專利名稱：一種利用活性炭提取純化梔子苷的方法
技術領域：
本發明屬天然藥物化學提純制備技術領域，具體涉及一種從中藥材梔 子中提取純化梔子苷的方法。
背景技術：
我國梔子資源豐富，分布廣泛，遍及十幾個省市。梔子果實中含有5% 左右的梔子苷。梔子苷藥用功效較多，具有解熱、保肝利膽的作用，并且 其降壓作用和抗炎鎮痛作用也非常顯著。動物實驗顯示梔子苷還具有導瀉
作用。最新研究表明，梔子苷可阻抑腦缺血損傷后致炎因子的表達，這對 缺血性腦神經損傷具有一定的保護作用。同時梔子苷也可作為治療肝、膽、 腎疾病的新藥和治療心腦血管疾病的新藥。因此利用梔子苷開發新藥具有 廣闊的市場前景。
從梔子中直接提取分離梔子苷最大的困難是除色素，因為梔子藥材中 含有大量的梔子黃色素，對梔子苷的提取及純化影響非常大，因此解決梔 子苷與梔子黃色素的有效分離，是獲得較純凈的梔子苷的關鍵。
根據目前國內的相關文獻及專利報道，梔子苷的純化，多采用大孔吸 附樹脂、硅膠柱層析、聚酰胺柱層析等方法，根據二者吸附力差異實現梔 子苷及梔子黃色素的分離。這些方法存在著操作流程長，獲得的梔子苷純 度較低的缺點，不適宜進行規模化生產。
發明內容
本發明的目的在于提供一種簡便、高效的從梔子中提取純化梔子苷的
方法。該方法不僅能夠直接從梔子藥材中提取梔子苷，還可以從提取梔子 黃色素后的廢液中提取梔子苷。該方法具有較大的應用價值。 為達到上述目的，本發明采用的技術方案是
1) 梔子藥材的浸提
取0. 5Kg梔子果實為原料，進行粉碎，過10 20目篩，用體積濃度 為60% 80%的乙醇常溫浸提梔子藥材2 3次，其中料液比為l: 10 1: 15 (g/ml)，過濾，合并濾液，減壓濃縮合并后的濾液；
2) 活性炭吸附
在合并的濾液中加入活性炭并不斷攪拌，每100ml溶液加活性炭25 45g，煮沸10 15分鐘后用布氏漏斗抽濾，濾得活性炭用體積濃度為70% 90%的乙醇洗脫，其中洗脫用乙醇的量與浸提時加入乙醇的量相同；
3) 硅膠柱分離
將洗脫活性炭所得的溶液濃縮成浸膏，用20 30ml甲醇溶解后與 70 100g硅膠吸附拌樣，再加入150 300g的硅膠干法裝柱，用氯仿甲
醇體積比3: 1 5: l進行洗脫，收集相應的含梔子苷的流份；
4) 結晶
將所收集的含梔子苷的流份蒸干，加入甲醇至完全溶解，再緩慢加入
氯仿使溶液出現結晶，靜置使其結晶完全，重結晶多次，可得純度97%以 上的梔子苷晶體。
本發明省略了傳統工藝中利用大孔吸附樹脂進行梯度洗脫，及用硅藻 土等來進行脫色，用萃取來除雜等復雜操作步驟。采用了活性炭，由于活 性炭對于色素及雜質的吸附力遠遠大于對梔子苷的吸附力，所以梔子苷較 色素和雜質更易被洗脫，因此可以起到很好的脫色和除雜的效果，并且脫
色、除雜可以一步完成。本發明的操作方法可以有效的減少色素等雜質對
提取工藝的影響，極大地簡化了操作，降低了成本，可制得純度達到97% 以上的梔子苷晶體，并且生產過程對環境無污染，具有工藝穩定性及重現 性好等優點，適宜進行規模化生產。
圖1是本發明收集梔子苷柱層析液的薄層色譜示意圖；圖中薄層板為 硅膠GF254與CMC-Na制成，其中展開劑為氯仿甲醇體積比3: 1，顯色 劑為10%的硫酸乙醇；
圖2是按照本發明的方法制得樣品的高效液相色譜圖，其純度為 99.89%,其中橫坐標為保留時間，縱坐標為信號響應值。
具體實施例方式
