，制成6乂103的細胞懸液，取100yL接種于96孔培養板中，培養24h，細胞貼壁后，分成多個試驗組。加入用不同表面活性劑制備的載藥納米粒溶液，每個試驗點設置三個復孔。37°C、5%(]02培育一定時間后，每孔加入MTT(5mg/ml)20yL繼續培養4h，吸棄培養液，加入二甲基亞砜(DMS0)150yL，置振蕩器振蕩IOmin后，于酶標儀測定570nm波長處的吸光值(A)。每株細胞重復試驗三次。按下式計算細胞抑制率。實驗^4-無細胞培養液亂4抑制率(1)='1-;空白細胞亂4-無細胞培養液亂4乂細胞毒試驗結果見表2。試驗數據采用SPSS13.0統計學處理軟件進行方差分析，結果發現，TPGS和F68組與PVA比較，可顯著增加耐藥乳腺癌細胞的死亡率(p〈0.05)，而TPGS的腫瘤抑制率又顯著高于F68組。表2不同表面活性劑制備的復方納米粒制劑體外細胞毒實驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>可見，TPGS和F68與PVA相比，培養不同的時間(24h，48h，72h)，都可顯著增加耐藥乳腺癌細胞的死亡率(P〈0.05);說明TPGS和F68這兩種表面活性劑制備的納米粒的抗癌效果都較PVA好，而TPGS的腫瘤抑制效果又較F68略高。通過上述方法制備而得的長春新堿-逆轉劑復合納米粒可用于制備為凍干制劑等制劑應用。發明人對長春新堿-逆轉劑復合納米粒膠束溶液的穩定性進行了初步研究，實驗結果顯示，納米粒膠束溶液在室溫和4'C放置6個月以后，納米粒都有不同程度的聚集，為了提高納米粒的穩定性，使其能夠長期貯存，將納米粒制成凍干制劑后可以長期貯存，采用凍干制劑復溶以后，納米粒的粒徑、包封率和載藥量與凍干前沒有顯著性差異。具體地，制備凍干制劑，支架劑可采用葡萄糖、乳糖、蔗糖或甘露醇，用量為1%6%。凍干工藝為將支架劑加入制備的納米粒膠體溶液中，振搖使溶解完全，分裝于5ml西林瓶中，置凍干機中凍干，即得。一、體外抗耐藥腫瘤活性試驗結果。復方納米粒、抗癌藥物單藥納米粒和耐藥逆轉劑單藥納米粒聯用制劑、抗癌藥物和耐藥逆轉劑游離藥物聯用制劑體外抗人耐藥乳腺癌細胞MCF-7/ADR活性的比較研究。從表3和表4中可以看出，復方納米粒和單藥納米粒聯用制劑的細胞毒作用較游離藥物聯用制劑強。表3為復方納米粒VCR—VRPNP(CVn)、抗癌藥物單藥納米粒和耐藥逆轉劑單藥納米粒聯用制劑VCRNP+VRPNP(Cn+Vn)、抗癌藥物和耐藥逆轉劑游離藥物聯用制劑(C-V)體外抗人耐藥乳腺癌細胞MCF-7/ADR活性的比較研究。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>AP〈0.05，采用t檢驗與游離VCR比較進行統計學分析。可見，將VCR與VRP聯用，比較兩藥游離藥物聯用、納米粒聯用及復方納米粒這三種制劑對MCF-7/ADR的生長抑制作用。VCR與VRP聯用，不管以哪種制劑形式給藥，都比游離藥物的細胞抑制活性高。用方差分析進行統計學處理，發現兩藥游離藥物聯用、納米粒聯用及復方納米粒這三種制劑在作用三個不同的時間(24h，48h，72h)里，對耐藥細胞的生長抑制作用沒有顯著差異，可能原因是三種藥物都是同時與細胞接觸，細胞通過內吞或胞飲作用攝取藥物，不管VCR和VRP是以游離藥物形式存在還是納米粒形式存在，被細胞攝取的速度和程度是相似的。這也說明將VCR和VRP用PLGANPs包封后，仍然能夠保持游離藥物聯用的MDR逆轉活性。表4為復方納米粒VCR—QCNP、抗癌藥物單藥納米粒和耐藥逆轉劑單藥納米粒聯用制劑VCRNP+QCNP、抗癌藥物和耐藥逆轉劑游離藥物聯用制劑(VCR+QC)體外抗人耐藥乳腺癌細胞MCF-7/ADR活性的比較研究。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>aP<0.05,釆用t檢驗與游離VCR比較進行統計學分析。可見，GANPs對BEL-7402和MCR-7/Adr的生長抑制作用，在考察的三個時間里都明顯高于VCR和QC游離藥物聯用組(P〈0.05)，與VCR-PLGANPs+QC-PLGANPs組無顯著差異，說明用PLGANPs包封后，VCR和QC在PLGANPs載帶下，通過內吞作用，攝取入胞內量增加，逆轉效率增加，從而達到了較強的細胞生長抑制作用。