下面結合附圖及實施例對本發明作進一步詳細說明。 實施例1:
1) 梔子藥材的浸提
取0. 5Kg梔子果實為原料，進行粉碎，過10 20目篩，用體積濃度 為70%的乙醇常溫浸提梔子藥材2 3次，其中料液比為1: 10 (g/ml), 過濾，合并濾液，減壓濃縮合并后的濾液；
2) 活性炭吸附
在合并的濾液中加入活性炭并不斷攪拌，每100ml溶液加活性炭30g， 煮沸15分鐘后用布氏漏斗抽濾，濾得活性炭用體積濃度為80%的乙醇洗 脫，洗脫用乙醇的量與浸提時加入乙醇的量相同。
3) 硅膠柱分離
將洗脫活性炭所得的溶液濃縮成浸膏，用30ml甲醇溶解后與80g硅膠吸附拌樣，再加入300g硅膠干法裝柱，用氯仿甲醇體積比4: l進行 洗脫，收集相應的含梔子苷的流份；可用硅膠GF254與CMC-Na制薄層板 快速定性檢測，其中展開劑為氯仿甲醇體積比3: 1，顯色劑為10%的硫 酸乙醇；(參見圖1，對梔子苷標準品及所收集的含梔子苷的流份進行薄層 點樣。在該展開系統下，薄層板上在與梔子苷標準品相應的位置，顯色后 有一個紫色的點，即表明收集的流份中主要含梔子苷) 4)結晶
將所收集的含梔子苷的流份蒸干，加入甲醇至完全溶解，再緩慢加入 氯仿使溶液出現結晶，靜置使其結晶完全，重結晶多次，可得純度97%以 上的梔子苷晶體。
實施例2:
1) 梔子藥材的浸提
取0. 5Kg梔子果實為原料，進行粉碎，過10 20目篩，用體積濃度 為60%的乙醇常溫浸提梔子藥材2 3次，其中料液比為1: 13 (g/ml)， 過濾，合并濾液，減壓濃縮合并后的濾液；
2) 活性炭吸附
在合并的濾液中加入活性炭并不斷攪拌，每100ml溶液加活性炭40g， 煮沸12分鐘后用布氏漏斗抽濾，濾得活性炭用體積濃度為70%的乙醇洗 脫，洗脫用乙醇的量與浸提時加入乙醇的量相同；
3) 硅膠柱分離
將洗脫活性炭戶萬得的溶液濃縮成浸膏，用28ml甲醇溶解后與100g硅 膠吸附拌樣，再加入150g硅膠干法裝柱，用氯仿甲醇體積比4: l進行 洗脫，收集相應的含梔子苷的流份；
4)結晶
將所收集的含梔子苷的流份蒸干，加入甲醇至完全溶解，再緩慢加入 氯仿使溶液出現結晶，靜置使其結晶完全，重結晶多次，可得純度97%以 上的梔子苷晶體。(參見圖2，由高效液相色譜圖分析可知，制得樣品出峰 單一，峰形較好，證明其純度較高，通過計算，梔子苷純度可達99.89%)。
實施例3:
1) 梔子藥材的浸提
取0. 5Kg梔子果實為原料，進行粉碎，過10 20目篩，用體積濃度 為65%的乙醇常溫浸提梔子藥材2 3次，其中料液比為l: 15 (g/ml)， 過濾，合并濾液，減壓濃縮合并后的濾液；
2) 活性炭吸附
在合并的濾液中加入活性炭并不斷攪拌，每100ml溶液加活性炭25g， 煮沸10分鐘后用布氏漏斗抽濾，濾得活性炭用體積濃度為85%的乙醇洗 脫，洗脫用乙醇的量與浸提時加入乙醇的量相同；
3) 硅膠柱分離
將洗脫活性炭所得的溶液濃縮成浸膏，用25ml甲醇溶解后與70g硅 膠吸附拌樣，再加入200g硅膠干法裝柱，用氯仿甲醇體積比5: l進行 洗脫，收集含梔子苷的流份；
4) 結晶
將所收集的含梔子苷的流份蒸干，加入甲醇至完全溶解，再緩慢加入 氯仿使溶液出現結晶，靜置使其結晶完全，重結晶多次，可得純度97%以 上的梔子苷晶體。
實施例4:
1) 梔子藥材的浸提