二、體內抗耐藥腫瘤活性試驗結果表5復方納米粒VCR—VRPNP、抗癌藥物單藥納米粒和耐藥逆轉劑單藥納米粒聯用制劑VCRNP+VRPNP、抗癌藥物和耐藥逆轉劑游離藥物聯用制劑(VCR+VRP)治療荷人耐藥乳腺癌裸鼠，腫瘤體積生長曲線。表5<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>aP<0.05，與生理鹽水組進行比較，釆用t檢驗進行統計學分析可見，VCR-PLGANPs+VRP-PLGANPs組和VCR-VRP-PLGANPs組的腫瘤質量明顯小于生理鹽水組。這可能是由腫瘤的EPR效應引起的^。腫瘤組織血管豐富，毛細血管壁通透性亢進，納米粒比較容易進入，而腫瘤組織又缺乏有效的淋巴排泄，納米粒消除減慢，從而增加了VCR和VRP在腫瘤內的滯留，延長了藥物對腫瘤的生長抑制作用。三、選用常用的HE染色進行腫瘤組織學觀察。蘇木精(Hematoxylin,H)是一種堿性染料，可將細胞核和細胞內核糖體染成藍紫色，被堿性染料染色的結構具有嗜堿性。伊紅(Eosin，E)是一種酸性染料，能將細胞質染成紅色或淡紅色，被酸性染料染色的結構具有嗜酸性。HE染色可以增加組織細胞結構各部分的色彩差異，利于觀察。HE染色后顯微照片見圖1(A-E)。可見，VCR—VRPNP對腫瘤的治療效果明顯優于VCRNP+VRPNP和VCR+VRP。病理切片觀察發現，生理鹽水組腫瘤生長迅速，增生層很厚；VCR組腫瘤生長性狀與生理鹽水組極為相似，僅有極少量壞死，除可能是藥物的殺傷作用外，也可能是瘤體內部供血不足所致；VCR與VRP聯用的三組制劑均可致腫瘤不同程度的壞死，說明VRP可以逆轉MCF-7/Adr裸鼠異位移植瘤對VCR的耐藥性，增加該耐藥腫瘤對VCR的敏感性，從而使VCR對MCF-7/Adr腫瘤細胞的殺傷力大大增加。其中VCR-VRP-PLGANPs組腫瘤細胞壞死率最高，可能原因是VCR和VRP用PLGANPs包封后，因EPR效應在腫瘤中的滯留增加，且PLGANPs的緩釋作用，使VCR能夠持續殺傷MCF-7/Adr腫瘤細胞，此外，VCR-VRP-PLGANPs可將VCR和VRP同時遞送到MCF-7/Adr腫瘤細胞，使VRP能夠最大程度發揮多藥耐藥逆轉作用，增加VCR對MCF-7/Adr腫瘤細胞的殺傷作用，因此，VCR-VRP-PLGANPs對MCF-7/Adr腫瘤細胞的殺傷作用強于VCR-PLGANPs禾口VRP-PLGANPs的機械復合物。四、體內藥動學結果表6和表7為復方納米粒VCR—VRPNP、抗癌藥物單藥納米粒和耐藥逆轉劑單藥納米粒聯用制劑VCRNP+VRPNP、抗癌藥物和耐藥逆轉劑游離藥物聯用制劑(VCR+VRP)在正常大鼠體內的藥一時曲線圖。表6VCR的藥-吋數據(ni)<table>complextableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>AP〈0.05，與VCR組進行比較，采用t檢驗進行統計學分析AAP〈0.01，與VCR組進行比較，采用t檢驗進行統計學分析可見，VCR與VRP游離藥物聯用后與VCR單藥比較，血藥濃度在各個時間點都有所增加，提示VRP可改變VCR的藥動學參數，減慢VCR在體內的清除速度。VCR-VRP-PLGANPs靜脈給藥后，VCR的血藥濃度在各個時間點都顯著高于游離VCR給藥組，也高于VCR+VRP組，可能原因是PLGANPs可進一步減慢VCR在體內的清除速度，從而改變了VCR的藥動學參數。但VCR-PLGANPs+VRP-PLGANPs組與VCR+VRP組比較，VCR的血藥濃度卻沒有顯著差異，說明單藥納米粒聯用制劑與復方納米粒的體內動力學過程存在差異。表7VRP的藥-吋教據(n^)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>與VR組進行比較，釆用t檢驗進行統計學分析^po.cn，與vRi)組進行比較，釆用t檢驗進行統計學分析可見，VRP與VCR游離藥物聯用與VRP單藥比較，血藥濃度沒有顯著差異；而制成納米粒制劑后，納米粒聯用制劑和復方納米粒都使其Cmax顯著增加，且在不同時間點，都較VRP游離藥物血藥濃度高。VRP作為VCR的逆轉劑，有效血藥濃度最好維持在5yg/mL左右W。VCR-VRP-PLGANPs靜脈給藥后，維持VRP5Ug/mL的濃度水平可長達6h，而游離VRP1.5h以后血藥濃度就低于5yg/mL，這說明PLGANPs可改變VRP的藥動學參數，可能作用機制是延緩了VRP在體內的消除。VCR-PLGANPs+VRP-PLGANPs組VRP的血藥濃度高于VCR+VRP，低于VCR-VRP-PLGANPs組，與其對VCR的藥一時數據規律不同，提示單藥納米粒聯用制劑與復方納米粒的體內動力學過程不僅存在差異，且對不同的藥物作用各異。綜上說明VCR和VRP制成納米粒制劑后，納米粒聯用制劑和復方納米粒都使VCR和VRP兩種藥物的Cmax顯著增加，且在不同時間點，都較VRP游離藥物血藥濃度高。五、急性毒性試驗結果。LD50試驗數據見下表8，可見復方納米粒和納米粒聯用制劑的毒性明顯低于游離藥物。表S<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>權利要求1.長春新堿逆轉劑復合納米粒，其特征在于將長春新堿及逆轉劑復合包載于PLGA中，即得。2.根據權利要求l所述的長春新堿-逆轉劑復合納米粒，其特征在于:所述的長春新堿為硫酸長春新堿。3.根據權利要求l所述的長春新堿-逆轉劑復合納米粒，其特征在于:所述的逆轉劑為維拉帕米或槲皮素。4.根據權利要求l所述的長春新堿-逆轉劑復合納米粒，其特征在于:PLGA、長春新堿、逆轉劑三者的配比如下PLGA:20-80mg、長春新堿501000yg、逆轉劑lmg20mg;其中，PLGA采用有機溶劑溶解使其濃度為20-80mg/ml，所述的長春新堿為硫酸長春新堿，所述的逆轉劑為維拉帕米或槲皮素。5.權利要求l-4任一項所述的長春新堿-逆轉劑復合納米粒的制備方法，其特征在于該復合納米粒是采用乳化溶劑揮發法、噴霧干燥法、自乳化/溶劑分散法、沉淀法、界面沉積法、溶劑-非溶劑法制備而得。6.根據權利要求5所述的長春新堿-逆轉劑復合納米粒的制備方法，其特征在于制備方法中使用的表面活性劑為F68或TPGS。7.根據權利要求6所述的長春新堿-逆轉劑復合納米粒的制備方法，其特征在于所述乳化溶劑揮發法采用單乳法，即取PLGA，溶于e^^^和丙酮組成的混合溶劑中，加入長春新堿和逆轉劑，混勻；加入表面活性劑溶液，超聲，揮去有機溶劑，即得;其中，丙酮/CH"二體積比為0.21，0/W體積比為l/21/8。8.根據權利要求6所述的長春新堿-逆轉劑復合納米粒的制備方法，其特征在于所述乳化溶劑揮發法采用復乳法，即取PLGA，溶于GHzet溶液中，加入長春新堿和逆轉劑，混勻；加入表面活性劑溶液，探頭超聲，形成油包水粗乳(W/0)，再加入表面活性劑溶液中，探頭超聲，形成復乳(W/0/W)，揮去有機溶劑，即得；其中，水相/L&Lt體積比為1/31/10，外水相體積為530ml。9.根據權利要求6所述的長春新堿-逆轉劑復合納米粒的制備方法，其特征在于采用沉淀法，即取PLGA，溶于丙酮溶液中，加入長春新堿和逆轉劑，混勻；在攪拌條件下，緩慢滴入表面活性劑溶液中，揮去有機溶劑，即得；其中，丙酮/水相體積比為1/31/10。10.權利要求l-4任一項所述的長春新堿-逆轉劑復合納米粒在制備抗耐藥抗癌藥的藥物中的用途。全文摘要本發明涉及長春新堿-逆轉劑復合納米粒及其制備方法和用途，屬醫藥領域。本發明所解決的第一個技術問題是克服多種腫瘤細胞對長春新堿存在的多藥耐藥現象。即將長春新堿及逆轉劑復合包載于PLGA中制備納米粒。為了獲得較小粒徑的納米粒，同時減少表面活性劑的殘留，采用F68和TPGS作為表面活性劑，TPGS和F68與PVA相比，可顯著增加耐藥乳腺癌細胞的死亡率(p＜0.05)；而TPGS的腫瘤抑制率又顯著高于F68。文檔編號A61K31/475GK101361714SQ20081030484公開日2009年2月11日申請日期2008年10月10日優先權日2008年10月10日發明者侯世祥,宋相容,魏于全申請人:四川大學