取0. 5Kg梔子果實為原料，進行粉碎，過10 20目篩，用體積濃度 為80%的乙醇常溫浸提梔子藥材2 3次，其中料液比為1: 12 (g/ml)， 過濾，合并濾液，減壓濃縮合并后的濾液；
2) 活性炭吸附
在合并的濾液中加入活性炭并不斷攪拌，每100ml溶液加活性炭35g， 煮沸14分鐘后用布氏漏斗抽濾，濾得活性炭用體積濃度為75%的乙醇洗 脫，洗脫用乙醇的量與浸提時加入乙醇的量相同；
3) 硅膠柱分離
將洗脫活性炭所得的溶液濃縮成浸膏，用20ml甲醇溶解后與90g硅 膠吸附拌樣，再加入180g硅膠干法裝柱，用氯仿甲醇體積比4: l進行 洗脫，收集含梔子苷的流份；
4) 結晶
將所收集的含梔子苷的流份蒸干，加入甲醇至完全溶解，再緩慢加入 氯仿使溶液出現結晶，靜置使其結晶完全，重結晶多次，可得純度97%以 上的梔子苷晶體。
實施例5:
1) 梔子藥材的浸提
取0. 5Kg梔子果實為原料，進行粉碎，過10 20目篩，用體積濃度 為75%的乙醇常溫浸提梔子藥材2 3次，其中料液比為1: 14 (g/ml)， 過濾，合并濾液，減壓濃縮合并后的濾液；
2) 活性炭吸附
在合并的濾液中加入活性炭并不斷攪拌，每100ml溶液加活性炭45g，煮沸11分鐘后用布氏漏斗抽濾，濾得活性炭用體積濃度為90%的乙醇洗 脫，洗脫用乙醇的量與浸提時加入乙醇的量相同；
3) 硅膠柱分離
將洗脫活性炭所得的溶液濃縮成浸膏，用23ml甲醇溶解后與85g硅 膠吸附拌樣，再加入260g硅膠干法裝柱，用氯仿甲醇體積比3: l進行 洗脫，收集含梔子苷的流份；
4) 結晶
將所收集的含梔子苷的流份蒸干，加入甲醇至完全溶解，再緩慢加入 氯仿使溶液出現結晶，靜置使其結晶完全，重結晶多次，可得純度97%以 上的梔子苷晶體。
權利要求
1、一種利用活性炭提取純化梔子苷的方法，其特征在于1)梔子藥材的浸提取0.5Kg梔子果實為原料，進行粉碎，過10～20目篩，用體積濃度為60％～80％的乙醇常溫浸提梔子藥材2～3次，其中料液比為1∶10～1∶15(g/ml)，過濾，合并濾液，減壓濃縮合并后的濾液；2)活性炭吸附在合并的濾液中加入活性炭并不斷攪拌，每100ml溶液加活性炭25～45g，煮沸10～15分鐘后用布氏漏斗抽濾，濾得活性炭用體積濃度為70％～90％的乙醇洗脫，其中洗脫用乙醇的量與浸提時加入乙醇的量相同；3)硅膠柱分離將洗脫活性炭所得的溶液濃縮成浸膏，用20～30ml甲醇溶解后與70～100g硅膠吸附拌樣，再加入150～300g的硅膠干法裝柱，用氯仿∶甲醇體積比3∶1～5∶1進行洗脫，收集相應的含梔子苷的流份；4)結晶將所收集的含梔子苷的流份蒸干，加入甲醇至完全溶解，再緩慢加入氯仿使溶液出現結晶，靜置使其結晶完全，重結晶多次，可得純度97％以上的梔子苷晶體。
全文摘要
一種利用活性炭提取純化梔子苷的方法，采用活性炭對梔子苷進行吸附，由于吸附的梔子苷較色素和雜質更易洗脫，因此可以起到很好的脫色和除雜效果，并且脫色、除雜一步完成。本發明包括梔子藥材的浸提，活性炭吸附除色素和除雜，硅膠柱分離，結晶等工藝步驟，具有試劑成本低，操作簡便，生產過程對環境無污染等優點，本發明工藝穩定，重現性好，制得梔子苷純度高，適宜進行大規模提取和純化。
文檔編號A61K36/185GK101343297SQ20081015028
公開日2009年1月14日 申請日期2008年7月8日 優先權日2008年7月8日
發明者盧貞偉, 史卓強, 周玲玲, 華 張, 齊香君 申請人:陜西科技大學